Practicas en el laboratorio de Fisiologia Vegetal

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PRÁCTICAS EN EL LABORATORIO DE “FISIOLOGÍA VEGETAL DE 
LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA” 
Presentación 
Estas actividades se ejecutaron en el Laboratorio de Fisiología Vegetal de la 
Facultad Agropecuaria de la Universidad Nacional de Loja. Lugar donde se 
realizan diferentes prácticas durante el proceso de enseñanza y formación del 
estudiante de Ingeniería Agronómica, se abarcan contenidos de materias como 
Botánica, Biología y Fisiología de las plantas, es visitado por estudiantes de las 
diferentes carreras de la misma, siendo a su vez un escenario para proyectos de 
investigación, clases teórico-práctico y prácticas pre-profesionales. 
Las labores ejecutadas en el Laboratorio Fisiología de Vegetal fueron realizadas 
con la finalidad de afianzar los conocimientos ya adquiridos en ciclos anteriores 
en temas de; limpieza, selección, germinación y evaluación de semillas mediante 
ensayos aplicando diferentes tratamientos además monitoreo en rizotrones para 
poder determinar el crecimiento radicular y foliar de plantas forestales ; ensayos 
para prácticas de estudiantes referentes a asignaturas como Biología, Fisiología 
y Botánica. Mediante las prácticas realizadas en el Laboratorio de Fisiología 
Vegetal se adquirió conocimientos teóricos-prácticos que serán aplicados en el 
campo laboral. 
 
Objetivos 
 Realizar ensayos de germinación de semillas de bromelias y forestales. 
 Analizar la dinámica del crecimiento radicular y foliar de especies forestales 
mediante monitoreo de rizotrones. 
 Monitorear el banco de semillas natural para evaluar el número de especies e 
individuos que se presentaron. 
 
 
 
2 
 
Materiales 
Durante las prácticas, se realizaron diferentes actividades en laboratorio, para 
lo cual se utilizaron los siguientes materiales: 
 Materiales de laboratorio 
• Vaso de precipitación 
• Cajas de Petri 
• Bisturí 
• Fundas 
• Pinzas 
• Papel filtro 
• Mechero de bunsen 
• Guantes 
• Mascarillas 
• Mandil 
 
 Insumos y equipos de laboratorio 
 
• Agua destilada 
• Cloro 
• Vinagre 
• Germinador 
• Estufa 
• Cámara de aislamiento 
• Destilador de agua 
• Semillas forestales y bromelias. 
 
 Materiales de oficina 
• Cuaderno 
• Cámara fotográfica 
• Esferográfico 
• Computador 
 
 
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Metodología 
a. Metodología para la selección, siembra y monitorio de semillas 
forestales. 
PROTOCOLO PARA RECEPCION DE MUESTRAS 
1. Las semillas al ingresar al laboratorio deben estar en buenas condiciones, 
libres de contaminación, certificadas, y con procesos de desinfección 
establecidas. 
2. Las semillas deben ser obtenidas directamente de la fuente semillera o de 
árboles con buenas características fenotípicas, y sometidas a protocolo de 
desinfección. 
3. Las semillas deben tener su identificación: Familia, nombre común, 
nombre científico, lugar, fecha de recolección, nombre del colector. 
PROTOCOLO PARA DESINFECCION DE MATERIAL Y EQUIPOS A 
UTILIZARCE 
1. Desinfección del material de vidrio (cajas petri, vasos de precipitación, 
pinzas) con agua y detergente. 
2. Ubicar en cada caja petri papel filtro, envolver con papel periódico o 
fundas de papel de acuerdo al número de cajas que se requiera, ubicarlas en 
estufa a 100 oC por espacio de dos horas. De igual forma se realiza para pinzas 
quirúrgicas y otro material que soporte temperaturas altas. 
3. Dependiendo del tipo de equipo, (incubador, cámara de aislamiento), se 
desinfecta con alcohol al 70 % o vinagre. 
PROTOCOLO PARA DESINFECCION DE SEMILLA 
1. Dependiendo del tamaño, contextura y de su pureza, se procede a 
desinfectar las semillas con hipoclorito de sodio al 5%, en cantidad de 10 a 50 
ml por espacio aproximado de dos a 5 minutos tomando en consideración la 
fragilidad de la semilla (testa dura, testa blanda). 
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2. Enjuagar las semillas con abundante agua destilada para eliminar residuos 
(utilizar cedazos si fuese necesario). 
 PROTOCOLO PARA SIEMBRA DE SEMILLAS BAJO 
CONDICIONES CONTROLADAS. 
1. Desinfección del equipo (Cámara de aislamiento) con alcohol potable al 
96% o vinagre, lugar donde se va a realizar la siembra de semillas en cajas 
petri. 
2. Para la siembra de semillas, se coloca en cada caja petri aproximadamente 
3 ml de agua destilada evitando que no se formen burbujas de agua en la caja, 
luego se procede a sembrar las semillas en número considerado y de acuerdo 
al tamaño de las semillas (10, 15, 25, 50, 100). 
3. Las pinzas se deben cambiar cada vez que se de paso a la semilla de una 
especie nueva, entre semillas de la misma especie, basta con flamearla. 
4. Se debe etiquetar cada caja Petri, se debe poner primeramente la fecha 
luego se toma en cuenta si es testigo o con tratamiento, To, T1, T2… según 
los tratamientos que se empleen, se pone el nombre de la especie, vulgar y 
científico. 
5. Cerrar la caja Petri, flamear alrededor de los bordes para proceder a 
meterlas en la cámara de germinación. 
6. Programar el germinador a la humedad relativa y temperatura que es 
requerida según la especie. 
7. Se realiza lecturas diarias hasta que se estabilice el proceso germinativo, 
adicionando agua destilada conforme la semilla lo requiera. 
8. La energía germinativa (número de semillas germinadas al realizar el 
primer conteo) y la facultad germinativa de las semillas deben expresarse en 
forma de porcentaje y por números enteros. 
5 
 
