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1 BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR Fagner da silva 2 BIOLOGÍA Ciencia cuyo objeto de Ciencia cuyo objeto de estudio son los seres vivos. Todos los seres vivos están formados por células De células a individuos 3 Los órganos se unen para formar el sistema digestivo Los órganos se unen para formar el sistema digestivo 4 LA CÉLULA Y LOS SERES VIVOS (datos históricos) • Zacarias Jansen (1608): construye el primer microscopio • Robert Hooke (1665): empleó el término célula por primera vez cuando estudiaba la estructura del corcho. • Leewenhoeck (1674): fue el primero en observar células vivas (bacterias) al microscopio • Brown (1831): descubre el núcleo celular • Purkinje (1838): denominó protoplasma a la materia viva. • Schleiden y Schwann (1838-1839): enuncian la teoría celular. 5 TEORÍA CELULAR Enunciada por el botánico Schleiden y el zoólogo Schwann • Todos los seres vivos están formados por células ( unicelulares y pluricelulares). • La célula es la unidad estructural y funcional de los seres vivos. • Sólo pueden originarse células por división de otras preexistentes, por lo tanto todas las células tienen antecesores remotos. • Hay semejanzas fundamentales en la morfología y la fisiología de todas las células. • La actividad de un organismo es la suma del conjunto de actividades e interacciones de las células que lo componen. • Toda células tiene hidratos de carbono, proteínas, lípidos y ácidos nucleicos. • Todas las células guardan la información hereditaria en el ADN y la transmiten a las células hijas • Toda célula está recubierta por una membrana plasmática 6 CARACTERÍSTICAS DE LOS SERES VIVOS 1) Formados por células. 2) Crecen y se desarrollan. 3) Son sistemas abiertos. 4) Metabolizan. 5) Presentan homeostasis 6) Son irritables. 7) Se reproducen. 8) Modifican el entorno. 9) Evolucionan. 7 LEY DE DRIESCH (DEL VOLUMEN CELULAR CONSTANTE) En aquellos seres vivos de la misma especie e igual grado de desarrollo, la diferencia de tamaño en un determinado órgano se debe a que varía el número de células y no el tamaño de las mismas. 8 COMPOSICION QUIMICA DE LOS SERES VIVOS ELEMENTOS: • Primarios: C, H, O, N, Ca++, PO43- (95%) • Secundarios: Na+, K+, Cl-, (más del 1 % del peso corporal) • Oligoelementos: Cu, Zn, etc. (menos del 1% del peso corporal) Biomoléculas: � Hidratos de Carbono o Glúcidos � Proteínas � Lípidos � Ácidos Nucleicos (ADN / ARN) Solvente : H2O 9 Tipos Celulares CARACTERÍSTICAS PROCARIOTA EUCARIOTA NUCLEO NO SI ADN Sólo (desnudo) unido a proteínas (histonas) CROMOSOMAS Único (circular) Varios (lineales) DIVISIÓN Amitosis (fisión binaria) Mitosis / meiosis RIBOSOMAS SI (70S) SI (80S) ORGANELAS NO SI ENDOMEMBRANAS NO SI CITOESQUELETO NO SI PARED CELULAR SI (peptidoglicano) Solo célula vegetal (celulosa) APARECIÓ HACE 3.000 millones de años 1.000 millones de años 10 CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS Clasificación de R. H. Whitaker (1969): REINO CARACTERÍSTICAS EJEMPLOS MONERAS Procariontes Unicelulares Autótrofos o heterótrofos Bacterias Rickettsias Micoplasmas PROTISTAS Eucariontes Unicelulares Autótrofos o heterótrofos Protozoos, algas unicelulares, ameba, etc. HONGOS Eucariontes Unicelulares y Pluricelulares Heterótrofos Levaduras, Mohos, Hongos de Sombrero, etc. VEGETAL Eucariontes Pluricelulares Autótrofos Plantas ANIMAL Eucariontes Pluricelulares Heterótrofos Invertebrados, vertebrados 11 Clasificación del Reino Animal