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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA TEMA: ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP COMO SOLUCIÓN A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO MODALIDAD: INVESTIGACIÓN LÍNEA DE INVESTIGACIÓN SALUD HUMANA, ANIMAL Y DEL AMBIENTE SUB-LÍNEA DE INVESTIGACIÓN BIOQUÍMICA CLÍNICA AUTORAS: CARDENAS BARRAGÁN NELLY ALEXANDRA LUCIN ESTACIO CLARA BERENICE TUTOR: Q.F. JOSÉ ZAMORA LABORDE M.SC. PERÍODO ACADÉMICO 2020 – 2021 GUAYAQUIL – ECUADOR XIII REPOSITORIO NACIONAL EN CIENCIA Y TECNOLOGÍA ANEXO XI.- FICHA DE REGISTRO DE TRABAJO DE TITULACIÓN TÍTULO Y SUBTÍTULO: ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP COMO SOLUCIÓN A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO AUTOR(ES) (apellidos/nombres): CARDENAS BARRAGÁN NELLY ALEXANDRA LUCIN ESTACIO CLARA BERENICE REVISOR(ES)/TUTOR(ES) (apellidos/nombres): Q.F. DANILO VICENTE BARROS SALAZAR M.Sc. (REVISOR) Q.F. JOSÉ ZAMORA LABORDE M.Sc. (TUTOR) INSTITUCIÓN: UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL UNIDAD/FACULTAD: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS GRADO OBTENIDO: TERCER NIVEL – QUÍMICO Y FARMACÉUTICO FECHA DE PUBLICACIÓN: 2021 No. DE PÁGINAS: 78 ÁREAS TEMÁTICAS: PALABRAS CLAVES/ KEYWORDS: Remoción, biosorción, metales pesados, Acanthophora spicifera. Removal, biosorption, heavy metals, Acanthophora spicifera. RESUMEN/ABSTRACT (150-250 palabras): Las transaminasas séricas son indicadores sensibles de lesión hepática. Los indicadores que se presentan con mayor frecuencia para conocer el daño o la disfunción de los hepatocitos son la glutámico pirúvica transaminasa (TGP) y la glutamico oxalacetico transaminasa (TGO). El presente trabajo tiene como objetivo la realización de un estudio comparativo de TGO y TGP mediante rangos, en pacientes entre 35 y 50 años que presenten problemas hepatocelulares en la clínica San Rafael de Milagro.Se empleó el método de estudio descriptivo experimental con un enfoque cuantitativa para lo cual se tomó muestras de sangre (suero) a los pacientes, para luego procesar las muestras en el laboratorio, este proceso tuvo una duración de tres meses (noviembre, diciembre y enero) obteniendo un total de 80 pacientes donde los parámetros evaluados fueron la edad, sexo y mes de estudio, se evaluó frente a parámetros establecidos. Los resultados de la investigación indican que los pacientes de sexo femenino tienen mayor concurrencia con un 52.5%,de pacientes con valores elevado de 38.09% y el sexo masculino con un 47.5% pacientes con valor elevado de un 26.31% respectivamente, se demostró que las enfermedades hepáticas afectan a ambos sexos se recomienda brindar campañas de concientización a la ciudadanía sobre la prevención y control de las enfermedades asociadas, causadas por el aumento en el nivel de las transaminasas. ADJUNTO PDF: X SI NO CONTACTO CON AUTOR/ES: Teléfono: 0991455615 0979466344 E-mail: nelly.cardenasb@ug.edu.ec clara.lucine@ug.edu.ec CONTACTO CON LA INSTITUCIÓN: Nombre: FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Teléfono: (04) 2293680 E-mail: www.fcq.ug.edu.ec FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN mailto:nelly.cardenasb@ug.edu.ec mailto:%20clara.lucine@ug.edu.ec http://www.fcq.ug.edu.ec/ XIV ANEXO VI. - CERTIFICADO DEL DOCENTE-TUTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN Guayaquil, 3 marzo de 2021 Q.F. ZOILA BELLA LUNA ESTRELLA, MSc. VICEDECANA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL Ciudad. – Guayaquil De mis consideraciones: Envío a Ud. el Informe correspondiente a la tutoría realizada al Trabajo de Titulación “ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP COMO SOLUCIÓN A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO” de las estudiantes CARDENAS BARRRAGAN NELLY ALEXANDRA con C.I. 0544699920 Y LUCIN ESTACION CLARA BERENICE con C.I. 0942109968 indicando que han cumplido con todos los parámetros establecidos en la normativa vigente: El trabajo es el resultado de una investigación. El estudiante demuestra conocimiento profesional integral. El trabajo presenta una propuesta en el área de conocimiento. El nivel de argumentación es coherente con el campo de conocimiento. Adicionalmente, se adjunta el certificado de porcentaje de similitud y la valoración del trabajo de titulación con la respectiva calificación. Dando por concluida esta tutoría de trabajo de titulación, CERTIFICO, para los fines pertinentes, que las estudiantes CARDENAS BARRRAGAN NELLY ALEXANDRA y LUCIN ESTACION CLARA BERENICE están aptas para continuar con el proceso de revisión final. Atentamente, Firmado electrónicamente por: JOSE ARCARIO ZAMORA LABORDE Q.F. JOSE ZAMORA LABORDE M.sc. Tutor de trabajo de titulación C.I. 0907008080 Fecha: 03-03-2021 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XV ANEXO VIII.- INFORME DEL DOCENTE REVISOR Guayaquil, 13 de marzo de2021 Q.F. ZOILA BELLA LUNA ESTRELLA, MSc. VICEDECANA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL Ciudad. – Guayaquil De mis consideraciones: Envío a Ud. el informe correspondiente a la REVISIÓN FINAL del Trabajo de Titulación “ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP COMO SOLUCIÓN A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO” de las estudiantes CARDENAS BARRRAGAN NELLY ALEXANDRA con C.I. 0544699920 Y LUCIN ESTACION CLARA BERENICE con C.I. 0942109968. Las gestiones realizadas me permiten indicar que el trabajo fue revisado considerando todos los parámetros establecidos en las normativas vigentes, en el cumplimento de los siguientes aspectos: Cumplimiento de requisitos de forma: El título tiene un máximo de 19 palabras. La memoria escrita se ajusta a la estructura establecida. El documento se ajusta a las normas de escritura científica seleccionadas por la Facultad. La investigación es pertinente con la línea y sublíneas de investigación de la carrera. Los soportes teóricos son de máximo 5 años. La propuesta presentada es pertinente. Cumplimiento con el Reglamento de Régimen Académico: El trabajo es el resultado de una investigación. El estudiante demuestra conocimiento profesional integral. El trabajo presenta una propuesta en el área de conocimiento. El nivel de argumentación es coherente con el campo de conocimiento. Adicionalmente, se indica que fue revisado, el certificado de porcentaje de similitud, la valoración del tutor, así como de las páginas preliminares solicitadas, lo cual indica el que el trabajo de investigación cumple con los requisitos exigidos. Una vez concluida esta revisión, considero que el estudiante está apto para continuar el proceso de titulación. Particular que comunicamos a usted para los fines pertinentes. Atentamente, Firmado electrónicamente por: DANILO VICENTE BARROS SALAZAR Q.F. DANILO VICENTE BARRROS SALAZAR M.sc. C.I. 0907792519 Fecha: 13-03-2021 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XVI ANEXO VII.- CERTIFICADO PORCENTAJE DE SIMILITUD Habiendo sido nombrado Dra. Alexandra Quesada Delgado, Mg., tutor del trabajo de titulación certifico que el presente trabajo de titulación ha sido elaborado por las estudiantes CARDENAS BARRRAGAN NELLY ALEXANDRA con C.I. 0544699920 Y LUCIN ESTACION CLARA BERENICE con C.I. 0942109968., con mi respectiva supervisión como requerimiento parcial para la obtención del título de Químico Farmacéutico. Se informa que el trabajo de titulación: “ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP COMO SOLUCIÓN A PROBLEMAS HEPATOCELULAREN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO”. ha sido orientado durante todo el periodo de ejecución en el programa antiplagio URKUND quedando el 7% de coincidencia. Atentamente, Firmado electrónicamente por: JOSE ARCARIO ZAMORA LABORDE Q.F. JOSE ZAMORA LABORDE M.sc. Tutor de trabajo de titulación C.I. 0907008080 Fecha: 03-03-2021 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XVII Atentamente, Firmado electrónicamente por: JOSE ARCARIO ZAMORA LABORDE Q.F. JOSE ZAMORA LABORDE M.sc. Tutor de trabajo de titulación C.I. 0907008080 Fecha: 03-03-2021 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XVIII APROBACIÓN DEL TUTOR Guayaquil, 3 de marzo del 2021 En calidad de tutor del Trabajo de Titulación, Certifico: Que he asesorado, guiado y revisado el trabajo de titulación en la modalidad de investigación, cuyo título es: ““ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP COMO SOLUCIÓN A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO” presentados por las estudiantes CARDENAS BARRRAGAN NELLY ALEXANDRA con C.I. 0544699920 Y LUCIN ESTACION CLARA BERENICE con C.I. 0942109968., previo a la obtención del título de Químicos y Farmacéuticos. Este trabajo ha sido aprobado en su totalidad y se adjunta el informe de Antiplagio del programa URKUND, quedando el 7 % de coincidencia. Lo Certifico: Atentamente, Firmado electrónicamente por: JOSE ARCARIO ZAMORA LABORDE Q.F. JOSE ZAMORA LABORDE M.sc. Tutor de trabajo de titulación C.I. 0907008080 Fecha: 03-03-2021 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XIX CERTIFICACIÓN DEL TUTOR REVISOR Guayaquil, 13 de marzo del 2021 Habiendo sido nombrado Q.F. DANILO VICENTE BARRROS SALAZAR tutor revisor del trabajo de titulación ““ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP COMO SOLUCIÓN A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO” certifico que el presente trabajo de titulación elaborado por CARDENAS BARRRAGAN NELLY ALEXANDRA con C.I. 0544699920 Y LUCIN ESTACION CLARA BERENICE con C.I. 0942109968., DIANA CAROLINA QUIÑONEZ PEREA con C.I. 0931375422 y CINTHYA MELANIA VALENCIA RODRIGUEZ C.I. 0956296313, con mi respectiva supervisión como requerimiento parcial para la obtención del título de Químicos y Farmacéuticos, en la carrera de Química y farmacia de la facultad de Ciencias Químicas, ha sido REVISADO Y APROBADO en todas sus partes, encontrándose apto para su sustentación. Atentamente, Firmado electrónicamente por: DANILO VICENTE BARROS SALAZAR Q.F. DANILO VICENTE BARRROS SALAZAR M.sc. C.I. 0907792519 Fecha: 13-03-2021 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XX CERTIFICACIÓN DEL TRIBUNAL ACTA DE REGISTRO DE LA SUSTENTACIÓN FINAL Guayaquil, 26 de marzo 2021 El Tribunal de sustentación del trabajo de titulación de la Srta. CARDENAS BARRAGÁN NELLY ALEXANDRA con C.I 09544699920 y de la Srta. LUCIN ESTACIO CLARA BERENICE con C.I 0942109968 después de ser examinados en su presunción, memoria científica y defensa oral da por aprobado el trabajo de titulación. Mgs. Danilo Barros Salazar Presidente de tribunal Mgs. Ma. Auxiliadora Alarcon Perasso Mgs. Carlos Silva Huilcapi Primer Miembro de tribunal Segundo Miembro de tribunal Ab. Francisco Palomeque Romero, Mg. Secretario general FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XXI ANEXO XII.