9. Para establecer el porcentaje de germinación se efectúa una relación 
simple tomando como base que el total de semillas del ensayo corresponde al 
100% de germinación. 
10. La germinación se considera como, la aparición de la radícula y de las 
primeras hojas, que indicaron el potencial o la capacidad de la semilla para 
producir una planta normal en condiciones favorables. 
b. Metodología para analizar la dinámica del crecimiento radicular y 
foliar de especies forestales mediante monitoreo de rizotrones. 
Para analizar la dinámica del crecimiento de las raíces de las especies 
forestales mediante rizotrones se procedió a realizar lo siguiente: 
• Se recolectó sustrato del vivero forestal, se lo desinfecto y luego se procedió 
a colocar en los rizotrones. 
• Se procedió a sembrar las diferentes especies forestales en el rizotron a una 
determinada distancia de cada una y tratando q se pueda observar las raíces. 
En este paso se siembra la planta cerca del vidrio del rizotron para poder 
observar el sistema radicular. 
• Se cubrió los rizotrones con fundas plásticas nesgras asegurándolas con 
cinta. 
• Luego se procedió a identificar y se colocó al rizotron en un lugar donde 
pueda recibir luz para el crecimiento de la planta y se lo ubico de una 
manera vertical a 30 grados de inclinacion para que el geotropismo de las 
raíces actué y las raíces se orienten en dirección a la zona que queremos 
observar. 
• Posterior a ello se procede al monitoreo de las especies forestales sembradas 
en rizotrones mismo que se realizó los días lunes y viernes. 
• Luego de monitorear, de existir plántulas muertas se procede a la resiembra. 
 c. Metodología para monitorear el banco de semillas natural para 
evaluar el número de especies e individuos que se presentaron. 
Desde el viernes 21 de septiembre del presente año, relevamos el conteo de los 
49 bancos de semillas, se iba etiquetando si aparecían nuevas especies e 
individuos y almacenándose en una base de datos, en un principio a cada 
especie se la señalaba con cintas pegadas a un palillo, la cinta scoth servía para 
señalar si aquella planta era de la especie 1 – 8, luego se presentó problemas 
6 
 
con hongos del género Penicillium identificado por la técnica del laboratorio 
de fitopatología Ing. Jeamel Ruiz Mg. Sc, la misma que nos recomendó y 
facilitó el hongo antagónico llamado Trichoderma, para combatir de manerabiológica. 
Resultados: 
 Resultados para el primer Objetivo. 
 Tabla 1. Resultados de germinación de semillas de Ébano a partir del 
19/09/2018. 
Especi
e 
Tratamient
o 
Total 
semillas 
sembrad
as 
Semillas germinadas Aparición de radícula Aparición de hojas 
Dí
a 1 
20 
Día
2 
21 
Día 
3 
24 
Dí
a 
4 
2
5 
Día 
5 
26 
Dí
a 
6 
2
7 
Dí
a 
7 
2
8 
Dí
a 
1 
20 
 Día2. 
21 
Día 
3. 
2
4 
Día 
4. 
2
5 
Dí
a 
5. 
2
6 
Dí
a 
6. 
2
7 
Dí
a 
7. 
2
8 
Dí
a 
1. 
2
0 
Día
2. 
21 
Día 
3. 
2
4 
Día 
4. 
2
5 
Día 
5. 
2
6 
Dí
a 
6. 
2
7 
Dí
a 
7. 
2
8 
Évano 
T0 (Testigo) 80 0 0 
 