INVERTEBRADOS Carecen de huesos PORÍFEROS (Cubiertos por poros. Ej: esponjas) CELENTERADOS (Tienen células urticantes. Ej: corales, medusas) PLATELMINTOS (gusanos planos. Ej: tenia) NEMATELMINTOS (gusanos redondos. Ej: lombriz intestinal) ANÉLIDOS (gusanos redondos y segmentados. Ej: lombriz de tierra) ARTRÓPODOS (cabeza, torax, abdomen y patas articuladas) Insectos (3 pares de patas. Ej mosca)) Arácnidos (4 pares de patas. Ej:araña) Crustáceos (4 pares de patas. Con caparazón. Ej: cangrejo) Miriápodos (cuerpo segmentado con un par de patas en cada segmento. Ej: ciempiés) MOLUSCOS (cuerpo blando. Ej: caracol) EQUINODERMOS (Acuáticos. Cuerpo en 5 ejes. Ej: estrella de mar) VERTEBRADOS Tienen esqueleto óseo PECES (acuáticos, cubiertos por escamas, aletas, respiración branquial) ANFIBIOS (viven en agua y tierra. Ej: rana) REPTILES (patas cortas o sin ellas. Se arrastran. Ej: víboras, cocodrilos) AVES (plumas, pico, ovíparos) MAMÍFEROS (pelos, glándulas mamarias, vivíparos) 12 PROCARIONTES Bacterias 13 CÉLULA PROCARIONTE Algunas bacterias poseen flagelo (distinto del de las células eucariontes). 14 PARED BACTERIANA Bacterias Gram+ y Gram- CÉLULA PROCARIONTE 15 16 ESPORA BACTERIANA Es un órgano de resistencia que le permite sobrevivir cuando las condiciones del medio le resultan desfavorables. 17 CLASIFICACIÓN BACTERIANA (por su morfología) 18 Bacterias y Enfermedades BACTERIAS ENFERMEDADES Diplococos Estreptococos Estafilococos Neumonía (neumococo) Anginas Infecciones de piel y mucosas. Bacilos Tuberculosis; Lepra; Difteria; Tétanos Espirilos y espiroquetas Sífilis 19 Morfología bacteriana 20 Nutrición Bacteriana AUTOTROFAS HETEROTROFAS Fotosintéticas: -Utilizan luz infrarroja como fuente de energía. - Son las bacterias purpúreas y las sulfobacterias. Quimiosintéticas: -Utilizan la energía de ciertos compuestos orgánicos. •Viven sobre materia orgánica muerta: -Saprófitas •Viven sobre otros organismos vivos: - Comensales (sin dañarlo) - Simbiontes (beneficiándolo) - Parásitas (dañándolos) Fagner da silva Fagner da silva 21 Bacterias y Oxígeno BACTERIASBACTERIAS AnaeróbicasAnaeróbicas Aeróbicas: (requieren O2) Aeróbicas: (requieren O2) Estrictas (No toleran el O2) Estrictas (No toleran el O2) Facultativas (no requieren O2 pero si está presente lo pueden utilizar) Facultativas (no requieren O2 pero si está presente lo pueden utilizar) Clostridium perfringes (gangrena gaseosa) Anaerobio estricto Clostridium perfringes (gangrena gaseosa) Anaerobio estricto Clostridium tetani (tétanos) Anaerobio estricto Clostridium tetani (tétanos) Anaerobio estricto 22 REPRODUCCIÓN ASEXUAL BACTERIANA AMITOSIS o FISIÓN BINARIA 23 INTERCAMBIO GENÉTICO BACTERIANO - TRANSFORMACIÓN: Intercambio de fragmentos de ADN cromosómico -CONJUGACIÓN: Intercambio de plásmidos - TRANSDUCCIÓN: Intercambio de fragmentos de ADN cromosómico mediante un virus que actúa como vector 24 Transformación Fragmentos de ADN de una bacteria, libres en el medio, pueden atravesar la membrana celular de otra bacteria cambiando la información genética de la bacteria"aceptora". 25 Conjugación - Una “bacteria dadora” (F+) transfiere un plásmido (factor F o episoma) a una “bacteria aceptora” (F-) - Si el plásmido otorga resistencia a algún antibiótico se llama factor R - El plásmido se transfiere a través de los pelos sexuales que tiene la bacteria dadora. 