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1
Diferenciación de Células Madre Adultas
con moléculas altamente diluidas y
agitadas, diseño de un modelo
experimental
Jaime Enrique Núñez Duran
Universidad Nacional de Colombia
Facultad de Medicina
Maestría de Medicina alternativa con énfasis en Homeopatía
Bogotá
2021
2
Diferenciación de Células Madre Adultas
con moléculas altamente diluidas y
agitadas, diseño de un modelo
experimental
Jaime Enrique Núñez Duran
Trabajo de Investigación presentado como requisito parcial para obtener el título de:
Magister en Medicina Alternativa con énfasis en homeopatía.
Director:
Doctor. Eduardo Beltrán Dussan.
MD Pediatra Hemato-Oncólogo, Master Medicina Alternativa.
Área de Énfasis:
Medicina Neural Terapéutica extendida a Área de Homeopatía.
Docente de la Maestría en Medicina Alternativa. Universidad Nacional de Colombia.
Línea de Investigación
Homeopatía
Universidad Nacional de Colombia
Facultad de Medicina
Bogotá, Colombia
2021
3
Este
trabajo está dedicado a la memoria de
Samuel Hahnemann, quien seguramente
si vivera en nuestros tiempos fuera el
único científico capaz de integrar todas las
ramas de la biología y la física para
explicar los fenómenos curativos de las
sustancias altamente diluidas y
revolucionar nuevamente a la medicina.
2
Declaración de obra original
Yo declaro lo siguiente:
He leído el Acuerdo 035 de 2003 del Consejo Académico de la Universidad Nacional.
«Reglamento sobre propiedad intelectual» y la Normatividad Nacional relacionada al
respeto de los derechos de autor. Esta disertación representa mi trabajo original, excepto
donde he reconocido las ideas, las palabras, o materiales de otros autores.
Cuando se han presentado ideas o palabras de otros autores en esta disertación, he
realizado su respectivo reconocimiento aplicando correctamente los esquemas de citas y
referencias bibliográficas en el estilo requerido.
He obtenido el permiso del autor o editor para incluir cualquier material con derechos de
autor (por ejemplo, tablas, figuras, instrumentos de encuesta o grandes porciones de
texto).
Por último, he sometido esta disertación a la herramienta de integridad académica,
definida por la universidad.
________________________________
Jaime Enrique Núñez Duran
CC: 77195375
Fecha 26/08/202
3
Agradecimientos
Agradezco a:
A mi familia, que con paciencia le presto durante 4 años a la universidad nacional de
Colombia a su padre y esposo.
A mi Dios que me mostro esta idea que ahora comparto con todos ustedes.
4
Resumen
La medicina homeopática emplea sustancias altamente diluidas, en las cuales se
reconocen compuestos de tamaño menor a 100 nanómetros. Por otra parte, el organismo
utiliza micro o nanodosis de sustancias como hormonas o moléculas de señalización
celular que se encuentran en el rango de los picogramos/mililitro. Considerando que el
cultivo de células madre se considera actualmente como una alternativa para la práctica
médica en el enfoque regenerativo o recuperativo de tejidos, se planteó como objetivo de
este estudio diseñar un modelo experimental simple, basado en la estimulación de un
cultivo de células madre adultas, por medio de moléculas altamente diluidas y agitadas,
obtenidas de sustancias minerales, animales y o vegetales. Mediante revisión
bibliográfica de publicaciones en revistas indexadas en National Library of Medicine, con
palabras claves como: hormesis, nanotecnología, terapia celular y organoterapia, en
combinación con células madre; en trabajos con diseño experimental, en relación con
definiciones, descripciones, mantenimiento y activación in vitro de células madre y su
aplicación. De acuerdo con la revisión, se considera factible montar protocolos
experimentales para la evaluación de los medicamentos homeopáticos, empleando como
modelo de cultivo in vitro, a células madre mesenquimales y valorar en ellas el efecto de
sustancias altamente diluidas, en su expansión o diferenciación. Reportándose
principalmente: el medio de cultivo Dulbecco modificado (DMEM) suplementado con
suero fetal bovino, antibióticos y L-glutamina, protocolos de recambio de tres días,
lavados con tampón fosfato, evaluaciones de tasa de sobrevivencia, morfología, actividad
metabólica, expresión de marcadores de superficie y o coloraciones específicas de
especies celulares.
Palabras claves: Células Madre Adultas, Moléculas, Diluidas, Agitadas
5
Abstract
Adult Stem Cell Differentiation with Highly Diluted and Agitated Molecules:
Design of an Experimental Model.
Homeopathic medicine uses highly dilute substances, in which compounds smaller than
100 nanometers are recognized. On the other hand, the body uses micro or nano doses
of substances such as hormones or cell signaling molecules that are in the range of
picograms / milliliter. Considering that stem cell culture is currently considered as an
alternative for medical practice in the regenerative or recuperative approach of tissues,
the objective of this study was to design a simple experimental model, based on the
stimulation of a culture of adult stem cells, by means of highly diluted and agitated
molecules, obtained from mineral, animal and vegetable substances. Through
bibliographic review of publications in journals indexed in the National Library of Medicine,
with keywords such as: hormesis, nanotechnology, cell therapy and organotherapy, in
combination with stem cells; in works with experimental design, in relation to definitions,
descriptions, maintenance and in vitro activation of stem cells and their application.
According to the review, it is considered feasible to set up experimental protocols for the
evaluation of homeopathic medicines, using mesenchymal stem cells as an in vitro culture
model, and to assess the effect of highly diluted substances in their expansion or
differentiation. Mainly reported: Dulbecco's modified culture medium (DMEM)
supplemented with fetal bovine serum, antibiotics and L-glutamine, three-day exchange
protocols, phosphate buffer washes, survival evaluations, morphology, metabolic activity,
expression of surface markers I specific colorations of cell species.
Keywords: Adult Stem Cells, Molecules, Diluted, Agitated
6
Contenido
Resumen…………………………………………………………………………………………VI
Lista de Figuras…………………………………………….……………………………………IX
Lista de Tablas………………………………………...…………………………………………X
Introducción……………………………………………………………………………………...XI
Capítulo 1 1
1.1 Planteamiento del problema: 1
1.2 Justificación 1
1.3 Objetivo general 4
1.4 Objetivos específicos 4
Capítulo 2 5
2.1 Marco Teórico 5
2.2 Definición y generalidades de las células madre. 5
2.2 Clasificación de células madre. 8
2.3 Diferenciación y potencialidad de células madre. 10
2.4 Biología molecular y celular de células madre. 12
2.5 Hormesis 18
2.6 Contextualización histórica del surgimiento del concepto de hormesis 19
2.7 Nanotecnología 21
2.8 La Nanotecnología en la Medicina (Nanomedicina) 21
2.9 Terapia celular 22
2.10 Homeopatía 23
2.11 Medicamentos homeopáticos 23
Capítulo 3 25
3.1 Materiales y Métodos 25
3.2 Diseño metodológico 25
3.3 Proceso de investigación documental 26
3.4 Criterios considerados para seleccionar los documentos, tesis, artículos y
publicaciones: 28
3.4.1 Criterios de inclusión 28
3.4.2 Criterios de exclusión 29
Capítulo 4 32
4.1 Resultados y discusión 32
4.2 Hormesis y células madre 32
4.3 Nanotecnología y células madre 34
4.4 Terapia celular y células madre 39
4.5 Organoterapia y células madre 42
4.6 Diseño del protocolo experimental 46
Capítulo 5 51
5.1 Conclusiones 51
5.2 Recomendaciones 52
5.3 Referencias Bibliográficas 54
7
Lista de figuras
Figura 2-1. Propiedades de las células madre 7
Figura 2-2. Curva de la
hormesis…………………………………………………………………………………………… 12
Figura 2-3. Esquema general de
trabajo………………………………………………………………………………...20
Figura 3-4. Protocolo experimental, activación de células madre in vitro con sustancias
altamente diluidas y
agitadas…………………………………………………………………………………………………………
……....26
Figura 4-5. Protocolo experimental,activación de células madre in vitro con sustancias
altamente diluidas y
agitadas…………………………………………………………………………………………………………
………63
8
Lista de tablas
Tabla 2-1. Clasificación de las células madre. 9
Tabla 2-2. Marcadores de proteína para diferentes tipos de células progenitoras/madre y células
madre cancerígenas. 12
Tabla 4-3. Hormesis y células madre, resultado de búsqueda en Medline de acuerdo a los
criterios establecidos. 32
Tabla 4-4. Terapia celular y células madre, resultado de búsqueda en Medline de acuerdo a
criterio
establecido………………………………………………………………………………………………………
………..39
Tabla 4-5. Organoterapia, resultado de búsqueda en Medline de acuerdo a criterio establecido.
44
9
Introducción
Los avances científicos en la biología de las células madre y de sus mecanismos de auto
renovación y diferenciación, hacen posible el diseño de nuevas terapéuticas para muchas
enfermedades. Cuando un órgano presenta una lesión o un deterioro patológico, este
órgano dispara señales biológicas para que las células madre despierten de su
aquiescencia, se movilicen hacia la circulación y migren a los órganos afectados; sin
embargo, el número de células madre disponible para esta finalidad puede que no sea
suficiente para reparar el daño, lo que da inicio a un estado de insuficiencia, injuria o
disfunción del órgano afectado1.
Hoy se sabe que en presencia de patologías como la hipertensión arterial, enfermedad
coronaria, diabetes mellitus y obesidad, se altera y disminuye la funcionalidad de las
células madre residentes en diferentes órganos como el corazón, riñones y tejido
adiposo, lo cual explicaría la alta incidencia de insuficiencias orgánicas como
complicaciones de estas enfermedades de base.