0 0 
 
0 0 
 
T1 
(Escarficac
on y 
remojo con 
acdo 
gberelico 
24H/100 
semillas) 100 0 0 
 
0 0 
 
2 0 0 
 
 
 
T2 
escarificaci
ón 100 0 0 
 
0 0 7 23 
 
36 47 0 0 
 
Especi
e Tratamiento 
Total 
semillas 
sembrada
s 
Semillas germinada s Aparición de radícula Aparición de hojas 
Dí
a 
8. 
0
1 
Día
9. 
02 
Día1
0 
. 03 
Dí
a 
11. 
04 
Día1
2 
. 05 
 Dí
a 
8. 
01 
Día9. 
02 
Dí
a 
10. 
03 
Dí
a 
11. 
04 
Dí
a 
12. 
05 
 Dí
a 
8. 
0
1 
Día9
. 02 
Dí
a 
10. 
03 
Dí
a 
11. 
04 
Dí
a 
12. 
05 
 
Évano 
T0 (Testigo) 80 
T1 
(Escarficac
on y 
remojo con 
acdo 
gberelico 
24H/100 
semillas) 100 
 
8 
 
35 56 85 86 86 
 
8 
 
7 
 
T2 
escarificació
n 
100 40 70 60 67 69 70 40 70 
Especie Tratamiento 
 
% Germinación 
 
Ébano 
T0 (Testigo) 0 
T1 (Escarificación y remojo 
con ácido giberelico 24H/100 
semillas) 
 
8 
T2 escarificación 70 
 
Descripción: Como podemos observar en la Tabla.1 las semillas de Ébano fueron 
sometidas a tres tratamientos siendo su fecha de siembra en cajas de petri el día 
19/09/2108, las mismas mostraron una diferencia significativa en la aparición de 
radícula en las cuales el T0 es igual a 0 el T1 igual a 86 y el T2 igual a 70 situación 
similar sucedió en la aparición de plantas con sus primeras hojas de los cuales el T0 
igual a 0 el T1 igual 58 y el T2 igual 70, los mismos son datos acumulados que se 
tomó hasta el día Viernes 05/10/2018 dándonos como resultado un porcentaje de 
germinación en el T0 igual a 0% el T1 igual a 58% y T2 igual 70%, tomando en cuenta 
que en el T1 se cambió de tratamiento el día 25/09/2018 porque la cáscara de las 
semillas estaba demasiado contaminada por presencia de hongos continuándose con 
su siembra el día 26/09/2018 y concluyéndose con su monitoreo al mismo tiempo que 
los demás. 
Como dato adicional cabe señalar que se realizó ensayos de germinación con cuatro 
especies de semillas de las cuales las únicas que presentaron resultados hasta el día 
05/10/2018 que fue nuestro último día en las pasantías, fueron las de ébano a mas mencionar 
que pasados 3 días en el T1 se ha presentado un porcentaje de germinación del 58%. 
 Resultados para el segundo Objetivo. 
Tabla 2. Monitoreo a partir de la resiembra del 17/09/2018. 
Código Especie 
 Largo de raiz 
principal. 
 
S1 L. 17 S1 V. 21 S2 L. 24 S2 V. 28 S3 L. 01 S3 V. 05 
G2A 
Faique 3,6 4,1 4,1 5,3 5,3 5,7 
Café 4,5 4,5 4,5 7,4 8 8,2 
G3A 
Cashco 17,3 17,3 17,3 17,3 17,3 17,3 
Aravisco 20 20 20 20 20 20 
G4A 
Cedro1 2,5 2,5 2,5 3,6 3,6 3,6 
8 
 
