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26/4/2024

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Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A en una cohorte
prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

Comité Ética de Protocolos de Investigación, N° de Protocolo: 2008

Resumen
Introducción: El bisfenol A (BPA) es un químico ampliamente utilizado en envases de
consumo masivo. El BPA biológicamente actúa como distruptor endócrino (DE) e influye en
el desarrollo gonadal y del sistema nervioso central. Está asociado a hiperactividad,
problemas de aprendizaje y alteraciones en el peso al nacer. Los estudios internacionales
realizados sugieren que el 95% de la población presenta niveles detectables de BPA en
orina. Consideramos necesario determinar los niveles de BPA en sangre de cordón umbilical
como primer paso para comenzar a estudiar en nuestro país la exposición a BPA y sus
efectos en nuestra población.
Objetivos: Evaluar el efecto de los niveles de BPA en cordón umbilical, controlando otros
condicionantes de la salud perinatal, sobre el peso, talla, BMI y perímetro cefálico a los 6
meses y al año en una cohorte de niños nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires.
Métodos:
Diseño: Estudio de cohorte prospectivo analítico.
Ámbito: Hospital Italiano de Buenos Aires (HIBA).
Población de Estudio: Recién nacidos y fetos de abortos tardíos asistidos en el Hospital
Italiano de Buenos Aires (HIBA) cuyos padres acepten mediante consentimiento informado
escrito a participar en el estudio.
Marco Muestral: turnos de obstetricia identificados por Sistema de Información Hospitalario.
Muestreo: será necesario incluir 360 recién nacidos.
Conformación de Cohorte: Se invitará a embarazadas de 20 o más semanas de gestación
que se atienden en el HIBA central a participar en el estudio antes de la consulta con el
médico obstetra. Se realizará entrevista personal para la firma de consentimiento informado.
Se proveerá recipiente libre de BPA para recolección de sangre.
Análisis: Se determinará presencia y concentración de BPA total y conjugado en sangre por
espectrometría de masa GS-MS, realizándose control de calidad para prevenir
contaminación de muestras con BPA ambiental.

Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

Introducción
La velocidad de sustancias químicas orgánicas de síntesis vertidas al ambiente aumenta
constantemente, se calcula que actualmente se utilizan alrededor de 100 mil sustancias
químicas sintéticas para la fabricación de productos de uso diario. De las cuales
aproximadamente la mitad se encuentran bajo sospecha de toxicidad, pudiendo provocar
diferentes efectos adversos en la salud, a mediano o largo plazo, de las personas, animales
o de sus descendientes lo que constituye un problema que recae en los responsables de la
Salud Pública.

En el año 1991, se conceptualizó bajo el nombre de disruptor endócrino DE o perturbador
endócrino a las sustancias químicas sintetizadas por el hombre y liberadas al ambiente que
tienen efectos sobre el sistema endócrino del hombre y de los animales [1] y que son
capaces de generar efectos sobre la salud de los organismos expuestos y/o su progenie [2-
5]

Las sustancias que se comportan como DE son los pesticidas, plastificantes, compuestos
clorados, Ftalatos, Estireno, Polibromodifeniléteres, Polibromuros de bifenilo, Bisfenol A,
entre otros [6]. Estas sustancias se desarrollan y producen de manera masiva, resultando
difícil demostrar la causalidad de los efectos de la exposición a los DE. Esta dificultad está
dada por la gran cantidad de sustancias implicadas y la complejidad de las funciones
reguladas por el sistema endocrino.

Los trabajos describen que el efecto del DE puede hacerse evidente al nacer, afectando el
sistema inmunológico y el sexual, pero las manifestaciones pueden hacerse evidentes en
etapas más tardías del crecimiento, incluso en la edad adulta.

La exposición a dosis bajas de DE influyen en el feto causando efectos en la descendencia.
La tradición de los estudios toxicológicos nos enseña que la naturaleza del efecto depende
del tipo y magnitud de la exposición, y en el caso de la gestación, de la coincidencia en
tiempo de la exposición con respecto al desarrollo fetal [7] [8]. Sin embargo los estudios
recientes están demostrando que los efectos tóxicos de algunas sustancias pueden darse a
dosis muy bajas, más allá de los límites que clásicamente se consideraban seguros.