La terapia con célula madre es una disciplina de la medicina regenerativa y el objetivo de
ella es la obtención, el procesamiento y su implantación en los órganos potencialmente
dañados, para mejorar o restaurar las funciones alteradas1. Alrededor del mundo se han
creado grupos de investigación clínica que emplean terapias con célula madre adultas
para lograr este objetivo2. Las células madres adultas se obtienen de varias fuentes,
como la médula ósea y el tejido adiposo3.
Las células madres de tejido adiposo han despertado gran interés, ya que son de fácil
obtención, capacidad de expansión ex vivo y gran plasticidad a otros tipos celulares.
Antes se creía que crecimiento hiperplásico del tejido adiposo se debía a la existencia de
un tipo de célula preadiposítica pero hoy se sabe que el tejido adiposo posee células
10
madres mesénquimales con capacidad pluripotencial, que desde un punto de vista
práctico pueden ser fuente de célula madre autólogas con las que se puede evitar el
paso de multiplicación en cultivo4.
Por otra parte, terapéuticas ancestrales como la homeopatía y más modernas como la
hormesis y nanopartículas, han tenido resultado en el tratamiento de muchas
enfermedades degenerativas empleando sustancias derivadas de moléculas altamente
diluidas de origen animal, mineral, vegetal y sintéticas, documentando resultados clínicos
favorables en el tratamiento de múltiples enfermedades comunes ya sea agudas o
crónicas y degenerativas, y cuya explicación podría interpretarse como el estímulo de
algún mecanismo de autocuración que podría estar relacionado con los mecanismos
autoregenerativos5.
Pregunta
¿Es posible estimular in vitro la diferenciación de las células madre adultas por medio de
moléculas altamente diluida
1
Capítulo 1
1.1 Planteamiento del problema:
La tecnología de célula madre promete revolucionar la práctica médica a la luz del
enfoque regenerativo de los órganos. Las líneas de investigación que actualmente
predominan en este campo, están direccionadas a los cultivos celulares, su manipulación
para lograr la diferenciación y el posterior implante en el órgano afectado, con la
esperanza de que se regenere. Los obstáculos encontrados en la actualidad van desde
apoptosis del implante, la fagocitosis autoinmunitaria, el rechazo inmunológico, etc. Lo
que ha retrasado la implementación de esta terapéutica, llevando a replantear los
modelos experimentales y direccionarlos hacia la estimulación de las células madres
adultas, que se encuentran en la médula ósea, el tejido adiposo y las residentes en los
diferentes órganos6.
Para lo cual es necesario diseñar modelos experimentales in vitro que logren vislumbrar
los posibles mecanismos biológicos que pueden estar implicados en la diferenciación
celular in vivo y que expliquen los resultados observados en las diferentes áreas como la
hormesis, la nanotecnología y la homeopatía.
1.2 Justificación
Las células madre dan lugar a células de proliferación rápida o amplificadoras del tránsito
que se dividen varias veces antes de diferenciarse, esta permanece sin activación o no
comprometida hasta que no reciba la señal especifica de diferenciarse en una célula
especializada; con propiedades principales como el desarrollo en una variedad de tipos
celulares en el cuerpo humano, sirviendo como un sistema de reparación7. En general la
mayoría de tipos celulares son altamente sensibles al medio ambiente donde se
encuentran, ya que existen factores que estimulan la proliferación celular, donde la
regulación de la progresión del ciclo celular es coordinada por una familia de enzimas,
conocidas como ciclina dependiente de quinasas8.
De acuerdo a su sitio de residencia las células madre son clasificadas en dos categorías
(células madre embrionarias y células madre adultas, derivadas del feto o tejido individual
2
postnatal). La clasificación funcional es elaborada de acuerdo a su potencialidad de
diferenciación en toti potencial, pluripotenciales, multipotenciales y unipotencial. Las
células madre tienen la propiedad de dividirse para producir células hijas, las cuales se
convierten en células madres que se divide y se diferencia7.
Los efectos biológicos a nivel celular de las sustancias altamente diluidas se han
documentado desde hace décadas, dichos efectos pueden estar determinados por la
estimulación de procesos de autorregulación9, proliferación celular, producción de
citoquinas10, inmunoglobulinas y hormonas11, así como la estimulación de los
mecanismos de diferenciación de las células madres embrionarias o adultas12.
En la homeopatía, se emplean sustancias altamente diluidas, en las cuales se reconocen
compuestos que tienen un tamaño menor de 100 nanómetros, más pequeños que un
mol, por lo que exceden el límite del número de Avogadro, entre ellas se ubican las
nanopartículas. Anteriormente se creía que después del límite de Avogadro no había
materia, pero cada vez hay más evidencia que existen nanopartículas con efectos
biológicos13.
A nivel endógeno, nuestro propio organismo utiliza microdosis y nanodosis de algunas
sustancias como las hormonas y las moléculas de señalización celular que se encuentran
en el rango de los picogramos/mililitro. Se conocen los efectos que tiene en el organismo
el estradiol (10-900 pg/ml), la testosterona (300-10000 pg/ml) y Tiroxina T4 (27 pg/ml)13.
Para que una célula madre se diferencie in vivo, requiere de un nicho o microambiente
que le proporcione las señales necesarias para su diferenciación, ya sea de manera
residente o distal. Estas señales están dadas por factores solubles en la matriz
extracelular o por otras células adyacentes o intermedias. Por lo tanto, es factible intentar
recrear un nicho artificial in vitro para proporcionar las señales necesarias que induzcan
la diferenciación celular. Abriendo de este modo la posibilidad de crear terapias basadas
en nanopartículas con mayor biodisponibilidad, mayor reactividad química y biológica,
superior accesibilidad intracelular, mayor capacidad de atravesar membranas celulares,
la barrera hematoencefálica y con menor toxicidad14.
El desarrollo de estos modelos experimentales podría encaminar los esfuerzos
investigativos hacia la simplificación de la terapia regenerativa, por medio de sistemas3
médicos más simples, suaves y con mínimo riesgo, haciendo innecesario los cultivos
celulares y los implantes invasivos.
El presente desarrollo investigativo pretende diseñar un método, el cual está orientado a
estimular la diferenciación de las células madres adultas residentes en los diferentes
tejidos, con el fin de producir un estímulo en la regeneración celular de los órganos, en el
cuerpo humano.
Se puede considerar que existe un conocimiento ancestral que sugiere la existencia de
mecanismos moleculares que son activados por terapéuticas basadas en moléculas
altamente diluidas como en la homeopatía, los cuales pueden estar involucrados en la
diferenciación de las líneas celulares a partir de células madres adultas, que están
presentes en los diferentes órganos y que pueden diferenciarse de manera autónoma en
respuesta a varios estímulos. Un ejemplo de ello, se ha demostrado in vitro,
cardiomiocitos sometidos a una leve isquemia, son estimulados a incrementar su
actividad contráctil y a la regeneración del tejido muscular15.
Asimismo, por muchos años se ha observado la mejoría del cuadro clínico de varias
enfermedades relacionadas con el deterioro de órganos, por medio del tratamiento con
nanopartículas derivadas de órganos homólogos. Evidencias en la acción de timulina y
en el uso de sarcodes, en inmunodeficiencias por linfocitos T16.
4
1.3 Objetivo general
Diseñar un modelo experimental simple, basado en la estimulación de un cultivo de
células madre adultas, por medio de moléculas altamente diluidas y agitadas, obtenidas
de sustancias minerales, animales y vegetales.
1.4 Objetivos específicos
Revisar los aportes de las diferentes visiones científicas y terapéuticas como la hormesis,
la nanotecnología y la homeopatía como posibles fuentes de información.
Identificar la relación que existe entre las teorías actuales y las más antiguas, en cuanto a
la posibilidad del empleo de sustancias altamente diluidas y agitadas en su influencia en
la biología celular.
Plantear las bases para futuras pruebas experimentales con células madres adultas, por
medio de la estimulación de la diferenciación de líneas celulares con diferentes
sustancias potenciales altamente diluidas y agitas.
5
Capítulo 2
2.1 Marco Teórico
2.2 Definición y generalidades de las células madre.
Las células madre, se define como una subpoblación de células autorrenovables menos
diferenciadas, presentes en la mayoría de los tejidos adultos, estas tienen la capacidad
de proliferar y reemplazar células diferenciadas durante a la vida de un animal, por lo
tanto, tiene una actividad relevante en el mantenimiento de los tejidos y órganos. Tiene la
propiedad de poderse dividir para producir una célula hija, la cual se convierte en célula
madre que se divide y se diferencia. Las células madres dan lugar a células de
proliferación rápida o amplificadoras del tránsito que se dividen varias veces antes de
diferenciarse, por lo tanto, la división de una célula madre, produce células madre nuevas
y células hijas diferenciadas se consideran una población autorrenovable, como fuente
para la producción de células diferenciadas. Esta propiedad que es evidente en células
sanguíneas, espermatozoides, células epiteliales de la piel y células epiteliales que
revisten el tracto digestivo, también se han identificado en musculo esquelético y el
sistema nervioso donde pueden sustituir tejido que ha sido dañado7.
Básicamente una célula madre, permanece sin activación o no comprometida hasta que
no reciba la señal especifica de desarrollarse en una célula especializada; estas tienen
propiedades principales como el desarrollo en una variedad de tipos celulares en el
cuerpo humano, sirviendo como un sistema de reparación con la capacidad de dividirse
sin un límite para reponer otras células, cada nueva célula en la que se divide la célula
madre, que tiene el potencial de permanecer como una célula madre o se convierte en
otro tipo de célula con nuevas funciones especiales, como las células sanguíneas,
cerebrales, tejido epitelial, etc7.
