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Manual de prácticas de Laboratorio de BIOLOGÍA Araujo Palomares, Cynthia Lizzeth Castellanos Martínez, Sheila De la Peña Nettel, Gabriela Rico Mora, Roxana Schramm Urrutia, Yolanda Silva Jiménez, Hortencia Responsables de la elaboración del manual de BIOLOGÍA Universidad Autónoma de Baja California Facultad de Ciencias Marinas [Avalado, Validado] el [fecha] por Consejo Técnico Directorio Dr. Juan Manuel Ocegueda Hernández. Rector UABC Dra. Mónica Lacavex Berumen Vicerrector, UABC Campus Ensenada Dr. Juan Guillermo Vaca Rodríguez Director FCM Dr. Víctor Antonio Zavala Hamz Subdirector, FCM Universidad Autónoma de Baja California Facultad de Ciencias Marinas Índice Índice ...................................................................................................................................................................................... iii Introducción ............................................................................................................................................................................ 1 Encuadre del Sistema de Prácticas ......................................................................................................................................... 2 Introducción ........................................................................................................................................................................ 2 Competencias a las que contribuye .................................................................................................................................... 3 Niveles de Desempeño ........................................................................................................................................................ 3 Ubicación dentro del mapa curricular ................................................................................................................................ 4 Programa del Sistema de Prácticas ..................................................................................................................................... 5 Contenido de Prácticas de Laboratorio de BIOLOGÍA ........................................................................................................ 6 1. Introducción 1.1 Presentación, clarificación de valores .......................................................................................................................... 7 1.2 Práctica No. 1. Normas de seguridad en el laboratorio de Biología ........................................................................... ..9 1.3 Práctica No. 2. Elaboración de un reporte de laboratorio ........................................................................................ ..17 2. La célula como unidad básica de la vida ........................................................................................................................ 28 2.1 Práctica No. 3. Uso del microscopio estereoscópico .................................................................................................. 28 2.2 Práctica No. 4. Uso del microscopio compuesto ........................................................................................................ 34 2.3 Práctica No. 5. Tipos de células: Procariotas y eucariotas .......................................................................................... 40 3. Genética ......................................................................................................................................................................... 45 3.1 Práctica No. 6. Mitosis ................................................................................................................................................ 45 3.2 Práctica No. 7. Meiosis ................................................................................................................................................ 50 3.3 Práctica No. 8. Herencia .............................................................................................................................................. 54 4. Historia evolutiva de la diversidad biológica ................................................................................................................. 59 4.1 Práctica No. 9. Sistemática .......................................................................................................................................... 59 5. Ecología ......................................................................................................................................................................... 65 5.1 Práctica No. 10. Anatomía de un vertebrado ............................................................................................................. 65 5.2 Práctica No. 11. Anatomía de un invertebrado .......................................................................................................... 68 Anexo A ................................................................................................................................................................................. 71 Normas generales de seguridad e higiene ........................................................................................................................ 71 Medidas generales en caso de accidente ......................................................................................................................... 73 Plan general de emergencia .......................................................................................................................................... 73 Fuego en el laboratorio ................................................................................................................................................. 73 Fuego en el cuerpo ........................................................................................................................................................ 73 Quemaduras .................................................................................................................................................................. 74 Cortes ............................................................................................................................................................................ 74 Derrame de productos químicos sobre la piel .............................................................................................................. 74 Corrosiones en la piel por ácidos y álcalis ..................................................................................................................... 75 Corrosiones en los ojos ................................................................................................................................................. 75 Ingestión de productos químicos .................................................................................................................................. 75 Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Introducción Página 1 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Introducción Este manual está diseñado para estudiantes del área de ciencias naturales y exactas. Está destinado a servir de complemento a la materia de Biología del Tronco Común de la Facultad de Ciencias Marinas de la Universidad Autónoma de Baja California, pero podrá, mediante adaptaciones y modificaciones leves, ser usado en cualquier carrera afín. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Encuadre del Sistema de Prácticas Página 2 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Encuadre del Sistema de Prácticas Introducción Las prácticas de laboratorio de Biología son parte de esta unidad de aprendizaje obligatoria que se imparte en el Tronco Común de la Facultad de Ciencias Marinas.Su propósito es que el alumno adquiera los conocimientos y habilidades básicas para la utilización del equipo y materiales dentro de un laboratorio de Biología. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Encuadre del Sistema de Prácticas Página 3 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Competencias a las que contribuye Conocer y saber aplicar la correcta utilización de equipo, materiales y herramientas para la observación, toma de datos y su interpretación, utilizando las habilidades del pensamiento lógico, con una actitud creativa, crítica y disciplinada. Niveles de Desempeño Las prácticas del laboratorio de Biología se ubican en el nivel de desempeño 2, ya que se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajo, variadas y aplicadas en diversos contextos. Algunas actividades son complejas y no rutinarias. Presenta un bajo grado de responsabilidad y autonomía en las decisiones. A menudo requiere colaboración con otros y trabajo en equipo. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Encuadre del Sistema de Prácticas Página 4 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Ubicación dentro del mapa curricular Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Encuadre del Sistema de Prácticas Página 5 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Programa del Sistema de Prácticas Tema Práctica o prácticas programadas Ámbito de desarrollo Duración* 1. Introducción Presentación, clarificación de valores. Laboratorio 2 Hrs. Semana 1 Práctica #1. Normas de seguridad en el laboratorio de Biología. Laboratorio 2 Hrs. Semana 2 Práctica #2. Elaboración de un reporte de laboratorio. Laboratorio 4 h Semana 3 y 4 2. La célula como unidad básica de la vida Práctica # 3. Uso del Microscopio Estereoscópico. Laboratorio 2 Hrs. Semana 5 Práctica # 4. Uso del Microscopio Compuesto. Laboratorio 2 Hrs. Semana 6 Práctica # 5. Tipos de células: Procariotas y eucariotas. Laboratorio 2Hrs. Semana 7 3. Genética Práctica # 6. Mitosis. Laboratorio 2 Hrs. Semana 8 Práctica # 7. Meiosis. Laboratorio 2 Hrs. Semana 9 Práctica # 8. Herencia. Laboratorio 2 Hrs. Semana 10 4. Historia Evolutiva de la Diversidad Biológica Práctica # 9. Sistemática Laboratorio 2 Hrs. Semana 11 5. Ecología Práctica # 10. Anatomía de un vertebrado. Laboratorio 2 Hrs. Semana 12 Práctica # 11. Anatomía de un invertebrado . Laboratorio 2 Hrs. Semana 13 * Duración en horas para cada práctica, y semana del semestre en la que se realizará. 