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23 ODOUS CIENTIFICA Vol. 14 No. 2, Julio - Diciembre 2013 ISSN:1315 2823 INDICE REVENCYT:RV0003 LATINDEX: 18219 PERIODICA IMBIOMED Faringitis estreptocócica: diagnóstico de laboratorio versus diagnóstico clínico en la emergencia pediátrica del Centro Clínico La Morita, estado Aragua Streptococcal pharyngitis: laboratory diagnosis versus clinical diagnosis in the pediatric emergency of Clinical Center La Morita, Aragua state Chacón-Herrera María1, Espinoza Yeinavi1, Frey Belkis1, Hernández Otilia1, Díaz Viviana1, Pérez- Ybarra Luis2, Gutiérrez Clara Nancy1. 1Laboratorio de Investigaciones Microbiológicas “Dr. Carlos Palacios”. Departamento de Microbiología. 2Departamento Ciencias Básicas. Facultad de Ciencias de la Salud. Universidad de Carabobo-Sede Aragua. zoiret.chacon@gmail.com Recibido: 14/09/2013 Aceptado: 08/12/2013 Resumen El principal agente bacteriano de la faringoamigdalitis aguda (FAA) es el Streptococcus pyogenes. Desde el punto de vista clínico, representa un reto diferenciar entre la etiología viral y bacteriana. El propósito del siguiente estudio fue correlacionar el diagnóstico clínico de FAA con el resultado del cultivo y la prueba rápida de detección de antígenos. Fueron evaluados 60 pacientes entre 5 y 15 años que acudieron a la emergencia pediátrica del Centro Clínico La Morita con manifestaciones de FAA. A cada paciente se le realizó el diagnóstico clínico (DC) y dos hisopados faríngeos: para el cultivo bacteriológico (CB) y el para la prueba rápida. 15% de los pacientes fueron diagnosticados clínicamente con faringitis estreptocócica. El cultivo resultó positivo para Streptococcus pyogenes en 11,7% de los pacientes, y el resultado de la prueba rápida fue positiva en 8,3%, existiendo una relación altamente significativa entre el CB y la prueba rápida (Kappa de Cohen 0,8154). No se observó relación significativa entre el DC y el CB (Kappa de Cohen 0,1367). El DC no es el procedimiento más adecuado para diagnosticar faringitis estreptocócica y la implementación de la detección rápida de antígeno de Streptococcus pyogenes permitirá un diagnóstico temprano y un tratamiento oportuno. Palabras clave: faringitis, Streptococcus pyogenes, diagnóstico clínico, cultivo bacteriológico, prueba rápida. Summary. Streptococcal pharyngitis: laboratory diagnosis versus clinical diagnosis in the pediatric emergency of Clinical Center La Morita, Aragua state The main bacterial agent of acute pharyngitis (AP) is Streptococcus pyogenes. From the clinical point of view is a challenge to differentiate between bacterial and viral an etiology. The aim of this study was to correlate the clinical diagnosis of AP with the result of the culture and antigen detection rapid test. We evaluated 60 patients between 5 and 15 years who attended the Pediatric Emergency of “Clinical Center La Morita” to present AP. Each patient was made clinical diagnosis (CD) and two throat swabs: for bacterial culture (BC) and for rapid testing. 15 % of patients were clinically diagnosed with strep throat. The culture was positive for Streptococcus pyogenes in 11.7 % of patients, and the result of the rapid test was positive in 8.3 %, with a highly significant relationship between the BC and the rapid test (Cohen’s Kappa 0.8154). No significant relationship between CD and BC ( Cohen’s Kappa 0.1367 ) was Artículo Original Vol. 14 No. 2, Julio - Diciembre 2013 24 Chacón-Herrera María / Espinoza Yeinavi / Frey Belkis / Hernández Otilia / Díaz Viviana / Pérez-Ybarra Luis / Gutiérrez Clara Nancy observed. The CD is not the most suitable method to diagnose strep throat and implementation of rapid antigen detection of Streptococcus pyogenes allow early diagnosis and prompt treatment. Key