- DECLARACIÓN DE AUTORÍA Y DE AUTORIZACIÓN DE LICENCIA GRATUITA INTRANSFERIBLE Y NO EXCLUSIVA PARA EL USO NO COMERCIAL DE LA OBRA CON FINES NO ACADÉMICOS Nosotros CARDENAS BARRAGÁN NELLY ALEXANDRA con C.I 0954469920, LUCIN ESTACIO CLARA BERENICE con C.I 0942109968, certificamos que los contenidos desarrollados en este trabajo de titulación, cuyo título es “ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP COMO SOLUCIÓN A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO” son de nuestra absoluta propiedad y responsabilidad, en conformidad al Artículo 114 del CÓDIGO ORGÁNICO DE LA ECONOMÍA SOCIAL DE LOS CONOCIMIENTOS, CREATIVIDAD E INNOVACIÓN*, autorizo/amo la utilización de una licencia gratuita intransferible, para el uso no comercial de la presente obra a favor de la Universidad de Guayaquil. NARANJO PINEDA ROXANA YAMILETH C.I. No.: LUCIN ESTACIO CLARA BERENICE C.I. No.: 0942109968 CARDENAS BARRAGÁN NELLY ALEXANDRA con C.I N° 0954469920 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XXII DEDICATORIA La presente Tesis está dedicada con mucho amor a mi mamá Lcda. Med. Petita Barragán Naranjo. Han pasado varios años en la cual siempre has estado para mí incondicionalmente y mereces lo mejor del mundo. Ya que me has enseñado que a base de trabajo y sacrificios todo se puede lograr. Brindándome tu amor, apoyo y hoy por hoy, soy lo que soy por ti Mamá. Supiste sembrar en tierra fértil y aquí están tus frutos. Tantas noches de desvelos ayudándome, viendo que nada me faltara, teniéndome todo listo para que yo pueda viajar. Que gran esfuerzo has hecho desde que tengo memoria y lo has sido todo. Con tu responsabilidad en tu trabajo para sacarnos adelante, cumpliendo dobles jornadas de trabajo para que nada me falte. Así enviándome a Guayaquil para que pueda prepararme como química farmacéutica. Tu bendición cada noche y en oración cada mañana me acompañaba a cumplir mis tareas, por eso este trabajo te lo dedico Mamita Bella. Te amo Y parte de este gran trabajo de Tesis lo dedico también a mi Bello Ángel (+) mi papi Lcdo. José Rafael Barragán aquella promesa esta saldada Te amo. NELLY ALEXANDRA CÁRDENAS BARRAGÁN XII DEDICATORIA Llena de regocijo de amor y esperanza dedico la presente tesis a Dios que me ha brindado la fortaleza de persistir cuando he estado a punto de rendirme. De igual forma a mi madre Patricia Estacio a quien le debo toda mi vida ya que con sus palabras de aliento no me dejaba decaer para que siguiera adelante y siempre sea perseverante y cumpla con mis ideas. A mis hermanos Lady, Karelis, Jordán y Josthyn, mis tíos y primos en especial a mi prima Vanessa gracias por ser parte de mi vida y por permitirme ser parte de su orgullo y sin dejar atrás a mis mejores amiga Amanda y María quien siempre me apoyaron y ayudaron. CLARA BERENICE LUCIN ESTACIO XIII AGRADECIMIENTO Este trabajo de tesis ha sido una bendición de DIOS al cual le agradezco por guiarme día a día en mis viajes de Milagro a Guayaquil, protegiéndome de todo mal y llevándome sana y salva a mi hogar. Dentro de este andar, doy gracias a mis padres, mis hermanos. Con gran amor a mi Mamá Nelly que día a día me levantó con su manera única, teniéndome paciencia y cuidándome de que me vaya bien en la universidad. Agradezco de corazón a mi esposo Henry Joan Salazar Delgado por ser un pilar fundamental, apoyándome emocionalmente, motivándome a no dejar mi carrera. Pese las dificultades que se me presentaron. A mi amor chiquito mi hijo Henry Rafael Salazar, que ha sido mis fuertes ganas de salir adelante, así como mi Mamá me enseñó. A mi compañera de tesis Clara Lucin Estacio le agradezco sus largos viajes para poderrealizar nuestra tesis por su dedicación y paciencia. A mi tutor Q.F. José Zamora, M.Sc. por todo lo brindado al ayudarnos a realizar la tesis Este ha sido un largo y gran camino de recorrido y agradezco de todo corazón a todas estas bellas personas importantes en mi vida por su gran apoyo incondicional. NELLY ALEXANDRA CARDENAS BARRAGAN XIV AGRADECIMIENTO Mi eterno agradecimiento a Dios por ser mi guía y fortaleza por cuidarme día a día y estar presente en todas mis etapas de la vida. Le agradezco a mi madre Patricia Estacio ya que no ceso de decir que es gracias a ti que esta meta está cumplida, a mis hermanos gracias por desvelarse acompañándome para realizar mis estudios, a mis tíos y primos. A mi tutor Q.F. José Zamora, M.Sc. por su paciencia y dedicación en el transcurso de este proyecto. A mi compañera de tesis Nelly Cárdenas por aguantar mis exigencias y tantas noches de desvelos, rindieron frutos. A mi gran amiga y hermana Amanda por siempre estar en las buenas y malas, gracias por tu apoyo incondicional. Y para finalizar agradezco a todos mis docentes y compañeros de clase durante todos mis niveles universitarios. CLARA BERENICE LUCIN ESTACIO XV ÍNDICE GENERAL ÍNDICE GENERAL ............................................................................................... XV ÍNDICE DE TABLAS ........................................................................................... XIX ÍNDICE DE FIGURAS .......................................................................................... XX ÍNDICE DE DIAGRAMA....................................................................................... XX INTRODUCCIÓN .................................................................................................... 1 CAPÍTULO I: PROBLEMA ..................................................................................... 3 I.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................................ 3 I.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA .................................................................... 4 I.3 JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA ................................................................... 4 I.4 HIPÓTESIS ........................................................................................................ 5 I.5 OBJETIVOS ....................................................................................................... 5 I.5.1 OBJETIVO GENERAL............................................................................ 5 I.5.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ................................................................... 5 I.6 VARIABLES DE INVESTIGACIÓN..................................................................... 6 CAPÍTULO II MARCO TEÓRICO ........................................................................... 7 II.1 ANTECEDENTES ............................................................................................. 7 II.2 BASES TEÓRICAS ........................................................................................... 8 II.2.1 HÍGADO ................................................................................................. 8 ll.2.1.1 ANATOMÍA DEL HÍGADO ................................................................... 8 ll.2.1.1.1 Lóbulo izquierdo ............................................................................ 9 ll.2.1.1.2 Lóbulo derecho.............................................................................. 9 ll.2.1.2 HISTOLOGÍA DEL HÍGADO ................................................................ 9 XVI ll.2.1.3 CITOLOGÍA DEL HÍGADO ................................................................. 9 ll.2.1.4 FUNCIÓN DEL HÍGADO .................................................................. 10 ll.2.1.4.1 Función metabólica ..................................................................... 10 ll.2.1.4.2 Síntesis de proteínas plasmáticas ............................................... 10 ll.2.1.4.3 Síntesis de ácidos grasos ........................................................... 10 ll.2.1.4.4 Metabolismo de hidratos de carbono .......................................... 11 ll.2.1.4.5 Almacenamiento .......................................................................... 11 ll.2.1.4.6 Detoxificación .............................................................................. 