Con respecto al BPA se encuentra bajo la lupa para su prohibición [6], es un producto
químico de muy alto volumen de producción [9] y se lo utiliza comúnmente como materia
prima para la producción de diversos tipos de plásticos, principalmente resinas epoxi y
plásticos de policarbonato, [10] y de un gran número de productos industriales relacionados
directa o indirectamente con el consumo humano. Se lo puede encontrar como material de
recubrimiento del interior de latas, tapas metálicas, en mamaderas, en envases de alimentos
y bebidas, filtros de agua, electrodomésticos, adhesivos, tuberías e instrumentos médicos y
quirúrgicos.[10]

El BPA que constituye o recubre estos materiales puede migrar a los alimentos, ya sea
durante la fase de elaboración o en la de conservación. Dicha migración está influenciada
por distintos factores como la acidez de alimentos y bebidas y los cambios de temperatura
producidos durante el proceso de transporte, almacenamiento y/o esterilización de los
alimentos enlatados [10] así como por el calentamiento de leche en mamaderas (utilizando
microondas o baño maría). Por lo tanto la posibilidad que la población se encuentre
expuesta a este DE es sumamente probable y elevada.

http://es.wikipedia.org/wiki/Ftalato
http://es.wikipedia.org/wiki/Estireno
Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

La exposición a BPA más frecuente es a través de la ingesta de alimentos y bebidas, lo que
en el caso de los niños está incrementado por el hábito de llevarse objetos a la boca, y por
el uso de mordillos y chupetes con este químico. Además los pacientes que requieren
intervenciones por vías intravenosas están expuestos a dicha sustancia debido a su
presencia en los materiales de venoclísis.

El BPA actúa principalmente como agonista de receptores estrógenicos (RE) mimetizando la
acción de la hormona [11]. Su metabolización se produce en el hígado mediante
glucuronización y sulfonación y es excretado por orina. Su metabolito principal, el BPA-
glucuronido, pierde su efecto endocrino [12, 13].

El efecto endocrino y su impacto sobre las crías fue evidenciado inicialmente en ratas [14-
16] y luego en seres humanos, lo que motivó la prohibición por la Administración Nacional
de Medicamentos, Alimentos y Tecnología Médica (ANMAT) de la fabricación, importación y
comercialización de mamaderas que contengan BPA en marzo del 2012.

En el feto y en las primeras etapas de la vida las enzimas que lo metabolizan tienen menor
actividad, lo que aumenta la concentración de BPA circulante y lo expone a una mayor
acción estrogénica. Este efecto se evidenció en seres humanos en estudios que sugieren
que los fetos, los bebés y los niños muestran mayor susceptibilidad que los adultos al BPA
[17-19]

Distintas investigaciones han encontrado BPA en una gran variedad de muestras de sangre
y tejidos de adultos sanos y en tejidos de madres y sus fetos. [20-23] Se encontraron
concentraciones de BPA y sus metabolitos en placenta y tejido hepático, variando sus
concentraciones según capacidad de metabolización de cada individuo [24, 25]. Así, se
confirma que casi la totalidad de la población está expuesta a bisfenol-A.La Encuesta de Salud y Nutrición Nacional de EE.UU (NHANES) publicó en el año 2008 un
estudio a gran escala sobre las concentraciones urinarias de BPA [26] donde se confirmó
que el 95% de la población está expuesta a esta sustancia. Similares concentraciones
reportaron estudios en población canadiense, australiana, española y mexicana. Además
estudios en mujeres de Egipto, Japón, México, y Países Bajos relevaron concentraciones de
BPA de rango entre 0,60 y 1,2 ng/ml [27-31].

Estudios en sangre de mujeres embarazadas relevaron niveles de BPA entre 1,4 ng/ml y 2,4
ng/ml; en líquido amniótico fue de 8,3 ng/ml, llegando a niveles en placenta entre 11,2ng/g a
104,9 ng/g [20] . Es decir, las concentraciones intra útero pueden alcanzar rangos hasta 10
veces mayores que los descriptos en adultos [21-23]. Al mismo tiempo los estudios que
comparan las concentraciones en sangre materna y sangre de cordón umbilical indican que
los niveles de BPA en sangre fetal pueden ser mayores que los presentes en sangre
materna [20], confirmando que el BPA traspasa la barrera placentaria materno-fetal [20-23].

Sin embargo el estudio de los efectos de estas sustancias es complejo, entre otros motivos
porque uno de los mecanismos de este tipo de toxicidad son las alteraciones epigenéticas
del genoma, [32]. Este tipo de efectos son difíciles de poner en evidencia, ya que puede
darse el caso de individuos que manifiestan efectos patológicos en ausencia del factor de
exposición o en un lapso de tiempo alejado de la misma.

Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

También resulta difícil evidenciar la relación entre los efectos de los DE en la salud ya que
gran parte de la población se encuentra expuesta, siendo difícil contar con una población de
referencia libre del factor de exposición con la cual establecer la relación del riesgo.

Las evidencias del efecto endócrino del BPA en la descendencia indican que en humanos se
producen incremento en el peso de los recién nacidos cuyas madres se había detectado
valores elevados de BPA en orina [33-35]. A su vez, otros estudios evidencian efectos
reproductivos [36], partos prematuros, alteración del sistema inmunológico, adelanto de la
menarca, reducción de la memoria y capacidad de aprendizaje [37] ,alteraciones en el
desarrollo del aparato genitourinario (hipospadias), disminución de la distancia ano-genital,
menor tamaño peneano y testiculo no descendido, proponiéndolo como agente etiológico del
síndrome de virilización incompleta. [33, 34]

Debido a que la exposición al BPA de la población se ha generalizado y que no se cuenta
con la suficiente evidencia de los efectos de la exposición transplacentaria a largo plazo,
consideramos que una manera de aportar a este complejo problema es comenzar
describiendo la magnitud del problema. Determinar en qué medida están expuestos los
niños que se están gestando en nuestra población a este disruptor endócrino. Es por ello
que nos proponemos determinar los niveles de BPA en sangre de cordón umbilical como
primer paso para comenzar a estudiar en nuestro país la exposición a BPA y sus efectos en
nuestra población.

