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DESARROLLO DE UN SISTEMA DE PRODUCCIÓN DE BIOGÁS EN UN BIODIGESTOR DE FLUJO DISCONTINUO EN CONDICIONES MEDIOAMBIENTALES DE CAMPUS CHÍA, UNIVERSIDAD EL BOSQUE DANIELA MARIÑO PARADA LAURA VALENTINA RIVERA DUARTE ANGIE MELISSA VILLANUEVA OSPINA UNIVERSIDAD EL BOSQUE FACULTAD DE INGENIERÍA PROGRAMA DE BIOINGENIERÍA BOGOTA D.C. 2021 DESARROLLO DE UN SISTEMA DE PRODUCCIÓN DE BIOGÁS EN UN BIODIGESTOR DE FLUJO DISCONTINUO EN CONDICIONES MEDIOAMBIENTALES DE CAMPUS CHÍA, UNIVERSIDAD EL BOSQUE DANIELA MARIÑO PARADA LAURA VALENTINA RIVERA DUARTE ANGIE MELISSA VILLANUEVA OSPINA Trabajo de grado presentado como requisito para optar al título de: BIOINGENIERO Tutor: Diana Astrid Fajardo Sua Cotutor: Yudtanduly Acuña Monsalve Modalidad: Desarrollo de Producto enmarcado en proyectos de la Facultad de Ingeniería UNIVERSIDAD EL BOSQUE FACULTAD DE INGENIERÍA PROGRAMA DE BIOINGENIERÍA BOGOTA D.C. 2021 Nota de aceptación: _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ Director del trabajo de grado _______________________________ Jurado 1 _______________________________ Jurado 2 AGRADECIMIENTOS A nuestros padres por guiarnos, acompañarnos durante todo el proceso formativo. Por ser los promotores de nuestros sueños, creer y querer siempre lo mejor para nosotras. A Dios por permitirnos terminar esta etapa de crecimiento académico. También, por brindarnos la sabiduría, paciencia y serenidad para culminar el proyecto. Agradecemos a nuestras tutoras por creer en nosotras y acompañarnos durante todo este proceso. A nuestros demás familiares, amigos y demás conocidos que nos han motivado y aconsejado durante nuestro crecimiento personal y académico. TABLA DE CONTENIDO INTRODUCCIÓN ................................................................................................... 15 1. DEFINICIÓN DEL PROBLEMA ....................................................................... 17 1.1 ÁRBOL DEL PROBLEMA ....................................................................... 18 2. JUSTIFICACIÓN ............................................................................................. 19 3. OBJETIVOS .................................................................................................... 21 3.1 OBJETIVO GENERAL ............................................................................. 21 3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS .................................................................... 21 4. MARCO REFERENCIAL ................................................................................. 22 4.1 MARCO TEORICO ................................................................................... 22 4.1.1 Residuos sólidos orgánicos .................................................................................. 22 4.1.2 Biodigestores .......................................................................................................... 25 4.1.3 Caracterización fisicoquímica en afluente y efluente ....................................... 35 4.1.4 Sensores .................................................................................................................. 37 4.1.5 Control de roedores ............................................................................................... 42 4.1.6 Modelo matemático de los biodigestores ............................................................. 43 4.1.7. Modelamiento matemático de la digestión Anaerobia ...................................... 47 4.2 MARCO LEGAL ....................................................................................... 50 4.3 ESTADO DEL ARTE ................................................................................ 51 5 LEVANTAMIENTO DE REQUERIMIENTOS ................................................... 56 5.1 Requerimientos operacionales .............................................................. 56 5.2 Requerimientos de calidad .................................................................... 57 5.3 Requerimientos de Seguridad ............................................................... 57 5.4 Requerimientos de funcionamiento biológico ..................................... 57 6 METODOLOGÍA PROPUESTA ....................................................................... 58 6.1 Desarrollo del sistema de monitoreo de variables fisicoquímicas .... 60 6.1.1. Diseño del sistema de monitoreo. ............................................................................ 60 6.1.2 Construcción y pruebas del sistema ......................................................................... 65 6.1.3. Conexiones del módulo Wifi y construcción de la interfaz. .................................. 68 6.2 Construcción e implementación de biodigestores .............................. 72 6.3 Pruebas de AGV/Alcalinidad en afluente y efluente ............................ 75 6.4 Determinación de la producción de biogás .......................................... 77 6.5 Configuración del experimento ............................................................. 79 7 RESULTADOS Y DISCUSIÓN ........................................................................ 81 7.1 Sistema de monitoreo ............................................................................ 81 7.2 Construcción de biodigestores ............................................................. 92 7.3 Pruebas de Ácidos Grasos Volátiles y Alcalinidad ........................... 106 7.4. Resultados y análisis de Varianza de los datos. ................................ 111 7.4.1. Resultados del ANOVA de la temperatura interna Superior. ............................ 111 7.4.2. Resultados del ANOVA de la temperatura interna Inferior. ................................ 112 7.4.3. Resultados del ANOVA del pH. ............................................................................ 112 7.4.4. Resultados del ANOVA de la concentración de metano. ................................. 113 7.4.5. Resultados del ANOVA del volumen de Biogás. ................................................ 114 7.4.6. Análisis de la determinación de producción de biogás. ................................. 114 8 CONCLUSIONES .......................................................................................... 119 9 RECOMENDACIONES ................................................................................. 120 BIBLIOGRAFÍA .................................................................................................... 121 ANEXOS ..............................................................................................................134 Anexo 1. Sistema de Monitoreo Remoto. ..................................................... 134 Anexo 1.1. Cálculos del consumo de energía. ................................................................ 134 Anexo 1.2. Diseño Esquemático del circuito electrónico ............................................... 135 Anexo 1.3. Código empleado en el proyecto. .................................................................. 136 Anexo 2. Construcción de Biodigestores ..................................................... 165 Anexo 2.1. Control de roedores ......................................................................................... 165 Anexo 2.2. Planos de los diseños CAD ............................................................................ 166 Anexo 3. Carta de solicitud de ingreso a Laboratorio de la Institución Educativa Simón Bolívar. ............................................................................... 169 Anexo 4. Resultados Análisis de varianza. .................................................. 170 LISTADO DE TABLAS Tabla 1. Valor del pH según la etapa de la digestión anaerobia (Veiga, 2015) (Llamas, 2015) (Martí, 2019). ......................................................................................................... 31 Tabla 2. Variación del tiempo de retención a partir de las variaciones en la temperatura (Martí, 2019, p. 37). ................................................................................... 32 Tabla 3. Características de las propuestas de sensores de pH ................................. 38 Tabla 4. Características de las propuestas de los sensores de temperatura ............ 39 Tabla 5. Características de propuestas de sensores de temperatura exterior .......... 39 Tabla 6. Características de las propuestas de los sensores de metano .................... 40 Tabla 7. Matriz de decisión de los sensores de pH .................................................... 61 Tabla 8. Matriz de decisión de los sensores de temperatura ..................................... 61 Tabla 9. Matriz de decisión de los sensores de temperatura ambiente ..................... 62 Tabla 10. Matriz de decisión de los sensores de metano. ......................................... 63 Tabla 11. Producción de Biogás según la temperatura y tiempo de retención ......... 78 Tabla 12. Sensores seleccionados para la medición de las variables ....................... 81 Tabla 13. Comprobación de lectura de sensores de temperatura DS18B20 ............. 82 Tabla 14. Comprobación de lectura de sensores de temperatura DS18B20 con modulo ........................................................................................................................... 82 Tabla 15. Comprobación de lectura de sensores de pH SEN0169 ............................. 83 Tabla 16. Comprobación de lectura de sensor HY-SRF05 .......................................... 