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33 r --:
ESTUDIOS DE DISTRIBUCION DE ESPECIES DE HELMINTOS*
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Federico Patlño Toro
Los numerosos géneros de Nemátodos que parasitan el tubo gastrointest¡nal de los
rumiantes, los cuales rcalizan postura en el interior de sus huéspedes, pero sus huevos son
muy parecidos entre si, ha llevado a los investigadores a diferenciar los diferentes géneros por
meiio d"l cultivo de larvas. Para distingu¡r los géneros se deben utilizar larvas L3 o
infectantes que presentan caracteristicas eñ cuanto a long¡tud del cuerpo, diámetro, longitud
del esófago, posición relativa del ano y anillo nervioso, distribución de los órganos genitales,
sistema excretor y número y forma de las células intestinales. Ver características L3
Para obtener larvas infectante L3, los huevos de los nemátodos se deben cultivar e incubar en
frascos a temperatura entrc 22 - 26' C. durante una semana, los cultivos deben tener una
consistencia adecuada lO que Se puede obtener mezclando las heCes con materiales estériles
como carbón. arena, aserTan o üruta de madera y que permita un buena aireación durante la
incubación.
El frasco se cubre con una caia de petri, después de siete días las larvas se recogen llevando
el frasco con agua entre 40 --45'C. , el cual se coloca boca abafO, sobre una caja de petri
ligeramenle incinada. Con una capa de agua. Las larvas se recogen después de 12 o más
hóras. para inmovilizar las larvas se puede utilizar ligero calentam¡ento, o fomoll al 5%, lugol
al5o/o, o colocarlas en refrigeración por unos m¡nutos y luego visualizadas
Las larvas se pueden concentrar por sedimentación o centrifugación en tubo de ensayo, luego
se exam¡nan unas gotas de sedimento utilizando un porta y cubreobjetos. Posteriormente se
cuentan 100 larvas y se establecen los porcentaies para cada género. Para determinar el
número de larvas por ml. se debe utilizar una pipeta graduada.
Los nemátodos durante su üda pasan por 5 estados; los dos primeros estados larvar¡os son
de v¡da libre y el tercero es el infestanie, el cual puede üür fuera del huésped. La L3 final,
cuarto y qu¡nto estado son morfológicamente dist¡ngu¡bles y pueden se separados-en estados
in¡cial í tnal y se encuentran dentro de el huésped. Basándonos en la morfología 
podemos
obtenér información de la historia natural de los parásitos por eiemplo la presencia de un gran
número de larvas L3, ¡nd¡can una gfan exposición del huésped y continua infestación.
Poblaciones compuestas de formas inmaduras L4 in¡cial y final y de L5 inicial y final en una
cant¡dad más o menos ¡gual puede indicar un parasitismo caracteristico de animales jóvenes
sin experiencia previa con parás¡tos.
una composición de L4 inicial y preponderancia L5 final indica aiuslam¡ento al parasitismo, al
,eno, qle cantidades perjudiciales de L5 final estén presentes; 500 o más vermes es un
paras¡tismo normal.
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M.v.Z. Ms. Profesor tituler Parasilología clínica' Universidad de caldas'
y La presencia de numerosas formas inmaduras después de un tratamiento antihelmíntico
puede indicar una falla en el tratamiento puesto que las formas larvarias son más resistentes
que los nemátodos adultos.
La presencia única de L5 final puede indicar un estado de inmunidad transitoria o un
parasitismo característico (hipobiosis).
nemátodos G.l. en los órganos tales como ei cuajar,
se deben realizar necropsias de los animales y recoger
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Para obtener estados larvarios de
intestino delgado, ¡ntestino grueso,
los parásitos pol:
a) Lavado y raspado de mucosas
b) Digestión de órganos
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Primero Se deben abrir los órganos, Se retiran todos sus contenidos, luego se lavan en 1 - 2
litros de agua; se hace un raspado con el fin de retirar las formas adultas que se encuentren
adheridas a la mucosa.
Para diger¡r los órganos se utiliza un l¡tro de una solución de HCI al 3olo y pepsina el 1o/o o
solamente el HCI al 3% a una tempelatura de 37 - 40'C. por un periodo de 2 - 6 horas; las
larvas son liberadas de la mucosa y sedimentan en el fondo del recipiente Una vez retirado el
órgano se homogeniza bien la muestra y se procede a filtrarla en un tamiz de 38 Micras. En
algunos casos se puede tomar solamente 100 ml o sea el 10%; el número de nemátodos
encontrados se deben mult¡plicar por 10 para obtener el total.
para separar los nemátodos inmaduros se debe utilizar un estereomicroscopio y estiletes
agudos; la identificación debe realizarse en un microscopio.
Para el intestino grueso no se utiliza digestión pueslo que los parásitos que se encuentran en
este órgano son de gran tamañO y raras veces Se encuentran en las mucosas. El tamiz debe
ser de 150 micras para gusanos adultos y 50 micras para larvas.
DIFERENCIACION DE ESTADOS I.ARVARIOS
Las L3 final son similares a las infestantes o L3 pero estas ya no poseen vaina. Las larvas L4
inicial presentan un pequeño indicio de formación de los órganos internos en hembras y los
machos presentan en extremidad posterior ligera d¡lalación gue corresponde al com¡enzo de la
fomación de la bolsa copulatriz.
Las larvas L4 final presentan el orificio wlvar en las hembras, y el macho su cola típica con su
bolsa copulatriz encapsulada y una torma caracterísüca de guante de dedo-
Las L5 inicial presentan los órganos genitales desanollados. Los machos tienen sus espiculos
poco quilinizados y las hembras en el útero no presentan huevos.