1. Introducción Conocer tanto al instructor, así como el espacio físico en el que se desarrollarán las sesiones, sus reglamentos de uso y comportamiento. Desarrollar un ejercicio de clarificación de valores. Conocer cómo se hace un Reporte de Laboratorio, compararlo con los artículos científicos y practicar la forma de citar en estilo Harvard. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 7 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 1.1 Presentación, clarificación de valores. 1.1.1. Introducción Conocer tanto al instructor o instructora, así como a los integrantes de la sección de laboratorio correspondiente. 1.1.2. Objetivo Objetivo explícito: Decidir por consenso, en equipo de trabajo, una jerarquización acerca del comportamiento de los actores de la historia que se narrará. Objetivos implícitos: Propiciar la integración grupal. Detectar la ideología y los valores de los participantes. Detectar la presencia de líderes. 1.1.2.2. Competencia de la Presentación e integración grupal. Decidir por consenso, en equipo de trabajo, una jerarquización acerca del comportamiento de los actores de la historia que se narrará para propiciar la integración grupal y detectar la ideología y los valores de los participantes. 1.1.3. Material Hoja con la historia de las Técnica de las islas de la guía de Habilidades Básicas para la Docencia de Carlos Zarzar Charur, para que la lea el instructor ante el grupo. Papel y lápiz. 1.1.4. Desarrollo 1. Se presentará el instructor o instructora del laboratorio. 2. Se establecerán las reglas de evaluación y la mecánica de trabajo. 3. Se darán a conocer las reglas de comportamiento y vestimenta dentro del laboratorio. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 8 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 4. A continuación el instructor o instructora aplicará la técnica de clarificación de valores denominada: Técnica de las Islas de la guía de Habilidades Básicas para la Docencia de Carlos Zarzar Charur. 5. Primero de manera individual y más tarde de manera grupal, jerarquización acerca del comportamiento de los actores de la historia que se narrará. 1.1.5. Método de Evaluación Observación directa a través de listas de cotejo, durante el desarrollo de la práctica o en dinámicas grupales y simulaciones. Esta sesión no es sujeta a evaluación sólo es motivacional para fomentar la participación, tanto con el resto del grupo así como, con el instructor o instructora. 1.1.6. Bibliografía Zarzar-Charur, C. 1993. “Habilidades Básicas para la Docencia”. Editorial Patria, México, D.F. 150 pp. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 9 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 1.2 Práctica No. 1. Normas de seguridad en el laboratorio de Biología. 1.2.1. Introducción Durante esta sesión se pretende conocer el espacio físico en el que se desarrollarán las sesiones, los reglamentos de comportamiento y uso del laboratorio. Se darán a conocer los procedimientos específicos en caso de accidente, y en el manejo de residuos generados en el laboratorio de biología para su correcta disposición. 1.2.2. Competencias 1.2.2.1. Competencia de las Normas de seguridad del laboratorio de Biología. Conocer los procedimientos para el adecuado manejo y disposición de residuos generados durante las prácticas del laboratorio de biología, y en caso de un accidente para su posterior aplicación. 1.2.3. Material 1.2.3.1. Normas de seguridad del laboratorio de Biología Hojas de seguridad de materiales de laboratorio. Bitácoras de uso de espacio físico. Bitácoras de generación de residuos peligrosos. Hojas de seguridad de sustancias químicas. Señalización de peligrosidad de sustancias químicas y área de almacenamiento de residuos peligrosos en el laboratorio. 1.2.4. Desarrollo El instructor o instructora de laboratorio explicará la información contenida en las hojas de seguridad, uso de bitácoras, señalización y áreas del laboratorio. Además se establecen las reglas de evaluación y la mecánica de trabajo. 1.2.4.1. Normas de seguridad en el laboratorio El alumno conocerá la forma de etiquetado de sustancias químicas que se usan en un laboratorio a través de material en presentación digital e identificará en el laboratorio la señalización correspondiente. El alumno conocerá algunas de las sustancias que se emplearán en el laboratorio de biología y las Hojas de seguridad (MSDS por sus siglas en inglés “Material Safety Data Sheet”) correspondientes, en las cuales se basará para establecer la forma adecuada Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 10 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC de su manejo, disposición, uso de equipo de protección personal y en su caso medidas de primeros auxilios en caso de accidente o contingencia. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 11 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Se establecerá la diferencia entre los diferentes tipos de residuos que se generarán en el laboratorio de biología; se identificarán las corrientes residuales que correspondan, las áreasdestinadas para la disposición de los residuos, la forma adecuada de disposición y las bitácoras de generación de residuos peligrosos. Para esclarecer lo anterior se definen los siguientes conceptos con base en el artículo 5o de la Ley General para la Prevención y Gestión Integral de los Residuos (LGPyGIR) (SEMARNAT, 2018). Residuo: Material o producto cuyo propietario o poseedor desecha y que se encuentra en estado sólido o semisólido, o es un líquido o gas contenido en recipientes o depósitos, y que puede ser susceptible de ser valorizado o requiere sujetarse a tratamiento o disposición final conforme a lo dispuesto en esta Ley y demás ordenamientos que de ella deriven. Residuos de Manejo Especial: Son aquellos generados en los procesos productivos, que no reúnen las características para ser considerados como peligrosos o como residuos sólidos urbanos, o que son producidos por grandes generadores de residuos sólidos urbanos. Residuos Incompatibles: Aquellos que al entrar en contacto o al ser mezclados con agua u otros materiales o residuos, reaccionan produciendo calor, presión, fuego, partículas, gases o vapores dañinos. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 12 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Residuos Peligrosos: Son aquellos que posean alguna de las características de corrosividad, reactividad, explosividad, toxicidad, inflamabilidad, o que contengan agentes infecciosos que les confieran peligrosidad, así como envases, recipientes, embalajes y suelos que hayan sido contaminados cuando se transfieran a otro sitio, de conformidad con lo que se establece en esta Ley. Residuos Sólidos Urbanos: Los generados en las casas habitación, que resultan de la eliminación de los materiales que utilizan en sus actividades domésticas, de los productos que consumen y de sus envases, embalajes o empaques; los residuos que provienen de cualquier otra actividad dentro de establecimientos o en la vía pública que genere residuos con características domiciliarias, y los resultantes de la limpieza de las vías y lugares públicos, siempre que no sean considerados por esta Ley como residuos de otra índole. Responsabilidad Compartida: Principio mediante el cual se reconoce que los residuos sólidos urbanos y de manejo especial son generados a partir de la realización de actividades que satisfacen necesidades de la sociedad, mediante cadenas de valor tipo producción, proceso, envasado, distribución, consumo de productos, y que, en consecuencia, su manejo integral es una corresponsabilidad social y requiere la participación conjunta, coordinada y diferenciada de productores, distribuidores, consumidores, usuarios de subproductos, y de los tres órdenes de gobierno según corresponda, bajo un esquema de factibilidad de mercado y eficiencia ambiental, tecnológica, económica y social. Con base en la Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002 se define como Agente biológico-infeccioso: Cualquier microorganismo capaz de producir enfermedades cuando está presente en concentraciones suficientes (inóculo), en un ambiente propicio (supervivencia), en un hospedero susceptible y en presencia de una vía de entrada. Conforme a la naturaleza y clasificación de los residuos que se generen durante las sesiones de laboratorio, el instructor indicará la forma adecuada de manejar y disponer cada uno de los residuos generados ya sea en el laboratorio o en el almacén de residuos peligrosos de la FCM conforme lo establece la normatividad ambiental y de salud vigente. De igual forma se llenará la bitácora de generación de residuos peligrosos conforme corresponda. 1.2.4.2. Reglas de comportamiento en el laboratorio Todo usuario de un laboratorio deberá guardar el siguiente comportamiento con base en el artículo 19 del Manual de organización y procedimientos de la Facultad de Ciencias Marinas: 1. Guardar orden y disciplina en el laboratorio en todo momento. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 13 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 2. Está prohibido hacer uso de aparatos electrónicos dentro del laboratorio (grabadores, celulares, juegos, etc.) durante las sesiones. Sólo se podrán usar aquellos cuando sean requeridos para el desarrollo del trabajo académico. 3. Uso obligatorio de la bata en todos los laboratorios. 4. Está prohibido fumar, comer, tomar todo tipo de bebidas y masticar goma dentro del laboratorio. 5. No jugar con el material ni con los reactivos químicos. 6. Los libros y objetos personales que no se requieran en la práctica deberán ser colocados en el casillero designado para tal fin. 7. Las mesas de trabajo no deberán usarse para sentarse. 8. Trabajar siempre bajo supervisión de un maestro o el responsable del laboratorio asignado. 9. Utilizar lentes de seguridad cuando se trabaje con equipo o sustancias químicas de alta reactividad. 10. Trabajar en la campana de extracción todas las sustancias que desprenden vapores o emisiones. 11. Mantener el orden y limpieza de los laboratorios. 12. Respetar el reglamento interno de seguridad correspondiente. En el caso de este laboratorio: a. Uso obligatorio de pantalones y zapato cerrado. b. Uso obligatorio de guantes de protección durante el manejo de sustancias químicas, manejo de especimenes y disecciones, además del equipo de protección especial que requiera cada caso con base en la información de las hojas de seguridad o fichas técnicas. c. Hacer buen uso de los reactivos y materiales de laboratorio. Con base en el artículo 34 de este manual; si un equipo o material de laboratorio se daña por descuido, negligencia o uso indebido, el importe de la reparación o sustitución del mismo deberá ser cubierto por el responsable directo o por toda la sesión del laboratorio, una vez establecida la responsabilidad de la falta. d. Todo material, instrumento y equipo de laboratorio deberá quedar limpio y seco al finalizar cada sesión. e. Llenar correctamente las bitácoras de uso de equipo y de generación de residuos peligrosos. f. Disponer en el recipiente o contenedor adecuado cada tipo de residuo. 13. Asegurarse de que todo residuo orgánico (peces, vísceras, conchas, algas, etc.) sea llevado al Almacén General para su correcta disposición. 14. Después de cada sesión verificar que el material, mesas de trabajo, gavetas, equipo, instalaciones eléctricas y de agua del laboratorio queden limpios (particularmente las mesas de trabajo y tarjas), en su lugar y bien cerradas (particularmente las gavetas con equipo como microscopios). 15. Ordenar los bancos y dejar limpios los casilleros antes de abandonar el laboratorio. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 14 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC En caso de accidente, se deberá informar inmediatamente al instructor, conservar la calma y describir en forma clara y precisa el nombre de la sustancia con la que se estaba trabajando, tipo de afectación y parte afectada de la víctima (p. e. cortada, quemadura, inhalación, contacto con ojos, etc.), si se presentó un derrame de una o más sustancias y la ubicación del derrame. Con base en dicha información, el instructor indicará si procede o no la evacuación del laboratorio, indicará a qué Brigada de atención a contingencias se deberá comunicar el accidente para recibir apoyo y se procederá a implementar el Protocolo de primeros auxilios si es el caso. El alumnado deberá leer y consultar el Anexo A de este Manual para seguir las instrucciones en caso de emergencias. La Facultad de Ciencias Marinas (FCM) cuenta con las siguientes brigadas: de Protección civil, de Prevención y combate de incendios, de Búsqueda y rescate, de Primeros Auxilios y la de Comunicaciones. Durante la sesión de laboratorio el alumno elaborará un croquis con la distribución de áreas del laboratorio de biología y señalará el espacio físico destinado para la disposicióny almacenamiento temporal de los residuos no peligrosos de tipo urbano y residuos peligrosos y residuos peligrosos biológico-infecciosos, además describirá el tipo de recipiente utilizado para la disposición de residuos con base en la corriente residual que indique el etiquetado de cada recipiente. Deberá señalar la ubicación de la salida para evacuar el laboratorio. 1.2.5. Método de evaluación Con base en la previa formación de equipos de trabajo, se entregará un reporte de la práctica con formato libre, ya sea escrito a mano, impreso o enviarlo de manera electrónica. Deberá incluir una portada con el nombre de los integrantes del equipo, título y número de la práctica, así como la fecha de entrega del reporte. Se evaluarán los resultados de las siguientes actividades. 1. En el croquis elaborado durante la sesión de laboratorio con la distribución de áreas del laboratorio de biología, el alumno señalará el espacio físico destinado para la disposición y almacenamiento temporal de los residuos no peligrosos y residuos peligrosos, además describirá el tipo de recipiente utilizado para la disposición de residuos con base en la corriente residual que indique el etiquetado de cada recipiente. 2. Como actividad extraclase, el alumno seleccionará una de las sustancias mencionadas por el instructor y mediante un pictograma describirá el sistema de identificación de dicha sustancia utilizando los colores y número de peligrosidad que corresponda a cada categoría. Describirá el significado de los colores, números, letras y símbolos para informar el riesgo en el lugar de trabajo y el tipo de equipo de protección personal que deberá usar durante el manejo de dicha sustancia. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 15 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 3. El alumno investigará y consultará en internet la Hoja de Seguridad para el alcohol etílico, identificará y enlistará las secciones que conforman la estructura de dicha hoja de seguridad, señalando la fuente de referencia. 4. El alumno elaborará un glosario a fin de definir los siguientes conceptos: agente infeccioso, agente biológico-infeccioso, características que definen a un residuo como peligroso, contenedor, constituyente tóxico, corriente residual, CRETIB, CRIT, disposición final, envase, generador, gestión integral de residuos, inventario de residuos, manejo integral, plan de manejo de residuos, residuo orgánico, residuo inorgánico, residuos peligrosos biológico-infecciosos (RPBI), residuo de tipo urbano, residuo peligroso, toxicidad, toxicidad aguda, toxicidad ambiental y toxicidad crónica. El glosario deberá elaborarse con base en las siguientes referencias: la Norma Oficial Mexicana NOM-052-SEMARNAT-2005, Que establece las características, el procedimiento de identificación, clasificación y los listados de los residuos peligrosos (SEMARNAT, 2006), la Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Protección ambiental - Salud ambiental - Residuos peligrosos biológico-infecciosos - Clasificación y especificaciones de manejo (SEMARNAT, 2003), la Ley General para la Prevención y Gestión Integral de los Residuos (LGPyGIR) (SEMARNAT, 2018), y el Plan de Manejo para la Gestión Integral de Residuos Peligrosos, considerando su acopio, almacenamiento, transporte y envío a reciclaje, tratamiento o disposición final de la Facultad de Ciencias Marinas (FCM, 2010). 5. Con base en la Clasificación de los residuos peligrosos biológico-infecciosos de la Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, el alumno enlistará y definirá los diferentes tipos de residuos peligrosos biológico-infecciosos y el manejo que establece esta norma por tipo de RPBI. 6. El alumno consultará la página web de la Facultad de Ciencias Marinas (FCM), en el menú principal seleccionará la ventana “Transparencia y otros”, en el rubro de Auditoría Ambiental se desplegará el apartado correspondiente a los responsables de brigada del edificio en el que se ubique el laboratorio de Biología en el que usted realizará sus prácticas. 7. El alumno presentará una relación con los nombres de los responsables de las brigadas que le corresponden al laboratorio de Biología; y en un croquis de la FCM el alumno señalará el cubículo u oficina en donde se localiza cada uno de los brigadistas. 8. Para concluir el reporte, el alumno deberá desarrollar un apartado de “referencias”, en donde indicará las fuentes consultadas para la realizar las actividades antes descritas, en orden alfabético con base en el nombre del autor o autores o de la página web; si consultó recursos electrónicos además del URL deberá incluir el nombre de la página. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 16 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 1.2.6. Bibliografía Facultad de Ciencias Marinas. Auditoría Ambiental: responsables de brigada, etiquetado de sustancias peligrosas, hojas de seguridad y procedimientos en caso de emergencia. Disponible en línea en: http://oceanologia.ens.uabc.mx/ http://oceanologia.ens.uabc.mx/auditoria/procedimientos/ Facultad de Ciencias Marinas. 2010. Plan de Manejo para la Gestión Integral de Residuos Peligrosos, considerando su acopio, almacenamiento, transporte y envío a reciclaje, tratamiento o disposición final de la Facultad de Ciencias Marinas. Disponible en línea en: http://oceanologia.ens.uabc.mx/auditoria/procedimientos/ Facultad de Ciencias Marinas. 2018. Manual de organización y procedimientos. Disponible en línea en: http://oceanologia.ens.uabc.mx/reglamentos/Manual_de_Org_y_Proced_FCM_15 _03_2018.pdf Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales (SEMARNAT). 2003. Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Protección ambiental - Salud ambiental - Residuos peligrosos biológico-infecciosos - Clasificación y especificaciones de manejo. Publicada en el Diario Oficial de la Federación el 17 de febrero de 2003. Disponible en línea en: http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=704675&fecha=17/02/2003 Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales (SEMARNAT). 2006. la Norma Oficial Mexicana NOM-052-SEMARNAT-2005, Que establece las características, el procedimiento de identificación, clasificación y los listados de los residuos peligrosos. Publicada en el Diario Oficial de la Federación el 26 de junio de 2006. Disponible en línea en: http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=4912592&fecha=23/06/2006 Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales (SEMARNAT). 2018. Ley General para la Prevención y Gestión Integral de los Residuos (LGPyGIR). Publicada en el Diario Oficial de la Federación el 8 de octubre de 2003. Última reforma publicada el 19 de enero de 2018. Disponible en línea en: http://www.diputados.gob.mx/LeyesBiblio/pdf/263_190118.pdf http://oceanologia.ens.uabc.mx/ http://oceanologia.ens.uabc.mx/auditoria/procedimientos/ http://oceanologia.ens.uabc.mx/auditoria/procedimientos/ http://oceanologia.ens.uabc.mx/reglamentos/Manual_de_Org_y_Proced_FCM_15_03_2018.pdf http://oceanologia.ens.uabc.mx/reglamentos/Manual_de_Org_y_Proced_FCM_15_03_2018.pdf http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=704675&fecha=17/02/2003 http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=4912592&fecha=23/06/2006 http://www.diputados.gob.mx/LeyesBiblio/pdf/263_190118.pdf Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 17 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 1.3 Práctica No. 2. Elaboración de un Reporte de Laboratorio 1.3.1. Introducción Una de las formas de comunicación escrita más común en el área de las ciencias naturales son los reportes de laboratorio, estos nos permiten transmitir las experiencias y avances en el conocimiento de una manera clara y ordenada. El reporte de investigación constituye la evidencia de aprendizaje tanto de las prácticas de laboratorio como de los trabajos de campo a través de la comunicación efectiva de resultados y su respectivoanálisis; éstos son un ejercicio práctico para desarrollar la habilidad de redactar futuros trabajos tanto de tesis como artículos científicos. La elaboración de reportes de laboratorio o de investigación, representan una competencia profesional y académica indispensable en la formación de los egresados en las carreras en ciencias. Las partes esenciales de un reporte de laboratorio son: 1. Portada 2. Introducción 3. Objetivo (s) 4. Materiales y Método 5. Resultados 6. Discusión 7. Referencias o bibliografía Algunos formatos de reportes de laboratorio incluyen resumen y conclusiones. Sin embargo, al tratarse de reportes relativamente sencillos, estas dos secciones (resumen y conclusiones) resultarían repetitivas. Por lo tanto, para los reportes de laboratorio del curso de Biología, sólo se solicitarán los siete puntos antes mencionados. 1. Guía para la elaboración de la portada (ver ejemplo en la siguiente página) Priorizar por tamaños de letras los identificadores en orden jerárquico iniciando por la institución, no se deben emplear abreviaturas ni acrónimos. Se podrán utilizar escudos o logotipos como identificadores, siempre en orden jerárquico como se muestra en el ejemplo. En la parte central escribir el nombre o título de la práctica y su respectivo código numérico. En la parte inferior derecha se identifica a qué curso pertenece la práctica, el nombre completo de quién o quiénes elaboraron el reporte iniciando con los apellidos seguidos del nombre de pila. Siempre en orden alfabético. Se establece la fecha de entrega del documento. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 18 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BAJA CALIFORNIA FACULTAD DE CIENCIAS MARINAS PRÁCTICA No. 1 BIOMETRÍA VEGETAL Laboratorio de Biología Grupo 1, subgrupo 2 Torres Ávila, Antonio 8 de septiembre del 2018 2. Guía para la elaboración de la introducción y marco teórico Para la redacción y desarrollo de la introducción se deben incluir los elementos que se describen a continuación, pero no se separan ni se subtitulan, éstos deben ser redactados con ilación y congruencia, con una secuencia lógica de ideas. El marco teórico es el punto de referencia del trabajo e incluye antecedentes históricos y/o conocimientos fundamentales del tema hallados en la literatura, producto de la revisión bibliográfica. a. Planteamiento del problema o tema de investigación. Redacta de lo general a lo particular, verificando que el tema quede claro y tan preciso como lo requiere el experimento o investigación. Incluye las razones por las que el tema es importante, la forma en que se relacionan las variables, cuáles son las implicaciones teóricas del estudio, cómo puede aplicarse en la práctica profesional y cuál es la relevancia en la formación profesional de un estudiante de ciencias. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 19 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC b. Desarrollo de los antecedentes: se presenta una recopilación de la literatura y el análisis de la misma de los trabajos y estudios que se han realizado, acorde a la perspectiva del tema de investigación o problema planteado; integrando la información para evidenciar una continuidad lógica entre los estudios previos y el actual. c. Se debe citar y referenciar la literatura pertinente; según sea el caso, se debe incluir en cada oración o párrafo la fuente a partir de la cual se tomó la información indicando entre paréntesis el autor y el año de publicación (p.e. Ruíz-Silva, 2004), y cuya cita completa será incluida en el apartado de “referencias o bibliografía” del reporte. 4. Guía para la elaboración del objetivo El objetivo puede estar explícitamente señalado, bajo el subtítulo “objetivo” o en algunos documentos (principalmente en artículos científicos) quedan incluidos en la introducción. En el caso de los reportes de laboratorio de Biología se deberá incluir explícitamente. Establezca claramente el objetivo de la práctica. Describa el fundamento del experimento o investigación, defina las variables y desarrolle los conceptos y definiciones que sustenten el experimento. Después de presentar los puntos anteriores cuenta con los argumentos para explicar cuál será su enfoque para la solución del problema o la importancia de abordar el tema de investigación, indicando los objetivos que persigue (objetivo general y particulares). 5. Guía para la elaboración de los materiales y método a. Se debe presentar un listado de los materiales que se utilizaron durante la sesión del laboratorio, desde muestras (organismos, preparaciones, etc.), reactivos (tinciones, solventes, etc.), material (cristalería, tijeras, pinzas, bisturí, etc.) y aparatos (microscopios, balanza, etc.). b. Para describir el método se detallará la forma en que se realizó la práctica, experimento o investigación. La claridad y precisión en el desarrollo de este apartado es fundamental para que se pueda comprender la validez y confiabilidad de la investigación, así como para que esta sea replicable por otros investigadores o estudiantes. Si el experimento consistió en varias etapas, puede dividirse y subtitular cada una siguiendo el orden cronológico con el que se desarrollaron. 6. Guía para la elaboración de resultados a. Este apartado dará inicio con la descripción de los resultados, se resumen los datos recolectados, con suficiente detalle como para justificar la discusión. Deberá redactar la descripción en párrafos con texto explicativo, seguido de tablas, figuras, imágenes, fórmulas, mapas, etc. como apoyo para la mejor comprensión de los resultados. b. Es importante que durante la redacción (texto) de los resultados se debe hacer referencia a las tablas, figuras, etc. Es decir, se debe mencionar entre paréntesis la tabla o figura antes de que aparezca en el cuerpo del documento. Por ejemplo: “Al utilizar el microscopio estereoscópico fue posible observar más detalles de la concha Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 20 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC de caracol que cuando se hace a simple vista (Figura 1.)…y más adelante se incluye la figura. c. Cuando se escribe “figura X” o “tabla X” se deben escribir con mayúscula, pues al numerarlas se consideran nombre propios. d. Las tablas deben incluir título, no así las figuras, sino pie de figura. A diferencia de las tablas, el número y descripción de la figura deberá colocarse inmediatamente después de la misma, es decir, los títulos de las figuras se colocan en la parte inferior de esta (pie de figura). e. Las tablas y figuras deben de contener toda la información necesaria para que el lector las entienda sin tener que leer la descripción del texto. Es decir, el título de la tabla debe de contener información para entenderla y lo mismo se aplica al pie de figura. Tablas. El formato de las tablas es libre, sólo deberá observarse que el tipo y tamaño de letra sea igual al utilizado en el texto del documento. En casos excepcionales, se podrá utilizar un tamaño de letra menor a la del texto del documento pero que no sea menor de 8. Las tablas serán numeradas en forma consecutiva comenzando con el número uno (se sugiere el uso de números romanos para las tablas). Ejemplo: Los datos de precipitación que se presentan se tomaron de la estación climatológica 3174-Guerrero Negro, en el municipio de Mulegé, Baja California Sur, que es la más cercana al área del proyecto. Con una localización geográfica de -114.017W, 27.967N y una altitud de diez metros. En la Tabla I se representan las temperaturas promedio, máximas y mínimas anuales para el periodo de 1996 al año 1998. Tabla I. Temperaturas anuales de la Estación Climatológica. 