86 Tabla 17. Exactitud y precisión de los sensores. ........................................................ 91 Tabla 18. Media inferior y superior de cada biodigestor. .......................................... 106 Tabla 19. Resultados del ANOVA para la temperatura Interna superior según las horas del día para cada biodigestor. .......................................................................... 111 Tabla 20. Resultados del ANOVA para la temperatura Interna inferior según las horas del día para cada biodigestor. .......................................................................... 112 Tabla 21.Resultados del ANOVA para el pH según las horas del día para cada biodigestor. .................................................................................................................. 113 Tabla 22. Resultados del ANOVA para la concentración de metano según las horas del día para cada biodigestor. .................................................................................... 113 Tabla 23.Resultados del ANOVA para la concentración de metano según las horas del día para cada biodigestor. .................................................................................... 114 Tabla 24. Consumo de energía eléctrica del circuito electrónico por biodigestor.. 134 Tabla 25. Matriz de decisión de control de roedores ................................................ 165 LISTADO DE FIGURAS Figura 1. Árbol del problema. Fuente: Elaboración propia ......................................... 18 Figura 2. Biodigestor de domo fijo. (Corona, 2007). .................................................... 26 Figura 3. Adaptación de los biodigestores a condiciones climáticas de la meseta andina (Garfi, Martí, Velo & Ferrer, 2016) ..................................................................... 52 Figura 4. Optimización de biodigestor tubular en clima frío ...................................... 53 Figura 5. Optimización de biodigestor modelo chino en Cusco (Amusquivar, 2015). ........................................................................................................................................ 54 Figura 6. Interfaz del usuario creada para la investigación ........................................ 55 Figura 7. Diagrama general de la metodología a realizar. ........................................... 59 Figura 8. Diseño de la ubicación de los sensores dentro del biodigestor ................ 64 Figura 9. Verificación de medición de sensor de Temperatura Interna. .................... 66 Figura 10. Verificación de medición de sensor de temperatura externa ................... 66 Figura 11. Verificación de la medición del sensor de pH y el pH metro .................... 67 Figura 12. Diagrama de la calibración de los sensores MQ-4. ................................... 67 Figura 13. Diseño en 3D de la placa con el circuito electrónico de la tarjeta ESP8266, el multiplexor y los sensores. ....................................................................................... 69 Figura 14. Archivo de Excel donde se almacenan los datos. ..................................... 70 Figura 15. Diagrama del desarrollo del sistema de monitoreo. .................................. 71 Figura 16. Diagrama de la implementación de los biodigestores .............................. 74 Figura 17. Diagrama de la práctica en el laboratorio de las pruebas en afluente y efluente, metodología .................................................................................................... 77 Figura 18. Diagrama de la evaluación de producción de biogás................................ 79 Figura 19. Diagrama de la configuración del experimento ......................................... 80 Figura 20. Grafica del comportamiento del sensor de pH. ......................................... 84 Figura 21. Curva de calibración de los sensores MQ-4. ............................................. 84 Figura 22. Interfaz de visualización de monitoreo ....................................................... 87 Figura 23. a. Pruebas de alarma de la aplicación cuando se desconecta la lectura de la tarjeta con la aplicación y b. cuando se encuentra fuera del rango de temperatura ........................................................................................................................................ 88 Figura 24. Pruebas de almacenamiento de datos de los sensores del biodigestor 2 en el archivo de Google Drive ....................................................................................... 89 Figura 25. Seudocódigo general del programa. .......................................................... 89 Figura 26. Seudocódigo del envío de datos a drive. ................................................... 90 Figura 27. Diseño CAD del proyecto. ........................................................................... 93 Figura 28. Diseño CAD del proyectoen el Laboratorio de Experimentación Agro- técnica y Energías Renovables .................................................................................... 93 Figura 29. Diseño CAD de la tubería de los biodigestores ......................................... 94 Figura 30. Construcción de los biodigestores ............................................................. 95 Figura 31. a. Tanque de 210 L con Thermolon y botellas PET con paja; b. Construcción del invernadero ...................................................................................... 96 Figura 32. Montaje de los biodigestores con sus sistemas de aislamiento y cerco perimetral ....................................................................................................................... 96 Figura 33. Ubicación de los sensores dentro del biodigestor .................................... 97 Figura 34. Ubicación de los sensores dentro del biodigestor .................................... 98 Figura 35. Alimentación del biodigestor y ubicación de sensores .......................... 100 Figura 36. Diseño, construcción e instalación de la caja de protección. ................ 100 Figura 37. Diseño del sistema para la medición del biogás ..................................... 101 Figura 38. Montaje del sistema de medición de biogás ............................................ 102 Figura 39. Resultado general de instalación de biodigestores. ............................... 103 Figura 40. Graficas del comportamiento de la temperatura interna inferior (T1) y temperatura interna superior (T2) durante los meses de monitoreo en diferentes horarios ........................................................................................................................ 104 Figura 41. Gráfica de AGV en el tiempo ..................................................................... 107 Figura 42. Medición de pH de cada uno de los biodigestores en el tiempo. ........... 108 Figura 43. Gráfica de Alcalinidad total en el tiempo.................................................. 109 Figura 44. Gráfica de la relación de Ácidos grasos volátiles/Alcalinidad en tiempo. ...................................................................................................................................... 110 Figura 45. Diseño esquemático de la conexión de la tarjeta ESP8266 y los sensores MQ-4, DS1B20, SEN0169 y HY-SRF05. ....................................................................... 135 Figura 46. Diseño del circuito electrónico en la PCB ................................................ 136 Figura 47. Planos CAD de la distribución de los biodigestores en la zona designada. ...................................................................................................................................... 166 Figura 48. Plano técnico de casa de protección para los reservorios. .................... 167 Figura 49. Caja de protección de PCB y conexiones. ............................................... 168 Figura 50. Tabla de ANOVA para la temperatura inferior evaluada en el horario de 2am, 6am y 10am ......................................................................................................... 170 Figura 51.Tabla de múltiples rangos para la temperatura inferior en los biodigestores evaluada en el horario de 2am, 6am y 10 am. .................................... 170 Figura 52. Gráfica de las medias y 95% de Fisher LSD ............................................. 171 Figura 53. Resumen estadístico temperatura inferior evaluada en el horario de 2am a 10 am ......................................................................................................................... 171 Figura 54. Tabla de medias para la temperatura inferior por biodigestor evaluada a las 2am, 6am y 10 am .................................................................................................. 172 Figura 55. Gráfico de caja y bigotes parala temperatura inferior evaluada a las 2am, 6 am y 10am ................................................................................................................. 172 Figura 56. Tabla ANOVA para valores de T. Interna superior medidos a las 2 a.m a 10a.m. ........................................................................................................................... 173 Figura 57. Pruebas de múltiples rangos para T. Interna superior de las 2a.m- 10a.m. ...................................................................................................................................... 