11 ll.2.1.5 UBICACIÓN DE LAS ENZIMAS HEPATOCELULARES ................ 11 ll.2.1.6 MECANISMO DE LIBERACIÓN..................................................... 12 ll.2.1.7 MARCADORES DE DAÑO CELULAR .............................................. 12 ll.2.1.8 HEPATOTOXICIDAD ..................................................................... 13 ll.2.1.9 PRUEBAS HEPÁTICAS .................................................................... 14 ll.2.1.10 TRANSAMINASA ............................................................................ 14 ll.2.1.11 ALANINA AMINOTRANSFERASA (ALT o TGP) ............................. 15 ll.2.1.12 ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST/TGO) ......................... 15 ll.2.1.13 MEDIDAS ........................................................................................ 16 ll.2.1.14 RANGOS DE REFERENCIAS ......................................................... 17 ll.2.1.14.1 Alanina aminotransferasa (TGP) ............................................... 17 ll.2.1.14.2 Aspartato aminotransferasa (TGO) ........................................... 17 ll.2.1.15 FACTORES QUE PUEDEN MODIFICAR LOS RESULTADOS ...... 17 ll.2.1.16 CAUSAS DE RESULTADOS ANORMALES ................................... 17 ll.2.1.17 ESTABILIDAD DEL ANÁLISIS ........................................................ 18 ll.2.1.18 TRASTORNOS HEPÁTICOS .......................................................... 18 ll.2.1.18.1 Hepatitis aguda ......................................................................... 18 ll.2.1.18.2 Hepatitis crónica viral ................................................................ 19 ll.2.1.18.3 Enfermedad hepática alcohólica ............................................... 19 XVII ll.2.1.18.4 Enfermedad hepática no alcohólica .......................................... 19 ll.2.1.18.5 Hepatitis autoinmune ................................................................. 20 ll.2.1.18.6 Enfermedad de Wilson .............................................................. 20 ll.2.1.18.7 Deficiencia de alfa -1-antitripsina .............................................. 21 ll.2.1.18.8 Hemocromatosis hereditaria...................................................... 21 ll.2.1.18.9 Cirrosis ...................................................................................... 21 II.3. MARCO LEGAL GUBERNAMENTAL .................................................... 22 ll.3.1 CONSTITUCIÓN DE LA REPÚBLICA DEL ECUADOR .................... 22 ll.3.1.1Sección primera .................................................................................. 22 ll.3.1.1.1 Educación.................................................................................... 22 ll.3.1.2 Sección segunda ............................................................................... 22 ll.3.1.2.1 Salud ........................................................................................... 22 ll.3.1.3 Sección octava .................................................................................. 23 ll.3.1.3.1 Ciencia, tecnología, innovación y saberes ancestrales ............... 23 ll.3.2 LEY ORGANICA DE SALUD............................................................. 24 ll.3.2.1 CAPITULO I ....................................................................................... 24 ll.3.2.1.1 Del derecho a la salud y su protección ........................................24 ll.3.2.2 CAPITULO I ....................................................................................... 24 ll.3.2.1.1 Disposiciones comunes ............................................................... 24 CAPÍTULO III MATERIALES Y MÉTODOS ......................................................... 26 III.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN.................................................................... 26 III.1.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN ................................................................. 26 III.1.1.1 Descriptiva .................................................................................... 26 III.1.1.2 Experimental ................................................................................. 26 III.1.1.3 Cuantitativa ................................................................................... 27 III.2 MATERIALES ........................................................................................ 27 III.2.1 LUGAR DE INVESTIGACIÓN ............................................................. 27 XVIII III.2.2 PERIODO DE INVESTIGACIÓN ......................................................... 27 III.2.3 RECURSOS EMPLEADOS ................................................................. 27 III.2.3.1 Talento humano ............................................................................... 27 III.2.3.2 Equipos ............................................................................................ 28 III.2.3.3 MATERIALES .................................................................................. 28 III.2.3.3.1 Material biológico ....................................................................... 28 III.2.3.3.2 Materiales de laboratorio ........................................................... 28 III.2.3.4 MUESTRA ........................................................................................ 29 III.2.3.5 REACTIVOS .................................................................................... 30 III.3 METODOLOGÍA EXPERIMENTAL ........................................................ 30 III.3.1 DIAGRAMA DE FLUJO DE ACTIVIDADES REALIZADAS ................. 31 III.4 SELECCIÓN DE POBLACIÓN DE REFERENCIAS .............................. 31 III.4.1 Criterios de inclusión ........................................................................ 31 III.4.2 Criterios de exclusión ....................................................................... 32 III.5 TÉCNICA EXPERIMENTAL ................................................................... 32 III.5.1 DETERMINACIÓN DE ALANINA AMINOTRASFERASA (ALT/GPT) . 32 III.5.1.1 Fundamento .................................................................................. 32 III.5.1.2 Procedimiento ............................................................................... 33 III.5.2 DETERMINACIÓN DE ASPARTATO AMINOTRASFERASA (AST/GOT) .................................................................................................... 33 III.5.2.1 Fundamento .................................................................................. 33 CAPÍTULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIONES ................................................ 35 lV.1 RESULTADOS ....................................................................................... 35 IV.2 DISCUSIÓN ........................................................................................... 44 CAPÍTULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ................................ 46 V.1 CONCLUSIONES ................................................................................... 46 V.2 RECOMENDACIONES ........................................................................... 47 XIX REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍCAS ..................................................................... 48 ANEXOS ............................................................................................................... 52 ÍNDICE DE TABLAS Tabla I. Definición operacional de las variables ................................................. 6 Tabla 2 Cálculos para el tamaño de población ................................................ 29 Tabla 3 Técnica de ALT/GPT ........................................................................... 33 Tabla 4 Técnica aspartato aminotransferasa ................................................... 34 Tabla 5 Resultados de la comparación TGP y TGO en pacientes entre 35 y 50 años en el laboratorio clínico de la Clínica San Rafael de Milagro ................... 35 Tabla 6 Resultados de la comparación de TGO Y TGP según la edad de los pacientes que acuden a la Clínica San Rafael de Milagros.............................. 39 Tabla 7 Resultados de la comparación de TGO Y TGP según el sexo de los pacientes de 35 y 50 años que acuden a la Clínica San Rafael de Milagros ... 40 Tabla 8 Resultados de la comparación de TGO Y TGP en el mes de Noviembre 2020 en los pacientes de 35 y 50 años que acuden a la Clínica San Rafael de Milagros ............................................................................................................ 41 Tabla 9 Resultados de la comparación de TGO Y TGP en el mes de Diciembre 2020 en los pacientes de 35 y 50 años que acuden a la Clínica San Rafael de Milagros ............................................................................................................ 42 Tabla 10 Resultados de la comparación de TGO Y TGP en el mes de Enero 2020 en los pacientes de 35 y 50 años que acuden a la Clínica San Rafael de Milagros ............................................................................................................ 43 XX ÍNDICE DE FIGURAS Ilustración 1 Reacción de ALT/GPT ............................................................... 15 Ilustración 2 Reacción de AST/GOT ............................................................... 