Sin embargo, las células totalmente diferenciadas no proliferan, pues son continuamente
renovadas por la proliferación de las células madre, que se diferencian para mantener un
número estable de células diferenciadas7.
6
Las células fueron identificadas por primera vez por Ernest McCulloch y James Till en
1961, evidenciadas en experimentos con células derivadas de la medula ósea de ratón,
en el sistema hematopoyético, con la capacidad de proliferar y generar múltiples tipo
diferenciados de células sanguíneas, teniendo en cuenta que las células
hematopoyéticas están bien caracterizadas y la producción de células sanguíneas son un
buen ejemplo en el mantenimiento de células diferenciadas, con varios tipos de células
sanguíneas con funciones especializadas (eritrocitos, granulocitos, macrófagos,
plaquetas y linfocitos cada una con función específica. Las células provenientes de las
células madre hematopoyéticas, continúan proliferando y sufren varios ciclos de división
de acuerdo a las vías de diferenciación específicas, determinado por los factores de
crecimiento que dirigen la diferenciación celular. Otro ejemplo de células madre
autorrenovables, lo constituyen las células epiteliales intestinales, responsables de la
digestión de alimentos y la absorción de nutrientes, con capacidad de renovación
continua, dando lugar a células amplificadoras de tránsito y luego a células diferenciadas
según su función7.
Se conoce que las células madre se encuentran en microambientes diferentes, conocidos
como nichos, con las señales ambientales determinadas, que mantienen a estas durante
todo su tiempo de vida, regulando el equilibrio entre la auto renovación y diferenciación7.
Por lo tal motivo, la aplicación del funcionamiento y las propiedades de las células madre,
tiene un amplio espectro, ya que en caso de poder ser aisladas y amplificadas por cultivo,
tendrían la capacidad de remplazar tejidos dañados y tratar diversos trastornos como la
diabetes, trastornos neurodegenerativos como el Parkinson o el Alzheimer, trasplante de
células madre hematopoyéticas o de medula ósea, actualmente realizado en pacientes
con cáncer, lo que ayuda a soportar la quimioterapia realizada y a restaurar el sistema
hematopoyético, de igual manera esta técnica también es usada en pacientes con
anemia aplásica, trastornos de la hemoglobina y deficiencia del sistema inmune. A su vez
las células madre epiteliales, tiene aplicación clínica en quemaduras, heridas y ulceras,
por medio de la transferencia de un cultivo celular previamente realizado7.
Básicamente una célula madre, permanece sin activación o no comprometida hasta que
no reciba la señal especifica de desarrollarse en una célula especializada; estas tienen
propiedades principales como el desarrollo en una variedad de tipos celulares en el
cuerpo humano, sirviendo como un sistema de reparación con la capacidad de dividirse
7
sin un límite para reponer otras células, cada nueva célula en la que se divide la célula
madre, que tiene el potencial de permanecer como una célula madre o se convierte en
otro tipo de célula con nuevas funciones especiales, como las células sanguíneas,
cerebrales, tejido epitelial, etc.17. La siguiente figura representa el esquema de todas las
virtudes que se adjudican a las células madre.
Figura 2-1. Propiedades de las células madre
Tomado de Hernández y Dorticós18
La mayoría de eventos para la reparación de tejido presentan eventos independientes de
diferenciación por medio de la activación de células madre preexistentes o células
progenitoras, que por definición se encuentran entre las células madre y las células
diferenciadas terminales. Actualmente, las células madre han sido aisladas de la pre
implantación de embriones, fetos, adultos y del cordón umbilical, bajo ciertas condiciones
estas células no diferenciadas pueden ser pluripotenciales, con la capacidad de generarlas capas germinales, ectodermo, mesodermo y endodermo, o multipotenciales con la
capacidad de generar un número de limitado de otros tipos de células especializadas17.
El sistema hematopoyético está compuesto por células madre hematopoyéticas
multipotenciales, con capacidad de auto renovación, posicionadas en el origen de un
árbol jerárquico en ramificaciones específicas. Esta organización facilita la formación de
células progenitoras comprometidas con auto renovación limitada, seguidas por células
precursoras con linaje restringido, las cuales por último dan lugar a células terminales
diferenciadas, consistente con la definición de células madre, auto renovación de células
8
madre hematopoyéticas en vivo, diferenciación de un solo nivel celular en todos los
elementos maduros sanguíneos y la repoblación funcional del sistema hematopoyético19.
2.2 Clasificación de células madre.
Las células madre, pueden ser clasificadas en 4 tipos generales de células con base en
su origen, a partir de tejido embrionario, de tejido fetal, de cordón umbilical y del adulto,
se piensa que algunas células madre fetales y del adulto evolucionaron del tejido
embrionario y pocas células madre observadas en órganos adultos, son el remanente de
células del tejido embrionario original que no se diferenciaron y permanecieron en los
nichos celulares de los órganos para la reparación durante la lesión de tejidos17.
La caracterización de células madre genera un mejor entendimiento en los procesos
celulares y del desarrollo de los organismos, sirviendo también como una herramienta
para usar este conocimiento como blanco terapéutico o terapia celular regenerativa. Su
clasificación también se puede realizar midiendo y cuantificando las distintas propiedades
funcionales o marcadores moleculares, como el grado de potencia definido como el
rango de diferenciación para generar diferentes tipos celulares20.
Células totipotenciales: generan todas las células incluyendo células
extraembrionarias (zigoto).
Células pluripotenciales: generan todas las células del cuerpo, incluyendo células
germinales (células madre de tejido embrionario, células madre pluripotenciales
inducidas, masa células interna del estado embrionario – blastocito).
Células multipotente: generan todos los tejidos celulares, como las células madre
del tejido hematopoyético.
Células unipotentes: generan células madre espermatogoniales.
La jerarquía no es unidireccional, ya que en ciertas circunstancias hay células que
pueden diferenciarse en células con mayor potencia. También se pueden clasificar,
subdividiendo las células multipotenciales de acuerdo al tejido que ellas pueden generar.
Se conoce que cada tejido contiene células responsables de mantener la homeostasis y
regenerar los daños ocasionados. La tabla 1 muestra la capacidad de las células o el
tejido con capacidad multipotencial y los órganos o sistemas que forman20.
9
Tabla 2-1. Clasificación de las células madre.
Tejido, Órgano, Sistema Célula madre
Sanguíneo células madre hematopoyéticas
Endotelio células madre endoteliales
Mensenquimal células madre mesenquimales
Muscular células madre satélites
Cardiaco células madre cardiacas
Espermatozoide células madre espermátogoniales
Intestino células madre intestinales
Páncreas precursores multipotenciales derivados
del páncreas
Hígado células madre hepáticas
Pulmón células madre pulmonares
Cerebro Células madre neurales
Piel y cabello Células madre de la piel
Glándulas mamarias Células madre mamarias
Tomado de Bissels et al. 20
Las células madre de tejido embrionario puede generar todas las células y tejidos de un
organismo con excepción, de tejido extraembrionario; con dicha definición, una célula
puede ser pluripotente, una vez demuestra que cuando es inyectada en un estado de
blastocito embrionario tiene la capacidad de generar un organismo completo incluyendo
las células germinales, acción solo posible en ratones, no en células humanas20.
10
La clasificación más comúnmente usada es basada en su origen o localización, no
obstante dependiente de su sitio de residencia las células madre son clasificadas en dos
categorías (células madre embrionarias (CME) y células madre adultas (CMA), derivadas
del feto o tejido individual postnatal). La clasificación funcional es basada de acuerdo a
su desarrollo de potencial (totipotencial, pluripotenciales, multipotenciales y unipotencial),
una célula totipotencial puede dar lugar a un nuevo individuo si se le proporciona un
adecuado soporte materno; como, por ejemplo, los blastómeros en el estado embrionario
de mórula son totipotenciales, ya que cada célula individual puede generar todos los
tejidos embrionarios y extraembrionarios20.
2.3 Diferenciación y potencialidad de células madre.
Las CME son pluripotenciales, las cuales pueden diferenciarse en todo tipo de células
somáticas como células germinales cuando son inyectadas en un blastocito y forman una
progenie madura de todas las tres placas germinales embrionarias in vitro. En contraste
con las CME, las células madre adultas pueden definirse como células madre
tejido-especificas (CMTE), presentes en el desarrollo de los estados más allá del
embrión, generando solo la progenie del tejido del origen19.
Después de la compactación y la formación del blastocito, las células de la masa celular
interna, son pluripotenciales ya que ellas pueden dar lugar a todo tipo de células del
embrión, incluyendo las células somáticas y células germinales, el desarrollo embrionario
y la vida adulta subsecuente tiene una continua disminución de potencialidad19.
Las células madre embrionarias humanas, obtenidas de la masa interna celular de
blastocitos son caracterizadas por un alto índice proliferativo y pueden generar no solo
todos los tipos células derivados de las tres placas germinales, también los tejidos
extraembrionarios, tales como la placenta y el cordón umbilical. A pesar de este futuro
promisorio para el tratamiento de enfermedades degenerativas, su uso es limitado por la
destrucción de blastocitos cuando la masa interna es removida, por tal motivo la
investigación se ha enfocado sobre las células madre tejido específicas, las cuales tienen
una distribución ubicua en el cuerpo19.