Cedro2 5 5 5 7,6 7,6 7,6 
G1B 
Pino 17 17 17 17 17 17 
Leucaena 28 29,4 29,7 30,4 30,4 30,9 
G2B 
Cedro 4 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 
Guararo 2,5 2,52 2,52 4,5 4,5 5,2 
G3B 
Leucaena 7,5 7,7 7,7 7,7 7,7 7,7 
Cedro1 6 6,4 6,4 6,4 6,4 6,4 
Cedro2 10 12,5 12,5 12,6 12,6 12,6 
G4B 
Café 4,5 7,6 7,6 7,6 7,6 7,6 
Cedro 2,8 4,5 4,5 4,5 4,5 4,5 
G5B 
Café 9,3 9,5 9,7 9,7 9,7 9,7 
Guararo 4 6 10,9 12,3 12,3 12,3 
 
Figura 1. Largo de raíz principal. 
Descripción: Como se puede observar en la Tabla 1. Los nombres de las especies de 
color verde son aquellas que fueron resembradas dándonos un total de 7 plántulas que 
se resembraron, en la misma y pudiendo evidenciar en la Figura 1. El crecimiento 
radicular ha sido progresivo en la mayoría de las especies sembradas desde el inicio 
ya que en las resembradas no se observa un crecimiento radicular significativo 
mismas de las cuales se continuo su monitoreo a partir del día 17/09/2018 y se 
9 
 
culminó el día 05/10/2018, en el cual se identificó que el mayor crecimiento radicular 
se dio en la especie G1B Leucaena con 30,9 y la de menor crecimiento en la especie 
de G4A Cedro 1 con 3,6. 
Tabla 3. Largo de raíces secundarias en rizotrones. 
 Largo de Raices secundarias (cm) 
 S1 L. 17 S1 V. 21 S2 L. 24 S2 V. 
28 
 S3 L. 01 S3 V. 05 
Faique 0 0 0 1,9 2,4 2,4 
Café 0 0 0 0 0 0 
Cashco 0 0 0 0 0 0 
Aravisco 0 0 0 0 0 0 
Cedro1 0 0 0 0,4 0,4 0,4 
Cedro2 0 0 0 1 1 1 
Pino 0 0 0 0 0 0 
Leucaena 0 0 0 0 0 0 
Cedro 0 2,2 2,2 2,2 2,2 2,2 
Guararo 0 0 0 0 0 0 
Leucaena 0 0 0 0 0 0 
Cedro1 0 0 0 0 0 0 
Cedro2 11,5 15,6 15,6 15,6 15,6 15,6 
Café 0 0 0 0 0 0 
Cedro 0 0 0 0 0 0 
Café 0 0 0 0 0 0 
Guararo 0 2,6 2,8 3,8 3,8 4,4 
10 
 
 
Figura 2. Largo de raíces secundarias. 
Descripción: Como podemos evidenciar tanto en la Tabla 2. Como en la Figura 2. Se 
presenta crecimiento radicular secundario tan solo en seis especies forestales mismas 
en las cuales se continuo su monitoreo desde el día 17/09/2018 hasta el 05/10/2018 
en donde el mayor crecimiento de raíz secundaria se presentó G3B Cedro 2 con 15,6. 
 
Tabla 4. Altura de las plántulas en rizotrones. 
 Altura foliar en (cm). 
 S1 L S1 V S2 L S2 V S3 L S3 V 
Faique 4,2 4,8 5,5 6,1 6,2 6,2 
Café 4 4 4 4,5 4,8 4,8 
Cashco 4 4 4 4,1 4,3 4,4 
Aravisco 2 2 2,5 2,6 3 3,5 
Cedro1 10 10,7 11 11,6 11,9 12,5 
Cedro2 6 6,8 7,7 7,8 8 9,1 
Pino 1,5 3 3,7 4,5 4,6 4,7 
Leucaena 2 3 3 3,7 3,9 4 
Cedro 8 8,8 8,8 9 9,4 10,2 
Guararo 3 3,6 3,6 4,2 4,5 4,6 
11 
 
Leucaena 5,5 6,4 6,5 6,8 7 7,1 
Cedro1 8,5 8,9 9 9,3 9,4 9,5 
Cedro2 6,9 7,5 7,8 8,3 8,5 8,6 
Café 3,5 4,5 4,6 5 5,1 5,2 
Cedro 3,5 3,5 3,5 3,6 3,7 3,9 
Café 5,8 5,8 5,8 5,8 6 6 
Guararo 2,3 3,4 3,4 3,8 3,9 4 
 
Figura 3. Altura de las plántulas en (cm). 
Descripción: Como podemos observar en la Tabla 3. Así como en la Figura 3. Se 
muestra un crecimiento progresivo de la altura de las plántulas tanto de las que fueron 
sembradas desde el inicio como las plántulas que fueron resembradas el día 
17/09/2018 hasta el último monitoreo que se realizó el 05/10/2018. 
La planta que mayor desarrollo presento en la parte área corresponde al cedro 1 que 
finalmente tuvo 12.5 cm correspondiente al rizotrón con código G4A y el cedro que 
corresponde al rizotrón con código G2B, es el segundo que más ha crecido con una 
altura de 10.2. 
 