words: pharyngitis, Streptococcus pyogenes, clinical diagnosis, bacterial culture, rapid test. Introducción La faringitis estreptocócica es causada por el estreptococo beta hemolítico del Grupo A (Streptococcus pyogenes, EBHGA), el cual es un coco Gram positivo, esférico, de diámetro comprendido entre 1 y 2 micrómetros. Las cepas más virulentas presentan cápsula y son anaerobios facultativos; se transmiten de persona a persona mediante la saliva.1 Los niños entre 5 a 15 años de edad, son los que presentan mayor riesgo de padecer la enfermedad2. Generalmente se desarrolla 2 a 4 días posterior a la exposición con el patógeno, con inicio brusco de dolor de garganta, fiebre, malestar general y cefalea. La faringe posterior puede tener un aspecto eritematoso con presencia de exudado, y puede existir una acentuada linfadenopatía cervical.1 El cultivo de las secreciones faríngeas, es el método convencional y estándar de oro para el diagnóstico de la faringitis aguda causada por los EBHGA; sin embargo, dicho método tiene la limitación práctica del tiempo, ya que se requiere de 24 a 48 horas para obtener un resultado3,4. Debido a esto, se suele realizar el diagnóstico clínico e indicar al paciente tratamiento antibiótico, a los fines de disminuir la sintomatología y evitar el desarrollo de una posible infección bacteriana de importancia. Esta presunción etiológica basada en manifestaciones clínicas, resulta en un alto porcentaje de falsos positivos, sometiendo de manera innecesaria al paciente a un tratamiento antimicrobiano durante 7 a 10 días, con el consiguiente riesgo de efectos adversos, aunado al costo económico y la contribución al aumento de resistencia bacteriana en la población.3 Asimismo, si no se tratan adecuadamente las faringoamigdalitis estreptocócicas, pueden producir otras complicaciones como fiebre reumática y glomerulonefritis aguda; por ende, hay que optimizar y agilizar el proceso de diagnóstico4. De aquí la necesidad de establecer un diagnóstico más certero, a través de técnicas alternativas más rápidas que el cultivo del exudado faríngeo, las cuales se basan en la detección de antígenos presentes en la muestra, ofreciendo resultados en un máximo de 30 a 60 minutos. Para facilitar el diagnóstico clínico, se han elaborado varios sistemas de puntuación, el más conocido de ellos es el de Centor5. El método de Centor, comprende los criterios predictivos clínicos más usados e incluyen exudado amigdalino, adenopatía cervical anterior dolorosa o linfadenitis, ausencia de tos y/o fiebre. En comparación con los cultivos faríngeos que tienen una sensibilidad de 90 a 95% y especificidad del 99%6, estos criterios clínicos tienen 75% de sensibilidad y especificidad.7 Respecto a las pruebas rápidas, éstas tienen una especificidad de 95% a 98%, por lo que su valor predictivo positivo es muy alto, pero la sensibilidad es variable de 60% a 90%8. Diversos estudios han evaluado ampliamente, la utilidad de las pruebas rápidas para la detección de antígeno, siendo validadas en numerosos y diversos centros para el diagnóstico de faringitis estreptocócica. Las mismas muestran buena concordancia con los resultados de los cultivos, convirtiéndose en recursos fiables, de fácil acceso, más económicos que los cultivos y de gran ayuda en el diagnóstico correcto de la faringitis aguda.4, 9, 10 En Venezuela, no existen estudios que correlacionen el diagnóstico clínico de faringitis con el diagnóstico microbiológico; por esta razón, los objetivos de este estudio fueron correlacionar el diagnóstico clínico de faringitis estreptocócica con los resultados del cultivo bacteriológico y la prueba rápida de Strep A Cassette (ELISA), así como cuantificar la prescripción de antibióticos de acuerdo al diagnóstico clínico, en