16 Ilustración 3 Porcentaje de pacientes según su edad. ................................... 39 Ilustración 4 Porcentaje de pacientes según su genero ................................. 40 Ilustración 5 Porcentaje de los resultados del mes de Noviembre ................. 41 Ilustración 6 Porcentaje de los resultados del mes de Diciembre ................... 42 Ilustración 7 Porcentaje de los resultados del mes de Enero ......................... 43 ÍNDICE DE DIAGRAMA Diagrama 1 Diagrama de flujo de actividades realizadas ................................ 31 XXI LISTA DE ABREVIATURAS Y SÍMBOLOS ASL/TGO: Aspartato aminotransferasa ALT/TGP: alanina aminotransferasa ºC: Grados centígrados EDTA: Ácido etilendiaminotetraacético EE.UU.: Estados unidos LDH: Lactato deshidrogenasa MDH: Malato deshidrogenasa Min: Minutos mmol/L: Milimol por litro n: Muestra N: Población NADH: Nicotinamida adenina dinucleótido NAD+: Nicotin adenin dinucleótido pH: Potencial de hidrógeno P: Probabilidad de aciertos q: Probabilidad de desacierto RPM: Revoluciones Por Minuto T: Temperatura U/L: Unidades por litro UV: Ultravioleta XXII Z: Nivel de confianza GLOSARIO DE TÉRMINOS Cápsula Glisson: es una envoltura fibrosa de colágeno que reviste el espacio exterior del hígado. Caspasas: parentela de enzimas referente a la clase de las cisteín-proteasas. Cetoácidos: son ácidos orgánicos que incluyen un conjunto utilitario cetona y un grupo carboxilo. Citólisis: es el proceso por el cual la célula se rompe, perdiéndose su material genético y deteniendo sus procesos vitales. Citosol: está conformada por fracciones del citoplasma y contiene dentro la membrana plasmática de las células. Endógenos: Que se configura o produce en la parte interna de algo, como la célula que se forma en el interior de otra. Esteatosis hepática: afección producida por hígado graso. Gen ATP7B: es un gen que agrupa lasíntesis del polipéptido beta de la ATPasa transportadora de cobre. Hepatocitos: son las células del hígado y forman aproximadamente el 80 % de este órgano. Hepatopatía: tipo de lesión o enfermedad del hígado. Intransigible: no se puede aceptar, consentir o tolerar Piridoxina: también conocida como vitamina B₆, se encuentra comúnmente en los alimentos. Spigel: lóbulo del hígado situado entre el borde posterior del hilio hepático. XXIII “ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP MEDIANTE LOS RANGOS, FRENTE A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO” Autores: Cardenas Barragán Nelly Alexandra Lucin Estacio Clara Berenice Tutor: Q.F. José Zamora Laborde M.SC. RESUMEN Las transaminasas séricas son indicadores sensibles de lesión hepática. Los indicadores que se presentan con mayor frecuencia para conocer el daño o la disfunción de los hepatocitos son la glutámico pirúvica transaminasa (TGP) y la glutamico oxalacetico transaminasa (TGO). El presente trabajo tiene como objetivo la realización de un estudio comparativo de TGO y TGP mediante rangos, en pacientes entre 35 y 50 años que presenten problemas hepatocelulares en la clínica San Rafael de Milagro.Se empleó el método de estudio descriptivo experimental con un enfoque cuantitativa para lo cual se tomó muestras de sangre (suero) a los pacientes, para luego procesar las muestras en el laboratorio, este proceso tuvo una duración de tres meses (noviembre, diciembre y enero) obteniendo un total de 80 pacientes donde los parámetros evaluados fueron la edad, sexo y mes de estudio, se evaluó frente a parámetros establecidos. Los resultados de la investigación indican que los pacientes de sexo femenino tienen mayor concurrencia con un 52.5%,de pacientes con valores elevado de 38.09% y el sexo masculino con un 47.5% pacientes con valor elevado de un 26.31% respectivamente, se demostró que las enfermedades hepáticas afectan a ambos sexos se recomienda brindar campañas de concientización a la ciudadanía sobre la prevención y control de las enfermedades asociadas, causadas por el aumento en el nivel de las transaminasas. Palabras clave: transaminasas, glutámico pirúvica transaminasa, glutamico FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN XXIV oxalacetico transaminasa. “ESTUDIO COMPARATIVO DE TGO Y TGP MEDIANTE LOS RANGOS, FRENTE A PROBLEMAS HEPATOCELULAR EN PACIENTES ENTRE 35 Y 50 AÑOS EN LA CLÍNICA SAN RAFAEL DE MILAGRO” Autores: Cárdenas Barragán Nelly Alexandra Lucin Estacio Clara Berenice Tutor: Q.F. José Zamora Laborde M.SC. ABSTRACT Serum transaminases are sensitive indicators of liver injury. The indicators that present in a higher frequency to know the damage or dysfunction from hepatocytes are glutamic pyruvic transaminase (GPT) and glutamic oxaloacetic transaminase (GOT). The current project aims to carry out a comparative study of GOT and GPT through ranges, in patients between 35 and 50 years old to present hepatocellular problems in the San Rafael de Milagro clinic. The experimental descriptive study method was used with a quantitative approach thus blood samples were taken (serum) from the patients, by then process the samples in the laboratory, this process had a duration of three months (November, December and January) getting a total of 80 patients where the evaluated parameters were age, sex and month of study, evaluated according to established parameters. The results of the research indicate that female patients have a higher concurrence with 52.5%, of patients with high levels of 38.09% and male patients with 47.5% patients with high levels of 26.31% respectively, it was demonstrated that liver diseases affect both sexes it is recommended to provide citizenship awareness campaign on the prevention and control of associated diseases, caused by the increase in the level of transaminases. Key words: transaminases, glutamic pyruvic transaminase, glutamic oxaloacetic transaminase. FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD DE TITULACIÓN 1 INTRODUCCIÓN El hígado es el órgano más exorbitante del ser humano y de mayor importancia respecto a la acción metabólica que acontece en el organismo. El hígado cumple funciones como la de acaparamiento de glucógeno; anabolismo de ácidos grasos y transformación a cetonas, desarrollo de lipoproteínas, colesterol y fosfolípidos; anabolismo de proteínas plasmáticas, transformación y posterior eliminación de aminoácidos; conversión y acopio de vitaminas; anabolismo de los factores de coagulación y la excreción de hormonas (García & Zurita, 2020). En la actualidad la deficiencia de los cuidados de los problemas hepatocelulares provoca que se manifiesten situaciones patológicas en el organismo. El hígado se ha denominado ciertamente la apoteca del organismo debido a que es responsable de modificar los elementos nutritivos que obtienen de la asimilación intestinal en otras aptas para ser empleadas por diversos órganos y tejidos asimismo el hígado elabora sustancias como proteínas y varios de los factores de coagulación. Igualmente, el hígado puede obtener y altera en inocua algunas sustancias tóxicas y excretarlo con las bilis (Monés, 2012). A través de análisis que advierten de traumatismo hepatocelular o rompimiento de las células sobresalen las transaminasas o aminotransferasas. Las cuales sustituyen a las enzimas del metabolismo de intervalo, que estimulan el traspaso de grupos amino por ácido aspártico o alanina al ácido acetoglutárico, creando el ácido oxalacético y ácido pirúvico. En el hígado elabora diversas respuestas para la transferencia de grupos aminos, pero las únicas transaminasas de importancia médicas son el aspartato aminotransferasa con una semivida de cuarenta y ocho horas, a la vez que la 2 alanina aminotransferasa tiene una semivida de dieciocho horas (García & Zurita, 2020). La alanina aminotransferasa tiene mayor especificación de traumatismo hepático que el aspartato aminotransferasa, puesto que la ALT se sitúa únicamente en el citosol del hepatocito, mientras tanto la AST, también está presente en el citosol y mitocondria, se localiza en el corazón, tejido muscular esquelético, otros órganos, glándulas, y células sanguíneas (García & Zurita, 2020). Investigaciones epidemiológicas ha revelado evidencia de que las transaminasas prominentes son un distintivo seguro de aparición de grasa periférica, o hígado graso y en ocasiones un marcador de peligro de diabetes. Un incremento de la transaminasa duplicara el límite elevado del rango estándar se reafirmada con la resolución que debe determinarse antes del comienzo de otro análisis adicional, que pueden cambiar la acción enzimática sin que exista traumatismo hepático (Martin, 2012). 3 CAPÍTULO I: PROBLEMA I.