173 Figura 58. Tabla de Medias para valores de T. Interna inferior medidos a las 2 a.m. ...................................................................................................................................... 174 Figura 59. Gráfica de las medias y 95% de Fisher LSD ............................................. 175 Figura 60. Tabla de resumen estadístico para valores de T. Interna superior medidos a las 2 a.m a 10a.m ...................................................................................................... 175 Figura 61. Gráfico de caja y bigotes de la temperaturas inferiores evaluadas en el horario de 2am, 6am y 10am. ...................................................................................... 176 Figura 62. Tabla de medianas de los grupos. ............................................................ 176 Figura 63. Tabla ANOVA para la temperatura inferior por biodigestor .................... 178 Figura 64. Pruebas de Múltiple Rangos de temperatura inferior por Biodigestor ... 178 Figura 65. Diagrama de medias de los biodigestores ............................................... 179 Figura 66. Resumen Estadístico para Temperatura inferior evaluada de 2pm a 10pm ...................................................................................................................................... 179 Figura 67. Gráfico de caja y bigotes de la temperaturas inferiores evaluadas en el horario de 2pm, 6pm y 10pm. ..................................................................................... 180 Figura 68. Tabla ANOVA para valores de T. Interna superior medidos a las 2 p.m a 10p.m ............................................................................................................................ 180 Figura 69. Pruebas de múltiples rangos para T. Interna superior de las 2a.m- 10a.m ...................................................................................................................................... 180 Figura 70. Tabla de medias para valores de T. Interna superior medidos a las 2 p.m. a 10p.m. ........................................................................................................................ 181 Figura 71. Gráfica de las medias y 95% de Fisher LSD ............................................. 182 Figura 72. Tabla del resumen estadístico para valores de T. Interna superior medidos a las 2 p.m a 10p.m ....................................................................................... 182 Figura 73. Gráfico de caja y bigotes de la temperaturas inferiores evaluadas en el horario de 2pm, 6pm y 10pm. ..................................................................................... 183 Figura 74. Tabla de medianas de los grupos. ............................................................ 183 Figura 75. Tabla de ANOVA para concentración de metano por Biodigestor ........ 184 Figura 76. Resumen estadístico para la concentración de metano ......................... 185 Figura 77. Media y 95% de Fisher LSD ...................................................................... 185 Figura 78. Tabla de medias para la concentración de metano por biodigestor ...... 186 Figura 79. Tabla de Múltiples rangos para la concentración de metano por biodigestor ...................................................................................................................186 Figura 80. Gráfico de caja y bigotes de la concentración de metano en el horario de 2am a 10 am ................................................................................................................. 187 Figura 81. Mediana de la concentración de metano en los biodigestores en el horario de 2am a 10am ................................................................................................ 187 Figura 82. Tabla ANOVA para valores de concentración de metano medidos a las 2 p.m a 10p.m .................................................................................................................. 188 Figura 83. Pruebas de múltiples rangos para T. Interna superior de las 2a.m- 10a.m. ...................................................................................................................................... 188 Figura 84. Tabla de medias para valores de concentración de metano medidos a las 2 p.m a 10p.m ............................................................................................................... 189 Figura 85. Gráfica de las medias y 95% de Fisher LSD. ............................................ 189 Figura 86. Tabla de resumen estadístico para valores de concentración de metanos medidos a las 2 p.m a 10p.m ....................................................................................... 190 Figura 87. Gráfico de caja y bigotes de la concentración de metano evaluadas en el horario de 2pm, 6pm y 10pm. ..................................................................................... 191 Figura 88. Tabla de medianas de los grupos ............................................................. 191 Figura 89. Tabla ANOVA para valores de producción de biogás. ............................ 192 Figura 90. Pruebas de múltiples rangos para la producción de biogás. ................. 192 Figura 91. Tabla de medias para la producción de biogás ....................................... 193 Figura 92. Gráfica de las medias y 95% de Fisher LSD. ............................................ 194 Figura 93. Tabla del resumen estadístico para la producción de biogás. ............... 194 Figura 94. Gráfico de caja y bigotes de la producción de biogás. .......................... 195 Figura 95. Tabla de medianas de los grupos ............................................................. 195 LISTADO DE ECUACIONES Ecuación 1. Transformación de reactivos a productos: .................................................... 43 Ecuación 2. Crecimiento de microorganismos y formación de productos (Valladares, 2017): .............................................................................................................................. 44 Ecuación 3. Síntesis de producto: .................................................................................... 44 Ecuación 4. Mortalidad de los microorganismos: ............................................................. 44 Ecuación 5. Calcular producción de biogás por Buswell y Mueller: .................................. 45 Ecuación 6. Calcular la producción de biogás por Boyle: ................................................. 45 Ecuación 7. Relación del tiempo y la temperatura: .......................................................... 45 Ecuación 8. Ecuación de Van’t Hoff: ................................................................................ 46 Ecuación 9. Efecto de la temperatura en la cinética del proceso: ................................... 46 Ecuación 10. Ecuación de Monod: ................................................................................... 47 Ecuación 11.Ecuación de Arrhenius: ............................................................................... 47 Ecuación 12. Bioconversión de los carbohidratos: ........................................................... 48 Ecuación 13. Bioconversión de los carbohidratos en la acidogénesis: ............................. 48 Ecuación 14. Bioconversión de los carbohidratos en la acetogénesis: ............................. 48 Ecuación 15. Bioconversión de los carbohidratos en la acetogénesis: ............................. 48 Ecuación 16. Bioconversión de los carbohidratos en la acetogénesis: ............................. 48 Ecuación 17 . Bioconversión de los carbohidratos en la acetogénesis: ............................ 49 Ecuación 18. Descomposición del trioleato de glicerina: .................................................. 49 Ecuación 19 . Descomposición del trioleato de glicerina: ................................................. 49 Ecuación 20. Descomposición del oleato: ........................................................................ 49 Ecuación 21. Descomposición del oleato: ........................................................................ 49 Ecuación 22. Hidrolisis de las proteínas: ......................................................................... 49 Ecuación 23. Descomposición de aminoácidos: .............................................................. 50 Ecuación 24. Descomposición del Valerato: .................................................................... 50 Ecuación 25. Alcalinidad Total: ........................................................................................ 76 Ecuación 26. Ácidos grasos volátiles: .............................................................................. 76 Ecuación 27. Cantidad de Biogás esperado: ................................................................... 78 Ecuación 28. Ecuación de la curva: ................................................................................. 85 Ecuación 29. Calcular Ro: ............................................................................................... 85 Ecuación 30. Calcular Rs: ................................................................................................ 85 Ecuación 31. Concentración de metano en ppm: ............................................................. 85 Ecuación 32 Volumen de la mezcla: ................................................................................ 98 Ecuación 33 Cantidad de estiércol: .................................................................................. 