pacientes con edades entre 5 y 15 años con sintomatología de faringitis, atendidos en la emergencia pediátrica del Centro Clínico La Morita ubicado en el municipio Francisco Linares Alcántara, estado Aragua. Materiales y Métodos Se llevó a cabo una investigación cuantitativa, no experimental, de tipo descriptiva, transversal 25 Faringitis estreptocócica: diagnóstico de laboratorio versus diagnóstico clínico enla emergencia pediátrica del Centro Clínico La Morita, estado Aragua. - PP. 23-29 Vol. 14 No. 2, Julio - Diciembre 2013 y correlacional. La población estuvo constituida por los pacientes que acudieron a la emergencia pediátrica del “Centro Clínico La Morita” ubicado en la parroquia urbana Santa Rita, perteneciente al Municipio Linares Alcántara, estado Aragua durante el periodo comprendido entre julio-septiembre del año 2009. La muestra estuvo conformada por 60 pacientes con edades comprendidas entre 5 y 15 años, que consultaban por presentar odinofagia o inflamación faringoamigdalina. Fueron excluidos del estudio los pacientes que recibieran medicación con antibióticos y pacientes con edades fuera del rango establecido. El diagnóstico clínico de faringitis estreptocócica, fue realizado por cuatro médicos residentes y pediatras que se encontraban de guardia en el centro asistencial. A cada paciente se le llenó una ficha clínica, donde se recogió información concerniente a sus datos de identificación, sintomatología presentada y diagnóstico clínico del médico, tratamiento indicado, así como el resultado del diagnóstico de laboratorio. Respetando las normas éticas concordantes con la Declaración de Helsinki de 1964, enmendada en 2008, a todos los pacientes que participaron en este estudio, se les solicitó el consentimiento informado por parte del padre o representante, con la finalidad de autorizar su participación en el desarrollo de la investigación, previa explicación del propósito de la misma. En relación al diagnóstico de laboratorio, para la toma de la muestra se emplearon hisopos de algodón, para obtener dos muestras de cada paciente en ambas amígdalas y pared posterior de la faringe. Uno de los hisopos se mantuvo seco en un tubo de ensayo plástico y se empleó para la prueba rápida y el otro se colocó en un medio de transporte Stuart, para realizar el cultivo bacteriológico. Los exudados faríngeos, fueron transportados al laboratorio del Departamento de Microbiología de la Universidad de Carabobo, para su procesamiento. Para el cultivo bacteriológico, el hisopo conservado en el medio de transporte, se sembró en placas de agar sangre desfibrinada de carnero al 5% e incubadas a 35 ºC, en un ambiente de 5-10% de dióxido de carbono por 24 a 48 horas, para la recuperación e identificación de estreptococos del grupo A. Luego del periodo de incubación, se examinaron las placas para evidenciar la presencia de colonias beta hemolíticas, características del Streptococcus pyogenes. Estas colonias fueron teñidas con Gram, con el fin de corroborar la presencia de cocos Gram positivos dispuestos en cadenas. La identificación de las colonias hemolíticas, se realizó a partir de un cultivo puro en agar cerebro corazón, mediante la prueba catalasa y la prueba de aglutinación de látex, para identificación de estreptococos del grupo A, B, C, D, F y G siguiendo las indicaciones del fabricante (OXOID, Streptococcus Extraction Enzyme). Con el hisopo seco, se procedió a la extracción antigénica de Streptococcus pyogenes, para luego ejecutar la técnica de ELISA, según indicaciones del fabricante (Strep A Cassette ELISA). Para el análisis estadístico, se estimó la frecuencia de estreptococos b-hemolíticos en los pacientes seleccionados. Se calculó la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo del diagnóstico clínico y de la prueba rápida, tomando como prueba gold standard o prueba de oro al cultivo bacteriológico. Se compararon los resultados de laboratorio (cultivo y prueba rápida) con el diagnóstico clínico. Se estimó la concordancia entre el tratamiento aplicado y el microorganismo aislado, elaborando tablas de contingencia de 2x2, en la cual se cruzaron los compuestos para el cultivo (+b-hemolíticos, -b-hemolíticos) y la diagnosis del médico (+b-hemolíticos, -b-hemolíticos); se aplicó las pruebas de concordancia Kappa de Cohen; se calcularon las odds-ratios [OR] para los signos clínicos, el diagnóstico clínico y los resultados del cultivo y la prueba rápida de detección de antígeno y asimismo se aplicó la prueba exacta de Fisher y se construyeron los intervalos al 95% de confianza para los OR. Se utilizaron los programas StatXact 8.0 y el Medcalc 10.4.8.0. Resultados El diagnóstico clínico fue realizado tomando en cuenta signos y síntomas como fiebre, adenopatías cervicales, odinofagia, hiperemia faríngea, presencia de exudado en las amígdalas y malestar general. De los pacientes que acudieron a la emergencia pediátrica con odinofagia e Vol. 14 No. 2, Julio - Diciembre 2013 26 Chacón-Herrera María / Espinoza Yeinavi / Frey Belkis / Hernández Otilia / Díaz Viviana / Pérez-Ybarra Luis / Gutiérrez Clara Nancy inflamación faringoamigdalina, 15% (9/60) fueron diagnosticados según signos clínicos, con faringitis estreptocócica y tratados con macrólidos. El cultivo bacteriológico resultó positivo en 7/60 de los pacientes, representando 11,7% del total de la muestra analizada y se obtuvo un resultado positivo para la prueba de ELISA en 5/60 pacientes. Al relacionar la sintomatología presentada por los pacientes diagnosticados según las manifestaciones clínicas y el resultado del cultivo, se observó que no existe diferencia estadísticamente significativa entre los pacientes con cultivo bacteriológico positivo a EBHGA, los pacientes con cultivo negativo y la manifestación de fiebre, adenopatías cervicales y ausencia de tos. En la tabla 1 se muestra que no existió concordancia significativa ( = 0,1367; p = 0,2846) entre los resultados del diagnóstico clínico y los resultados del cultivo; asimismo la prueba exacta de Fisher, muestra que no existe asociación entre ambas variables (p = 0,5611), por lo cual el intervalo de confianza para la OR incluyó al valor OR = 1, lo cual indica ausencia de asociación entre las variables. TABLA 1. Relación entre el diagnóstico clínico y el cultivo bacteriológico positivo en pacientes con faringoamigdalitis aguda entre 5-15 años que acudieron a la emergencia pediátrica del Centro Clínico La Morita. Municipio Linares Alcántara. Estado Aragua. Julio-Septiembre 2009. Cultivo Negativo Cultivo Positivo Total Diagnóstico clínico negativo 46 5 51 Diagnóstico clínico positivo 7 2 9 Total 53 7 60 Coeficiente de Cohen: = 0,1367; p = 0,2846. Odds-ratio: OR = 2,6286; p = 0,5611; IC(OR) 95% = (0,2074; 20,1387). Comparando los resultados obtenidos según el diagnóstico clínico y el cultivo bacteriológico, se evidenció que la especificidad del diagnóstico clínico es moderada (88,7%), la sensibilidad es bastante baja (28,6%), el valor predictivo positivo es bajo (56,2%), y el valor predictivo negativo es moderado (91%). Al contrastar el resultado de la prueba de ELISA y el cultivo bacteriológico, se obtuvo que la sensibilidad de la detección rápida de antígeno fue del 71,4% y la especificidad, del 100%. El valor predictivo positivo fue 100% y el valor predictivo negativo 96,4%; existiendo una concordancia significativa ( = 0,8154; p< 0,0001) entre el cultivo bacteriológico y la prueba de ELISA, lo cual indica que la detección rápida de antígenos tiende a presentar los mismos resultados