Hipótesis
La exposición a Bisfenol A durante la etapa fetal influye en el desarrollo al nacer y al 1° año
de vida.

Objetivos
Principal
Evaluar el efecto de los niveles de BPA en cordón umbilical, controlando otros
condicionantes de la salud perinatal, sobre el peso, talla, BMI y perímetro cefálico a
los 6 meses y al año en una cohorte de niños nacidos en el Hospital Italiano de
Buenos Aires

Objetivos secundarios:
Determinar los niveles de BPA en cordón umbilical de los alumbramientos asistidos
en el HIBA.
Describir las condiciones ambientales fetales.
Determinar la distancia ano-genital y la frecuencia de hipospadias.
Correlacionar los niveles de BPA en cordón umbilical con la edad gestacional y el
peso al nacer.

Materiales y Métodos
1. Tipo de estudio y diseño
Estudio de cohorte prospectivo analítico.
2. Descripción del ámbito de estudio.
Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

El Hospital Italiano de Buenos Aires es un hospital universitario de 750 camas. Posee una
red asistencial de alta complejidad, con cobertura en Ciudad de Buenos Aires y Gran
Buenos Aires. Cuenta con 2 hospitales y 23 centros ambulatorios de atención primaria y
secundaria, una Universidad, un Instituto de Ciencias Básicas y un Laboratorio Central.
Posee un sistema de medicina prepaga “Plan de Salud del HIBA” (PS) con 160.000 afiliados
en su mayoría pertenecientes a clase media. Se realizan mensualmente aproximadamente
300 partos, el 60% de afiliados al PS. Posee una Historia Clínica Electrónica (HCE) desde
1998 como único repositorio de información del paciente que facilita el registro prospectivo
de los nacidos en la institución [38]

3. Población. Muestra y tamaño de la muestra.
3.1 Población de referencia: Cohorte 2013 de alumbramientos y nacimientos de clase
media de la Ciudad de Buenos Aires.

3.2 Población elegible: Recién nacidos y fetos de abortos tardíos asistidos en el Hospital
Italiano de Buenos Aires (HIBA).

3.3 Criterios de Inclusión y exclusión:
Criterios de Inclusión:
Nacidos a termino o prematuros, vivos o muertos.
Abortos tardíos: 20 o más semanas de gestación.
Madre afiliada a la prepaga del HIBA, para garantizar el seguimiento al año.

Criterio de exclusión:
Abortos: menor a 19 semanas de gestación.
Nacimientos/abortos de madres y padres menores de 18 años.
Madres que quieren guardar sangre de cordón umbilical para banco de células
madre.

3.4 Población de Estudio: Recién nacidos y fetos de abortos tardíos asistidos en el
Hospital Italiano de Buenos Aires (HIBA) cuyos padres acepten mediante consentimiento
informado escrito a participar en el estudio.

3.5 Tamaño muestral
Para el cálculo muestral se utilizan los datos de diferencia de peso al nacer según grado de
exposición a disruptores endocrinos publicados por Christine Wohlfahrt-Veje et al. (40) En
base a ese estudio se determina que entre los recién nacidos del tercil superior de niveles
de Bisfenol A y aquellos del tercil inferior existe una diferencia de peso al nacer de 200gr (sd
500) sería necesario incluir 300 unidades muestrales (recién nacidos). Contemplando el
análisis multilevel se considerará un efecto de diseño de 1.2 en el cálculo muestral, para lo
que será necesario incluir 360 recién nacidos.

3.6 Tiempo estimado
El número aproximado de partos mensuales en el HIBA de los afiliados es de 120 por lo que
se estima un tiempo aproximado de inclusión para el estudio de 4 meses teniendo en cuenta
que se tomarán las muestras de los nacimientos diurnos y en días hábiles por la
disponibilidad del personal encargado de realizar las mediciones.

4. Método de Conformación de la Cohorte
Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

Para obtener la población elegible (nacidos y abortos de más de 20 semanas) se cumplirán
los siguientes pasos:

a- Identificación de embarazadas:
El obstétrica invitará a participar a embarazadas de 20 o más semanas de gestación
que se atienden en el HIBA central.

Para incluir a una mujer embarazada en el protocolo:
b- Contacto telefónico:
Personal instruido y capacitado en la temática de investigación contactará a la
embarazada mediante llamado telefónico.