99 LISTADO DE ANEXOS Anexo 1. Sistema de Monitoreo Remoto. 134 Anexo 2. Construcción de Biodigestores 165 Anexo 3. Carta de solicitud de ingreso a Laboratorio de la Institución Educativa Simón Bolívar. 169 Anexo 4. Resultados Análisis de varianza. 170 RESUMEN La digestión anaeróbica es un proceso biológico que permite la degradación de residuos orgánicos transformándolos en productos como efluente y biogás con altos contenidos de metano (Gómez, 2012). El rendimiento de este proceso de digestión depende de parámetros tales como pH, ácidos grasos volátiles y temperatura, teniendo este último una alta influencia en el aumento de la actividad de las bacterias que actúan en las etapas de hidrolisis, acidogénesis, acetogénesis y metanogénesis. Considerando estas variables, se propone el desarrollo de un sistema de producción de biogás en un biodigestor de flujo discontinuo monitoreando variables fisicoquímicas en tres diferentes tipos de aislamiento. Este proyecto fue desarrollado en el Laboratorio de Experimentación Agro Técnica y Energías Renovables (LEATYER), Campus Chía en la Universidad El Bosque. Para esto, la metodología se dividió en cuatro fases: La primera, el desarrollo de un sistema de monitoreo remoto de las variables fisicoquímicas importantes en el proceso de digestión anaeróbica. La segunda, la implementación de los tres diferentes tipos de aislamiento para los biodigestores:invernadero, botellas PET con paja y Thermolon y el tercer, sin sistema de aislamiento. En la tercera, se determinó la relación de Ácidos grasos volátiles-AGV y alcalinidad del afluente y en el efluente con el fin de evaluar el funcionamiento del biodigestor. Por último, se realizó un ANOVA con el objetivo de determinar las variables que afectaron la producción de biogás en cada uno de los biodigestores. Los resultados obtenidos se basan en que el biodigestor con recubrimiento de thermolon y botellas PET con paja fue el que mayor producción de biogás y concentración de metano tuvo. También se encontró un valor de la relación de Ácidos Grasos Volátiles y Alcalinidad superior al rango del valor ideal. Por otro lado, a partir del ANOVA se pudo observar que el valor de p se encontraba <0,05 en cada una de las variables medidas lo que representó una diferencia significativa entre cada uno de los grupos de biodigestores. PALABRAS CLAVES: Estiércol bovino, variables fisicoquímicas, sistema de aislamiento, monitoreo remoto, producción de biogás. 15 INTRODUCCIÓN Un biodigestor es un depósito herméticamente cerrado que permite la producción de biogás, metano y fertilizante orgánico, esto a partir de materiales orgánicos mezclados con agua que se fermentan gracias a la actividad de bacterias en ausencia parcial o total de oxígeno (Pacelli & Fanelli, 2020). Con el fin de que se lleve a cabo el proceso de digestión anaeróbica con ayuda de las bacterias ya mencionadas, se debe cumplir con parámetros en las variables de pH y temperatura dado que un cambio abrupto de estas condiciones en las etapas de digestión anaerobia puede conllevar a resultados irreversibles, como la inhibición de las bacterias presentes (Arenas, 2019; Santa Fe, 2019). Desde hace un siglo se empezó a fomentar el uso de tecnologías que permitan el empleo de materia orgánica para la generación de energía. El primer biodigestor fue instalado en India en el año 1890, a partir de la necesidad de obtener energía (Ávila, 2016). Seguido de ello, se imitó esta tecnología en otros países asiáticos y de la Latinoamérica. Donde, se estima que hay 30 millones de biodigestores en China, 3.8 millones en India, 0.2 millones en Nepal y 60.000 en Bangladesh, igualmente se han instalado en países como México, Costa Rica y Colombia con fines investigativos (Arrieta, 2016). Sin embargo, se encontró la limitación de implementar biodigestores en ambientes con temperaturas inferiores a 15°C en vista de que se alteraba la velocidad de las reacciones que ocurren en el proceso anaerobio (Deublein & Steinhauser, 2008). Por esta razón, se empezaron a indagar acerca de las diferentes maneras para aislar los biodigestores de la temperatura exterior a la que se ve expuesta. El primer país en emplear materiales aislantes para paredes y fondos de los biodigestores y en diseñar invernaderos para generar aislamiento de la temperatura fue India en el año 1985. Por otra parte, en Latinoamérica la primera experiencia se dio en el año 2003 donde Jaime Martí Herrero propuso y construyó un invernadero para el aislamiento de la temperatura en biodigestores tubulares a 4100 m.s.n.m. (Martí Herrero, 2007).En la actualidad se han seguido estudiando nuevas tecnologías que garanticen el proceso de digestión anaerobia con el control de las variables de pH y temperatura, como es el caso de la Universidad Técnica de Ambato de Ecuador donde se investigó el tiempo de retención para biodigestores instalados en zonas con temperaturas entre 7,8°C a 18,7°C monitoreando la temperatura interna y externa de los biodigestores además del pH (Palacios, 2020). 16 Este proyecto busca desarrollar tres biodigestores con diferentes tipos de aislamiento en el Laboratorio de Experimentación Agro-técnica y Energías Renovables que se encuentra ubicado en el campus Chía de la Universidad el Bosque. Teniendo en cuenta las investigaciones anteriormente mencionadas y además, que el municipio de Chía se encuentra a 2560 m.s.n.m., con temperaturas máximas de 27.5°C, mínimas de – 2.5°C y un promedio de 14°C (Alcaldía de Chía, 2012), el presente proyecto se realiza con el fin de dar respuesta a la carencia de la implementación de sistemas basados en la digestión anaerobia bajo las condiciones climáticas de campus Chía para el aprovechamiento del estiércol bovino generado en la Sabana de Bogotá. 17 1. DEFINICIÓN DEL PROBLEMA En América Latina se han implementado biodigestores desde el año 1970 debido a una crisis energética. Actualmente, se presentan diversas experiencias acerca de esta tecnología, aunque, el número de biodigestores instalados en este lugar es menor a comparación de los ubicados en el continente asiático; algunas de las razones por las cuales sucede este acontecimiento es debido a la carencia de apoyo institucional y la escasez de subsidios financieros (Garfí, Martí, Garwood & Ferrer, 2016). Colombia al ser un territorio que posee varios pisos térmicos, puede presentar diversas temperaturas dependiendo la altura sobre el nivel del mar a la que se encuentra cada municipio (Aguirre, 2013). La Sabana de Bogotá al ser una región ubicada en el altiplano cundiboyacense puede presentar condiciones climáticas frías con temperaturas que oscilan entre -5°C y 26°C lo que hace que la actividad biológica del biodigestor se vea afectada, debido a que los biodigestores por medio de la digestión anaeróbica degradan la materia orgánica por la acción de microorganismos; como resultado de este proceso se genera Biogás (mezcla de metano, dióxido de carbono y otros compuestos) y una solución acuosa rica en elementos minerales considerada fertilizante (Virginia & amp; Estevan, 2015). El proceso anteriormente mencionado requiere de determinadas condiciones del medio en el que se encuentra, como temperatura, pH y sustancias inhibidoras al ser realizado por entes biológicos (Perrigault, Weatherford, Martí, & Poggio, 2012). Siendo más específicos, en el caso de la temperatura se encuentra que esta variable afecta la velocidad y la estabilidad de la reacción del proceso, por lo cual los biodigestores se construyen normalmente en lugares que cuentan con un clima tropical donde la temperatura brinda el ambiente favorable para que se lleve a cabo el proceso de digestión anaeróbica (Perrigault, Weatherford, Martí, & Poggio, 2012). Este tipo de tecnología necesita materia prima renovable para funcionar, por lo que se puede disponer del estiércol generado por el sector ganadero; debido a que este sector es una de las actividades económicas que mayor presencia tiene en el campo colombiano, siendo como ejemplo el municipio de Chía donde se dispone de un 28.69% de los suelos rurales para uso agropecuario semi-intensivo. Considerando lo antes citado, se ha encontrado como limitante la implementación de este tipo de procesos en lugares que se encuentran a bajas temperaturas (Ferrer, Garffi, Uggetti, Ferrer, Calderon & Velo, 2011). 18 Según lo planteado anteriormente se establece como problema central la carencia en la implementación de Biodigestores como alternativa para la disposición de excrementos generados en fincas cercanas al campus Chía, teniendo en cuenta las condiciones climáticas de la Sabana de Bogotá. 