Las células madre tejido especifico, con capaces de diferenciarse in vitro o in vivo, a
varios tipos celulares no solo pertenecientes al tejido de origen; pues este proceso
11
depende de las señales de conmutación en el ambiente, sobre los genes involucrados en
los programas de diferenciación. Estas células madre tejido especifico son conocidas
como células madre pluripotenciales de la medula ósea o células madre mesenquimales,
aisladas también de otros órganos como el sistema nervioso central (SNC), epidermis,
intestino, hígado, pulmón, retina, entre otros; por lo tanto también pueden ser células
madre neurales, células madre musculo esqueléticas; dichas células derivadas de
órganos son indiferenciadas, no obstante están comprometidas con su linaje,
dividiéndose lentamente y alimentando el tejido del cuerpo con una progenie
diferenciada. Al final de la diferenciación, se puede definir como célula unipotencial
aquella capaz de contribuir solo con un tipo de célula madura, estas pueden incluir
células miosatelites musculares, células progenitoras endoteliales y células epiteliales
corneales19.
Las células de la mórula tienen una potencia de diferenciación a nivel toti potencial, que
va disminuyendo a medida que ocurre su proceso de diferenciación, siendo las células
provenientes de la masa celular interna (blastocito y epiblasto), las células de
endodermo, mesodermo y ectodermo de características pluripotenciales, las células de
tejido específico de características multipotenciales y las células residentes en un tejido
generado de características unipotenciales19, (Figura 2).
12
Tomado Bissels et al.20
2.4 Biología molecular y celular de células madre.
Los marcadores de proteínas sonampliamente usados para la clasificación de células
madre, ya que la expresión de proteínas sobre la superficie celular, es menos variable,
por lo tanto, es posible usar estas para el aislamiento de dichas células. Cuando las
células son aisladas pueden ser analizadas, lo que permite tener un punto de vista más
claro que refleje la función de la célula madre. Los marcadores de proteína para
diferentes tipos de células progenitoras/madre humanas y células madre cancerígenas,
estudiados en modelos experimentales con ratones17, se describen en la tabla 2.
Tabla 2-2. Marcadores de proteína para diferentes tipos de células progenitoras/madre y
células madre cancerígenas.
Células madre
pluripotenciales (ESC células
E-cadherina (CD324),
13
madre embrionarias, iPSC
células madre
pluripotenciales inducidas)
EpCAM (CD326) y SSEA-1 (CD15) han sido usadas
como marcadores de superficie.
El carbohidrato SSEA-1 es un marcador pluripotencial
en el caso de células madre pluripotenciales del ratón,
en humanos es indicativo de diferenciación de células
madre pluripotenciales.
Las células madre y
progenitoras hematopoyéticas
murinas
Ausencia de marcadores de linaje tales como CD5,
CD45R (B220), CD11b, Gr-1 (Ly-6G / C) y Ter-119, y
alta expresión de CD117 (c-kit / SCFR) y
Sca-1.
CD34 es expresado en células murinas de feto y
neonato, pero disminuye con la edad. Para células
madre hematopoyéticas multipotentes son
CD150+ CD48 − CD244−, para células progenitoras
multipotentes son CD150− CD48− CD244+, y para
células progenitoras con línea restringida son CD150−
CD48+ CD244+.
Células progenitoras
endoteliales
Otro tipo de células madre el cual es encontrado en la
medula ósea y movilizado hacia el torrente sanguíneo
por estímulos ambientales para la regeneración de
tejido fisiológico y patológico. Forma nuevos vasos
sanguíneos y contribuye en el reparo vascular.
En humanos estas células se han definido por la
expresión de marcadores como CD34, CD133, CD309
(VEGFR2/KDR/Flk-1), CD184 (CXCR4), CD105
(Endoglin).
Células madre/estromales
mesenquimales
Varios antígenos de superficie celular han sido
sugeridos para el aislamiento de células
mesenquimales, tales como antígenos anti
14
fibroblastos como CD117, CD105, Stro-1 and CD146,
CD133, CD271 y MSCA-1.
Células madre neurales Comparten muchas características con astrocitos y
muestran expresión de proteínas típicas de astrocitos
como GFAP, o GLAST, además el receptor EGF
CD133/Prominin, CD15, y Nestina han sido descritos
como marcadores, sin embargo, el aislamiento de
estas células del tejido neural primario con alta pureza
se ha dificultado.
Muchas otras proteínas de la superficie celular han
sido descritas y usadas para la clasificación de células
progenitoras neurales como PSANCAM
(Precursores neurales) y A2B5 (precursores gliales).
Células madre tumorales
cerebrales
El incremento de la capacidad de renovación de estas
células, fue más alto entre las muestras del más
agresivo meduloblastoma comparado con los gliomas
de bajo grado. Otros reportes demostraron el
aislamiento de células que expresaron en la superficie
el marcador CD133 enriqueciendo estas células
madre tumores cerebrales, mientras que SSEA-1
(CD15) enriquece la subpoblación tumorogenica en
glioblastoma humano.
Células madre/progenitoras
cardiacas
La existencia de varias poblaciones de células madre
cardiaca en corazones posnatales se ha afirmado.
Células CD117 (c-kit) +/lin aislado fe corazones de
ratones adultos parecen ser clonogenicas y con
capacidad de auto renovación, así mismo de
diferenciación en cardiomiocitos células de musculo
liso vascular y células endoteliales, no obstante, esta
población solo expresa heterogéneamente factores de
15
transcripción cardiacos tempranos como GATA4,
Mef2c, y Nkx2.5.
Como se describe en ratones, se ha encontrado una
población de células cardíacas CD117 + en el corazón
humano con características clave de las células
madre: auto-renovación, clonogenicidad y
multipotencia. in vitro e in vivo
Células madre
espermatogoniales
Varios marcadores de superficie han sido descritos y
usados para el aislamiento de células madre
espermatogoniales en el ratón. Se ha descrito un
enriquecimiento de estas células basado en el
anticuerpo Thy-1 (CD90) del ratón.
Se ha demostrado que estas células tienen un
fenotipo de población lateral inestable y proporcionan
evidencia de que cambian sus características de
fenotipo en respuesta a su microambiente. Otro
estudio describió el aislamiento y caracterización de
células madre germinales humanas, usando técnicas
de cultivo, propiedades de adhesión de células
progenitoras espermatogoniales y selección positiva
usando CD49f, CD133, o CD90.
Células madre hepáticas
humanas
Estas células pueden ser aisladas por inmunosleccion
positiva por la molécula de adhesión de células
epiteliales CD326 (EpCAM+). Las células madre
hepáticas humanas expresan citoqueratinas 7 y 19,
CD133, telomerasa, CD44H, claudina 3, and albumina
(débilmente). Son negativos para alfa-feto proteína
(AFP), moléculas de adhesión intracelular 1(ICAM-1),
y para marcadores de células hepáticas adultas
(citocromo P450s) y células hematopoyéticas
16
(progenitoras) (CD45, CD34, CD14, CD38, CD90
(Thy-1), CD235a (Glicoforina A)).
Células madre de cáncer
hepático
Se han delineado células madre de cáncer hepático
seriadamente a partir de líneas celulares HCC,
especímenes de cáncer hepático humano y
muestreas sanguíneas, usando CD90 como
marcador. Células CD45− CD90+ fueron detectadas
en todas las muestras de tumor, pero no en hígado
normal, cirrótico y tumores paralelos.
Células madre mamarias Estas células han sido caracterizadas por marcadores
CD49f, CD29 (también conocidos como integrinas
alfa-6 and beta-1) y CD24 cuando muestran un CD24
bajo y CD49f elevado como una marca moléculas.
En contraste a su progenie diferenciada, estas células
son negativas para receptor de estrógenos (ER alfa),
receptor de progesterona (PR) y receptor de tirosin
cinasa HER2 – 3 marcadores moleculares que
definen diferentes poblaciones de células epiteliales
luminales diferenciadas, pero altamente positivas para
el factor de transcripción p63, receptor del factor de
crecimiento epidermal (EGFR) y citoqueratina
14(CK14), confirmando su origen basal.
Tomado de Bissels et al.20
2.4 Características de las células madre adultas.
La célula madre adulta (CMA) es un tipo de célula especializado dentro de la estructura
celular de un tejido ya formado, que posee una capacidad restringida de diferenciación
17
que está determinada por el tejido a que debe recambiar de forma natural. Habitualmente
las CMA se ubicaron en esta etapa de la evolución celular, pero actualmente se ha
evidenciado su capacidad multipotente como las células hematopoyéticas y pluripotente
con las células madres embrionarias, siempre y cuando su entorno natural sea sustituido
por otro que genere nuevas señales de diferenciación, contradiciendo el dogma de la
biología celular que se relacionada con la capacidad limitada de las CMA, abriendo el
panorama para el tratamiento de muchas patologías que solo se creía que podrían
tratarse con células madre embrionarias (CME) 1.
El cambio que realiza la CMA en su programa de diferenciación podría estar vinculado a
las variaciones de las señales internas y externas con las que interactúa en el nuevo
nicho o microambiente en el que se sitúa1.
La mayoría de los tejidos poseen una cantidad de células madre adultas residentes que
permiten su renovación periódica y su recuperación cuando se produce una injuria tisular.
Se han identificado 20 principales fuentes de las CMA en el organismo, como lo son: la
córnea, los dientes, el pulmón, el corazón, el cerebro, la piel, los vasos sanguíneos, el
riñón, los huesos, el hígado, la medula ósea, los músculos, la sangre periférica, el
intestino y el tejido adiposo. Esta última fuente ha sido de mucho interésdurante los
últimos años por su fácil acceso y su abúndate y renovable disponibilidad3.