3174-Guerrero Negro, en el periodo 1996-1998. Fuente: Estación climatológica 3174 Guerrero Negro Temperatura / año 1996 19971998 T oC máx. 22.6 26.7 24.3 T oC mín. 7.6 15.3 10.9 T oC promedio 15.1 21 17.6 T oC Temperatura expresada en grados Celsius Siempre incluya el significado de la simbología y abreviaturas que emplee, así como la fuente si es el caso o bien especifique si es de su autoría. Es fundamental que se especifiquen las unidades en cada una de las columnas, en caso de utilizar símbolos para las unidades, deben cumplir con lo establecido en la Norma Oficial Mexicana NOM-008-SCFI-2002, que establece el Sistema General de Unidades de Medida en México, en concordancia con normas internacionales de metrología (Dirección General de Normas, 2002). En el cuerpo de la tabla (celdas) sólo Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 21 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC debe colocar los datos numéricos sin las unidades, a menos que éstas varíen en la columna. Cuando por la extensión de una tabla sea necesario cortarla para su edición en dos hojas, se deberá colocar de nueva cuenta el título, indicando que es continuación de la “Tabla X” y deben incluir los encabezados de cada columna. Figuras. Las figuras de calidad profesional son importantes, ya que atraen al lector, proporcionando una impresión visual rápida. Siempre tenga en mente que la escala y forma de las figuras puede tener una gran influencia sobre la interpretación final de los datos. Las figuras deben numerarse en forma consecutiva comenzando con 1 y de manera independiente de las tablas. Ejemplo: En colindancia con el cuerpo lagunar Guerrero, el ambiente terrestre se localiza en la Región Hidrológica número 2 Baja California Centro-Oeste del Vizcaíno (INEGI, 2010) (Figura 1 ó Fig. 1). RH02 RH02Bb Sitio del proyecto Figura 1. Región Hidrológica número 2 Baja California Centro-Oeste del Vizcaíno. Fuente: Elaboración propia, 2016. Se recomienda evitar el uso de sombras y líneas punteadas. El texto en las figuras deberá tener al menos 2 mm de altura. Ecuaciones. Las ecuaciones o fórmulas estarán centradas y separadas del texto. La numeración será consecutiva comenzado con el 1. El número de la ecuación deberá encerrarse entre paréntesis y colocarse a la derecha de la ecuación lo más cercano posible al margen derecho. Por ejemplo: x + y = z ……...................……. (1) Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 22 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 7. Guía para la elaboración de la discusión La discusión en un documento científico se refiere a la explicación de los resultados. Es decir, el autor debe referenciar (apoyar con otras fuentes) sus resultados para que el lector entienda por qué el resultado se considera “adecuado, promedio, bajo, alto, etc.”. La discusión se desarrollará en referencia a los objetivos del trabajo y a los antecedentes obtenidos de la revisión bibliográfica. Es decir, se contrastan los resultados obtenidos del experimento o de la investigación con aquellos resultados reportados por los autores referidos en los antecedentes de la introducción o marco teórico. Las semejanzas y diferencias entre sus resultados y los de otros autores deben aclarar y confirmar las conclusiones que obtenga y le dan validez a sus resultados. Finalice la discusión con un comentario sobre la importancia de sus hallazgos. La discusión puede incluir alguno o todos los puntos que se mencionan a continuación. Discutir (explicar) el procedimiento y los resultados a la luz de lo esperado (teoría) Discutir (explicar) las posibilidades de mejorar el método y proponer soluciones a las limitaciones de las técnicas o método empleados. ¿Se ajusta el procedimiento o los pasos del mismo a los objetivos? ¿Por qué? ¿Son los resultados los esperados? ¿Por qué? ¿Son similares o disímiles a los hallazgos de otros investigadores (antecedentes)? Identificar las dificultades encontradas para la obtención de los resultados/datos. Identificar las fuentes de error para cada resultado obtenido. Discutir (explicar) las limitaciones, fuentes de error y cómo afectan al resultado obtenido. ¿Por qué son importantes los hallazgos? ¿De qué manera se pueden vincular los hallazgos con otros fenómenos? ¿Existen aplicaciones justificables con base en esta investigación? Esta sección es una de las partes más importantes del reporte, en donde el alumno o investigador desarrolla toda su capacidad de análisis y plasma cómo sus hallazgos contribuyen al conocimiento del tema abordado o a la solución del problema planteado. Especificaciones generales para la edición del reporte de laboratorio Tamaño de la hoja y márgenes. Se deberá utilizar hoja tamaño carta. Todos los márgenes (superior, inferior, izquierdo y derecho) deberán ser de 2.5 cm. Tipo y tamaño de letra. Se deberá usar el tipo de letra Arial. El tamaño de letra a usar en el texto es 11. Salvo el caso del contenido de tablas y figuras que requieran un menor tamaño de letra (el mínimo aceptable es 8). Espacio interlineal. Se usará un espacio interlineal sencillo. No se usarán espacios antes ni después del renglón. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 23 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Alineación del texto. El texto del documento debe presentarse en alineado por ambos márgenes (justificado), sin sangrías. Paginación. Se deberá paginar el reporte en el extremo inferior derecho de la hoja, con excepción de la portada. Se iniciará la paginación en la hoja del resumen. Todas las partes o secciones del reporte se escribirán en forma consecutiva, dejando un doble espacio entre cada parte. Se debe cuidar la edición para que las tablas y figuras siempre queden con el título o rótulo de las mismas en la misma página. Extensión del documento. La extensión es libre. El requisito es que la estructura deberá contener todas las partes esenciales de un reporte de laboratorio descritas con anterioridad. 8. Guía para la elaboración de las Conclusiones A pesar de que en los reportes de Biología no se pide incluir conclusiones, a continuación se menciona información relevante sobre su elaboración. En esta sección se resaltan los resultados obtenidos y su consecuencia en el cumplimiento del objetivo. Una forma adecuada de presentar las conclusiones es por medio de párrafos u oraciones independientes separadas por alguna forma de viñeta. El orden de presentación de las conclusiones es primordial para entender el alcance y eficiencia del trabajo realizado. a. Analizar las implicaciones de la investigación y si ésta respondió a las preguntas planteadas antes de la investigación o si se cumplió con los objetivos del trabajo. b. Señalar objetivamente los errores observados y las limitantes de las técnicas y método empleado. c. Proponer alternativas para optimizar el método en función de las limitaciones y errores observados y de la discusión. d. Hacer recomendaciones para futuras investigaciones. 9. Guía para la elaboración del listado de Referencias / bibliografía Una referencia bibliográfica es un conjunto mínimo de datos que permite la identificación de una publicación o de una parte de la misma. Existen diferentes estilos de citar como convenciones en diferentes áreas del conocimiento o el comercio. Por ejemplo: Estilo ISO690 (se usa en documentos industriales o comerciales), APA (uso en ciencias sociales y del comportamiento), MLA (literatura, artes y humanidades), Turabian (periodismo, historia y humanidades), Vancouver (medicina, farmacología, enfermería, odontología, fisioterapia), etc. Sin embargo, para el reporte de laboratorio de Biología, se empleará el estilo Harvard, que es el que corresponde al de las ciencias naturales y exactas. Dicho estilo, también se le conoce como el estilo “autor-año” o “autor-fecha”, en referencia a la manera en que se menciona la cita en el texto, dentro del cuerpo del documento. Es decir, despuésde escribir una idea en el texto, se cita al autor o autores y el año, para identificarlo en la lista de literatura. Ejemplo: Las hembras Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 24 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC adultas de lobo marino de California presentan un color café más claro que los machos (King, 1983) o (King 1983), o King (1983) menciona que las hembras adultas... Mientras que en la referencia, al final del documento se debe incluir la cita: King, J.E. 1983. Seals of the world. 2a edición. Oxford University Press. Ithaca, Nueva York, E.U.A. 239 pp. King, JE (1983) Seals of the world. 2a edición. Oxford University Press. Ithaca, Nueva York, E.U.A. 239 pp. Como se observa en el ejemplo, puede cambiar el formato pero no el orden de los elementos [apellido, iniciales del nombre, año, título del libro, edición (sólo de la segunda en adelante se menciona), editorial, ciudad, estado, país (también se puede incluir sólo el país, o sólo estado y país), finalmente páginas totales]. En la lista de referencias, se presentan las citas en orden alfabético y se le da formato “francesa” para ubicar fácilmente el apellido del autor; como se presenta en el ejemplo anterior. Las diferentes revistas científicas pueden utilizar variantes al estilo Harvard, sin embargo el orden de los componentes no cambia y éste se presenta a continuación. Libros: Apellidos, A. y Apellidos, B. (Año). Título de la obra. Edición. Casa Editorial. Lugar de Edición (ciudad y país). Páginas. 