1.1 ÁRBOL DEL PROBLEMA Figura 1. Árbol del problema. Fuente: Elaboración propia 19 2. JUSTIFICACIÓN En América Latina se encuentran implementados únicamente 69 biodigestores a comparación de los 510.200 biodigestores que están instalados en el continente asiático, esto debido a diferentes razones socioeconómicas (Martí,2017). Así mismo, se ha encontrado insuficiencia en el monitoreo de las variables que se ven implicadas en el proceso de digestión anaerobiapresente en los biodigestores ya que en los estudios realizados acerca de los biodigestores se ha hallado como única investigación “Low cost digester monitoring under realistic conditions: Rural use of biogas and digestate quality”, en el que se realiza monitoreo manual de variables como: potencial de biometano, ácidos grasos volátiles, concentración de metano, entre otras (Castro, Escalante, Jaimes, Díaz, Vecino, Rojas & amp; Mantilla et al.,2017). Los biodigestores hacen uso del estiércol como materia prima, ya que por medio de la digestión anaeróbica del estiércol se producen diferentes gases relevantes para la generación de biogás, tales como el metano (60%), dióxido de carbono (39%) y óxido nitroso (0.2%). Además, el estiércol presenta una gran cantidad de nutrientes (Nitrógeno, fósforo y potasio) que permiten que los microorganismos posean un ambiente en el que puedan trabajar en óptimas condiciones (Ruiz, 2017). En el proceso de la digestión anaerobia es necesario contemplar a la temperatura como un factor importante, puesto que este factor aumenta la velocidad y eficiencia de las reacciones hasta un límite de temperatura de 65°C (Lorenzo & Obaya,2005), debido a que de la producción total de un biodigestor el 35% depende de la conservación de la temperatura (Ramirez, 2016), por lo que se encuentra imprescindible garantizar la temperatura necesaria para la digestión anaeróbica ocurrida en biodigestores que se puedan localizar en el municipio de Chía, siendo este el fin principal del proyecto. El laboratorio (LEATYER) de Campus Chía se enfoca en la implementación de Fuentes no Convencionales de Energía Renovable, en las que se incluye Eólica y Solar. Este lugar se podría complementar introduciendo la generación de energía a partir de la biomasa, debido a que se puede aprovechar el estiércol bovino generado por las fincas aledañas a la Universidad y, además, servir como herramienta en los futuros proyectos de investigación. Así mismo, el desarrollo de este proyecto permitirá tener conocimiento acerca de la mejor manera en que se puede implementar este tipo de tecnología para que los pequeños granjeros puedan replicarlo, emplear estiércol generado por 5.957 vacas situadas en las fincas del 20 municipio de Chía (ICA,2021) y también, aprovechar de los productos generados al finalizar el proceso. El desarrollo de la generación de esta energía por medio de biodigestores se puede encontrar como una tarea de un Bioingeniero puesto que pone en práctica uno de los focos misionales del programa, en el cual se proveen soluciones en la producción y conservación de energías utilizando materia prima renovable. 21 3. OBJETIVOS 3.1 OBJETIVO GENERAL Desarrollar un sistema de producción de biogás en un biodigestor de flujo discontinuo monitoreado con tres condiciones diferentes de aislamiento en el Laboratorio de Experimentación Agro-técnica y Energías Renovables (LEATYER), Campus Chía en la Universidad El Bosque. 3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS -Desarrollar un sistema de monitoreo remoto de variables fisicoquímicas (temperatura, pH, concentración de metano y cantidad de biogás) durante el proceso de digestión anaeróbica. - Implementar tres biodigestores piloto dos de ellos con diferentes condiciones de aislamiento en el Laboratorio de Experimentación Agrotécnica y Energías Renovables (LEATYER), Campus Chía. - Realizar mediciones de las variables fisicoquímicas (Ácidos Grasos Volátiles (AGV) y Alcalinidad) del afluente y efluente que puede inhibir la producción de metano. - Determinar la producción de biogás de cada uno de los biodigestores por medio de un método estadístico. 22 4. MARCO REFERENCIAL 4.1 MARCO TEORICO 4.1.1 Residuos sólidos orgánicos Los residuos sólidos orgánicos son los que proceden de restos de productos orgánicos, estos residuos pueden desintegrarse o degradarse de forma rápida, para así transformarse en otra forma de materia orgánica (Jaramillo & Zapata, 2008). En estos residuos se puede encontrar: • Residuos putrescibles son aquellos que proceden de la producción de materiales naturales sin transformación natural significativa, y por esta razón su grado de humedad permite que se pueda mantener un alto grado de biodegradabilidad, en este grupo se encuentran los residuos forestales o de jardín, residuos de animales, residuos de comida, heces animales, residuos agropecuarios y agroindustriales entre otros. • Residuos No putrescibles son los que sus características biológicas han sido modificadas hasta el punto de que en ciertas condiciones pierde su biodegradabilidad, entre estos se encuentran los combustibles (Galvis, 2016). Dentro de los residuos putrescible se encuentran los residuos generados por la actividad agropecuaria, cabe resaltar que en Colombia para el 2017 el 23% de su territorio usaba el suelo en actividades agropecuarias, en el cual el 10% era agrícola, el 6% en ganadería, 4% agroforestal y 3% en forestal de producción (Ministerio de Educación Nacional, 2019). Por otro lado, en el sector agropecuario se consideran como principales componentes las actividades en agricultura y ganadería, esto por el aporte en productos indispensables para la economía y la alimentación (Linero, 2017). 4.1.1.1 Residuos de la Industria agropecuaria La industria agropecuaria es una actividad en la cual la producción primaria agrícola, pecuaria o forestal es combinada con el proceso industrial para generar alimentos o materias primas semielaboradas al mercado. (Cury et al., 2017). 23 Ganadería. Los seres humanos han domesticado a especies de mamíferos, aves, reptiles, peces y artrópodos para cumplir demandas en alimentos o para trabajar encontrándose en ellos principalmente la producción de vacas y porcino. La ganadería es una actividad que se basa en la crianza y cuidado de animales con el fin de obtener alimento (Myers, 2012); siendo esta actividad una de las principales fuentes de materia para los biodigestores por los desechos que generan estos animales. En Colombia se encuentra un aproximado de 23,8 millones de cabezas de ganado (FEDEGAN, 2018), mientras que el departamento de Cundinamarca presenta un aproximado de 1´288.570 (Gobernación de Cundinamarca, 2016) y a su vez el municipio de Chía tiene un total de 2284 cabezas de bovinos, dado que la ganadería es una de las principales actividades agropecuaria en el país y que Chía cuenta con un suelo destinado a la productividad agrícola y pecuaria (Guzmán, 2018); siendo esta actividad una de las principales fuentes de materia para los biodigestores por los desechos que generan estos animales. La actividad ganadera deja residuos sólidos orgánicos los cuales es posible reutilizar, recuperar o reciclar, por lo cual es necesario conocer el manejo que se le da a estos respectivos residuos (Galvis, 2016). • Actividades para el manejo y degradación de los residuos ganaderos Entiéndase como residuos ganaderos el resultado de la cría intensiva o extensiva de ganado bovino, ovino, caprino, porcino o aves. Estos residuos pueden ser estiércoles y purines, residuos zoosanitarios o subproductos de origen animal no destinados al consumo humano (Agencia Extremeña de la Energía, 2018). Corrales fijos o móviles. En este proceso el ganado está limitado en un lugar cerrado con el fin de que los excrementos se almacenen en ese espacio específico y sirvan para abonar los terrenos pobres de nutrientes, estos suelos pueden ser usadas posteriormente para agricultura; por esta razón los corrales pueden ser fijos o móviles dependiendo la zona que necesite de este beneficio (Arellano, Rosales & Giraldo, 2014). Lagunas de fermentación. Mediante esta técnica el materialorgánico en la fase líquida se degrada en sus elementos minerales por medio de microorganismos que no dependen del aire, para posteriormente pasar a ser riego del campo; en este proceso es importante garantizar que el material orgánico no contenga agroquímicos o medicamentos veterinarios (Arellano, Rosales & Giraldo, 2014). 24 Abono orgánico. Existen diferentes formas de procesamiento del estiércol para obtener un producto con nutrientes que sirve como abono para el suelo (Arellano, Rosales & Giraldo, 2014), entre estas técnicas se encuentran: - Composteo: Mediante este proceso el estiércol se degrada por medio del empleo de microorganismos que dependen del aire (aeróbicas), esto se realiza por medio de la mezcla de estiércol, residuos de cosecha, agua, cal agrícola y suelo para posteriormente ser amontonado, cubierto con un plástico y volteado cada semana para conseguir una descomposición homogénea; el resultado es obtenido a los 2 o 3 meses cuando evidencie un aspecto de suelo negro poroso (Arellano, Rosales & Giraldo, 2014). - Bocashi: En este método se cuecen al vapor los materiales para el abono dando provecho al calor que se genera por medio de la fermentación aeróbica de estos; para ello se usará carbón vegetal, estiércol, salvado de arroz, cascarilla de arroz, ceniza de fogón, miel de caña de azúcar, levadura para pan, agua y suelo. En un principio se mezcla la melaza, el agua y la levadura y posteriormente se le agregan el resto de los ingredientes echando un monto de un lado a otro para finalmente dejar la preparación del abono extendido y protegido por la lluvia y el sol. La humedad que llevan los materiales de la mezcla interviene en la regulación de la temperatura que influye en el desarrollo de las bacterias que actúan en el proceso (Ministerio de Agricultura y Ganadería de El Salvador, 2007). - Lombricomposta: En esta técnica para la producción de abono se usa la lombriz de tierra “coqueta o roja californiana” o “lombriz roja” (Eisenia foetida). La lombriz se alimenta de los desechos orgánicos y da como excremento algo más de la mitad de lo alimentado ya convertido en abono; este proceso se deja por unos seis meses para obtener un resultado que aumente la capacidad de retención de agua en el suelo y promueva la actividad microbiana del mismo (Arellano, Rosales, Giraldo, 2014). Sumado a esto, los residuos de estiércol bovino además de contener materia orgánica son una fuente de inoculo al contar con un alto recuento de grupos tróficos adecuados para que se de el proceso de digestión anaerobia (Castro, Escalante, Gómez and Jimenéz, 2016). Al igual que en el caso de los residuos porcinos los cuales además de contener materia orgánica, se consideran como una fuente de inoculo para la producción del metano (Chávez, Gárcia, Sandoval and Trejo, 2015). En el caso de los residuos vegetales como fuente para los biodigestores, se ha encontrado que poseen un alto contenido de humedad el cual favorece la fase inicial de la digestión anaerobia que es la hidrólisis (Parra, 2014). 