Este primer contacto permitirá corroborar la elegibilidad de la mujer muestreada, y su
interés en participar del protocolo.
c- Entrevista personal:
a). En el contacto telefónico se acordará con la potencial participante una fecha de
entrevista en el hospital paraproveerle información oral y escrita sobre el estudio y
sobre los resguardos éticos.
b). En el caso que la candidata manifieste su interés en participar del protocolo se le
solicitará la firma del consentimiento a fines de incluir a ella en el estudio.
c) Se le realizará una encuesta para relevar información sobre los padres:
Antecedentes patológicos; Hábitos alimentarios, Tabaco y Alcohol durante el
embarazo; Nivel de instrucciones; Actividad laboral; Lugar actual de residencia, Nivel
de riesgo en el ambiente.

5. Variables y Definiciones de las variables.
5.1 Variables de resultado:
o Presencia de BPA total en sangre, como variable dicotómica
o Presencia de BPA conjugado en sangre, como variable dicotómica
o Concentración de BPA total en sangre: expresada en µg / l
o Concentración de BPA conjugado en sangre: expresada en µg / l

5.2 Variables de exposición de la población bajo estudio
Salud del niño
o Distancia Ano-genital al nacimiento
o Presencia de hipospadias al nacimiento
o Talla al nacimiento, a los 6 meses y al año de vida.
o Peso al nacimiento, a los 6 meses y al año de vida.
o Perímetro cefálico al nacimiento, a los 6 meses y al año de vida
o Evaluación individual con peso/edad y talla/edad, a los 6 meses y al año de vida

Patrones de alimentación del niño
o duración de lactancia materna exclusiva
o edad de incorporación de alimentos

Antecedentes de salud maternos y paternos
o Edad de la madre y el padre
o BMI de la madre
o Diferencia de peso durante el embarazo
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o Comorbilidad: enfermedades de los padres durante el transcurso del embarazo.
o Hábitos alimentarios, Tabaco y Alcohol durante el embarazo: Encuesta sobre los
hábitos durante el curso del embarazo. (Anexo)
Nivel de instrucciones de la madre y el padre
Actividad laboral de la madre y del padre
Lugar de residencia de la madre
Nivel de riesgo en el ambiente

5.3 Definiciones de las variables
Peso: se expresará en g y kg.
Talla: se expresará en cm.
Perímetro Cefálico: se expresará en cm.
Peso al nacer: se ajustará a la edad gestacional (PEG) con la distribución de peso al nacer
en la misma semana de gestación y sexo según los datos de los percentiles de peso al
nacer por edad gestacional de los recién nacidos en Argentina. Se define PEG apropiado si
el mismo se encuentra entre el percentil 10 y 90 [39]
Se define bajo peso al nacer (BPN) como el peso al nacer del recién nacido ajustado a edad
gestacional inferior al Percentil 10. Se define alto peso al nacer (APN) a los incluidos sobre
el percentil 90.
Índice de masa corporal: Se calculara de acuerdo a la fórmula de Peso/Talla².
Indicadores Peso/edad y Longitud oTalla/edad: los resultados de dichos indicadores
deben extrapolarse a las curvas correspondientes de Peso/edad y longitud o talla/edad.
Distancia Ano-genital: la distancia anogenital (DAG) es un parámetro antropométrico que
se ha validado en algunos estudios como un marcador sensible de exposición intrauterina a
andrógenos y antiandrógenos.
En las figuras 1 y 2, se señala la manera de realizar las mediciones perineales en varones y
mujeres. En varones el DAG se mide desde la zona intermedia del ano hasta la cara anterior
de la base del pene, el DAG en mujeres se mide desde la zona intermedia del ano hasta el
clítoris. Los bebes deben ser posicionados con las extremidades inferiores en abducción, las
rodillas flexionadas.[40]

Hipospadia: Se informará la presencia de hipospadia si se observa el orificio uretral situado
en la parte ventral del pene o en el periné, acompañado de una curvatura del eje mayor del
mismo y presencia de prepucio solo en la región dorsal del glande.
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Desarrollo de signos asociadas a hiperestrogenismo: Se registrarán aquellos casos en
que el pediatra identifique por examen físico signos de hiperestrogenismo como el aumento
de botón mamario en el transcurso del primer año de vida.
Duración de lactancia materna exclusiva: se tomará duración de lactancia materna
exclusiva a aquellos niños que toman sólo leche materna, excluyendo otro tipo de alimento
según la definición de la OMS. Se registrará en meses la duración de la lactancia materna
exclusiva.
Edad de incorporación de alimentos: Se registrará en meses del niño.
Edad de los padres: se expresará en años.
BMI: Peso/Talla² según estandarización del protocolo siguiendo las normas de la OMS.
Antecedentes patológicos: enfermedades de los padres previas y durante el transcurso
del embarazo.
Hábitos alimentarios, Tabaco y Alcohol durante el embarazo: Se registrará sobre estos
hábitos de los padres durante el curso del embarazo.
Nivel de instrucción de los padres: se tomará el grado más alto completado, dentro del
nivel más avanzado que se ha cursado, de acuerdo a las características del sistema
educacional del país, considerando tanto los niveles primario, secundario, terciario y
universitario del sistema educativo no reformado, como la categorización del sistema
educativo reformado (ciclos de Educación General Básica y Polimodal), según la Dirección
de Estadísticas e Información de Salud.
Actividad laboral histórica de los padres: se tomará la determinación de la condición de
actividad de la población según la EPH continua.
Lugar de residencia de la madre: es la localización geográfica o dirección donde reside
habitualmente la paciente embarazada.
Nivel de riesgo en el ambiente: se tomará el grado de contaminación ambiental según el
barrio donde vive la madre, tomando como Riesgo Alto si vive cerca de la Cuenca del Rio
Matanza –Riachuelo, Riesgo Bajo si vive en otras zonas.
Diferencia de peso durante el embarazo: se registrará el peso de la madre al inicio del
embarazo y al finalizar el mismo y se calculará la diferencia de peso en kilos en el período
total del embarazo. Se expresará en Kg.