que el cultivo; asimismo la prueba exacta de Fisher muestra que hay asociación significativa entre ambas variables (p < 0,0001). Adicionalmente, el intervalo de confianza para la OR, toma como valor mínimo a OR = 12,3924, lo cual indica que existe una fuerte asociación entre los resultados de estas variables, es decir, resultados positivos en la prueba rápida ELISA están asociados con resultados positivos del cultivo (Tabla 2). TABLA 2. Relación entre la técnica rápida ELISA y el cultivo bacteriológico para el diagnóstico de faringoamigdalitis aguda en pacientes que acudieron al servicio de emergencia pediátrica del Centro Clínico La Morita. Municipio Linares Alcántara. Estado Aragua. Julio-Septiembre 2009. Cultivo negativoCultivo positivo Total ELISA negativo 53 2 55 ELISA positivo 0 5 5 Total 53 7 60 Coeficiente de Cohen: = 0,8154; p < 0,0001. Odds-ratio: OR = ∞; p< 0,0001; IC(OR) 95% = (12,3924; ∞). Respecto a la distribución según el grupo etario, el grupo de 5 a 7 años presentó 43% (26/60) de positividad para EBHGA, seguido por 18% del grupo de 8 a 10 años (18/60). El grupo de 11 a 13 años y el de 14 a 15 años presentaron 14% de positividad cada uno (8/60). Teniendo en cuenta que cuando los médicos consideraron probable un diagnóstico de faringitis estreptocócica, los pacientes fueron medicados con macrólidos, en 66,7% de los casos no era necesario el tratamiento. Sólo tres (42,9%) de los pacientes con cultivo positivo fueron tratados adecuadamente dejando al 57,1% sin terapia antimicrobiana. 27 Faringitis estreptocócica: diagnóstico de laboratorio versus diagnóstico clínico en la emergencia pediátrica del Centro Clínico La Morita, estado Aragua. - PP. 23-29 Vol. 14 No. 2, Julio - Diciembre 2013 Discusión La faringoamigdalitis causada por Streptococcus pyogenes es la etiología bacteriana más común de esta patología, alcanzando una frecuencia que puede variar entre 17% a 38% en pacientes pediátricos. En este estudio, se obtuvo un valor inferior (11,7%), lo cual difiere con el resultado observado en estudios similares.11-17 La diferencia entre la frecuencia obtenida en esta investigación y la reportada en otras investigaciones, puede deberse a que en estas últimas la toma de muestra se realizó durante un periodo de tiempo más prolongado, incluyendo la estación de invierno o el periodo de lluvia. En este estudio, las muestras fueron tomadas entre los meses de julio a septiembre y debido a cambios climáticos no hubo precipitaciones; de igual forma, los resultados pudieron verse afectados porque la fase experimental se llevó a cabo durante el periodo de vacaciones escolares, lo que hace que se reduzca el hacinamiento, disminuyendo el contacto con posibles fuentes de contagio. Las manifestaciones clínicas durante la faringitis por EBHGA son variadas18,19. Piñeiro et al. señalan que son signos sugestivos de faringitis estreptocócica, presencia de fiebre, ausencia de tos, presencia de exudado tonsilar o faríngeo, y presencia de adenopatías cervicales6; sin embargo, en este estudio no se observó diferencia estadísticamente significativa entre los pacientes con cultivo bacteriológico positivo a EBHGA, los pacientes con cultivo negativo y la manifestación de fiebre, adenopatías cervicales, ausencia de tos; esta ausencia de correlación entre las variables clínicas (signos y síntomas) y el resultado del cultivo bacteriológico es señalada por Maryer y col.20 Para el diagnóstico clínico se obtuvieron valores de sensibilidad y especificidad de 28,6% y 88,7%, respectivamente; valores inferiores a los observados en otros estudios 21, 22. La baja sensibilidad y moderada especificidad obtenidos para el diagnóstico clínico puede corresponder a que, en todas las investigaciones revisadas, señalan el uso de