 
 
 
 
12 
 
 Resultados para el tercer Objetivo. 
Tabla 5. Monitoreo del banco de semillas natural para evaluar el número de 
especies e individuos que se presentaron. 
 
Número inicial de 
plantas: 914 
 
Número 
de plantas 
Número de 
especies 
alcanzadas 
21 DE 
SEPTIEMBRE DEL 
2018 939 8 
24 DE 
SEPTIEMBRE 1051 8 
28 DE 
SEPTIEMBRE 1079 8 
1 DE OCTUBRE 1113 8 
5 DE OCTUBRE 1122 8 
 
Figura 4. Número de especies e individuos que se presentaron en el banco de 
semillas. 
Descripción: El resultado final del banco de semillas, tras la última evaluación 
realizada el 5 de octubre, es de 1122 individuos, de una manera general 8 especies 
fueron encontradas. 
Algunas plantas eran muy pequeñas y con características similares por lo que se tenía 
que esperar hasta que se desarrolle más y poder ponerla dentro de la misma o diferente 
especie. 
La importancia de la biodiversidad radica también en los impactos quetiene sobre el 
medio ambiente. Varios procesos y factores que forman parte de la biodiversidad 
hacen posible el balance de los gases que existe en la atmósfera, el cual, a su vez, 
determina el comportamiento del clima. Si no existiera esa gran diversidad, las 
características de la atmósfera y del clima serían diferentes. 
13 
 
 
 
Conclusiones: 
• Al realizar el procesamiento de muestras para ensayos de germinación de 
semillas se cumplió con la metodología establecida para el éxito del trabajo. 
• Se consiguió hacer de los protocolos un hábito que impulsan la calidad de 
las prácticas y por ende de sus resultados. 
• Se logró evidenciar la dinámica del crecimiento radicular y foliar de 
especies forestales con la utilización de rizotrones. 
• Así mismo se fortaleció destrezas y habilidades adquiridas a lo largo de 
nuestro desarrollo y preparación pre-profesional. 
Recomendaciones 
• Se recomienda tener especial cuidado con cada una de las muestras para 
evitar así su contaminación durante el proceso de germinación, esto se logra 
realizando una desinfección adecuada de las muestras y del material utilizado. 
• Al momento de la resiembra de plántulas en rizotrones se recomienda que 
en lo posible la raíz este junto al vidrio para poder observar de mejor manera 
su crecimiento. 
• Se recomienda que en lo posible las autoridades pertinentes realicen los 
respectivos trámites para la legalización de laboratorios como el de Fisiología 
Vegetal ya que contribuyen a que se obtenga un aprendizaje significativo en 
nuestra formación académica y de esta manera poder aplicar dichos 
conocimientos en el ámbito laboral. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
14 
 
 Anexos: 
A1. Fotografías de las prácticas Pre-profesional 
 
 
Fig.1. Selección de semillas Fig.2. Esterilización de materiales. 
 
 
 
 
 
 
 
Fig.3. Desinfección de semillas 
 
Fig.4. Tratamientos para las semillas 
 
 
15 
 
 
 
 
Fig.5. Siembra de semillas 
 
 
Fig.6. Semillas dentro del germinador. 
 
 
 
 
Fig.7. Aparición radicular. Fig.8. Germinación de semillas. 
 
 
 
16 
 
Fig.9. Traspaso de semillas germinadas 
a bandejas desechables. 
 Fig.9. Limpieza del germinador por 
infección de hongos. 
 
 
 
Fig.10. Plántulas muertas 
 en rizotrones. 
 
 
 
Fig.11. Reposición de plántulas en 
rizotrones. 
 
 
 
 
Fig.12. Monitoreo del 
crecimiento radicular 
en rizotrones. 
 
 
 
Fig.13. Monitoreo del crecimiento en 
altitud de plantulas en rizotrones. 
 
 
 
 
 
 
 
 Fig.14. Toma de datos y etiquetado de bancos de semillas. 
 
 
 
 
 Fig.15. Paso de información de banco de simillas a una base de datos.