El ejemplo más clásico de CMA son las derivadas de la fuente hematopoyética extraídas
de la medula ósea, con una gran capacidad proliferativa y plasticidad, circulan por la
sangre periférica y migran a diferentes tejidos distantes, pudiendo contribuir a la
reparación de diferentes tejidos dañados. El trasplante de medula ósea se realiza desde
hace más de 50 años para el tratamiento de múltiples enfermedades hematoncológicas
y su efectividad se debe no solo a la presencia de CMA hematopoyéticas sino también a
la presencia en la medula ósea de CMA progenitoras endoteliales, CMA mesenquimales,
CMA ovales, y unas células muy pequeñas parecidas a las embrionarias con capacidad
pluripotenciales, lo que generaría una mezcla de CMA que podrían ejercer una acción
sinérgica en la regeneración de tejidos como la angiogénesis y la vasculogénesis. Hoy es
posible extraer estas CMA de la sangre periférica mediante tras la estimulación de la
movilización desde la medula ósea empleando factores de crecimiento1.
18
2.5 Hormesis
La hormesis es el proceso mediante el cual la administración de una dosis baja de un
elemento químico o un factor ambiental, dañino en altas dosis o alta concentración,
puede inducir una respuesta adaptativa o un efecto beneficioso en la célula o en el
organismo. En tal sentido, se dice que una respuesta hormética implica la manifestación
de una gran cantidad de genes que agrupan para proteínas citoprotectoras como las
chaperonas que responden al estrés térmico, las enzimas antioxidantes, los factores de
crecimiento y las melatotineínas 22.
Por otro lado, los agentes horméticos más conocidos e importantes, son el calor, la
radiación, los metales pesados el etanol, los antibióticos, los agentes prooxidantes, el
ejercicio y el ayuno. Sin embargo, dado que el estudio de hormesis se ha retomado,
luego de algunos periodos de ausencia de las investigaciones en medicina no se conoce
con precisión los mecanismos y vías de transducción a través de los cuales se da una
respuesta hormética. De acuerdo a estudios e investigaciones en el campo, existe
evidencia experimental que indica que los mecanismos para desencadenar la hormesis
no son únicos, sino que son variados.
Otro aspecto significativo para la investigación, tiene que ver con la valoración que se le
da a la homeopatía y la postura de la biomedicina. Cuando se habla de la hormesis, para
la biomedicina, algunos autores señalan que es una dosis-respuesta bifásica con
características cuantitativas específicas para la amplitud de la estimulación. La hormesis
puede inducirse mediante una estimulación directa o mediante una compensación
excesiva a una alteración de la homeostasis. La inducción de hormesis por agentes
estresantes de bajo nivel no solo regula rápidamente los procesos de adaptación para
reparar el daño, sino que también protege el sistema adaptado del daño debido a una
dosis desafiante posterior (tóxica) dentro de una ventana temporal definible. La
sorprendente consistencia de la amplitud de la respuesta hormonal sugiere que la
hormesis proporciona una descripción cuantitativa de la plasticidad biológica23.
19
2.6 Contextualización histórica del surgimiento del concepto de
hormesis
Entre 1493 y 1541, Paracelso afirmó que las dosis determinaban la toxicidad de cualquier
sustancia, pudo apreciar que algunas sustancias tóxicas en pequeñas dosis pueden ser
beneficiosas. Mas adelante, en el siglo XVIII, Gerard Van Swieten (1700-1772), nota que
pequeñas cantidades del jugo de la amapola provoca sensación de ánimo, pero si la
cantidad es mayor provocan sueño, y si aumentan la dosis puede provocar la muerte.
Otros hallazgos, son los de Hufeland (1795), quien escribió, Ideas Sobre la Patología,
donde señaló que la intensidad de un estímulo marca la diferencia con relación a la
respuesta esperada, es decir que un estímulo puede originar diferentes efectos24.
En otro momento, Rudolf Arndt (1835-1900), en su libro Estudios Biológicos (1892),
expresa que los estímulos de baja intensidad incitan la actividad vital, los de intensidad
media, la aceleran, los de alta intensidad los inhiben, y los de muy alta intensidad los
descartan. A partir de estas experiencias, el farmacólogo Hugo Schulz (1853-1932),
aplica lo descubierto por Arndt, a los fenómenos asociados con las sustancias adversas a
la putrefacción, desinfectantes tales como. Mercurio, fenol o formaldehido, las cuales
eran capaces de inhibir estos procesos en los generadores de la fermentación de la
levadura y que hasta ese momento no había podido explicar. A este modelo se le conoce
como la ley de Arndt-Schulz24. En relación a lo anterior, la ley de Arndt-Schulz, se
convirtió posteriormente base de sustentación de la homeopatía.
La palabra hormesis aparece por primera vez en textos de ciencia en el año 1943, fue
acuñado por Charles Southan y John Ehrlich, quienes investigaban los efectos del
extracto de cedro rojo, en la síntesis metabólica de algunas cepas de hongos, observaron
que cuando empleaban bajas dosis el metabolismo aumentaba y, cuando las dosis eran
mayores el metabolismo se inhibía24.
Luego, entre los años 1954 y 1955, Herbert Neugebauer, escribió 6 artículos, sobre
medicina, farmacología y biología, en la revista Allgemeine Homeopathische Zeitung,
donde describía sus investigaciones, de cómo algunas sustancias, en forma diluida,
provocan efectos contrarios en las “sustancias biológicas” con relación a la sustancia en
20
estado puro o poco diluido, entre estas se encuentran acetilcolina, adrenalina, atropina,
histamina, hormonas entre otras, en animales o en órganos de animales22.
En la segunda mitad del siglo XX, se produjo un debate, en el cual la medicina
tradicional, no aceptaba los métodos y principios que planteaba la homeopatía.
Encabezando este debate se encontraba Alfred Clark, quien lideraba la farmacología
cuantitativa, autor de una vasta producción escrita y fundador de la Sociedad de
Farmacología Británica. Su crítica se refería a la llamada respuesta bifásica, que planteo
Schulz, por considerar que no era reproducible, y que su valor no era tal. Clark gracias a
su reputación y producción escrita, desarrolló el modelo dosis-respuesta, altamente
difundida y aceptada por la comunidad científica y las agencias regulatorias del gobierno,
y con ello negó la posibilidad del modelo de Schulz de un efecto dosis-respuesta
bifásico24.
Luego, a finales de 1970, las investigaciones y reportes sobre dosis-respuesta de tipo
horméticas, se hicieron más visibles y algunas disciplinas biomédicas y biológicas
registraron estudios y trabajos de investigación, que daban cuenta de este tipo de
observaciones. Como por ejemplo en el área de la epidemiología, que los estudios
documentaban usando la curva J, para explicar algunas condiciones de salud 24,(Figura
3).
Figura 2-3. Curva de la hormesis
Tomado de Valenzuela 25
21
2.7 Nanotecnología
La definición etimológica de la palabra nanotecnología proviene del griego, y el prefijo
nano significa enano. Para la ciencia su significado representa en términos de cantidad y
volumen una milmillonésima parte (10 a menos 9) de algo, su unidad de medida que es
el nanómetro (nm) es la milmillonésima parte de un metro, o 0,00000000001 metros.
Cada nanómetro puede tener entre tres y cinco átomos de ancho, es decir, unas 40.000
veces más pequeño que el grosor del cabello humano, por ejemplo, un virus puede tener
un tamaño de 100 nm26.
La manipulación de estructuras y propiedades a nanoescala, en ciencias en general y en
medicina en particular, es como disponer de un laboratorio sub-microscópico en el que se
pueden manipular los componentes celulares, los virus o los fragmentos de ADN, de
especies diversas, utilizando una variedad de pequeñas herramientas, tecnología, robots,
modelos y tubos26.
2.8 La Nanotecnología en la Medicina (Nanomedicina)
Durante siglos,el hombre ha buscado curas milagrosas para poner fin al sufrimiento
causado por enfermedades y lesiones. Muchos investigadores creen que las aplicaciones
de la nanotecnología en medicina pueden ser el primer «paso gigante» de la humanidad
hacia este objetivo. Según Robert A. Freitas, la nanomedicina es: el monitoreo, control,
construcción, reparación, defensa y mejoramiento integral de todos los sistemas
biológicos humanos, trabajando desde el nivel molecular, utilizando nanodispositivos y
nanoestructuras de ingeniería; la ciencia y la tecnología para diagnosticar, tratar y
prevenir enfermedades y lesiones traumáticas, aliviar el dolor y preservar y mejorar la
salud humana, utilizando herramientas moleculares y conocimientos moleculares del
cuerpo humano; el empleo de sistemas de máquinas moleculares para abordar
problemas médicos, utilizando el conocimiento molecular para mantener y mejorar la
salud humana a escala molecular 26.
22
2.9 Terapia celular
La terapia celular es reciente, en 1998 comenzó el desarrollo de las células madre, las
primeras en ser aisladas fueron las de origen embrionario por su capacidad de regenerar
cualquier tipo de tejido. Luego, estas células fueron halladas también en la médula ósea,
que se denominaron células madre adultas. Shinya Yamanaka (2006), concluyó que de
cualquier célula se podrían fabricar células madre embrionarias, sus estudios concluyen,
que no necesariamente las células se deben transformar para tener efectos terapéuticos.
Hoy estas células se denominan mesenquimales, las cuales cumplen la función de
controlar la inflamación y de este modo propiciar la regeneración de los tejidos27.