6. Toma de muestra y recolección de datos
6.1 Toma de muestra:
Las muestras de sangre del cordón umbilical serán tomadas en el momento del nacimiento
por los investigadores neonatólogos del estudio.

Las muestras se recepcionarán en el Laboratorio Central del HIBA corroborando los detalles
de identificación de la misma.
6.2 Método de Recolección de datos:
Las variables de exposición se recabarán en diferentes instancias:
Al nacimiento
Los neonatólogos registrarán en la historia clínica electrónica talla, peso y distancia
ano-genital del niño.

Control a los 6 meses de vida
El pediatra registrará en la historia clínica electrónica talla, peso y BMI, edad de
incorporación de alimentos, duración de lactancia materna exclusiva.

Control al año de vida
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en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

El pediatra registrará en la historia clínica electrónica talla, peso, BMI y edad de
incorporación de alimentos, duración de lactancia materna exclusiva.

Entrevista con la madre para firmar consentimiento
Los investigadores del estudio registrarán los datos correspondientes a ambos
padres

7. Selección de técnica e instrumento de recolección de datos para el dosaje de BPA

7.1 Dosaje de BPA:
El laboratorio del HIBA medirá las concentraciones en sangre de BPA totales (libres y
conjugados) en las muestras aceptadas mediante espectrometría GS-MS.

El BPA se medirá utilizando un método basado en una extracción de fase sólida
automatizada (SPE) acoplado al isótopo dilution-GC/MS. [31]

Las concentraciones de BPA en general están a menudo cerca de los límites de
cuantificación incluso utilizando métodos muy sensibles. Se tomará como límites de
detección paraBPA en una muestra de sangre: 0,1 µg / L [31]

7.2 Control de calidad:
Se garantizará que las muestras no se contaminen durante la manipulación,
almacenamiento y análisis mediante un sistema de control de calidad global por parte del
laboratorio. Este proceso estará regulado por las normas internacionales de calidad a las
que adhiere el laboratorio, acreditado internacionalmente desde 1998 por el College Of
American Pathologists (Cap), la red de laboratorios International Maternal Pediatric
Adolescent Clinica Trials (IMPACCT), de la División SIDA de los Institutos Nacionales de
Salud de los Estados Unidos (NIH) y desde 2008 por la Food and Drug Administration (FDA)

Se descartarán aquellas muestras donde se detecten fallas puntuales en el proceso de
manipulación, identificación, almacenamiento y/o procesamiento.

8. Criterios de la muestra biológica
8.1 Tipo de frasco de la muestra: Se recolectarán muestras de sangre del cordón umbilical
en envase de polipropileno con tapa de polietileno [27, 30], ambos tipos de plásticos carecen
de la sustancia BPA.

8.2 Recepción y registro de las muestras:
Recepción de las muestras: El personal administrativo del laboratorio del HIBA
previamente entrenado, recibirá las muestras de sangre.

Recepción y registro de las muestras: La muestra se entregará al sector
administrativo del laboratorio con la identificación correspondiente (apellido y número
de ID HC o DNI) y nombre del protocolo.

8.3 Criterios de aceptación y rechazo de muestras
Criterios de aceptación de la muestra:
La muestra debe ser provista en envase de polipropileno con tapa de polietileno.

Criterios de rechazo de la muestra:
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No se aceptarán muestras que no estén remitidas en envase de polipropileno con
tapa de polietileno.

8.4 Reporte de resultado del dosaje de BPA.
El dosaje de BPA se realizará en forma centralizada en el Laboratorio Central del HIBA. El
dato será registrado en una base de datos primaria para determinar la prevalencia de BPA
en sangre y la media de BPA en sangre.

9. Análisis estadístico
Los niveles de BPA serán divididos en tercilos y se correlacionarán con Ro de Spearman y
Tau B de kendall, con otras variables de exposición y con las variables finales al nacimiento
(peso según edad gestacional, distancia anogenital) y al año (peso, talla, PC y BMI).