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA La alanina aminotransferasa TGP es una enzima que estimula el traspaso de grupos amino para formar el metabolito oxalacetato la cual se halla en gran cantidad en el citoplasma de los hepatocitos (Tejos, et al., 2013). En diversos tejidos del organismo, como el hígado, corazón, músculos, riñones y el cerebro se hallan de forma concurrente el GTO. Algunos de estos órganos o tejidos se hallan alterados por un trauma o por una enfermedad (Durani, 2014). En la actualidad la determinación de transaminasas TGO y TGP se encuentra entre análisis de apoteca más efectuado, la mayoría de los análisis se detectan de forma fortuita en pacientes sin manifestaciones de enfermedades hepáticas o biliares, estas enzimas se localizan principalmente en el hígado, musculo y miocardio. Más del 90% de los casos se origina poruna hepatitis aguda viral, excesivo consumo de alcohol, cirrosis y todas aquellas enfermedades en las que se depositan sustancias en el hígado de forma excesiva, como la grasa. Las personas de 35 a 65 años de edad tienden a tener complicaciones ya que su funcionamiento cambia en esta etapa de la vida. Ya que no es el mismo desarrollo de una persona joven, a un adulto mayor. Por falta de actividad física e ingesta de mala alimentación se afecta progresivamente nuestro órgano principal de vida como lo es el corazón e hígado. Las muestras empíricas de traumatismo hepatocelular in vivo o in vitro son empleados para entender el progreso de la muerte celular y reconocer zonas curativas para los traumatismos hepáticas. Pero el interés de las consecuencias obtenidas de forma empíricas la cual se analizada en las diversas disposiciones medicas de hepatopatía (Megan, 2016). En el hígado la aparición de la muerte celular indica las presencias de una colocación focal, en tanto que la necrosis hepatocelular muestra una conducta 4 del área. Pese a la selección evidente efectuada entre apoptosis y necrosis, en el hígado acostumbran cohabitar ambos arquetipos de muerte celular por un igual incentivo es apto para incitar la apoptosis o necrosis conforme el arquetipo celular perjudicado, el nivel de exhibición, la disposición metabólico celular que contribuye en la muerte celular (Jhonns, 2015). Esta problemática que se expone es un inconveniente que no se logra solucionar espontáneamente, si no que requiere que los pacientes implementen los debidos tratamientos y recomendaciones. I.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA ¿Cómo incide el estudio de pruebas bioquímicas TGO y TGP en pacientes de 35 a 50 años en la clínica San Rafael en Milagro? I.3 JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA Se lleva a cabo un estudio comparativo entre los rangos de las pruebas de TGO y TGP, como causante daño hepático; debido a que en la actualidad los análisis de transaminasas, se encuentra entre las pruebas más efectuadas, debido a que estas enzimas evalúan la salud del hígado, cuando hay lesiones hepáticas sus rangos tienden a elevarse, ya sea por una lesión hepatocelular, hepatitis, cirrosis o presencia de grasa en el hígado. Gran cantidad de los traumatismos hepáticos pueden exhibirse de manera inesperada en pacientes sin presencia de enfermedades hepáticas o biliares, estas enzimas se localizan sobre todo en el hígado, musculo y miocardio. Los datos recogidos de la determinación de transaminasas realizados a los pacientes de 35 a 50 años de la clínica San Rafael de Milagro, servirán como apoyo al doctor para el pronóstico, terapia y prevención de traumatismo ligadas 5 a las transaminasas TGO y TGP, debido a que estos análisis clínicos no se pueden producir a simple vista, ya que algunos de los pacientes no presentan sintomas. I.4 HIPÓTESIS Los pacientes de la clínica San Rafael de Milagro presentan lesiones hepatocelulares, verificadas mediante determinación de TGO y TGP. I.5 OBJETIVOS I.5.1 OBJETIVO GENERAL Realizar un estudio comparativo de TGO y TGP mediante los rangos, en pacientes entre 35 y 50 años que presenten problemas hepatocelulares en la clínica San Rafael de Milagro. I.5.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS Comparar los análisis de los pacientes TGO y TGP como expresión bioquímica de daño hepatocelular. Relacionar los resultados obtenidos en los análisis de los pacientes frente a los parámetros establecidos. Determinar las principales causas que originan las enfermedades hepatocelulares. 6 I.6 VARIABLES DE INVESTIGACIÓN Tabla I. Definición operacional de las variables Fuente: Autores (2020) Tipo Variables Descripción Valores D e p e n d ie n te TGO y TGP Exámenes de transferasa diagnostica lesiones hepatocelulares U/L In d e p e n d ie n te Lesiones hepatocelulares La presencia de lesión hepatocelular se da por enfermedades como cirrosis, hepatitis o grasa en el hígado. - 7 CAPÍTULO II MARCO TEÓRICO II.1 ANTECEDENTES El hígado se ha denominado adecuadamente el laboratorio del organismo ya que se tiene la responsabilidad de modificar los elementos nutritivos que se obtiene de la absorción intestinal la cuales son utilizadas por diversos órganos y tejidos además el hígado elabora sustancias como proteínas y algunos factores de coagulación. Además puede atraer y modificar ciertas sustancias tóxicas una ingerida y otras procedentes de la luz intestinal y eliminando las con las bilis (Monés, 2012). Los traumas o daño hepático provocados por la presencia de medicamento u otros agentes no farmacológicos como la edad, género, consumo de alcohol, tabaquismo, fármacos, enfermedad hepática previa o subyacente, factores genéticos y ambientales se consideran factores de riesgo (Cano, Cifuentes, & Amarile, 2017). Parodi (2017) refiere que los traumas hepatocelulares tiene un mal pronóstico debido a que en el año 2010 se generaron 748 300 casos a nivel mundial, los cuales causaron 695 900 muertes (92.9 %) en la cual la población masculina es la más afectada por esta patología y en países de tercer mundo la tasa de incidencia es de 17.4% y la población femenina es de 8.7% con una tasa de mortalidad de 16.8% y 8.1%. En EE.UU. se reporta una repercusión de 4.9 casos por 100 mil habitantes, pero solo en el 50% de los casos se define la etiología asociada a cirrosis hepática. En España con una incidencia de 8.2% por 100 mil habitantes, se establece la etiología en el 70 % de los casos en un hígado cirrótico. China reporta aproximadamente el 50 % de los casos mundiales con una incidencia 7.1% en la población masculina, y con una fuerte carga genética debido a la alta incidencia en descendientes Chinos que habitanen el extranjero, sin embargo en Latinoamérica la relación hombre y mujer es de 1.1% de los casos. 8 Según datos del Instituto Nacional de Estadísticas y Censos (INEC) Cerca de 2.500 personas fallecieron en Ecuador en el 2016 a consecuencia de la cirrosis hepática y la formación de cicatrices en el hígado causada por diversas afecciones y enfermedades hepáticas, como las hepatitis y el alcoholismo crónico. Este mal silencioso es la séptima causa de muerte en el país. (Villarreal , Ruiz, & Montalvo, 2018) II.2 BASES TEÓRICAS II.2.1 HÍGADO ll.2.1.1 ANATOMÍA DEL HÍGADO El hígado lo particulariza dos lóbulos fundamentales (derecho e izquierdo), y dos lóbulos suplementarios (cuadrado y caudado o de Spigel). La anatomía pragmática reseñada recientemente, se fundamenta en la disposición de los pedículos portales y de las venas suprahepáticas en el interior del hígado el cual se divide en dos partes hígados derecho e izquierdo (Castaing & Veilhan, 2006). El hígado se divide en dos sectores (anterior y posterior) y cada sector en dos segmentos, salvo el sector posterior izquierdo, que sólo contiene un segmento; un segmento suplementario rodea la vena cava, por consiguiente, existen ocho segmentos autónomos en el hígado. La anatomía concreta es un poco distinta que la anatomía teórica debido a las numerosas variaciones, puede investigarse por medio de métodos morfológicos o mediante la ecografía peroperatoria (Castaing & Veilhan, 2006). El hígado está compuesto por ocho segmentos funcionales autónomos donde cada segmento está constituido por una rama arterial hepática, una rama de la vena porta y un conducto biliar, y la rama venosa hepática que transporta las secreciones de salida (Iza, 2016). 9 ll.2.1.1.1 Lóbulo izquierdo El segmento II (segmento lateral izquierdo) El segmento III (segmento izquierdo topográfico). El segmento IV (segmento medial) (Sibulesky, 2013). ll.2.1.1.2 Lóbulo derecho El segmento Vy VIII (segmentos anteriores). El segmento VI Y VII (segmentos posteriores). El segmento I (lóbulo caudado) (Sibulesky, 2013). ll.2.1.2 HISTOLOGÍA DEL HÍGADO El hígado es un órgano que está revestido por una cápsula de tejido conjuntivo, la cápsula de Glisson. El parénquima está fraccionado en lobulillos hepáticos, los cuales poseen una estructura hexagonal, y están notablemente limitados por tejido conjuntivo. En el centro del lobulillo se localiza la vena centrolobulillar donde cada zona está conformado por la arteria hepática, vena porta, un vaso linfático y un conductillo biliar (UCM, 2020). ll.2.1.3 CITOLOGÍA DEL HÍGADO Las células hepáticas denominada también hepatocitos tiene una forma poliédrica con un núcleo único y centro uno o varios nucléolos contiene gran cantidad de glucógeno. Dos o más caras de hepatocitos tiene microvellosidades y están en contacto por espacio de polo sinusoidal de 10 hepatocitos las caras restantes están en estrecha con en estrecho contacto con los hepatocitos vecinos que sacaran poseen unos surcos dotados de microvellosidades calzado Unidos delimitan unos canalículos que constituyen los capilares biliares (Segarra, 2006). ll.2.1.4 FUNCIÓN DEL HÍGADO Las funciones del hígado son considerable y complejas se pueden agrupar en dos grupos de síntesis o metabólicas y de excreción (Segarra, 2006). ll.2.1.4.1 Función metabólica ll.2.1.4.2 Síntesis de proteínas plasmáticas Para sintetizar la proteína del hígado utiliza aminoácidos provenientes de los alimentos o del músculo que llega al hígado por la aorta también utiliza aminoácido sintetizados por la propia glándula. La albúmina, proteína transportadora, factores de coagulación, hormonas y factores