25 4.1.2 Biodigestores En la actualidad se están promoviendo los sistemas de producción de biogás donde se disponen los residuos orgánicos a través de diferentes métodos; el más conocido es por medio del uso de Biodigestores, que ha visto su promoción gracias a el alto costo de los fertilizantes orgánicos y la producción de alternativas no convencionales de energía (Moreno, 2011). Los Biodigestores son, brevemente, un tanque cerrado que puede ser cilíndrico, rectangular, esférico o semiesférico, donde los residuos orgánicos mezclados con agua permanecen un periodo de tiempo para lograr la digestión anaerobia que da como resultado biogás (Corona, 2007; Olaya & González, 2009). Gracias a su estructura, este tipo de sistema presenta ventajas como la obtención de energía que puede ser utilizada para el cocimiento de alimentos o combustible para motores, así como la contribución al medio ambiente ya que se disminuyen los residuos y de igual forma la carga contaminante; además, se genera el efluente que sirve como abono para cultivos (Biometrans, 2016). Por lo tanto, la digestión anaerobia se entiende como la interacción de microorganismos con los compuestos orgánicos que se encuentran en los desechos; estos microorganismos se encargan de degradar los compuestos orgánicos dando como resultado Metano y Dióxido de Carbono en mayor proporción. Adicionalmente, los nutrientes que poseen los desechos, permiten dar un ambiente para que los microorganismos trabajen en óptimas condiciones (Ruiz, 2017) y así dar lugar a la degradación de la fracción orgánica inestable, siendo esta la contaminante, hasta una forma estable en la que se obtiene Biogás y Biol (Orrico, Orrico, & Junior, 2010). 4.1.2.1 Tipos de Biodigestores Los biodigestores se pueden clasificar según su uso, para ello, se decidió tomar como referencia el modo de operación con relación a la carga (Moreno, 2011): - Los biodigestores discontinuos, son llamados así porque la carga se realiza de forma discontinua, esto quiere decir que el biodigestor se vuelve a cargar con residuos frescos una vez finalizada la fermentación y se descarga el producto (Nogués, Galindo & Rezeau, 2010). - Los biodigestores continuos, son aquellos que se cargan de forma continua, es decir, se cargan grandes cantidades aproximadamente todos los 26 días (Rodríguez & García, 2017); esto permite que la producción de biogás sea de forma uniforme en el tiempo. Debido a esto, es comúnmente usado en aplicaciones industriales (Moreno, 2011). - Los biodigestores semi-continuos son los más usados en zonas rurales, su carga puede ser diaria y con un volumen del cual dependerá el tiempo de fermentación, permitiéndose así una producción constante de gas (Sosa, Chao & del Río, 1999). En las zonas rurales de Latinoamérica existen tres tipos de biodigestores que se encuentran en mayor proporción, estos son los biodigestores de domo fijo, de tambor flotante y tubular, los cuales pueden operar con residuos de animales o de cosecha y llegan a presentar volúmenes entre 5 a 20 aproximadamente; adicionalmente, su producción de biogás puede tardar de 40 a 45 días dependiendo de las condiciones ambientales en las que se encuentren (Parra, Botero & Botero, 2018). ● Biodigestor de domo fijo: Este tipo de biodigestor consiste en un recipiente tipo tambor que es inmóvil y va construido bajo suelo con diferentes materiales como ladrillos, arena y metal que tienen la finalidad de darle sostén (Parra, Botero & Botero, 2018). Figura 2. Biodigestor de domo fijo. (Corona, 2007). Este biodigestor presenta tanto ventajas como desventajas; dentro de las ventajas se incorporan los costos de su construcción que son evidentemente bajos, igualmente, esta obra permite que haya protección al digestor con relación a cambios de temperatura; por otro lado, hay desventajas como lo son los problemas de permeabilidad para los gases del recipiente (Corona, 2007). ● Biodigestor de tambor flotante: 27 Esta clase de biodigestor tienen su singularidad en el hecho de que es subterráneo y usualmente es construido a base de hierro, adicionalmente, presenta una tapa flotante o móvil que permite entrampar el gas que se produce, así mismo, se alimenta de forma semi continua por medio de una entrada hecha de tubería; convergentemente, el tambor presenta diferentes movimientos (arriba y abajo) dependiendo de la cantidad de gas que se almacena (Ecocosas, 2011). Como consecuencia de su estructura, se pueden apreciar ventajas como su fácil operación y la sencilla forma de percibir el gas que se almacena; por otro lado, presenta como desventajas los costos elevados de su fabricación y manutención y el hecho de que su vida útil es más corta a comparación a el domo fijo(Corona, 2007). ● Biodigestor tubular: Este tipo de biodigestor está conformado por polietileno, una salida y una entrada por medio de tubos PVC y comúnmente es sumergido dentro de una zanja realizada; su trabajo depende del clima donde se vaya a ubicar ya que si el clima es caliente su producción varía entre 20 y 60 días, por el contrario, si es frío varía entre 60 y 90 días (Parra, Botero & Botero, 2018). Cabe destacar que este biodigestor es ideal para comunidades que se encuentran en la parte rural ya que presenta ventajas como su bajo costo y su fácil utilización, además, no necesitan métodos complejos de calentamiento como el uso de invernaderos; por otro lado, su principal desventaja es el tiempo útil ya que se estima una duración de entre 2 y 5 años si es de plástico y máximo 10 años si es de geomembrana (Parra, Botero & Botero, 2018). 4.1.2.2 Digestión Anaerobia La digestión anaerobia es una degradación microbiológica en ausencia parcial o total de oxígeno, en donde se obtiene como resultado principal el biogás; el cual, es una mezcla gaseosa de metano (50%-70% de la composición), dióxido de carbono (30%-50% de la composición) y con pequeñas cantidades de otros componentes como el nitrógeno, oxígeno, hidrógeno y sulfuro de hidrógeno. Durante los procesos de degradación los microorganismos trabajan en serie o grupo para llevar a cabo el proceso de degradación, que se lleva a cabo a través de etapas sucesivas cada una desencadenando la siguiente; estas etapas son denominadas hidrólisis, acidogénesis, acetogénesis y metanogénesis (Corrales et al., 2015). 28 Para que las bacterias puedan ejecutar los procesos de manera adecuada, se ven condicionadas por factores físicos y químicos, como son: cargas de materia orgánica, ácidos grasos volátiles, la temperatura, alcalinidad, nutrientes y presencia de N y P, entre otros (Corrales et al., 2015). Entre estos factores, la presencia de materia orgánica y la temperatura son primordiales para el metabolismo de las bacterias; la temperatura, es un factor que condiciona las interacciones biológicas y de supervivencia que forman las bacterias. Etapas del proceso. Hidrólisis: Es un proceso que radica en la hidrolización de moléculas complejas como las proteínas, lípidos y carbohidratos, por medio de reacciones de oxidorreducción y enzimas celulares (celulasas, amilasas y lipasas) generadas por las bacterias Hidrolíticas (Reyes, 2017). En el caso de los carbohidratos, se pueden encontrar dos tipos importantes de polisacáridos: la celulosa y la hemicelulosa con enlaces β 1-4 y la pectina y el almidón con enlaces α 1-4. La ruptura de los enlaces de la celulosa (β 1-4) es llevada a cabo por la acción de enzimas extracelulares, que rompen el enlace al introducir una molécula de agua; generando como productos la celobiosa (disacárido) y la glucosa (monosacárido). Mientras que la ruptura de los enlaces α 1-4, se hidrolizan por medio de la acción de las amilasas y pectinasas (Deublein & Steinhauser, 2008). Con respecto a la hidrólisis de los lípidos, estas moléculas se encuentran constituidas por ácidos grasos unidos a una molécula de glicerol; en este caso la hidrolisis depende de la solubilidad del ácido, que depende a su vez del pH. Por lo cual, a altos valores de pH la solubilidad aumenta y a bajos valores disminuye. Al producirse la hidrolisis de estas moléculas se generan ácidos grasos, glicerol, galactosa, colina, entre otros (Deublein & Steinhauser, 2008). Por otro lado, en la hidrólisis de las proteínas por medio proteasas, se generan como producto proteasas, peptonas, péptidos y aminoácidos; estos aminoácidos al ser degradados dan lugar a productos como los ácidos grasos volátiles, dióxido de carbono, hidrógeno, amonio y sulfuro (Cámara & Laines, 2011). En el proceso de la hidrolisis los microorganismos facultativos adquieren el oxígeno disuelto en el agua y generan un bajo potencial redox necesario para los microorganismos anaeróbicos estrictos (Deublein & Steinhauser, 2008). La hidrolisis se da por microorganismos estrictos y facultativos por medio de la síntesis de enzimas hidrolíticas denominadas lipasas, enzimas proteolíticas llamadas proteasas (Díaz, 2016), que son capaces