Las variables continuas se expresarán como media y desvío estándar y se analizarán
mediante t-test o Anova según número de grupos de comparaciones de cada variable
exposición. Las variables nominales serán comparadas con Mann-Whitney, y las variables
categóricas se expresaran en porcentajes e intervalos de confianza del 95%, y se analizarán
mediante test de Chi2.

Para cada variable final se considerará que el cambio es clínicamente significativo si el Z
score para edad gestacional y sexo de cada medición es -+2 (valor del niño menos la media
para el subgrupo de edad gestacional y sexo/ desvio estándar de dicho grupo).
Para cada variable final al nacer (peso al nacer según edad gestacional, distancia
anogenital) y al año se realizarán dos modelos de regresión logística múltiple con multinivel:
uno para evaluar el odds ratio ajustado de cada factor de riesgo potencial de presentar o no
(outcome dicotómico) un incremento clínicamente significativo en la variable final analizada
y otro para presentar un decremento clínicamente significativo (Z score -2). El nivel de BPA
(incluida como variable continua o Logtransformada en caso de ser necesario por su
distribución) se ajustará por exposición al tabaco, al alcohol de la madre, nivel social,
paridad y edad de la madre y aquellas variables cuyo análisis bivariado sea
estadísticamente significativo a un nivel de 0,05. En el modelo se incluirá en un segundo
nivel la contaminación barrial existente en el lugar de gestación de cada niño.

Los niveles de BPA de fetos muertos de abortos tardíos se compararán con los niveles de
los nacidos vivos.

Se considerará significativo un p-valor menor de 0,05. Se utilizara para el análisis de los
datos el programa Stata 10.

Los valores de nuestra población de estudio serán comparados con otras poblaciones a
través de inferencia estadística de la superposición de los intervalos de confianza del 95%.

Se realizará un georreferenciamiento del lugar de residencia de las mujeres embarazadas
con presencia de BPA en sangre. Previo al georreferenciamiento se obtendrán los datos de
longitud y latitud del lugar de residencia a través de un sistema de Mapas HI y luego se
graficarán usando el Epi Info 7.

10. Aspectos éticos
El protocolo fue ingresado para su evaluación al Comité de Ética del Hospital Italiano de
Buenos Aires (CEPI).
Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

El presente trabajo de investigación cumplirá con las guías éticas internacionales vigentes
para la realización de estudios con seres humanos redactadas en la Declaración de Helsinki
(Asociación Médica Mundial, 1964, última actualización 2008).

Se ajustará a la normativa legal vigente de Ley Nacional de Protección de Datos Personales
25.326 (Ley de Habeas Data) para proteger la identidad y los datos del paciente,
garantizando el absoluto anonimato y confidencialidad de toda la información que se
produzca a raíz de este protocolo.

Se garantiza que la participación en este protocolo, será voluntaria y libre de influencia
indebida, incentivo indebido o coerción.

Los participantes tienen derecho a rehusarse a participar o a abandonar el estudio en
cualquier momento, sin necesidad de justificarse y sin exponerse a ninguna represalia, ni
afectarse el cuidado médico y la atención que reciben por parte del hospital.

Se garantiza que los contactos telefónicos y las entrevistas con cada potencial participante
serán realizados por personal instruido y capacitado en la temática de investigación.

En dichas entrevistas se otorgará al participante potencial información oral y escrita
presentada en forma clara, precisa, veraz, en lenguaje práctico y adecuado a su
comprensión, sobre el propósito, procedimientos, beneficios y riesgos previsibles y fuentes
de financiamiento de la investigación.

Después de verificar que el individuo ha comprendido toda la información, ha realizado
todas las preguntas que desee y quedó satisfecho con las respuestas, se le solicitará la
firma del consentimiento para incluirla en el estudio y acceder a su HCE y la de su niño.
Luego de las firmas, el participante recibirá uno de los originales de la hoja de firmas.

Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

11.Bibliografía
1. Morando JD, N.H., Bociógenos ambientales y Disruptores endocrinos, in Tratado
Argentino de Tiroides, D.H. Niepomniszcze, Editor. 2010. p. 3-14.
2. Fernandez, M.F., Estrogens in the environment: is there a breast cancer
connection? The Cancer Journal, 1998. 11: p. 11-17.
3. Olea N., M.M.J., García-Martin M. and Olea-Serrano M.F, Modern agricultural
practices: The human price. In: Endocrine disruption and Reproductive effects in
Wildlife and Humans. REVISTA Ecosistemas, 2006.
4. Center for Disease control and prevention, National Health and nutrition
Examination Survey: lab methods 2003-2004. 2008.
5. Guillette, L.J., Jr. and M.P. Gunderson, Alterations in development of
reproductive and endocrine systems of wildlife populations exposed to endocrine-
disrupting contaminants. Reproduction, 2001. 122(6): p. 857-64.
6. Olea, N. and M.F. Olea-Serrano, Oestrogens and the environment. Eur J Cancer
Prev, 1996. 5(6):p. 491-6.
7. Kok, A.Y.T.K.T.d. and T.L. Guidotti, SALUD AMBIENTAL BÁSICA, ed.
S.T.B.p.l.F. Ambiental. 2002.
8. Fonseca, A.F.M.C.P.B.L.M., Impacto de los disruptores endocrinos en la salud y el
medio ambiente. Revista CENIC. Ciencias Biológicas (Cuba) 2005. Vol.36. .
9. Lang, I.A., et al., Association of urinary bisphenol A concentration with medical
disorders and laboratory abnormalities in adults. JAMA, 2008. 300(11): p. 1303-10.
10. González, G.L., Toxicidad del Bisfenol A (BPA): migración desde los envases a los
alimentos. Revista Salud Publica, 2011.
11. Espinosa L. Maria J, Exposición Materno infantil vía placentaria a compuestos
químicos medioambientales con actividad hormonal. 2006.
12. Yokota, H., et al., Glucuronidation of the environmental oestrogen bisphenol A by
an isoform of UDP-glucuronosyltransferase, UGT2B1, in the rat liver. Biochem J,
1999. 340 ( Pt 2): p. 405-9.
13. Shimizu, M., et al., Sulfation of bisphenol A abolished its estrogenicity based on
proliferation and gene expression in human breast cancer MCF-7 cells. Toxicol In
Vitro, 2002. 16(5): p. 549-56.
14. Cabaton, N.J., et al., Perinatal exposure to environmentally relevant levels of
bisphenol A decreases fertility and fecundity in CD-1 mice. Environ Health
Perspect, 2011. 119(4): p. 547-52.
15. Chen, M., et al., Bisphenol A alters n-6 fatty acid composition and decreases
antioxidant enzyme levels in rat testes: a LC-QTOF-based metabolomics study.
PLoS One, 2012. 7(9): p. e44754.
16. Patisaul, H.B., et al., Anxiogenic effects of developmental bisphenol a exposure are
associated with gene expression changes in the juvenile rat amygdala and mitigated
by soy. PLoS One, 2012. 7(9): p. e43890.
17. Birnbaum, L.S. and S.E. Fenton, Cancer and developmental exposure to endocrine
disruptors. Environ Health Perspect, 2003. 111(4): p. 389-94.
18. Goldman, L., et al., Environmental pediatrics and its impact on government health
policy. Pediatrics, 2004. 113(4 Suppl): p. 1146-57.
Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

19. Sharpe, R.M., Pathways of endocrine disruption during male sexual differentiation
and masculinization. Best Pract Res Clin Endocrinol Metab, 2006. 20(1): p. 91-
110.
20. Schonfelder, G., et al., Parent bisphenol A accumulation in the human maternal-
fetal-placental unit. Environ Health Perspect, 2002. 110(11): p. A703-7.
21. Avissar-Whiting, M., et al., Bisphenol A exposure leads to specific microRNA
alterations in placental cells. Reprod Toxicol, 2010. 29(4): p. 401-6.
22. Balakrishnan, B., et al., Transfer of bisphenol A across the human placenta. Am J
Obstet Gynecol, 2010. 202(4): p. 393 e1-7.
23. Zhang, Z., et al., Selective pressurized liquid extraction of estrogenic compounds in
soil and analysis by gas chromatography-mass spectrometry. Anal Chim Acta,
2011. 685(1): p. 29-35.
24. Cao, X.L., et al., Bisphenol A in human placental and fetal liver tissues collected
from Greater Montreal area (Quebec) during 1998-2008. Chemosphere, 2012.
89(5): p. 505-11.
25. Edlow, A.G., et al., Fetal bisphenol A exposure: concentration of conjugated and
unconjugated bisphenol A in amniotic fluid in the second and third trimesters.
Reprod Toxicol, 2012. 34(1): p. 1-7.
26. GUILLETTE, L.J.J.A.D.A.C., Endocrine Disrupting Contaminants: An
Evolutionary Perspective. 2000: Francis and Taylor Inc., Philadelphia.
27. Nahar, M.S., et al., Urinary bisphenol A concentrations in girls from rural and
urban Egypt: a pilot study. Environ Health, 2012. 11: p. 20.
28. Ouchi K, Measurement of bisphenol A in humanurine using liquidchromatography
with multi-channelcoulometricelectrochemicaldetection. Journal of
Chromatography 2002. 780: p. 365-370.
29. Cantonwine, D., et al., Bisphenol a exposure in Mexico City and risk of
prematurity: a pilot nested case control study. Environ Health, 2010. 9: p. 62.
30. Ye, X., et al., Urinary metabolite concentrations of organophosphorous pesticides,
bisphenol A, and phthalates among pregnant women in Rotterdam, the
Netherlands: the Generation R study. Environ Res, 2008. 108(2): p. 260-7.
31. Calafat, A.M., et al., Urinary concentrations of bisphenol A and 4-nonylphenol in a
human reference population. Environ Health Perspect, 2005. 113(4): p. 391-5.
32. Singh, S. and S.S. Li, Epigenetic effects of environmental chemicals bisphenol a
and phthalates. Int J Mol Sci, 2012. 13(8): p. 10143-53.
33. Philippat, C., et al., Exposure to phthalates and phenols during pregnancy and
offspring size at birth. Environ Health Perspect, 2012. 120(3): p. 464-70.
34. Miao, M., et al., In utero exposure to bisphenol-A and anogenital distance of male
offspring. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol, 2011. 91(10): p. 867-72.
35. Wohlfahrt-Veje C, M.K., Schmidt IM, Boas M, Jensen TK, Grandjean P,
Skakkebæk NE, Andersen HR., Lower birth weight and increased body fat at
school age in children prenatally exposed to modern pesticides: a prospective study.
Environ Health., 2011.
36. Gill, W.B., et al., Association of diethylstilbestrol exposure in utero with
cryptorchidism, testicular hypoplasia and semen abnormalities. J Urol, 1979.
122(1): p. 36-9.
37. Federico Argemi1, N.C., Andrés Porta3, Disrupción endocrina: perspectivas
ambientales y salud pública*. TOXICOLOGÍA AMBIENTAL, 2005. 39.
Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