de crecimiento son sintetizadas por las células plasmáticas (Segarra, 2006). ll.2.1.4.3 Síntesis de ácidos grasos Al convertirse en cetonas forma lipoproteínas, colesterol y fosfolípidos (Carvajal, 2014) 11 ll.2.1.4.4 Metabolismo de hidratos de carbono El hígado es primordial para mantener la glucemia estable y forma glucosa a partir de aminoácidos y lípidos (Segarra, 2006). ll.2.1.4.5 Almacenamiento El hígado actúa como almacenamientos de varias sustancias como almacenamiento de glucógeno por 8 horas, depósito de vitamina liposolubles (A, D y E) y depósito de metales hierro y cobre por meses, depósito de vitamina K por un mes y vitamina B12 por más de un año (Segarra, 2006). ll.2.1.4.6 Detoxificación Diversos fármacos o productos químicos que no son hidrosolubles son trasportado por el plasma por lo que no son filtrada por los riñones entonces el hígado se encarga de oxidar, reducir, hidrolizan o desmetilación para luego volverlos hidrosolubles (Segarra, 2006). ll.2.1.5 UBICACIÓN DE LAS ENZIMAS HEPATOCELULARES Las enzimas hepatocelulares fundamentales se sitúan en distintas zonas del hepatocito, lo que da origen a distintos modelos de liberación de enzimas para diferentes mecanismos de daño. La alanina aminotransferasa (ALT / TGP) y el aspartato aminotransferasa (AST/ TGO) se localizan fundamentalmente en el citosol del hepatocito. Cuando se produce daño a la membrana en el daño 12 hepatocelular agudo, estas enzimas se migran y pasa a las sinusoides, incrementando la actividad en plasma de la TGO y la TGP. El aspartato aminotransferasa mitocondrial migra cuando llega a hallarse daño mitocondrial, como el producido por la ingesta de etanol (Tubetano, 2015). ll.2.1.6 MECANISMO DE LIBERACIÓN Las enzimas migran por los hepatocitos mediante diferentes mecanismos los cuales van a precisar el patrón de incremento de los niveles enzimáticos. El patrón de daño más frecuente es el daño irreversible en la membrana celular que acompaña a la muerte celular, que la traslada para que se filtre las enzimas citoplasmáticas. El alcohol causa rápidamente de descarga de TGO/AST por los hepatocitos y su expresión en la superficie celular. (Tubetano, 2015) ll.2.1.7 MARCADORES DE DAÑO CELULAR Los marcadores más notables de las lesiones celulares son las enzimas citoplasmáticas y mitocondriales. Estas enzimas no son específicas de los hepatocitos, sus niveles suelen incrementarse debido al daño en otros órganos; sin embargo, la causa más común en niveles superiores de TGP son las enfermedades hepáticas (Tubetano, 2015) La TGO/AST citoplasmática produce actividades superiores a los normales en los hepatocitos, con niveles alrededor de 7.000 veces mayor que en plasma. También la TGP/ALT muestra un incremento en la actividad de hepatocitos, con niveles celulares aproximadamente 3.000 veces mayores que en plasma. Cuando existe deficiencia en la síntesis de piridoxina, la síntesis hepática de TGP está afectada; un fenómeno similar se produce en la fibrosis hepática y en 13 la cirrosis .la vida media de la TGO citoplasmática es de 17 ± 3 horas, mientras que la TGP tiene una vida media de 42 ± 11 horas (Tubetano, 2015). Los daños hepatocelulares agudo, al inicio los niveles de TGO será mayor que el de la TGP, debido al incremento de la acción de la TGO en los hepatocitos, luego de 24 a 48 horas persiste el daño, la TGP logra un incremento mayor que la TGO, ya que su vida media es más larga. (Tubetano, 2015) En el caso del daño hepático alcohólico agudo, el incremento de los niveles de TGO permanecen la mayor parte de la vida media de la TGO mitocondrial causa la deficiencia de piridoxina en muchos pacientes. En el daño hepático crónico, los niveles elevados de TGP son más frecuentes que los de TGO; aunque, a medida que avanza la fibrosis, la actividad de la TGP normalmente decrece y la proporción de TGO respecto a la TGP incrementa gradualmente, de tal forma que para el momento en que se presenta la cirrosis, los niveles de TGO son a menudo mayores que los de TGP (Tubetano, 2015). ll.2.1.8 HEPATOTOXICIDAD Son lesiones o daño hepático producidas por la exposición a un medicamento u otros agentes no farmacológicos y factores como la edad, sexo, ingesta de alcohol, nicotismo, fármacos, enfermedad hepática, factores de riesgo como los genéticos y ambientales (Cano, Cifuentes, & Amarile, 2017). Varias de las reacciones desfavorables que afectan al hígado han sido determinadas mediante análisis bioquímicos hepáticos: a) Incremento de alanina aminotransferasa (ALT) superior a dos veces el límite normal (Tejada, 2010). b) Incremento de la concentración de bilirrubina directa sérica más de dos veces el límite normal (Tejada, 2010). 14 c) Incremento de aspartato aminotransferasa (AST), fosfatasa alcalina (FA) y la concentración total de bilirrubina, siempre que uno de ellos supere más de dos veces el límite (Tejada, 2010). ll.2.1.9 PRUEBAS HEPÁTICAS El hígado realiza varias funciones fundamentales en el cuerpo, entre las que se consigue transformar los nutrientes en energía para el cuerpo y disgregar sustancias tóxicas. Se aconseja realizar pruebas hepáticas si tiene indicio de enfermedad del hígado como fiebre, vómito, dolor abdominal, color amarillento en piel u ojos, orina de color amarillo oscuro y cansancio. El análisis de sangre se realiza para medir los niveles de Albumina, Bilirrubina, Proteínas Totales, ALP, AST, ALT (Cigma, 2020). ll.2.1.10 TRANSAMINASA La transaminasa son enzimas claves en la modificación de aminoácidos y sus cetoácidos por traspaso del grupo amino al par formado por el glutamato 2- cetoglutarato. El análisis de esta enzima suele efectuarse en suero, aunque también se puede valorar en plasma conteniendo heparina, oxalato, EDTA O citrato es muy oportuno para diagnosticar de enfermedades hepáticas agudas y crónicas (Roca, Oliver, & Rodríguez, 2004). El incremento sérico de transaminasas se relaciona con el traspaso de la sangre del contenidoenzimático de los hepatocitos afectados, debido al incremento enzimático puede no enlazarse con la gravedad de las lesiones. Se puede estimar que las enfermedades hepáticas son el motivo más importante de la elevación de la actividad de la TGP/ASL y del acrecentamiento de la actividad de la TGO/AST (García & Zurita, 2020). 15 ll.2.1.11 ALANINA AMINOTRANSFERASA (ALT o TGP) La alanina aminotransferasa ALT/TGP es una enzima que cataliza la transferencia de grupos amino para formar el metabolito oxalacetato la cual se localiza en gran cantidad en el citoplasma de los hepatocitos, donde su acción es aproximadamente de 3.000 veces superior que en el suero (Tejos, et al., 2013). El ALT se encuentra aumentar Entre 10 y 100 veces con respecto a los niveles normales en infarto al miocardio, hepatitis vírica, necrosis tóxica hepática y en caso de choque y potencia En caso de daño o muerte hepatocelular, la liberación de ALT desde las células hepáticas incrementa sus niveles séricos (Roca, Oliver, & Rodríguez, 2004). La alanina aminotransferasa (ALT/GPT) fomenta el traspaso del grupo amino de la alanina al cetoglutarato con la elaboración de glutamato y piruvato inmediatamente el piruvato es limitado por el lactato deshidrogenasa (LDH) en presencia del NADH. Las respuestas se observan de forma cinética a 340nm por medio del decrecimiento de la absorbancia resultante (Linear, s.f). Ilustración 1 Reacción de ALT/GPT ll.2.1.12 ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST/TGO) En diversos tejidos del organismo, como el hígado, el corazón, los músculos, los riñones y el cerebro se encuentran presente el AST/GTO. Algunos de estos órganos o tejidos se encuentran alterados por un trauma o por una ALT/GPT L-Alanina + 2-Cetoglutarato L-Glutamato + Piruvato LDH Piruvato + NADH + H+ Lactato + NAD+ 16 enfermedad, se recupera AST/GTO en la circulación sanguíneo. Debido a que el AST/GTO no es un indicador particular de daño hepático, como la ALT/TGP (alanina aminotransferasa), otro tipo de enzima que se ubica más o menos exclusivamente en el hígado (Durani, 2014). La AST/GOT están situados en los hepatocitos los trastornos que afectan a estas células provocan un incremento de dicha enzima este análisis se utiliza para evaluar la sospecha de enfermedades hepatocelulares, la AST se elimina de la sangre después de varios días (Deska , James , & Noel, 2017). La aspartato aminotransferasa (AST /GOT) cataliza la transferencia del grupo amino del aspartato al cetoglutarato con el desarrollo de glutamato y oxalato luego es limitado a malato por la malato deshidrogenasa frente a NADH. Las reacciones se verifican cinéticamente a 340nm por medio del decrecimiento de la absorbancia obtenida (Linear, s.f.). Ilustración 2 Reacción de AST/GOT ll.2.1.13 MEDIDAS Tanto la TGO como la TGP normalmente se miden a través de reacciones acopladas, utilizando el NADH como el resultante de la reacción que se mide. Los reactivos que incluye NH4+ producirán que los niveles de ALT y AST sean falsamente aumentados resultante de la conversión de NADH en NAD por el ion amonio en el proceso de aminación reductiva de α-cetoglutarato y glutamato deshidrogenasa endógena (Tubetano, 2015). AST/GOT L-Aspartato + 2-Cetoglutarato L-Glutamato + Oxalacetato MDH Oxalacetato + NADH + H+ L-MaLato + NAD+ 17 ll.2.1.14 RANGOS DE REFERENCIAS ll.2.1.14.1 Alanina aminotransferasa (TGP) Mínimo: 10 U/L. Máximo: 40 U/L. ll.2.1.14.2 Aspartato aminotransferasa (TGO) Mínimo: 15 U/L. Máximo: 41 