de solubilizar la materia orgánica en presencia de agua, en esta etapa se encuentran los Peptostretococcus sp, 29 Propinibacterium sp, Bacteroides sp, Micrococcus, sp, Clostridium sp., Lactobacillus sp., Sphingomonas sp., y Bifidobacterium sp (Morales, 2020). Acidogénesis: En este proceso las moléculas orgánicas solubles pasan por un proceso de fermentación y se generan como productos el acetato, ácidos grasos de cadena corta, alcoholes, hidrógeno y dióxido de carbono para obtener los productos que se mencionan anteriormente, es necesario que ocurran los procesos de fermentación alcohólica, láctica y acética. ● Fermentación alcohólica: Es un proceso biológico que ocurre en ausencia de oxígeno. Este es llevado a cabo por microorganismos que tienen la capacidad de procesar los hidratos de carbono convirtiéndolos en etanol y dióxido de carbono (Corrales et al., 2015). ● Fermentación láctica: Es un proceso que es llevado a cabo por bacterias facultativas. Este consiste en la obtención de ácido láctico, fórmico, entre otros, a partir de la degradación de piruvato (Corrales et al., 2015). Existen dos tipos de fermentaciones lácticas, las cuales son: a. Fermentación heteroláctica: En este tipo de fermentación actúan bacterias del género Bifidobacterium. Estas generan productos como ácido acético, ácido fórmico y ácido láctico (Corrales et al., 2015). b. Fermentación homoláctica: En este proceso actúan bacterias de los géneros Streptococcus, Lactococcus y Pediococcus. En este se genera mayormente ácido láctico y una pequeña cantidad de alcohol, anhídrido carbónico y acetoína; esto varía dependiendo la disponibilidad de oxígeno (Corrales et al., 2015). ● Fermentación acetona-Butanol: En este tipo de fermentación se generan productos tales como el ácido propiónico, ácido acético, ácido succínico y dióxido de carbono; para generar estos productos es necesaria la presencia de bacterias del género Propioniobacterium, Veillonella y, además, Clostridium propinicum. ● Fermentación del ácido butírico: En este proceso se presentan bacterias del género Clostridium y se generan productos como el butanol, ácido acético, acetona, alcohol isopropílico y gases (Hidrogeno y Dióxido de Carbono) (Corrales et al., 2015). La cinética del proceso en esta etapa es relativamente rápida y el pH óptimo para el crecimiento de los microorganismos es bajo (Llamas, 2015). 30 Acetogénesis: En esta fase ocurre la oxidación del butirato y propionato con ayuda de los organismos acetógenos que actúan como productores obligados de hidrógeno con el fin de obtener como productos el acetato, el dióxido de carbono y el hidrógeno. Del mismo modo, en esta etapa las bacterias homoacetogénicas presentan una gran función, ya que catalizan la generación del acetato a partir del dióxido de carbono e hidrógeno (Corrales et al., 2015). En el género de las bacterias homoacetogénicas se incluyen los Clostridrium aceticum, Acetobacterium wooddi, entre otros (Cámara & Laines, 2011). Hasta este punto del proceso se generaron ácidos que producen una baja del pH medio, sin embargo, a medida que esta etapa va pasando a la fase de la metanogénesis los ácidos comienzan a ser consumidos y genera una subida del pH (Llamas, 2015). Metanogénesis: Durante esta fase se genera la formación del metano que se produce debido a la presencia de microorganismos del dominio Archaea, las especies más comunes en esta etapa son Methanobacterium sp., Methanosarcina y Methanothix (Morales, 2020). Las reacciones para estos microorganismos en esta etapa se encuentran en dos diferentes procesos; el primero,la conversión de acetato en metano por medio de las archaeas metanogénicas acetoclásticas lo cual es llevado a cabo por los géneros Methanosarcina y Methanotrix. Por último, la formación de metano a partir del dióxido de carbono e hidrógeno por las archaeas homoacetogénicas (Reyes, 2017). En el primero de los procesos mencionados anteriormente ocurre la descarboxilación del acetato y a su vez la reducción del grupo metilo, generando como resultado metano y dióxido de carbono; por otra parte, en el segundo, ocurre la formación metano a partir de la conversión de dióxido de carbono e hidrógeno, donde este beneficia al biodigestor debido a que controla el potencial de oxidorreducción en la fermentación (Reyes, 2017). Las bacterias Arqueas Metanogenicas cuentan con coenzimas exclusivas, entre estas se encuentra la coenzima la cual permite reducir el dióxido de carbono en metano, las coenzimas F420 y F430 las cuales contienen niquel y son portadoras de hidrogeno (López, 2016). Las bacterias metanogénicas son más estrictas en comparación a las bacterias fermentativas con respecto al pH, puesto que las primeras son sensibles a las variaciones de pH fuera de su rango óptimo (Milquez, 2017). 31 Las bacterias en estos procesos se ven condicionados por algunos factores químicos y físicos, que permiten el correcto desarrollo como son: El pH y la temperatura. En la tabla 1 podemos ver los rangos de pH y temperatura que influyen en cada una de las etapas. Con respecto al pH, interviene en el crecimiento bacteriano, la mayoría de las bacterias pueden conseguir un desarrollo óptimo en un intervalo de pH de 6,3 – 7,6 (Acosta, 2019). Por otro lado, la temperatura interfiere en las interacciones biológicas y de supervivencia que desarrollan las bacterias. Tabla 1. Valor del pH según la etapa de la digestión anaerobia (Veiga, 2015) (Llamas, 2015) (Martí, 2019). 4.1.2.3 Factores determinantes en el proceso de digestión anaerobia El proceso de digestión anaerobia se puede ver afectado por condiciones ambientales del biodigestor, uno de estos factores es la temperatura, en la que existen tres rangos óptimos para que se dé la fase de metanogénesis, en 5-15°C para psicrófilos, 35-40°C mesófilos y 50-60°C para termófilos (RedBioCol, & RedBioLAC, 2018). Por esta razón, es importante mantener los rangos óptimos para cada tipo de microorganismos, puesto que si la temperatura disminuye más del límite mínimo puede causar en la bacteria una gelificación de la membrana lo que causa que el transporte sea tan lento que no ocurra el crecimiento; si ocurre lo contrario, situación en la que se subiopera el límite máximo de temperatura, la bacteria puede sufrir desnaturalización proteica causando el colapso de la membrana; mientras que si se promueve estar entre el rango o valor óptimo habrá una reacción enzimática a la máxima velocidad posible hasta llegar a una velocidad con constante aumento (Madigan, Martinko, & Parker, 2004). Conforme a lo planteado, se puede entender que el aumento de la velocidad de reacción de los procesos depende de la velocidad de crecimiento de los microorganismos y estos a su vez dependen de la temperatura (Moreno, 2011). Parámetro Etapa pH Hidrólisis 5,5 – 6,5 Acidogénesis 5,0 – 6,0 Acetogénesis 5,5 – 6,5 Metanogénesis 6,6 - 7,5 32 Otro factor determinante radica en la velocidad en la que las bacterias trabajan el estiércol, ya que este define el tiempo de retención, este tiempo hace referencia al periodo de tiempo en el que la materia se encuentra en el biodigestor hasta conseguir la degradación (Olaya & González, 2009); lo que hace referencia a que ante la presencia de mayor velocidad, menor será el tiempo que necesita el estiércol dentro del biodigestor para tener como resultado todo el potencial de biogás de la carga (Martí, 2019, p. 37), esta relación se muestra en la Tabla 2. El biodigestor se debe encontrar en un rango de temperatura óptima 25-35°C (Guerrero, 2012). Tabla 2. Variación del tiempo de retención a partir de las variaciones en la temperatura (Martí, 2019, p. 37). Temperatura Tiempo de retención 35°C 25-30 días 30°C 30-40 días 25°C 35-50 días 20°C 50-65 días 15°C 65-90 días 10°C 90-125 días Adicionalmente, el proceso se ve afectado por el pH, ya que las bacterias que actúan en las diferentes fases de la digestión anaerobia tienen unos rangos óptimos para su máxima actividad; en el caso de las hidrolíticas tienen un rango óptimo de 7,2 a 7,4, acetogénicas entre 7,0 a 7,2 y la metanogénicas entre 6,5 a 7,5; siendo un rango entre 6,5 a 7,5 el valor óptimo del biodigestor (Guerrero, 2012). Es decir, las consecuencias de tener un valor de pH menor a 6 radican en que el producto de biogás tendrá concentraciones de metano bajas, puesto que las bacterias que actúan en la metanogénesis son sensibles a las variaciones en pH; además, la baja actividad en los microorganismos metanogénicos causa acumulación de ácido acético y al aumentar la presión de las bacterias que degradan el ácido propiónico son inhibidas dando una acumulación de ácidos grasos volátiles, disminuyendo la producción de ácido acético y disminuyendo el pH (Moreno, 2011). De manera conclusiva, en caso de que el pH aumente a más de 8, se da un cambio de NH4+ a NH3, esto teniendo en cuenta que concentraciones superiores a 1500 mg/L de amoniaco pueden llegar a inhibir la fase de metanogénesis, ya que la molécula no ionizada del nitrógeno puede entrar a la célula a través de la membrana 33 celular y en concentraciones muy altas puede producir la muerte celular (RedBioCol & RedBioLAC, 2018). 