38. Luna D., O.P., García Martí S., López Osornio A., De los Rios E., Pedernera F.,
Gómez A., Martinez M., Cifarelli G., Marchetti M., González Bernaldo de
Quirós, F. and 2003, Implementación de una Historia Clínica Electrónica
Ambulatoria: El Proyecto ÍTALICA 6to Simposio de Informática en Salud - 32
JAIIO - Buenos Aires - Argentina. 2003.
39. Christine Wohlfahrt-Veje, K.M.M., Ida M Schmidt, Malene Boas, Tina K
Jensen, Philippe Grandjean, Niels E Skakkebæk and Helle R Andersen Lower
birth weight and increased body fat at school age in children prenatally exposed to
moder pesticides: a prospective study. Environmental Health, 2011.
40. Agramunt, Distancia anogenital en recién nacidos: un marcador sensible de
disrupción hormonal intrauterina. . Med Clin 2011.

12. Cronograma
Año 2013 2014 2015
Meses 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1 2
Presentación a beca
Desarrollo de Beca SAP
Reclutamiento de personas
Invitación a embarazadas
Contacto con embarazadas
Firma de Consentimiento Informado
Recolección de muestras
Entrenamiento para toma de muestras
Toma de muestras al nacimiento
Recepción de muestras
Almacenamiento de muestras
Recolección de datos en consulta
Recolección de datos
Revisión de HCE
Cargado de base con datos
Análisis de muestras
Dosaje de BPA
Reporte de dosaje de BPA
Procesamiento de información
Análisis estadísticoPreparación de informe SAP
Presentación de informe SAP
Finaliza Beca SAP
Preparación de informe final
Presentación de informe final

Ambiente fetal y su impacto al año de vida: exposición a Bisfenol A
en una cohorte prospectiva de nacidos en el Hospital Italiano de Buenos Aires

13. Presupuesto

Concepto Unidad Cantidad
Costo
Unitario
($ ARS)
Costo
Total ($
ARS)
Aporte
Contraparte
($ ARS)
Solicitud
Subsidio
($ARS)
Recursos Humanos
Director de proyecto* Salario/mes 12 1.875,00 22.500,00 22.500,00
Investigador Principal* Salario/mes 12 2.250,00 27.000,00 27.000,00
Investigador Asistente* Salario/mes 12 1.500,00 18.000,00 18.000,00
Bioquímico* Honorarios 2 2.250,00 4.500,00 4.500,00
Neonatólogo* Honorarios 4 2.250,00 9.000,00 9.000,00
Obstétrica inclusión paciente* Honorarios 4 1.000,00 4.000,00 4.000,00
10 Pediatras para seguimiento* Honorarios 10 3.600,00 36.000,00 36.000,00
Recursos Materiales
Hojas p/ encuestas y
consentimiento*
3 Hojas 360 15,00 5.400,00 5.400,00
Llamadas telefónicas* Llamada 1080 0,10 108,00 108,00
Refrigerio* Refrigerio 400 10,00 4.000,00 4.000,00
Puesta a punto de la medición de
BPA*
Proceso 1 10.000,00 10.000,00
Determinación BPA/paciente Paciente 360 150,00 54.000,00 16.000,00 38.000,00
Material descartable* Paciente 360 10,00 3.600,00 3.600,00
Adecuación de sistema
cromatográfico y materiales
(reactivos, calidad cromatográfica)*
19.800,00 19.800,00
Cartuchos de extracción de fase
sólida para la elución de biphenol A
y estándares internos para el
biphenol A*
13.200,00 13.200,00
Total 231.108,00 193.108,00 38.000,00
*Recurso humano de planta permanente del HIBA / Recurso material correspondiente a los
gastos corrientes del HIBA / Recurso de infraestructura