U/L. ll.2.1.15 FACTORES QUE PUEDEN MODIFICAR LOS RESULTADOS El ejercicio físico puede aumentar los niveles. El déficit de piridoxina, embarazo, la hepatopatía grave prolongada, la uremia o la cetoacidosis diabética pueden disminuir los niveles. El consumo de fármacos (anticoagulantes, anticonceptivos orales, antihipertensivos, colinérgicos, opiáceos y verapamilo) puede aumentar los niveles (Deska , James , & Noel, 2017). ll.2.1.16 CAUSAS DE RESULTADOS ANORMALES Los motivos fundamentales del incremento de los valores de TGO Y TGP es el daño en los hepatocitos. Los niveles de TGO y, en menor grado, de TGP son incrementados cuando existe daño muscular. El aumento de los valores de TGO asimismo puede verse en pacientes con tumores malignos, aun cuando 18 generalmente los niveles de TGP son menos dispuestos de ser incrementados. Rara vez los infartos de riñón pueden producir niveles altos de TGO y TGP Los valores de estas pueden ser engañosamente bajos en caso de fallo renal, lo que produce problemas en el reconocimiento del daño hepático en los individuos afectados. En la hepatitis viral es característico que los niveles de TGP sean mayores que los de TGO cuando la elevación de transaminasa ocurre con una relación inversa se debe sospechar hepatitis alcohólica (Tubetano, 2015). ll.2.1.17 ESTABILIDAD DEL ANÁLISIS La muestra para TGO/AST y TGP/ALT son permanentes en sangre en un trascurso máximo de 12 o 24 horas, pero incrementa progresivamente luego de este tiempo debido a la liberación desde los glóbulos rojos. La TGO es permanente en suero a temperatura de refrigerador en el transcurso de tres semanas e permanentemente si es congelada. La TGP muestra una consistencia parecida cuando es refrigerada, pero muestra descensos muy claros al ser congelada que dependen del tampón utilizado en el ensayo (Tubetano, 2015). ll.2.1.18 TRASTORNOS HEPÁTICOS ll.2.1.18.1 Hepatitis aguda Es una inflamación del hígado producida por diversos agentes sobre todo ciertos virus, pero también algunos tóxicos y fármacos que le agreden, algún caso persiste más allá de 6 meses llega a ser grave e incluso peligroso para el paciente causándole un fallo hepático fulminante. Las hepatitis agudas de cualquier causa pueden ser poco sintomáticos parecidos a la de una gripe el 19 diagnostico se hace por medio de análisis de sangre en el que hay transaminasas altas más 10 veces la normalidad (Monés, 2012). ll.2.1.18.2 Hepatitis crónica viral Aproximadamente el 0,2% y el 0,9% de la población de USA muestran resultados positivos para el antígeno de superficie de la hepatitis B en sangre, pero, esta incidencia puede ser elevada, logrando incluso el 20% en personas que han transmigrado desde zonas endémicas (García W. , 2013). Los virus B y C de la hepatitis pueden ser transferirás sexualmente, aun cuando es notable que este método es muy poco activo en el caso de la hepatitis C. En áreas endémicas de hepatitis B la infección acontece generalmente en el transcurso del nacimiento (García W. , 2013). ll.2.1.18.3 Enfermedad hepática alcohólica El alcohol puede instigar problemas a nivel hepático depende de factores como la ración y persistencia de la deglución de este, causas genéticas, aspectos con la obesidad, infección por los virus B y C de la hepatitis, la ingesta de varias drogas hepatotóxicas. En la enfermedad hepática alcohólica el daño puede ir desde una esteatosis hepática ligera hasta la cirrosis del hígado (García W. , 2013). ll.2.1.18.4 Enfermedad hepática no alcohólica Este grupo comprende pacientes con una extensa escala de traumas hepático que puede partir desde una esteatosis hepática, transformándose en 20 una esteatohepatitis no alcohólica incluso la cirrosis hepática. La incidencia de esta es de alrededor de un 25% en los habitantes norteamericanos existiendo aún más alta médicas en pacientes con diabetes mellitus y obesidad (García W. , 2013). ll.2.1.18.5 Hepatitis autoinmune La predominación de la hepatitis autoinmune es muy inconstante en lasdiversas áreas geográficas. En Hong Kong el 1% de los casos de hepatitis crónica son correctos para hepatitis autoinmune, pero en Austria y Alemania se han hallado que el 34% al 62% son predominantes entre los pacientes con hepatitis crónica. En Norteamérica la prevalencia estimada de hepatitis autoinmune en pacientes con hepatitis crónica es del 11 al 23% y la incidencia es de aproximadamente 0.68 por cada 100 000 personas por año (García W. , 2013). ll.2.1.18.6 Enfermedad de Wilson Es una enfermedad congénita, difundida por herencia autosómica regresiva es decir heredara a la vez del padre y de la madre. Se distingue por acopio de tóxicos de cobre en el organismo originario de la dieta, esto sucede particularmente en el hígado y en el cerebro. En condiciones normales la mayor parte del cobre ingerido (2-5 mg/día) se elimina por la bilis y sólo una pequeña cantidad por la orina (Moreira & López, 2010). Generalmente el diagnóstico se realiza antes de los 40 años, básicamente en la segunda década de la vida la predominación estimada de esta enfermedad es de 1 en 40 000 a 1 en 100 000. Los análisis genéticos tienen un 21 valor reducido conveniente al gran número de mutaciones que representa al gen ATP7B, el responsable de la enfermedad de Wilson (García W. , 2013). ll.2.1.18.7 Deficiencia de alfa -1-antitripsina La predominación de esta afección es 1 por cada 1700 nacimientos. Esta afección genética es un motivo determinante para identificar enfermedad hepática en infantes y adolescentes, aun cuando existe una pequeña cantidad de pacientes que desarrollan un estadio final de su enfermedad en la adultez (García W. , 2013). ll.2.1.18.8 Hemocromatosis hereditaria La valoración de esta afección debe ser deferente en sucesores del norte de Europa. Los pacientes comúnmente son asintomáticos incluso si los depósitos de hierro producen daño hepático relevante. La flebotomía es una medida terapéutica efectiva para esta enfermedad (García W. , 2013). ll.2.1.18.9 Cirrosis El hígado con cirrosis puede haber una falta de proteína en un descrecimiento de algún factor de coagulación lo que adherido al menor números de plaqueta provoca que el paciente tenga hematomas y heridas de sangre más de lo habitual. La cirrosis hepática también discurre durante períodos extensos de tiempo sin presentar síntomas ya que la destrucción del tejido hepático es tardía y el 80% no desaparece y se modifica en fibrosis (Monés, 2012). 22 II.3. MARCO LEGAL GUBERNAMENTAL ll.3.1 CONSTITUCIÓN DE LA REPÚBLICA DEL ECUADOR ll.3.1.1Sección primera ll.3.1.1.1 Educación Art. 343.- El sistema nacional de educación tendrá como finalidad el desarrollo de capacidades y potencialidades individuales y colectivas de la población, que posibiliten el aprendizaje, y la generación y utilización de conocimientos, técnicas, saberes, artes y cultura. El sistema tendrá como centro al sujeto que aprende, y funcionará de manera flexible y dinámica, incluyente, eficaz y eficiente. El sistema nacional de educación integrará una visión intercultural acorde con la diversidad geográfica, cultural y lingüística del país, y el respeto a los derechos de las comunidades, pueblos y nacionalidades (CRE, 2008, p. 160). Art. 350.- El sistema de educación superior tiene como finalidad la formación académica y profesional con visión científica y humanista; la investigación científica y tecnológica; la innovación, promoción, desarrollo y difusión de los saberes y las culturas; la construcción de soluciones para los problemas del país, en relación con los objetivos del régimen de desarrollo (CRE, 2008, p. 162). ll.3.1.2 Sección segunda ll.3.1.2.1 Salud Art. 358.- El sistema nacional de salud tendrá por finalidad el desarrollo, protección y recuperación de las capacidades y potencialidades para una vida saludable e integral, tanto individual como colectiva, y reconocerá la diversidad 23 social y cultural. El sistema se guiará por los principios generales del sistema nacional de inclusión y equidad social, y por los de bioética, suficiencia e interculturalidad, con enfoque de género y generacional (CRE, 2008, p. 165). Art. 359.- El sistema nacional de salud comprenderá las instituciones, programas, políticas, recursos, acciones y actores en salud; abarcará todas las dimensiones del derecho a la salud; garantizará la promoción, prevención, recuperación y rehabilitación en todos los niveles; y propiciará la participación ciudadana y el control social (CRE, 2008, p. 165). Art. 360.- El sistema garantizará, a través de las instituciones que lo conforman, la promoción de la salud, prevención y atención integral, familiar y comunitaria, con base en la atención primaria de salud; articulará los diferentes niveles de atención; y promoverá la complementariedad con las medicinas ancestrales y alternativas (CRE, 2008, p. 165). ll.3.1.3 Sección octava ll.3.1.3.1 Ciencia, tecnología, innovación y saberes ancestrales Art. 385.- El sistema nacional de ciencia, tecnología, innovación y saberes ancestrales, en el marco del respeto al ambiente, la naturaleza, la vida, las culturas y la soberanía, tendrá como finalidad: 1. Generar, adaptar y difundir conocimientos científicos y tecnológicos. 2. Recuperar, fortalecer y potenciar los saberes ancestrales. 3. Desarrollar tecnologías e innovaciones que impulsen la producción. nacional, eleven la eficiencia y productividad, mejoren la calidad de vida y contribuyan a la realización del buen vivir (CRE, 2008). 