1. Nombre del (los) autor/es, 2. Año de la publicación, 3. Título de la publicación y subtítulo, 4. Edición (sólo de la segunda edición en adelante), 5. Editorial (nombre de la compañía donde se imprime), 6. Lugar de la publicación, (ciudad y/o, estado y/o país), 7. Número (s) de página (s) totales. Ejemplo: Berkman, R. I. 1994. Find It fast: How to uncover expert information on any subject. 2th edition. Harper Perennial, New York, USA. 65 pp. Publicaciones Periódicas (artículo científico): Apellidos, A. A., Apellidos, B. B. y Apellidos, C. C. (Fecha). Título del artículo. Título de la revista, volumen (número), pp. inicial-final. doi: xx.xxxxxxx. 1. Nombre del (los) autor/es, 2. Año de la publicación, 3. Título del artículo, 4. Título la revista periódica, 5. Volumen, 6. Número del volumen (no siempre existe), 7. Número de páginas (de tal-a tal). Ejemplo: Huffman LM (1996) Processing whey protein for use as a food ingredient. Food Technology. 50(2): 49-50. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 25 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Versión electrónica: Autor, editorial o nombre de la página. (Año o fecha) Titulo. Recuperado de http://www.etc.etc/estaes/aquiesta. Ejemplo: ASTEC (1994). The Networked Nation, Disponible en: http://astec.gov.au/astec/net_nation/contents.html EDICIÓN FINAL. Lea su reporte, con calma y objetivamente. i. ¿Contiene todas las partes esenciales de un reporte de laboratorio? ii. ¿Entiende lo que escribió? iii. ¿Es lo que quiere comunicar? iv. ¿Las ideas están expresadas en forma clara y concreta? v. ¿Usó oraciones completas bien estructuradas? vi. ¿Los párrafos están construidos con base en una idea principal, luego ideas secundarias que describen, abundan, explican o se vinculan con la principal? vii. Revise la ortografía viii. ¿Cumple con lo anterior? Sí es así, el documento está listo para impresión y entrega. Recuerde que la elaboración de un reporte de laboratorio es una competencia profesional que implica el desarrollo de la habilidad de redacción para la comunicación efectiva de resultados, esto se logra mediante la práctica constante, la autoevaluación y la retroalimentación. Por último, cabe mencionar que existen diversos tipos de reportes para la comunicación de resultados, a continuación se presenta la estructura generalizada de los más comunes utilizados en las ciencias. Elemento Reporte de investigación Reporte de laboratorio o de campo Reporte Técnico Reporte técnico sencillo Portada Resumen Introducción / marco teórico Método / esquema de trabajo Síntesis Esquemático Área de estudio Opcional Opcional Resultados (descripción y Análisis) Discusión Conclusiones Referencias / bibliografía Opcional Agradecimientos Anexos / apéndices Opcional Opcional Opcional Anexos. Los anexos deberán colocarse al final del documento después de las referencias. Se recomienda usar caracteres alfabéticos para distinguirlos, por ejemplo: Anexo A, Anexo B, etc. Se recomienda colocar en los anexos información que, aunque importante, no es indispensable para la comprensión de lo reportado. Por ejemplo: http://www.etc.etc/estaes/aquiesta Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 26 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC demostraciones y desarrollos matemáticos, registros biométricos, etc. Los anexos o apéndices resultan útiles como material de apoyo, para describir en mayor detalle ciertos aspectos, sin distraer la lectura del texto principal. 1.3.2 Competencia El alumno será competente para elaborar un Reporte de laboratorio, completo en forma y contenido. 1.3.3 Material 1.3.3.1. Material en el laboratorio Manual de prácticas de Laboratorio de Biología Revista de Ciencias Marinas de la Universidad Autónoma de Baja California. Libros 1.3.4 Desarrollo Actividad 1 (entregar las siguientes actividades al final de la primera sesión): 1. Consulte la revista de Ciencias Marinas, seleccione un artículo e identifique los elementos constitutivos del mismo, contrástelos con la estructura de un reporte de laboratorio, elabore una lista con las diferencias identificadas. 2. En el mismo artículo identifique la forma en que se citan a los autores en el texto. Brinde tres ejemplos, el primero en el que se cite a un autor, otro en donde se citen a dos autores y el tercero en donde se citen a más de dos autores. 3. A partir del mismo artículo científico, seleccione algún resultado (texto, tabla o figura) y su parte correspondiente en la discusión. Transcríbalo al documento que entregará al final de la sesión. Actividad 2 (entregar las siguientes actividades al final de la segunda sesión): 1. Escoja un artículo científico y redacte su cita bibliográfica. Cada estudiante pasará al pizarrón a transcribir la cita y el resto del grupo deberá revisarla. 2. Escoja algún libro y redacte su cita bibliográfica. Cada estudiante pasará al pizarrón a transcribir la cita y el resto del grupo deberá revisarla. 1.3.5 Método de evaluación Entregar las cinco actividades realizadas durante las sesiones de manera individual, cada una de ellas tiene un valor de 5 puntos (total máximo 25 puntos). Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 27 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 1.3.6 Bibliografía Dirección General de Normas. 2002. Norma Oficial Mexicana NOM-008-SCFI-2002, Sistema General de Unidades de Medida. Publicada en el Diario Oficial de la Federación el 27 de noviembre de 2002. Recuperado de http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=718870&fecha=27/11/2002 Figueroa N (2010). Manual de estilo de publicaciones American Psychological Association. pp. 63. Recuperado de https://drive.google.com/file/d/1DQXKiqs09je7vt8sUwTPRWpvIpRWNHfh/edit Hernández-Sampieri, R, C Fernández-Collado y MP Baptista-Lucio (2016). Metodología de la Investigación. 5a edición. Editorial Mc Graw Hill. Sojo-Monzón, VE (2003). Algunas pautas para presentar informes de investigación indicadas por la American Psychological Association (APA). Universidad Central de Venezuela. Caracas. Recuperado de https://psicologiaexperimental.files.wordpress.com/2009/03/pautas-para- presentar-informes-por-la-apa.pdfhttp://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=718870&fecha=27/11/2002 https://drive.google.com/file/d/1DQXKiqs09je7vt8sUwTPRWpvIpRWNHfh/edit https://psicologiaexperimental.files.wordpress.com/2009/03/pautas-para-presentar-informes-por-la-apa.pdf https://psicologiaexperimental.files.wordpress.com/2009/03/pautas-para-presentar-informes-por-la-apa.pdf Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 28 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 2. La Célula como Unidad Básica de la Vida 2.1 Práctica No. 3 Uso del Microscopio Estereoscópico (Lupa) 2.1.1. Introducción El microscopio estereoscópico o lupa, es ampliamente utilizado para la observación de especímenes cómo la macro fauna y mega fauna. Se le conoce como estereoscópico porque las lentes de los oculares se encuentran separadas con y con un ligero ángulo, lo cual permite que la imagen que llega a cada ojo sea ligeramente distinta, por lo que se obtiene una imagen tridimensional. Además de su uso en Biología, es una herramienta ampliamente utilizada en otras disciplinas como la geología para la observación de rocas, grava, diferentes sedimentos y minerales. En cualquier caso, es un equipo utilizado para amplificar y resolver detalles finos de objetos relativamente grandes. Está compuesto por tres sistemas: mecánico, óptico y de iluminación. Sistema mecánico Consta de las siguientes partes: 1. Base o pie: Sirve de soporte al microscopio y suele tener el peso suficiente para darle estabilidad al aparato. 2. Brazo: Continuación de la base o pie y permite movilizar al microscopio sosteniéndolo con las manos. 3. Platina: Sostiene las muestras directamente o recipientes que contengan las muestras. Esta estructura puede ser blanca, negra o translúcida para permitir el paso de luz proveniente de la base de la platina. 4. Pinzas: Sostienen al espécimen o al contenedor sobre la platina. No todos los modelos de microscopio estereoscópico tienen pinzas. 5. Cabezal: Es la base de los oculares y contiene los lentes de aumento y en su parte inferior puede sostener una fuente de luz incidente. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 29 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 6. Anillo de enfoque o macrométrico: Mueve el cabezal hacia arriba o hacia abajo, acercando o alejando rápidamente el objetivo a la distancia focal correcta con respecto a la muestra. 7. Anillo de aumento: permite modificar la óptica para incrementar o disminuir el número de aumentos. Sistema óptico Consta de las siguientes partes: 1. Oculares: Están ubicados en la parte superior del cabezal sin ningún aumento en la mayoría de los modelos, por lo que el aumento dependerá exclusivamente del objetivo. 