DOUVRES nos presenta algunas claves para la diferenciación de larvas L3 y L4 de los
rumiantes:
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CLAVES PARA LA IDENT]FICACION DE LAS LARVAS DE NEMATODOS
Clave para el tecer estado larval en el abomaso
1. Caüdad bucal no distinguible; esófago truncado anteriormente; el 
poro excretor puede estar
lo"alo"Oo en una deprésión üsible; iola con terminación fuertemente redondeada 
y puede
estar curvada veniralment redondeada y puede estar curvada ventralmente 
(Fig 1 y 2)
T. axei. Caüdad bucal de 5 a 7 micras de longitud y fácilmente d¡stinguible; en 
otros casos
d¡fiere del anterior,. . 2
2. Caüdad bucal tubular con la base cón¡ca y parcialmente rodeada 
por el esófago, de este
último se pfoyectan hacia adelante dos prócesos situados lateralmente; 
cola en forma de
J"J, lr¡é. i v l) . o ostertag¡. cavidad bucal tubutar no 
rodeada por el esófago, con
,ut p"Lo-"t ródeadas por dos 
-masas 
granulares , cada una de estas últimas de forma
semejante a una pinza; protuberancia presente en la parte dorsal 
del polo..anterior del
"iáiág";'Ltt¡"ac¡ón 
de É cola fuertemente redondeada (Fig 6 v 8) Haemonchus
spp
Clave para el cuarto estado larval eir el abomaso
1 . poro excretor localizado en una depresión üsible; la pared de la cápsula 
bucal aparece
como un cuerpo sem¡lunar diüdido en dos partes' o como dos estructuras 
en forma de
iotas, isómeras gruesas f"ort"t; la cola termina fuertemente 
redondeada (Fig 3' 3A y 2)
...T. axei. poro excreror nó l¡calizado en depres¡ón üsible; en otros casos 
difiere del
anterior... 2
2.Cápsulabucalcón¡ca,apareceanteriormentecomodosestructurassemejantesaveri l laso
d¡entes; poster¡ormenle como dos lineas finas completamente rodeadas 
por el esófago;
estr iacionesdiagonalesbienmarcadaspresentesenlaporciónanteriordel.esófago;lacola
temina suavemente redondeada (F¡é 5 y 9) ,- O. ostertagi 
Cápsula bucal de
;;;;;;; ltonut"r, relativamente profunda y de pared 
gruesa; la terminación-anterior del
esófago no tiene t"t". 
"it 
i""iones; cola atenuada y redondeada (Fig. 10 y 11)
Haemonchus sPP.
Glave para el tercer estado larval en e¡ intestino delgado
1. Esófago ahusado antenomenle; dos cuerpos ovo¡des üsibles o 
áreas vacuoladas en forma
de pera en el flanco tate¡á de la caüdad bucal y poto anterior del 
esófago (Fig. 14) - . oe
radiatum.Esófagotruncedoanteriormente;nohayta|esestructurasene|po|oanteriof. . . '2
2. Cola terminada en un proceso simple " 3 Cola terminada en más 
de un proceso 4
3. Cola adelgazada y curvada dofsalmente en forma cafactefística 
(Fig 17 y 18) c
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¿áu ion rn tódulo ventral y otro dofsal, entre los que se asientaun proceso en
fo rmadevar i | |aqueseex t iendemása | |áde |margenpos te r io rde |os |óbu |os (F ig .22y
26).. . . . . N. helvetianus
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4. Cola terminada en dos tubérculos de longitud desigual (Fig, 1 y 2) . ... T colubr¡formis.
Terminac¡ón trifida de la cola, apareciendo como tres puntas (Fig 21 y 24) .. ... S.
papillosus.
Clave para el cuarto estado larval en el intest¡no delgado
1. Con una cutícula cefál¡ca inflada.... 2 Sin cutícula cefál¡ca inflada,.. 4
2. Esófago redondo y d¡latado anleriormente, estriaciones cuticulares transversas, muy
pronunciadas, en la región cefálica (Fig. 19) . . C. punctata Esófago truncado
anteriormente; estriaciones cuüculares transversas, no pronunciadas, en la región
cefá | i ca . . , .3
3. Cápsula bucal pequeña de apariencia tubular e inerme; cola puntiaguda, en forma de
espina finamente atenuada (Fig. 20 y 27) ..... N helvetianus. Cápsula bucal grande en
forma de huevo o de copa y armada de dientes en su base; cola obtusa, no puntiaguda
(Fig. 15 y 16) , . . . Oe. radiatum.
4. Cápsula bucal en forma de copa y armada con 4 lancetas cuticulares en su base;
terminac¡ón de la cola en un punto (Fig. 23 y 28) ...... B. phlebotomum. Cápsula bucal en
forma de copa e inerme; term¡nac¡ón de la cola en algo diferente a un punto., . 5
L, 5. Poro excretor localizado en una depresión üsible; la cola está fuertemente redondeada! (cerca del cuarto estado larval) o termina (en la cuarta muda) en dos tubérculos de
longitud desigual (Fig 2, 3, 3A y 13)...-. T. colubnformis Poro excretor no localizado en
una depresión visible; terminación trif¡da de la cola, o en forma de punta de dedo (Fig. 24 y
25) . . . , . S. PaPil losus.
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vaina con una pfotuberan-
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de color pardo oscuro en
su extremo anteÍior.
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