24 ll.3.2 LEY ORGANICA DE SALUD ll.3.2.1 CAPITULO I ll.3.2.1.1 Del derecho a la salud y su protección Art. 1.- La presente Ley tiene como finalidad regular las acciones que permitan efectivizar el derecho universal a la salud consagrado en la Constitución Política de la República y la ley. Se rige por los principios de equidad, integralidad, solidaridad, universalidad, irrenunciabilidad, indivisibilidad, participación, pluralidad, calidad y eficiencia; con enfoque de derechos, intercultural, de género, generacional y bioético (LOS, 2017, p. 1) Art. 3.- La salud es el completo estado de bienestar físico, mental y social y no solamente la ausencia de afecciones o enfermedades. Es un derecho humano inalienable, indivisible, irrenunciable e intransigible, cuya protección y garantía es responsabilidad primordial del Estado; y, el resultado de un proceso colectivo de interacción donde Estado, sociedad, familia e individuos convergen para la construcción de ambientes, entornos y estilos de vida saludables (LOS, 2017, p. 2). ll.3.2.2 CAPITULO I ll.3.2.1.1 Disposiciones comunes Art. 12.- La comunicación social en salud estará orientada a desarrollar en la población hábitos y estilos de vida saludables, desestimular conductas nocivas, fomentar la igualdad entre los géneros, desarrollar conciencia sobre la importancia del autocuidado y la participación ciudadana en salud. Los medios de comunicación social, en cumplimiento de lo previsto en la ley, asignarán espacios permanentes, sin costo para el Estado, para la difusión de programas 25 y mensajes educativos e informativos en salud dirigidos a la población, de acuerdo a las producciones que obligatoriamente, para este efecto, elaborará y entregará trimestralmente la autoridad sanitaria nacional. La autoridad sanitaria nacional regulará y controlará la difusión de programas o mensajes, para evitar que sus contenidos resulten nocivos para la salud física y psicológica de las personas, en especial de niños, niñas y adolescentes. (LOS, 2017, p. 6) 26 CAPÍTULO III MATERIALES Y MÉTODOS En el presente capítulo se describen los materiales, parámetros y reactivos que se emplearon para estudiocomparativo de TGO y TGP como solución a problemas hepatocelular en pacientes entre 35 y 50 años en la clínica San Rafael de Milagro. III.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN El presente trabajo investigativo, tiene como tipo de estudio descriptivo experimental con un enfoque cuantitativa ya que permitirá relacionar los valores de transaminasas obtenidos de las muestras analizadas en pacientes entre 35 y 50 años en el laboratorio clínico de la Clínica San Rafael de Milagro basado en técnicas de laboratorio establecidas por la casa comercial de donde provienen los reactivos, para la determinación de TGO y TGP. III.1.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN III.1.1.1 Descriptiva Manifiesta el entendimiento de la existencia tal como se expone en una posición de ámbito y de un periodo determinado donde se percibe y se anota, o se interroga y se escribe (Rojas, 2015). III.1.1.2 Experimental Radica en el manejo de una variable empírica no confirmada, en situaciones minuciosamente ponderado, con la finalidad de explicar de qué forma o debido a qué se desarrolla un suceso especifico (Fernández, 2020). 27 III.1.1.3 Cuantitativa Es aquella que está basada en la recolección y análisis de datos numéricos relacionado sobre las variables (Pita & Pértegas, 2002) III.2 MATERIALES III.2.1 LUGAR DE INVESTIGACIÓN La investigación se realizó en el laboratorio clínico de la clínica San Francisco de la ciudad de Milagros, provincias del Guayas. III.2.2 PERIODO DE INVESTIGACIÓN La presente investigación se realizó durante el mes de noviembre 2020 a febrero de 2021. III.2.3 RECURSOS EMPLEADOS III.2.3.1 Talento humano Autoras Tutor Población en estudio de entre 35 y 50 años. 28 III.2.3.2 Equipos Espectrofotómetro semiautomatizado TEMIS Centrifuga Clay Adams Compact ll Baño de María Geyer Cronómetro III.2.3.3 MATERIALES III.2.3.3.1 Material biológico Suero sanguíneo III.2.3.3.2 Materiales de laboratorio Tubo de ensayo Gradilla Lápiz graso Pipetas automáticas 50 µL Puntas para pipeta automática Torniquete Vacutainers Tubo BD Vacutainers Aguja hipodérmica 29 Toalla absorbente Guantes Cofia Bata de laboratorio III.2.3.4 MUESTRA La resolución de la magnitud de la muestra es fundamental debido a que si captamos una muestra mínima no sería representativa y si captamos una muestra abundante estaremos derrochando recursos (Badii, Castillo , & Guillen, 2017). Tabla 2 Cálculos para el tamaño de población Datos Formula n=? N = tamaño de la población Z = nivel de confianza 95% (1.69) P = probabilidad de éxito, o proporción esperada Q = probabilidad de fracaso D = precisión (Error máximo admisible en términos de proporción). n= 100𝑥 (1.96)2𝑥 (0.5)(0.5) (0.05)2 (100−1)+1.962(0.5)(0.5) n= 96 1.2075 = 80 Fuente: (Badii, Castillo , & Guillen, 2017) La muestra estuvo constituida de 80 pacientes de ambos géneros con edades comprendidas entre 35 y 50 años que acuden a la clínica San Rafael 30 de la ciudad de Milagros, provincias del Guayas, durante mes de noviembre 2020 a enero de 2021. III.2.3.5 REACTIVOS GPT/ALT BR IFCC método enzimático UV. Sustrato Tampón TRIS 150 mmol/L pH 7.3 L-alanina 750 mmol/L. Lactato deshidrogenasa >1350 U/ Coenzimas ALT NADH 1.3mmol. 2-cetoglutarato, 75 mmol/L. GOT/AST BR IFCC método enzimático UV. Sustrato Tampón TRIS 121 mmol/L pH 7.8, L-aspartato 360 mmol/L Malato deshidrogenasa >460 U/L Coenzimas NADH 1.3mmol 2-cetoglutarato, 75 mmol/L. Agua destilada III.3 METODOLOGÍA EXPERIMENTAL 31 III.3.1 DIAGRAMA DE FLUJO DE ACTIVIDADES REALIZADAS Diagrama 1 Diagrama de flujo de actividades realizadas Fuente: Autoras III.4 SELECCIÓN DE POBLACIÓN DE REFERENCIAS III.4.1 Criterios de inclusión Pacientes que acuden a la clínica San Francisco de Milagro de ambos géneros entre 35 y 50 años. 1. Definición del tema de tesis. 2.Planteamiento del problema. 3. Formulación del problema. 4. Planteamiento de objetivos generales y especificos. 5. Elaboración del marco teorico. 6. Realización de la metodología 3. Recolección y tratamiento de muestra sanguinea. 4. realización de los analisis de GPT/ALT y GOT/AST. 5. tabulación y elaboración de graficas de resultados y discusión. 5. Realización de conclusión recomendación , introducción y resumen. 32 III.4.2 Criterios de exclusión Pacientes que no acudan a la clínica San Francisco de Milagro paciente menores de 35 años o mayores de 50 años. III.4.3 RECOLECCIÓN Y TRATAMIENTO DE MUESTRA SANGUÍNEA Se procedió a que el paciente tome asiento con una posición adecuada. Seleccionando la punción venosa se procedió a colocar el torniquete y realizar la asepsia. Luego se recolectó la muestra sanguínea mediante el sistema de tubo al vacío (vacutainer) rotulado con el código específico de cada paciente. Se centrifuga la muestra de sangre, utilizando la centrífuga Clay Adams Compact ll a 1830 RPM por 15 min para separar el suero. III.5 TÉCNICA EXPERIMENTAL III.5.1 DETERMINACIÓN DE ALANINA AMINOTRASFERASA (ALT/GPT) III.5.1.1 Fundamento La alanina aminotransferasa (ALT/GPT) fomenta el traspaso del grupo amino de la alanina al cetoglutarato con la elaboración de glutamato y piruvato inmediatamente el piruvato es limitado por el lactato deshidrogenasa (LDH) en presencia del NADH. Las respuestas se observan de forma cinética a 340nm por medio del decrecimiento de la absorbancia resultante (Linear, ALT/GPT, s.f). ALT/GPT L-Alanina + 2-Cetoglutarato L-Glutamato + Piruvato 33 III.5.1.2 Procedimiento Tabla 3 Técnica de ALT/GPT Preincubar el reactivo de trabajo, muestras y controles a la temperatura de reacción Pipetear en una cubeta 37ºC Muestra o control 50 μL Reactivo de trabajo 1,0 mL Mezclar suavemente por inversión Insertar la cubeta en el compartimiento termostato del instrumento, Incubar durante 1 minuto, Repetir las lecturas exactamente a los 1,2 y 3 minutos. Fuente: (Linear, ALT/GPT, s.f) III.5.2 DETERMINACIÓN DE ASPARTATO AMINOTRASFERASA (AST/GOT) III.5.2.1 Fundamento El aspartato aminotransferasa (AST /GOT) cataliza la transferencia del grupo amino del aspartato al cetoglutarato con el desarrollo de glutamato y oxalato luego es limitado a malato por la malato deshidrogenasa frente a NADH. Las reacciones se verifican cinéticamente a 340nm por medio del decrecimiento de la absorbancia obtenida (Linear, s.f.). III.5.2.2 Procedimiento LDH Piruvato + NADH + H+ Lactato + NAD+ AST/GOT L-Aspartato + 2-Cetoglutarato L-Glutamato + Oxalacetato MDH Oxalacetato + NADH + H+ L-MaLato + NAD+ 34 Tabla 4 Técnica aspartato aminotransferasa Preincubar el reactivo de trabajo, muestras y controles a la temperatura de reacción Pipetear en una cubeta 37ºC Muestra o control 50 μL Reactivo de trabajo 1,0 mL Mezclar suavemente por inversión Insertar la cubeta en el compartimiento del instrumento, Incubar durante 1 minuto, Repetir las lecturas exactamente a los 1,2 y 3 minutos. Fuente: (Linear, s.f.) 35 CAPÍTULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIONES lV.1 RESULTADOS Se logró trabajar con una muestra de 80 pacientes que acudieron a la clínica San Rafael de Milagros en un lapsus de tres meses (noviembre, diciembre del 2020 y enero del 2021) aplicado los criterios de exclusión e inclusión en los que constan pacientes la edad de 35-50 años y pacientes
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