2. Objetivo: Compuesto por lentes de diferente aumento. Se encuentran ubicados en la parte inferior del cabezal, no son movibles ni intercambiables y su aumento depende de las características particulares del microscopio. El aumento de un microscopio estereoscópico o lupa va de 4X a 40 ó 60X. Sistema de iluminación Fuente de luz: puede utilizarse luz artificial de una lámpara externa (fibra óptica, luz incidente) o una que se inserta en la base o pie del microscopio, algunos microscopios poseen una fuente incidente en la base del cabezal o en el brazo. Poder de resolución El poder de resolución se define como la capacidad de un lente para presentar dos puntos cercanos como puntos diferentes y separados. Cuidados del microscopio estereoscópico Lentes: es importante que las lentes y el espejo (si lo tiene) se mantengan limpios. Para limpiarlos se utilizan papeles y soluciones de limpieza especiales para evitar el daño de las lentes. Se prohíbe el uso de pañuelos, servilletas o cualquier otro tipo de material para limpiar las lentes aunque éstos estén limpios, ya que pueden rallar las lentes. Objetivos: usualmente se ensucian con las muestras observadas. Para limpiarlos se utiliza el papel especial mencionado anteriormente y solventes orgánicos como el xilol. Es importante evitar exceso de solvente ya que puede dañar el pegamento que mantiene unida la lente a la base del objetivo. Oculares: si al rotar (girar) los oculares mientras observamos hay una imagen que rota al mismo tiempo, significa que el ocular está sucio. Se debe limpiar con papel especial para lentes. Almacenamiento: antes de guardarlo, asegurarse de remover las muestras de la platina; desconectar, tapar con la funda correspondiente, transportar el equipo al gabinete que corresponda tomándolo con la mano derecha del brazo y la mano izquierda en la base. Cuando se utilice el equipo, evite usar maquillaje en los ojos, ya que se puede acumular en los oculares y dañar la lente. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 30 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Uso del microscopio en el laboratorio Para el buen uso del microscopio en el laboratorio de biología se deben tener en cuenta los siguientes aspectos: 1. Los microscopios están numerados y se guardan en gabinetes. 2. A cada estudiante del grupo se le asigna un microscopio por el cual será responsable. Es obligatorio que llena la bitácora del microscopio asignado. 3. La mesa donde se colocará el microscopio para hacer la observación debe ser estable para evitar vibraciones de la muestra durante el examen. 4. La posición del observador ante el microscopio debe ser cómoda y a una altura correcta. 5. La mesa de trabajo debe estar limpia y libre de libros, cuadernos, bandejas y reactivos. 6. Cuando se transfiera el microscopio del gabinete a la mesa de trabajo, se sostiene fuertemente el brazo del microscopio con la mano derecha y se coloca la mano izquierda por debajo del instrumento. Si no se realiza de esta manera, las probabilidades de golpear contra el mesón o dejarlo caer se elevan. Nunca se debe tomar el microscopio con una sola mano y menos aún, dos microscopios (uno en cada mano). 7. Nunca se deben de enrollar los cables de la fuente luminosa alrededor del microscopio. 8. Una vez finalizada la observación, se limpian las lentes, la platina y se guarda siguiendo las mismas instrucciones dadas para el transporte. 2.1.2 Competencia El alumno será capaz de reconocer las partes de un microscopio estereoscópico, la función que éstas desempeñan y utilizar correctamente el equipo. 2.1.3 Material y equipo 2.1.3.1. Material a solicitar en el almacén general Caja de Petri Pinzas de disección Aguja de disección 2.1.3.2. Material en el laboratorio Microscopio estereoscópico Papel para limpiar lentes del microscopio 2.1.3.3. Además ¿Qué debe llevar al laboratorio? Muestras para observar en el microscopio estereoscópico tales como: arena, pequeños insectos, granos de polen, etc. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 31 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 2.1.4 Desarrollo 1. Completar la información de la Tabla 1. 2. Colocar los nombres de las partes del microscopio estereoscópico en la Figura 1. 3. Observe y dibuje al menos dos objetos (rocas, arena, tierra, etc.) u organismos (plantas, animales, etc.), utilizando tres aumentos distintos (aumento más bajo, aumento intermedio, aumento más alto) para cada objeto observado. Para dibujar sus observaciones, puede utilizar los círculos que se proporcionan como ejemplo del campo visual (total 6 círculos) e incluya la información que se solicita. Para ello, puede seguir los siguientes pasos: a. Colocar sobre la platina o sobre una caja de Petri la muestra a observar. b. Situar la parte que va a examinar en el centro de la platina. c. Ajustar la fuente de iluminación sobre la porción a observar de la muestra. d. Ajustar la fuente de iluminación sobre la porción a observar de la muestra. e. Si el tornillo de enfoque no da la nitidez requerida se tendrá que modificar la distancia del cabezal a la muestra mediante el ajustedel cabezal en el brazo. f. Cambiar de aumentos hasta obtener la visión requerida, si es necesario se deberán hacer más ajustes como en el punto e. Tabla 1. Señale a qué sistema (óptico o mecánico) pertenece cada una de las partes que se mencionan en los renglones y su función. Sistema óptico Sistema mecánico Función Platina Pie Oculares Anillo de enfoque Anillo de aumento Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 32 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Figura 1. Microscopio estereocópico marca Zeiss, model Steami DV4, en donde se deben señalar: 1) Base, 2) Platina, 3) Brazo o soporte, 4) Anillo de enfoque o macrométrico, 5) Botón de encendido, 6) Botón de control de luz, 7) Fuente de luz (ambas), 8) Objetivo, 9) Anillo de aumento, 10) Cabezal, 11) Oculares. 2.1.5 Método de Evaluación 1. Entregar un reporte de laboratorio de manera individual (a mano, impreso con computadora o enviarlo electrónico al correo del profesor o profesora). Debe incluir todas las secciones: Portada (2 puntos), introducción (4 puntos), objetivo (2 puntos), materiales y método (4 puntos), resultados (15 puntos de la Tabla 1, +11 de la Figura 1, +2x6 de los dibujos), discusión (4 puntos) y literatura citada o referencias (4 puntos, incluye citas en el texto y forma de citar) = 58 puntos. El autor o autora debe de definir qué información es relevante mencionar en la introducción y definir el objetivo. Las actividades se deben incluir como resultados y discutir acerca de ellos. Recuerde que la información de la introducción y la discusión deben contener citas y sus correspondientes referencias. 2. En los resultados se debe incluir la Tabla 1, Figura 1 y las observaciones al microscopio (6 círculos). Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 33 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Observación 1 Observación 2 Tipo de muestra ___________________ Tipo de muestra ___________________ ________________________________ ________________________________ Aumento utilizado_________________ Aumento utilizado_________________ 2.1.6 Bibliografía Benson, Harold., 1979. Microbiological Applications. A laboratory manual in general microbiology. 3era ed. Wm. C. Brown Company Publishers. Dubuque, Iowa. Campbell, N.A., Reece, J.B., Taylor, M.R., Simon, E.J., 2006. Biology. Concepts and connections. 5th ed. Pearson/ Benjamin Cummings. San Francisco. 783pp. Tortora G.J., Funke, B.R., Case, C.L., 2001. Microbiology. An Introduction. 7th ed. The Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 34 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 2.2 Práctica No. 4 Uso del Microscopio Compuesto 2.2.1 Introducción Una de las herramientas básicas de un laboratorio de Biología es un microscopio de luz, óptico o compuesto. Este tipo de microscopio recibe este nombre ya que permite el paso de luz no alterada a través de un sistema de lentes de manera que produce un campo brillante en el que se pueden observar objetos y/o organismos microscópicos como bacterias, hongos, algas, parásitos, etc. El microscopio óptico compuesto está constituido por un sistema mecánico, óptico y de iluminación: Sistema mecánico 1. Base o pie: Brinda soporte al microscopio. Tiene el peso suficiente para darle estabilidad al aparato. 2. Brazo o estativo: Continuación de la base o pie que permite movilizar al microscopio con la mano. 3. Platina: Pieza que sostiene las preparaciones con la muestra a observar. Cuenta con pinzas para mantenerla firme sobre la platina. La preparación se mantiene sobre una perforación central que deja pasar la luz que viene del condensador o del espejo. 4. Pinzas: Sostienen al espécimen o al contenedor sobre la platina. 5. Columna: Une la platina a la base y sostiene al condensador y al diafragma. Sostienen al espécimen o al contenedor sobre la platina. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 35 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 6. Tubo o cabezal: Sostiene al ocular y al objetivo, y los mantiene separados por la distancia de trabajo correcta. Sistema óptico 1. Oculares: compuestos por lentes que multiplican el aumento del objetivo. Están ubicados en la parte superior del tubo o cabezal. El aumento que presentan varía en función del modelo. Sin embargo, un buen ocular tiene un aumento de 10X, que se multiplica por el aumento del objetivo en uso. Ejemplo: 10 x 100 = 1000X. 2. Objetivos: Pieza compuesta por una lente de aumento específico cuyo propósito es magnificar el objeto para producir una imagen real que se proyecta hasta el plano focal del ocular. Cada microscopio cuenta con varios objetivos de distinto aumento (4X ó 5X, 10X, 20X, 40X, 100X) que se insertan en una pieza denominada revólver, misma que se ubica en la parte inferior del tubo o cabezal. Para calcular el aumento total de observación proporcionado por el microscopio, basta multiplicar el aumento del ocular por el aumento del objetivo. Por ejemplo, si estamos utilizando un ocular de 10X y un objetivo de 40X, el aumento total de la observación será: 10X × 40X = 400X. Esto significa que la imagen de la muestra observada ha sido ampliada 400 veces. Sistema de iluminación 1. Fuente de luz: Es la lámpara (externa o incorporada al estativo) que proporciona la iluminación para observar la muestra. Algunos microscopios emplean también lámparas de fluorescencia para aplicaciones específicas en patología, biología celular, entre otras. 