A menudo se han adoptado nuevas terapias en la práctica clínica antes de que sus
mecanismos de acción hayan sido completamente descifrados, y se emplean siempre
que su seguridad y efectos beneficiosos sean reproducibles. Sin embargo, para la terapia
celular emergente, es necesario identificar el tipo de célula, la dosis, el momento y la vía
de administración óptimos para garantizar que las terapias celulares produzcan el mejor
beneficio posible para cada paciente evitando el sobretratamiento. Es probable que
muchas de estas variables dependan tanto del estado de enfermedad específico como
de interacciones complejas entre numerosos mecanismos que funcionan sin problemas
en un sistema in vivo. La disponibilidad de modelos de disfunción del VI en animales
grandes clínicamente relevantes es fundamental para identificar, caracterizar y cuantificar
las respuestas a la terapia celular28.
En correspondencia con los nuevos tratamientos farmacológicos, la terapia celular se ha
adoptado clínicamente antes de que se haya probado el reconocimiento y caracterización
de sus mecanismos de acción. Los resultados recolectados proporcionan información
crítica sobre los problemas fundamentales que enfrenta actualmente la terapia celular
clínica. Las preguntas principales incluyen la implementación del tipo de célula más
eficaz y su dosis, el momento de administración y la vía de administración. Estas
variables dependen del estado de la enfermedad, la competencia funcional de la
categoría de células progenitoras y las complejas interacciones entre las células y el
microambiente de la enfermedad o lesión28.
23
2.10 Homeopatía
La homeopatía es una corriente de las ciencias médicas, se basa en la utilización de
pequeñas dosis de compuestos en relación a principio de similitud para el tratamiento
médico. Su fundamento radica en que, si una sustancia es capaz de generar
determinados síntomas y desordenes en una persona sana, cuando es administrado en
pequeñas dosis a un enfermo, esta desencadenará reacciones de tipo reguladoras,
reparadoras y curativas, y de esta manera se aliviarán sus síntomas corrigiendo los
desórdenes parecidos que provoca en el individuo sano 29.
Los tratamientos homeopáticos persiguen estimular una respuesta curativa en el
paciente, mediante la acción restauradora de las funciones vitales al emplearse
pequeñas dosis, suministradas de acuerdo al fenómeno de similitud, en donde no será
específicamente la sustancia la que cura, sino que el propio organismo, por la
información patogénica que recibe “la sustancia altamente diluida” es estimulada hacia la
recuperación 29. De acuerdo a lo anterior, la homeopatía es un método terapéutico,
holístico y científico, en el cual las sustancias son preparadas a partir de un proceso de
sucesivas diluciones y agitaciones 30.
En cuanto a su origen, se dice que fue en el siglo XVIII, cuando el médico e investigador,
Christian Samuel Hahnemann, estableció las bases y fundamentos de la homeopatía, en
1796, publica un ensayo acerca de un nuevo principio para determinar las cualidades
curativas de las sustancias medicinales, muchos de los postulados de este escrito aún
son admitidos, se dice que es el primer escrito sobre la homeopatía 30. También desde
entonces se establecieron sus dos principios fundamentales, el primero establece que
una sustancia que provoca síntomas en una persona sana se puede usar de forma
diluida para tratar síntomas y enfermedades, conocido como similar cura similar; y el
segundo, que establece que cuanto más diluida es la sustancia, más potente es, lo que
se conoce como la ley de los infinitesimales.
2.11 Medicamentos homeopáticos
Serie de modelos in vitro sobre antígenos y diluciones de histamina, condujeron a la
demostración de los efectos de modulación biológica de estos preparados sobre la
24
desgranulación de los basófilos, estudios posteriores sobre citoquinas, timulina y otras
hormonas altamente diluidas abrieron líneas de investigación sobre las propiedades
reguladoras de las sustancias endógenas preparadas según métodos homeopáticos. La
sustancia más estudiada, es la timulina, cuando se administra a ratones a una potencia
de 5cH, es capaz de mejorar la actividad de los fagocitos en diferentes situaciones
experimentales, como las infecciones víricas, bacterianas y parasitarias 16.
Entre las sustancias o medicamentos homeopáticos se encuentran los sarcodes, como
derivados de las estructuras provenientes de secreciones naturales como la urea, el
ácido úrico, la bilirrubina entre otros. Que preparados a partir de una parte de un tejido
sano, tendrá relación con su fisiología 31, y como medicamentos de base homeopática,
curan un órgano enfermo a partir de su igual. Entre los medicamentos homeopáticos se
encuentran también, elementos constitutivos de la llamada organoterapia, ejemplos: la
tiroides, el páncreas o la tiroxina entre otros.16
En general, los medicamentos en el área homeopática, se derivan de sustancias puras
de origen natural, a partir de: plantas silvestres y frutas; de animales como abejas,
hormigas, crustáceos, culebras, entre muchos otros; de origen mineral, como sílice,
azufre, mercurio, plata; y de sustancias orgánicas como los sarcodes. La homeopatía
cuenta con alrededor de 2 mil remedios, muy diferentes entre sí, los cuales tienen en
común, que se encuentran altamente diluidos, bajo el principio de que es la misma
naturaleza la que se encarga de reestablecer las energías y de regresar la salud32.
25
Capítulo 3
3.1 Materiales y Métodos
3.2 Diseño metodológico
La presente investigación, fue inicialmente de tipo documental por análisis bibliométrico
de calidad del contenido de revistas médicas y especializadas, que permitió conocer los
procedimientos y hallazgos sobre el empleo de sustancias altamente diluidas y agitadas,
y su valor en la biología celular. Para posteriormente, servir de base teórica para el
diseño de un protocolo experimental, con el uso de herramientas de medicina, y con base
en las evidencias bibliográficas y o técnicas, las cuales definen y describen conceptos,
aplicaciones en el desarrollo de células madre, en la estimulación de su crecimiento y
diferenciación.
Se parte de un método de investigación hipotético-deductivo, pues a partir de conceptos,
teorías o hechos previosse formula una hipótesis, para la formulación de deducciones y
nuevos conceptos, método que considera los siguientes pasos:
1. El punto de partida: se establece mediante observación o experimentación un
problema no resuelto, o abordado desde otros ángulos, con la información disponible.
2. La elaboración de una o varias hipótesis explicativas del hecho o fenómeno
observado o del problema detectado. La hipótesis va a depender de la actitud y
experiencias del investigador, en ciencias las hipótesis menos probables son las más
exigentes para el científico.
3. Luego de la formulación de una hipótesis se pueden deducir las posibles
consecuencias verificadas por la experiencia. Se dice que es la fase deductiva de la
ciencia empírica.
4. Los resultados son sometidos a contrastación (verificación y falsación), a través
de la experimentación. La contrastación ocurre en dos momentos, verificación y
falsación. Donde verificación refiere a que la hipótesis es verdadera, solo cuando los
casos observados coinciden con los hechos deducidos de la hipótesis, y falsación,
cuando los hechos no concilian con los hechos deducidos de la hipótesis.
26
3.3 Proceso de investigación documental
La investigación documental permite organizar, numerar y catalogar la información
existente tanto para el diseño que se pretende elaborar como para evidenciar algunos
aspectos que no hayan sido tomados en cuenta, por esta razón se planteó un esquema
convencional para el manejo y la organización de la información contenida en los
documentos que se van a revisar (Figura 3-4).
Figura 3-4.Esquema general de trabajo
Elaboración propia, 2021.
En relación con la definición, descripción de términos y fundamentos para el desarrollo de
un protocolo experimental que permita la aplicación de células madre adultas y su
activación con sustancias altamente diluidas, se establecieron como palabras claves para
la búsqueda bibliográfica: hormesis, nanotecnología, terapia celular y organoterapia, en
combinación con células madre, en idioma español e inglés. Estos documentos fueron
posteriormente seleccionados de acuerdo a los siguientes criterios de inclusión:
27
1. Con la finalidad de seleccionar información de calidad, debidamente respaldada por
instituciones e investigadores de prestigio en trabajos realizados en centros de
investigación o universidades de prestigio, se escogerán publicaciones en revistas
que forman parte de la base de datos de acceso abierto (gratuito) específicamente
del área biomédica, Index Medicus (Medline), editada por la National Library of
Medicine (NLM) de Estados Unidos, índice que recoge anualmente información sobre
unas 4.000 revistas médicas de todo el mundo.
En dicha base de datos, se encuentran revistas que pasan por revisión arbitrada
exhaustiva que garantiza trabajos con procedimientos metodológicos rígidos en relación
a las consideraciones éticas (derechos de autor a nivel de citaciones y en relación al
manejo de materiales de origen animal, vegetal o humano), con validación de los
resultados no solo por pruebas estadísticas, sino acordes a los procedimientos
experimentales aplicados en cuestión.
2. Los trabajos corresponden a publicaciones de los últimos 10 años a nivel
internacional, de acceso abierto y cuando en número suficiente, se haya cubierto la
información requerida.
3. Los trabajos según el tópico clave, se seleccionaron preferiblemente con diseño
experimental, en relación al mantenimiento y activación in vitro de células madre o en
relación a definición, descripción o su aplicación en medicina humana, de acuerdo a
la cantidad de publicaciones que puedan ser revisadas dentro de los límites de
tiempo.
Como criterios de exclusión: no se considerarán trabajos de años anteriores al 2011 y
muestren interés comercial relacionados con marcas comerciales de reactivos para
procedimientos o productos para tratamientos homeopáticos o clínicos.
3.3. Análisis de la información recabada
Los datos suministrados en los diferentes estudios fueron organizados y clasificados de
acuerdo a las definiciones y utilidades prácticas con el fin de tomar la información básica
para establecer un protocolo experimental que permita determinar en condiciones in vitro,
la activación de CMA con compuestos que se encuentren dentro de la categoría de
moléculas altamente diluidas y agitadas de uso homeopático. El cual eventualmente
puede ser ensayado en próximo trabajo de investigación.