diferentes criterios de puntuación para realizar el diagnóstico clínico de faringitis estreptocócica; no obstante, los médicos participantes en el trabajo manifestaron desconocer estos criterios, por lo que no aplicaron un criterio uniforme al momento de realizar la evaluación clínica. La sensibilidad de la prueba de detección rápida de antígenos obtenida en esta investigación fue de 71,4%, semejante a la obtenida en estudios similares23,24, en los cuales han reportado una sensibilidad entre 70% y 73%, pero difiere de algunas de las investigaciones revisadas que reportan valores que oscilan entre 86% a 96% de sensibilidad4, 9, 10, 25-27. La especificidad y el valor predictivo positivo obtenido, están por encima de los valores reseñados en otras investigaciones; y el valor predictivo negativo es similar al reseñado en la literatura revisada. Según la revisión sistemática y el metaanálisis realizado por Ruiz-Aragón y col.28, las técnicas rápidas pueden usarse como método de cribado para el diagnóstico de faringitis estreptocócica, porque muestran buena sensibilidad, especificidad y valor predictivo positivo y negativo. En el grupo etario de 5 a 10 años hubo mayor aislamiento de S. pyogenes, resultados semejantes han sido reportados en investigaciones similares 3, 22. Muñoz y col.3 señalan que la mayor tasa de positividad es observada en una edad entre 6 y 10 años (50%), y que la misma disminuye conforme la edad se aleja de ese rango. Los nueve (9) pacientes diagnosticados clínicamente con faringoamigdalistis estreptocócica, fueron tratados con macrólidos; de éstos 66,7% recibieron antibioticoterapia innecesariamente. Al 57,1% de los pacientes con cultivo positivo para Streptococcus pyogenes, no les fue prescrito tratamiento; estos porcentajes difieren de los presentados por Morais y col.29 quienes reportaron que 23% de los pacientes recibieron antibioticoterapia innecesariamente y 13% fueron tratados posterior al resultado del cultivo. Los estudios de sensibilidad y especificidad, sugieren que el diagnóstico clínico es erróneo en 25-50% de los casos y que sin el empleo de los estudios microbiológicos, debido a la inespecificidad de los síntomas, se tiende al sobre diagnóstico de la faringoamigdalitis estreptocócica, con la consiguiente prescripción innecesaria de antibióticos.6 Vol. 14 No. 2, Julio - Diciembre 2013 28 Chacón-Herrera María / Espinoza Yeinavi / Frey Belkis / Hernández Otilia / Díaz Viviana / Pérez-Ybarra Luis / Gutiérrez Clara Nancy Debido a su baja sensibilidad, moderada especificidad, bajo valor predictivo positivo y moderado valor predictivo negativo, el diagnóstico clínico tiene escaso valor para decidir la etiología estreptocócica de faringitis en la población estudiada. Es por esto que se sugiere el uso de la prueba de detección rápida de antígeno de SBHGA en la consulta de emergencia pediátrica, ya que su aplicación reducirá la dosificación innecesaria de antibióticos de amplio espectro, en la población pediátrica que acuda al Centro Clínico, disminuyendo la probabilidad de aparición de resistencia bacteriana. Además permitirá realizar un diagnóstico temprano y tratamiento oportuno de infección faríngea por S. pyogenes, reduciendo el riesgo de aparición de secuelas, como fiebre reumática o glomerulonefritis postestreptocócica. Referencias 1. Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Microbiología Médica. 5ta ed. Madrid: Elsevier Mosby; 2006. 2. Cunningham MW. Pathogenesis of group A streptococcal infections. Clin Microbiol Rev. 2000; 13:470-511. 3. Muñoz S, Córdova M, Morales V, Cifuentes L. Faringitis aguda, ¿estreptocócica? Empleo del estudio etiológico y de antimicrobianos en dos centros pediátricos universitarios. 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