4.1.2.4 Biogás El Biogás es un producto de la digestión anaerobia de materiales orgánicos sólidos, esta es una mezcla gaseosa que contiene principalmente metano y dióxido de carbono, además de diferentes compuestos (Cvetkovski, I., & Litonjua, R. 2012). Las concentraciones en las que se encuentra los compuestos del biogás depende de la composición de la biomasa que se usa en el biogás, el metano (𝐶𝐻4) se encuentra en un 35%-75%, el dióxido de carbono (𝐶𝑂2) en un 15%-60%, vapor de agua (𝐻2𝑂) 5%-10%, sulfuro de hidrógeno (𝐻2𝑆) 0,005%-2%, el amoniaco (𝑁𝐻3) se encuentra en menos de 1%, oxígeno (𝑂2) 0%-1%, monóxido de carbono (𝐶𝑂 ) en menos del 0,6% y el nitrógeno (𝑁2) de 0%-2% (Arellano et al., 2017). La producción de Biogás a partir del estiércol y lodo animal permite disminuir las emisiones de gases invernadero principalmente el amoniaco y metano (Holmn, Seadi, & Oleskowicz, 2009); este producto permite que se use como energía renovable, puesto que el metano puede ser usado como reemplazo de combustibles fósiles para generación de calor, energía eléctrica y combustible para vehículos (Weiland, 2010). El biogás puede ser empleado de diferentes maneras, en lo que se incluye la producción de calor o vapor, generación de electricidad e iluminación. La primera se basa en utilizar el biogás para la generación de energía térmica, el segundo está basado en la utilización del biogás para la electricidad y generación de calor. Por otra parte, en la iluminación se transforma el biogás generado en luz o calor (Moreno, 2011). 4.1.2.5 Biol/Efluente El biol o Efluente se le considera al producto dado en la digestión anaerobia además del biogás, este contiene materia orgánica rica en elementos minerales que permite que sea usado como fertilizante en el suelo (Moreno, 2011); es la fracción liquida que resulta del fango proveniente del biodigestor, este es sedimentado obteniendo de esta manera la parte liquida a la cual se le llama Biol (Canales, Rivas, & Sorto, 2010). Es preciso señalar que el biol está compuesto en promedio por un 8.5% de materia orgánica, 2.6% nitrógeno, 1. 5% fósforo, 1.0% de potasio y un pH de 7.5; este se 34 puede usar deforma líquida en cantidades controladas o de forma sólida una vez este se ha deshidratado (Bautista, 2010). El uso del Biol se da principalmente como fortalecedor y fomentador del crecimiento de las raíces y frutos de las plantas; dado que, contiene materia orgánica, N, P, K, hormonas de crecimiento, vitaminas y aminoácidos; además, el Biol se puede usar para fertilizar los cultivos o puede añadirse al compostaje usado. - Ventajas: • El Biol permte un mejor intercambio catiónico en el suelo, ya que ayuda a ampliar la disponibilidad de nutrientes del suelo. • Ayuda a mejorar la resistencia a plagas y enfermedades, debido a que mejora la actividad de los microorganismos benéficos del suelo. • Mejora la floración y activa el vigor y la germinación de las semillas, lo que aumenta las cosechas. • Ayuda a desarrollar mayor tolerancia a condiciones climáticas adversas. • Contribuye a mantener el N, P, K, Ca debido al proceso de descomposición anaerobia que permite el aprovechamiento de los nutrientes de manera completa (Saldaña, 2019). El uso del Biol para el follaje de las plantas no debe de hacerse de forma pura sino en diluciones del 25% al 75%, para estas diluciones se puede realizar: - Disolución sencilla • El Biol obtenido de la DA filtrar por cedazos o filtros de alambre • Filtrar en tela para que pase por un embudo • Diluir un 25% agregando 15 L de agua a 5 L de Biol, o diluir un 75% agregando 5 L de agua a 15 L de Biol (Guanopatín, 2012). - Preparación del Biol bovino con urea y 18-46 • Filtrar 200 L de Biol (separación de solidos) • A una caneca de 200L. Agregar 100 L de Biol • En una cubeta con 5 L de Biol disolver 1,5 Kg de urea • En una cubeta con 10 L de Biol disolver 1 Kg de 18-46 dejando por 20 minutos hasta que se disuelva la mayor parte • Se mezcla todo en la caneca inicial y se complementa con los 100 L de Biol restante (Sistema Bio Bolsa, 2018). 35 4.1.3 Caracterización fisicoquímica en afluente y efluente Con el propósito de asegurar una eficiente producción de biogás se debe realizar un dimensionamiento del sistema de biodigestión, para esto se puede analizar características físicas, químicas y biológicas del afluente y efluente; entre las principales características encontramos: Contenido de Sólidos (Sólidos Totales, Sólidos Volátiles), pH, relación carbono-nitrógeno, AGV, demanda bioquímica y química de oxígeno y alcalinidad (SEMARNAT & SAGARPA, 2010). ▪ Nutrientes. Para lograr el alcance de un correcto desarrollo de la flora bacteriana se hace necesaria la existencia de nutrientes como nitrógeno, fósforo, sulfuro, potasio, calcio, magnesio y otros elementos como manganeso, hierro, molibdeno, zinc, selenio y níquel; de manera análoga el sustrato debe mantener concentraciones determinadas de estos elementos. Altas concentraciones de estos elementos causan efectos inhibidores como es el caso de la elevación del contenido de nitrógeno que causa problemas por formación de amonio y este a su vez el aumento de la presencia de AGV disminuyendo la producción de biogás y causando reducción en el pH, por lo cual se hace necesario un análisis del sustrato para garantizar las concentraciones de estos elementos (Pérez, 2011). ▪ Sólidos totales (ST). Los sólidos totales hacen referencia al porcentaje o peso de solidos secos presentes en estiércol, orín o material orgánico (Navarro, 2017). Así mismo, los sólidos totales y solidos volátiles se interpretan como un % en peso húmedo de muestras y sus unidades son % masa (López, 2016), de esta forma un valor del 10% de ST significa un bajo contenido en sólidos, del 15–20% representa un contenido medio y del 22- 40% representa un alto contenido en sólidos (Pérez, 2011). ▪ Solidos Volátiles (SV). Los sólidos volátiles son tomados en cuenta como la materia que en realidad es transformada por las bacterias (Reyes, 2017), estos son la porción orgánica de los sólidos y se volatizan a temperaturas de 550 ± 50°C (Gonzales & Vargas, 2018). ▪ Relación carbono-nitrógeno (C/N). Las bacterias que se encuentran en el proceso de digestión anaerobia dentro de biodigestor deben tener un correcto contenido de carbono y nitrógeno para su crecimiento (Palau, 2016). El carbono les da energía y el nitrógeno es importante para la creación de nuevas bacterias (Cortés, 2019). Sin embargo, la relación C/N debe mantenerse 30/1, puesto que una relación C/N puede generar un incremento de amonio y este a su vez inhibir la producción de metano (Palau, 2016). 36 ▪ Demanda bioquímica y química de oxígeno. La demanda bioquímica de oxígeno (DBO) indica la cantidad de oxígeno disuelto que en el proceso de oxidación bioquímica de la materia es consumido por los microorganismos (Quispe, 2019). Mientras que la demanda química de oxígeno (DQO) mide la cantidad de un oxidante especifico que reacciona con una muestra en condiciones controladas, esta es expresada en mg𝑂2/L (Paredes, 2019). ▪ Ácidos grasos volátiles (AGV). Son ácidos orgánicos con cadenas carbonadas que cuentan con una cantidad de carbonos inferior a seis, entre estos se puede encontrar el ácido fórmico, acético, propiónico, butírico, isobutírico, valérico e isovalérico (Herrera, 2020). Conocer la concentración de ácidos grasos volátiles es usado como un indicador de control en la digestión anaerobia, puesto que una acumulación de ellos indica si el proceso de metanogénesis no se está realizando total o parcialmente, su concentración se expresa en mg/L (López, 2016). Los principales productos de la acidogénesis y acetogénesis son los AGV que sirven como intermediarios degradativos, como es el ácido propiónico, alcoholes, ácido butírico, valérico, capriónico y lácticos; además son precursores directos que permiten la formación de metano, tales como el ácido fórmico, metilaminas, ácido acético, metano, hidrogeno y 𝐶𝑂2 (Reyes, 2017). ▪ Alcalinidad. La alcalinidad está vinculada con el pH puesto que esta cuantifica la capacidad de un medio para neutralizar ácidos y de esta forma mantener el pH lo más estable posible (Martínez, 2019). Al realizar el análisis de alcalinidad se puede definir tres indicadores, el primero es la alcalinidad total (AT), seguido esta la alcalinidad parcial (AP), y por último la alcalinidad intermedia (AI) que está vinculada a la concentración de ácidos y bases débiles, su unidad es mg𝐶𝑎𝐶𝑂3/L (López, 2016). ▪ Relación Ácidos grasos volátiles/Alcalinidad. La cuantificación de la alcalinidad debida a los AGV y la alcalinidad total es usada para el control de la estabilidad del proceso de digestión (Pérez & Torres, 2008), la alcalinidad permite medir la capacidad tampón del digestor, por lo cual, si la acidez volátil aumenta la alcalinidad debe contrarrestar este aumento (Llamas, 2015). Durante la fase inicial de la digestión la producción de AGVs causa la disminución del pH, sin embargo, la reacción del 𝐶𝑂2 permite formar 𝐻𝐶𝑂3 y así recuperar la neutralidad del proceso, a esta acción se le llama Capacidad tampón (Parra, 2014). 37 4.1.4 Sensores El primer elemento que tiene contacto con lo que va a ser medido es el sensor; por lo tanto, es sensible y responde a las variaciones de las magnitudes que se miden. Los componentes de medición además de tener un elemento sensible tienen un transductor que permite la conversión de la variación fisicoquímica detectada como entrada en una señal eléctrica como salida (Granda & Mediavilla, 2010). 4.1.4.1 Sensor de pH El sensor de pH (potencial de hidrógeno) es un transductor entre la acidez de una solución y la señal eléctrica de la misma que permite conocer el grado de acidez y alcalinidad de las sustancias (Abarca, Corona & Carreño, 2014); esta medición es usada para garantizar la calidad de los procesos, como en el caso de los alimentos para saber si es apto para el consumo o
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