28
3.4 Criterios considerados para seleccionar los
documentos, tesis, artículos y publicaciones:
3.4.1 Criterios de inclusión
▪ Herrera, et, al., (2018) en su artículo “Tratamiento con células madre adultas
autólogas en lesiones raquimedulares” menciona que los modelos
experimentales de lesiones de médula espinal se han implementado las
células madres como una estrategia para resolver trastornos físicos. Señala
que diversos estudios han indicado los beneficios que se obtienen con la
aplicación en la médula espinal dañada de diferentes células madre incluidas,
provenientes de la médula ósea. En su estudio presentó 25 pacientes
mayores de edad con una lesión completa de la médula espinal secundaria a
traumatismo raquimedulares, en donde después de aplicar el tratamiento
antes mencionado, se observaron cambios sensitivos y motores evolutivos,
sobre todo en los casos tratados con células madre vinculadas con las
citosinas neuroestimulantes36.
▪ Los tratamientos con células madre adultas no son nuevos y se han utilizado
como tratamiento para la leucemia, un cáncer hematológico, durante más de
40 años. Para ello, se utiliza un trasplante de médula ósea de donante, el
objetivo es reemplazar las células enfermas y reemplazarlas de manera
confiable con un nuevo lote de células sanas al nacer. Animales enfermos
Está por dar a luz. Con nuevas células sanas. Aún no está claro cómo las
29
células de la médula ósea contribuyen a la curación de enfermedades.
Durante mucho tiempo, se pensó que células madre de la médula ósea
simplemente reemplazaban a las células enfermas. Sin embargo, aunque no
parecen ser específicos de esta función de reemplazo, también ayudan a las
células enfermas (y aún a las células sanas) a mejorar su capacidad de
regeneración. Era como si estuvieran infundiendo nueva energía a células
enfermas para combatir las enfermedades.41
▪ La homeopatía es un sistema de medicina alternativa propuesto en el siglo
XVIII por Samuel Hahnemann, basado en el "principio de analogía" y
afirmando que "también cura" y se deriva fuertemente de plantas, minerales o
animales. Equipo. La homeopatía se usa para tratar enfermedades humanas,
pero también se usa en agricultura y medicina veterinaria. El uso de
medicamentos homeopáticos en animales en cautiverio ha crecido
rápidamente en los últimos años, principalmente debido al uso inadecuado de
medicamentos potentes (hormonas, antibióticos, etc.) que ayudan a la hora de
resolver problemas42.
3.4.2 Criterios de exclusión
Los trastornos concurrentes pueden, a criterio del investigador, afectar la
medición de las variables clínicas en el estudio (insuficiencia hepática, renal o
cardíaca, diabetes mellitus, etc.).
30
Tratamiento con hemofilia, hemorragia interna o anticoagulantes.
Hipersensibilidad conocida al suero bovino o gentamicina. Antecedentes de
infección por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) o estado de
inmunodeficiencia grave. Creatinina sérica en pacientes no en hemodiálisis> 3,0.
Infección cutánea o sistémica en el lugar de la inyección.
▪ Cruz, et al. (2013) en su artículo “Impacto del tratamiento con células madre
adultas en la osteoartrosis de la rodilla.” expresó que los tratamientos
quirúrgicos para tratar la osteoartrosis de la rodilla son efectivos, en cambio
la terapia celular ofrece una opción terapéutica de carácter poco invasivo por
la propiedad natural de las células de la médula ósea a implementar. Se ha
hablado de que, en lesiones en cartílagos de conejos, se observóla
reparación de la zona dañada después de realizarse el implante de células
mononucleares autólogas, lo que se comunicó como un método fácil, seguro,
y bastantes viables para la implementación clínica.
▪ Hernández, (2004). en su artículo titulado “Medicina regenerativa: Células
madre embrionarias y adultas” señala que los criterios establecidos para
conceptualizar la célula madre adulta son difíciles de comprobar
experimentalmente, se ha determinado que los factores que cumplen la
células embrionarias los satisfacen, la célula hematopoyética contiene
divisiones auto renovadoras, además de dar lugar a las células sanguíneas,
reconstruir la médula ósea cuando se realiza un trasplante en receptores
31
irradiados letalmente, y se ha observado también su implementación de
tejidos sanos. Se han encontrado varias células madre adultas en diferentes
sitios de los organismos como la médula ósea, sangre periférica, sangre del
cordón umbilical, vasos sanguíneos, cerebro, médula espinal, hígados,
pulmón, entre otros. Todos estos hallazgos han ampliado la investigación, y
particularmente los relacionados con el mayor potencial generativo de algunos
de sus tipos que lo acercan al de las células embrionarias. Esto ha permitido
crear diversas perspectivas para el tratamiento de enfermedades con células
madre adultas, lo que se pensaba que sólo podía hacer con células
embrionarias.
32
Capítulo 4
4.1 Resultados y discusión
4.2 Hormesis y células madre
En Medline se ubican para los últimos 10 años 36 publicaciones, de las cuales 9
coinciden con los criterios de búsqueda, a excepción de 4 que corresponden a
publicaciones con restricción de acceso. La tabla 3 muestra las características
principales de las referencias en relación a los objetivos y hallazgos.
Tabla 4-3. Hormesis y células madre, resultado de búsqueda en Medline de acuerdo a
los criterios establecidos.
Autoría Objetivo Hallazgo
Shin et al. 33 Efectos de carotenoide
xantofílico (astaxantina
-AXT) en las líneas celulares
de astroglioma.
Altas concentraciones (20-40
μM), el AXT desencadenan
apoptosis en la línea celular
cancerígena U251-MG. Sin
embargo, se observó que en
concentraciones bajas (4-8 μM)
aumentan el ciclo celular
proliferativo.
Posadas-Rodrígue
z et al. 34
Evaluar si la
tert-butil-hidroquinona
(tBHQ) activa una respuesta
hormética antioxidante capaz
de proteger a los mioblastos
L6 del efecto tóxico del ácido
graso palmitato.
Las L6 tratadas con palmitato
mostraron un 72% de muerte
celular en comparación con las
tratadas con tBHQ, donde la
muerte fue del 35 al 55%
dependiendo de la
concentración de palmitato
utilizada, observándose
protección en las dosis bajas
del palmiato.
33
Kumar y Rattan 35 Efecto de hidrocortisona
(HC) sobre células madre
mesenquimales de médula
ósea humana in vitro.
Las células madre
inmortalizadas con telomerasa,
expuestas a dosis de HC entre
100 nmol/L y 150 μmol/L, en
relación a la actividad
mitocondrial y metabólica
mostró efectos estimulantes
entre 0,1 y 1 µmol/L y efectos
inhibidores a partir de unos 10
µmol/L. mientras que los
efectos citostáticos y de
inducción de la diferenciación
fueron lineales
Thorne et al. 36 Utilizar astrocitos
diferenciados de células
madre embrionarias
humanas como modelo para
identificar compuestos que
protegen contra el estrés
oxidativo, condición asociada
a muchas enfermedades
neurodegenerativas.
De 4.100 compuestos
bioactivos y fármacos
aprobados, se identificó 22, que
protegen de forma aguda a los
astrocitos humanos del estrés
oxidativo inducido por H2O2. 9
resultaron ser protectores de los
astrocitos diferenciados a través
de respuesta hormética.
Rzechorzek et al.37 Efectos moleculares del
enfriamiento utilizando
neuronas corticales
funcionales diferenciadas de
células madre pluripotentes
humanas.
El estrés por frío, precondiciona
a las neuronas por regulación
de las vías adaptativas
impulsadas por activación de
proteínas no plegadas, y se
precipita respuesta hormética
del retículo endoplásmico.
Diversos estudios ponen en evidencia que las respuestas horméticas en relación
a la acción de variedad de sustancias y en un amplio espectro de células madre,
han implicado tanto características de respuesta a la dosis de estimulación directa
como aquellas inducidas dentro de un marco de precondicionamiento. Las
características cuantitativas de la respuesta hormética a la dosis para las células
34
madre son similares a las de los demás tipos de células. Hay interés hacia el
diseño de protocolos de preacondicionamiento o respuestas bifásicas horméticas
con células madre dentro de un marco potencialmente terapéutico o de
protección. A nivel experimental, se busca mejorar la capacidad para la
sobrevivencia en microambientes biológicos estresantes con la idea de que se
aumente la probabilidad de reparación de los tejidos 38. La naturaleza bifásica de
las respuestas horméticas, sugiere rangos de dosis óptimos lo que implica la
necesidad de evaluar todo el continuo dosis-respuesta para definir la respuesta a
la dosis, especialmente en la zona de dosis bajas 39.
4.3 Nanotecnología y células madre
El área de la nanotecnología en los últimos 40 años está creciendo rápidamente
aumentando el rango de aplicaciones en los ámbitos de la ingeniería, eliminación
de residuos, artículos de electrónica, óptica, deporte, ropa, alimentos, cosmética,
e incluso en biomédica se explora su uso para dirigir y modificar el
comportamiento de células y tejidos a escala nanométrica, perfilándose como
herramienta que puede ser útil en la detección, tratamiento y seguimiento de
enfermedades40. De la revisión en Medline para los últimos 5 años aparecen 1730
publicaciones que se reducen a 433 para el último año, por lo que sólo se revisan
las últimas 40 publicaciones, de las cuales se decide incluir en el presente trabajo
la información básica que muestran trabajos de revisión.
Las nanopartículas se definen como nanomateriales de tamaño entre 1 y 100 nm
en al menos, una de sus dimensiones externas, lo que les confiere una elevada
35
relación superficie/volumen, por lo que presentan propiedades significativamente
diferentes en comparación con los materiales convencionales de escala no
nanométrica, en el orden de propiedades ópticas, magnéticas, electrónicas y
biológicas, que pueden ajustarse en tamaño y forma, con modificaciones en la
superficie (funcionalización) o incluso combinándolas con diferentes materiales
para crear nuevas nanopartículas41.