2. Espejo: Lo requieren aquellos microscopios que trabajan con lámparas externas y permite reflejar hacia arriba la luz que debe atravesar el diafragma, la platina, la preparación y el sistema óptico. El espejo plano se utiliza cuando hay bastante luz y el cóncavo cuando hay poca luz. 3. Condensador: Concentra el haz luminoso en la preparación. 4. Diafragma: Regula la cantidad de luz que pasará a través de la preparación. 2.2.2 Competencia El alumno aprende cómo está conformado el microscopio óptico compuesto, aplicaciones y el uso del mismo, empleando diversas muestras. 2.2.3 Material y equipo 2.2.3.1 Material a solicitar en el almacén general Portaobjetos Cubreobjetos Pinzas de disección Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 36 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 2.2.3.2 Material en el laboratorio Preparaciones permanentes y semipermanentes 2.2.3.3 Además ¿Qué debe llevar al laboratorio? Muestra del material que le solicite el instructor 2.2.4 Desarrollo 1. Colocar los nombres de las partes del microscopio compuesto en la Figura 1. 2. Antes de comenzar la observación de las preparaciones, realice el ajuste de iluminación Köeller (ver procedimiento en Anexo 1). El objetivo de ello es asegurarse que la luz está centrada para así, garantizar una observación correcta. Una vez hecho el ajuste de iluminación Köeller, no debe moverlo nuevamente. NOTA: Se recomiendo realizar este ajuste, sólo en caso de que la no sea nítida. 3. Observe y dibuje al menos dos preparaciones, utilizando dos aumentos distintos (aumento más bajo y aumento máximo posible) para cada preparación. Para dibujar sus observaciones, puede utilizar los círculos que se proporcionan como ejemplo del campo visual (total 4 círculos) e incluya la información que se solicita. Para observar las preparaciones permanentes y semipermanentes realice los siguientes pasos: a. Colocar la preparación sobre la platina. La porción a observar debe quedar sobre el hueco que hay en la parte central de la platina, ya que es por donde pasará la luz para iluminar la muestra. La muestra debe quedar sujetada con las pinzas para que funcionen los tornillo x/y. b.Ajustar la fuente de iluminación hasta que pase la mayor cantidad de luz a través de la muestra. El diafragma y el condensador, se deben ajustar hasta que la luz cubra todo el campo visual. c. Inicie la observación con el objetivo de menor aumento (4X ó 5X, 10X) según el equipo que esté utilizando. d. En todo momento, observe por los oculares con ambos ojos abiertos. Utilice el tornillo macrométrico para aproximar lentamente el objetivo a la preparación con cuidado de no quebrarla ni rallar la lente. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 37 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC e. Para enfocar totalmente la muestra, utilice el tornillo micrométrico. Ajuste la luz con el diafragma y el condensador hasta lograr una buena iluminación. No demasiado brillante ni demasiado oscuro. 4. Una vez realizadas las observaciones: a. Anotar y esquematizar lo observado b. Cuando haya terminado, guarde el microscopio c. No olvide llenar la bitácora del microscopio d. Reportar con el instructor cualquier anomalía con el equipo. Figura 1. Microscopio compuesto marca Zeiss, model Axiostar, en donde se deben señalar: 1) Base, 2) Foco, 3) Anillo regulador de la luz, 3) Brazo o soporte, 4) Botón de encendido, 5) Botón de control de luz, 6) Anillo macrométrico, 7) Anillo micrométrico, 8) Condensador, 9) Diafragma, 10) Platina, 11) Pinzas, 12) Anillos de ajuste de platina (movimiento x-y), 13) Objetivos, 14) Revolver, 15) Cabezal o tubo, 16) Oculares. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 38 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Observación 1 Observación 2 Tipo de muestra ___________________ Tipo de muestra ___________________ ________________________________ ________________________________ Aumento del ocular_________________ Aumento del ocular________________ Aumento del objetivo______________ Aumento del objetivo______________ Aumento total_________________ Aumento total___________________ 2.2.5 Método de Evaluación 1. Entregar un reporte de laboratorio en equipo (a mano, impreso con computadora o enviarlo electrónico al correo del profesor o profesora). Debe incluir todas las secciones: Portada (2 puntos), introducción (4 puntos), objetivo (2 puntos), materiales y método (4 puntos), resultados (16 puntos de la Figura 1, +2x4 de los dibujos), discusión (4 puntos) y literatura citada o referencias (4 puntos, incluye citas en el texto y forma de citar) = 44 puntos. Los o las autoras deben de definir qué información es relevante mencionar en la introducción y definir el objetivo. Las actividades se deben incluir como resultados y discutir acerca de ellos. Recuerde que la información de la introducción y la discusión deben contener citas y sus correspondientes referencias. 2. En los resultados se debe incluir la Figura 1 y las observaciones al microscopio (4 círculos). 2.2.6 Bibliografía Benson, H. 1979. Microbiological Applications. A Laboratory Manual in General Microbiology. Third edition. Wm. C. Brown Company Publishers. Dubuque, lowa Brock Th.; Brock K. 1973. Basic Microbiology with Applications. Prentice-Hall, Inc. New Jersey. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 39 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC Clavell, L., Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos Generales (segunda edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela. Seely. H., Van Demark, P. 1962. Microbios en acción. Manual de Laboratorio para Microbiología. Editorial Blume. Madrid-España. ANEXO 1 Ajuste de iluminación Köhler 1. Colocar una preparación en la platina en el objetivo de menor aumento (4x o 10x) de que disponga en su microscopio y enfocar. 2. Cerrar el diafragma de campo. Este es el diafragma ubicado en la base del microscopio, sobre la fuente de iluminación. 3. Con mucho cuidado y lentamente, subir y bajar el condensador usando la perilla del mismo hasta que observe un hexágono con un halo entre rojo y azul. 4. Observe la ubicación del hexágono; éste debe estar en el centro. Si el hexágono no está centrado, significa que la luz tampoco lo estará. Por lo tanto, utilice los tornillos insertados en el condensador para centrar la luz (el hexágono). 5. Cuando observe el hexágono en el centro, abra el diafragma de campo. Si la luz ha sido centrada correctamente, debe observar que todos los lados del hexágono desaparecen al mismo tiempo. De lo contrario, debe repetir el paso 4 hasta centrar la luz. 6. Ajustar la cantidad de luz que llega a la muestra con el diafragma del condensador. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 40 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 2.3 Práctica No. 5 Tipos de células: Procariotas y eucariotas 2.3.1 Introducción Todos los seres vivos pueden clasificarse en dos categorías en función de su estructura celular: 1) procariotas y 2) eucariotas. Las células procariotas tienen una estructura relativamente sencilla y carecen de un núcleo envuelto en una membrana. Desde el punto de vista evolutivo, las células procariotas son representadas por dos grupos: bacterias y arqueas. En ambos casos, son microorganismos relativamente pequeños. Las arqueas, son bacterias que habitan ambientes extremos tales como las ventilas hidrotermales. Por su parte, las bacterias se pueden encontrar en el suelo, el agua, inclusive en el tracto digestivo humano. Aunque muchas especies son inocuas, algunas bacterias pueden causar enfermedades. La estructura general de una célula bacteriana se comprende de una membrana plasmática, que representa una barrera entre el ambiente celular interno y externo. En el citoplasma celular se encuentra el nucleoide, región de la célula donde se encuentra su material genético (ADN); y los ribosomas. Por otra parte, en el grupo de las células eucariotas (con núcleo verdadero) se incluye a protistas, hongos, plantas y animales. En todas las células eucariotas, el ADN se encuentra en el núcleo celular. Una característica de las células eucariotas es la presencia de distintos organelos que separan a la célula en diferentes regiones, cada una con funciones específicas (Brooker et al., 2008). Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Página 41 Facultad de Ciencias Marinas de la UABC 2.3.2 Competencia El alumno comprende la diferencia entre tipos celulares mediante observación directa de las mismas y aprende cuáles de ellas conforman a los distintos seres vivos. 2.3.3 Material y equipo 2.3.3.1 Material a solicitar en el almacén general Portaobjetos Cubreobjetos Bisturí Pinzas de disección Cajas Petri Lugol H2O destilada 2.3.3.2 Material en el laboratorio Microscopio compuesto Preparaciones semipermanentes de células procariotas Preparaciones permanentes de células eucariotas (animal y vegetal) 2.3.3.3 Además ¿Qué debe llevar al laboratorio? Cebolla (preferentemente morada) Tomate Sábila (cualquier agave o suculenta) 2.3.4 Desarrollo 1. La observación de células procariotas se realizará en preparaciones semipermanentes proporcionadas por el instructor. Como representante de células eucariotas de origen animal, se observarán preparaciones permanentes de hemocitos de la almeja generosa, Panopea globosa, previamente teñida con el colorante Giemsa el cual, tiñe los núcleos celulares de azul intenso mientras que el citoplasma permanece incoloro o bien, algunas veces se observa de color azul tenue. La observación de las células se realizará, al menos, con los objetivos 10x y 40x. Consulte con el instructor la posibilidad de observar las muestras con el objetivo 100x (no olvide utilizar el aceite de inmersión). También se pueden utilizar laminillas
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