Los nanomateriales en medicina, son un poco más flexibles, se pueden incluir,
como nanofármaco partículas de 200 nm o más, y el término "nanopartícula"
puede ser amplio e incluir nanosustancias orgánicas, como lípidos o
biopolímeros; y nanosustancias inorgánicas, como metales, óxidos, carbono. Con
formas variadas, entre cubos, estrellas, agujas, esferoides o formas diseñadas
con geometrías complejas, por ejemplo, en la nanotecnología del ADN o de
proteínas40.
Las nanopartículas, pueden clasificarse de acuerdo a su estructura en:
nanopartículas simples, cuando están formadas por un solo elemento como el
oro, plata, cobre, entre otros. Se han diseñado diversos sistemas para la
liberación sincronizada de múltiples fármacos para la terapia del cáncer basados
en nanopartículas individuales; y nanopartículas heteroestructuradas, cuando la
componen dos o más materiales diferentes41.
Entre las nanopartículas heteroestructuradas, se encuentran: core-shell, cuando
el núcleo central está recubierto por una o más capas de material diferente;
yolk-shell, cuando el núcleo móvil, se encuentra en una cavidad hueca rodeada
36
por un Shell; nanopartícula sin núcleo o hueca, estructura núcleo-cáscara hueca,
y en el espacio vacío de la cáscara se carga con fármacos, microARN, genes,
péptidos y otros, que ahora pueden liberarse de forma controlada; y
nanopartículas Janus, que poseen una estructura asimétrica sintonizable, con dos
o más regiones en su superficie, de propiedades diferentes yúnicas, como
reactividad selectiva o interacciones direccionales. El campo de aplicación es
amplio e innovador, incluyendo su uso como sensores, portadores
autopropulsados o recubrimientos41.
La nanotecnología de las células madre es uno de los campos más novedosos, la
estructura y las propiedades de los nanomateriales que afectan a la propagación
y diferenciación de las células madre es una frontera interdisciplinar en la ciencia
de los materiales y las medicinas de regeneración. Se han creado varias
nanoplataformas artificiales que imitan las características topológicas del nicho
natural de las células madre para estimularlas, donde interpretan y reaccionan a
señales, como adhesión de proteínas de la superficie a la topografía. Es decir, la
unión de las células madre a la matriz extracelular mediada por integrinas, lo que
desempeña un papel clave en el control de las células madre. Esta estimulación
mecánica modula una secuencia de eventos, que da lugar a cambios a nivel de
genes y proteínas que influyen en la programación de su diferenciación 42.
Ejemplo de ello, la observación de respuesta de células madre a nanopatrones
que contienen arginina-glicina-aspartato acoplados a un oligopéptido neutro y o
cargados positiva y negativamente, en sustratos de cuarzo como modelo, en
donde el oligopéptido cargado positivamente puede inhibir la diferenciación
37
osteogénica, mientras que los oligopéptidos cargados negativamente y neutros
facilitaron la diferenciación osteogénica42. Se encuentra también, la experiencia
con un nanofactor de crecimiento (GFc7) basado en la tecnología de
nanoquelado mediante el método de autoensamblaje como un nanocomplejo
quelante de cobre que contiene hierro, con la se observó mejora de la
proliferación celular de células madre mesenquimales humanas, manteniendo sus
propiedades de pluripotencia y más tarde, mismo efecto sobre células madre
hematopoyéticas, además de la protección a los procesos de congelación y
descongelación en aquellas células tratadas con el GFc7 43.
Como ejemplo en el área de tratamientos, Valizadeh et al.44 evaluaron el efecto de
nanocurcumina para la modulación de citoquinas inflamatorias en pacientes
COVID 19. La curcumina, es un polifenol aislado de la planta Curcuma longa, de
conocido efecto como antiinflamatorio, antioxidante y anticancerígeno, por lo que
puede accederse a ella, en diferentes formas, polvo, cápsulas y tabletas, pero con
ayuda de la nanotecnología se ha formulado como nanopartícula y nanocélula, en
esta última se concentra la curcumina tanto en la parte lipofílica como hidrofílica y
al administrarse a pacientes COVID 19, se observó aumento de la tasa de
citoquinas inflamatorias, especialmente la expresión del ARNm de la IL-1β y la
IL-6, lo que puede causar una mejora en la manifestación clínica y la
recuperación en general.
En relación al tratamiento del cáncer, recientes estudios se dirigen hacia la terapia
contra las células madre del cáncer, por administración controlada con
38
nanopartículas. Un estudio mostró que nanopartículas de albúmina envueltas en
ácido transretinoico y recubiertas con ácido hialurónico, que se unen estas células
por la sobreexpresión del marcador CD44, lográndose la entrega selectiva del
fármaco y la supresión de dichas células42.
Las nanopartículas como sistemas de administración y terapéutica de las células
madre, presenta el reto de hallar una forma eficaz de regular su proliferación y
diferenciación. Las nanopartículas pueden construirse a partir de materiales
poliméricos biocompatibles, biodegradables y seguros. Se han preparado con
diferentes formas y diseños para entregar biomoléculas pequeñas e incluso
macromoléculas, a las células madre. Se reporta una experiencia en un sistema
de administración de genes no virales con nanopartículas de poliamidoamina
terminadas en arginina, utilizando una construcción común de plásmidos. Estos
experimentos indican que las nanopartículas no sólo contribuyen a la generación
efectiva de células pluripotentes inducidas, sino también a una mayor eficiencia
de transfección que los agentes de transfección tradicionales42.
Por otra parte, el nivel actual de comprensión y las estrategias de las terapias
basadas en nanofármacos y células madre tienen limitaciones que las hacen
inadecuadas para su aplicación clínica, el mayor inconveniente son los problemas
de toxicidad y eliminación, en relación con su acumulación en el retículo
endotelial y el tiempo en circulación sanguínea, siendo los blancos actuales en los
cuales se dirige buena parte de las investigaciones45 que reflejan que aun hay
mucho por hacer, investigaciones que implican mas allá de observar sus efectos o
39
beneficios, los procesos de estandarización y posterior aplicación en estudios de
diseño de casos control.
4.4 Terapia celular y células madre
Las células madre pluripotenciales, se caracterizan por proliferar infinitamente y
se diferencian en células de tres capas germinales. Estas dos propiedades hacen
que sean fuentes alternativas para terapias celulares en diversas enfermedades y
lesiones. Para su uso clínico, se exploran dos tipos, las CME y las células madre
pluripotenciales inducidas. Las cuales han sido empleadas en terapias celulares
para tratar a más de 14 enfermedades o lesiones, como: enfermedad de
Parkinson, degeneración macular, retinitis pigmentosa, lesión espinal, entre otros.
Sin embargo, se observan problemas que limitan su uso, como su propiedad
inherente de tumorigenicidad, inmunogenicidad y heterogeneidad46. Hay, por
tanto, gran interés encontrándose en Medline para los últimos 5 años, 38749
publicaciones y en el último año 7730, razón por la cual se revisan las últimas 70
publicaciones, de las cuales un 84% fueron revisiones. Del grupo restante, se
seleccionan aquellas de acceso abierto, y de tipo experimental en modelo animal
o humano, con el fin de visualizar su potencial aplicativo en la salud humana, que
se resumen en la Tabla 4, otras tres publicaciones.
Tabla 4-4.Terapia celular y células madre, resultado de búsqueda en Medline de acuerdo
a criterio establecido.
Autoría Objetivo Hallazgo
40
Murphy et al.47 Capacidad de las células
madre esqueléticas residentes
(CMER) para regenerar
cartílago
Se puede estimular la
expansión de CMER en la
superficie condral de
articulaciones de extremidades
de ratón, por activación inicial
con cirugía de microfractura,
sesgando la formación de tejido
fibroso y osteogénico mediante
administración de BMP2 (factor
de crecimiento osteogénico) y
bloqueo del VEGF (reduce
progresión de osteogénesis y
fibrosis) hacia cartílago articular.
Doi et al. 48 Evaluación de la seguridad y
eficacia de precursores
dopaminérgicos (PDA)de una
línea de células madre
pluripótenciales inducidas
humanas de grado clínico, en
estudio preclínico para
tratamiento de Parkinson.
Cuando las PDA se trasplantan
en el cuerpo estriado de ratas
lesionadas con 6-OHDA, los
animales muestran una mejora
del comportamiento. Por lo que
se adelanta ensayos clínicos
con pacientes.
Wu et al. 49 Tratamiento de lesiones
pulmonares y fibrosis in vivo
con generación de CME
humanas de grado clínico,
derivadas a células
reguladoras de inmunidad y
de matriz (CRIM).
Por diferenciación secuencial
de las CEM se generó CRIM y
su administración intravenosa
inhibió tanto la inflamación
pulmonar como la fibrosis en
modelos de ratón con lesión
pulmonar. Hubo mejora
significativa de la tasa de
supervivencia de los ratones
receptores de forma
dependiente de la dosis. La
CRIM son superiores a las
células madres mesenquimales
del cordón umbilical y al
fármaco aprobado por la FDA
pirfenidona. Se prepara prox.
ensayo clínico.
Wei et al. 50 La terapia con células madre
mesenquimales derivadas de
la médula ósea (CMMMO)
transamniótica para los DTN
En modelo in vivo en ratas, la
terapia con CMMMO
transamniótica para los defectos
del tubo neural, durante el
41
durante el desarrollo
temprano puede lograr una
recuperación