26 Transducción Intercambio de fragmentos de ADN cromosómico mediante un virus que actúa como vector 1) El fago infecta a una bacteria (le inocula su ADN) 2) Replicación del fago. Lisis bacteriana. El fago se lleva “un poco” de ADN de la bacteria 3) El virus infecta a otra bacteria y le inocula su ADN + ADN de la anterior bacteria. 4) Integración del ADN híbrido del virus al ADN de la nueva bacteria infectada. 27 Rickettsias y Micoplasmas (procariontes sin pared celular) Rickettsia prowazekii Agente causal del tifus, transmitida por los piojos. Son células que se reproducen dentro de células vivas. Mycoplasma iowae Son procariontes sin pared celular, mil veces más pequeñas que una bacteria y un millón de veces menor que una célula eucarionte promedio. 28 RICKETTSIAS � Reino: Monera (unicelulares aeróbicos) � Parásitos intracelulares obligados � Pleomórficas ( cocos, bacilos, filamentos) � Tamaño: intermedio entre bacterias y virus � Se pueden observar con elmicroscopio óptico � Carecen de pared celular � Viven en: piojos, pulgas y garrapatas � Se transmiten al hombre por picaduras y se alojan en endotelio capilar � Enfermedades que causan: Tifus clásico (transmitido por piojos) Tifus murino (transmitido por pulgas de las ratas) Fiebre de las montañas rocosas (transmitido por garrapatas) 29 MYCOPLASMAS “son los seres vivos mas pequeñas” � Reino: Monera ( unicelulares aeróbicos) � Parásitos intracelulares � Pleomórficas � Tamaño: similar al de un virus (miden menos de 1 µm) � No se pueden ver con el microscopio óptico � Carecen de pared celular � Enfermedades que causan: Mycoplasma pneumoniae: neumonía atípica 30 Célula Eucarionte Organización General 31 Características Diferenciales entre Célula Procariota y Eucariota Característica Célula Procariótica Célula Eucariótica Núcleo No posee membrana nuclear Posee membrana nuclear Cromosomas Un único cromosoma circular y desnudo Posee uno o más cromosomas lineales unidos a proteínas (cromatina) ADN extracromosómico Puede estar presente como plásmidos Presente en organelas (mitocondrias y cloroplastos) Organelas citoplasmáticas No posee Mitocondrias y cloroplastos, (los cloroplastos presentes sólo en células vegetales) Membrana plasmática Contiene las enzimas de la cadena respiratoria, también puede poseer los pigmentos fotosintéticos Semipermeable, sin las funciones de la membrana procariótica Sistema de endomembranas No posee Presenta REG, REL, Golgi, lisosomas, vacuolas y vesículas. Pared celular Capa rígida de peptidoglucano (excepto micoplasmas) No poseen pared de peptidoglucano. Pueden poseer una pared de celulosa o quitina Esteroles Ausentes (excepto micoplasmas) Generalmente presentes Citoesqueleto Ausente Presente. Formado por filamentos proteicos. Exocitosis y Endocitosis Ausente Presente Ribosomas 70 S en el citoplasma 80 S en el retículo endoplásmico y en el citosol División Fisión Binaria (amitosis) Mitosis - Meiosis 32 MÉTODOS DE ESTUDIO DE LAS CÉLULAS MÉTODOS DE ESTUDIO DE LAS CÉLULAS Microscopía 33 34 MICROSCOPIA OPTICA Y ELECTRONICA 35 Microscopio Óptico Microscopio óptico clásico MICROSCOPIO ÓPTICO 36 MICROSCOPIO ELECTRÓNICO 37 Escherichia coli al microscopio óptico E. coli Células de Escherichia coli, bacteria habitante del tracto intestinal. Escherichia coli al microscopio óptico 38 Escherichia coli al microscopio electrónico de transmisión Escherichia coli al microscopio electrónico de transmisión 39 Escherichia coli al microscopio electrónico de barrido 40 Mitocondria observada con MET 41 Ojo Humano 0,1 mm = 100 µm M. O. 0.25 µm M. E. 5 A 10 A (1 mm = 103 µm = 106 nm = 107 °A) Es la menor distancia que puede ser resuelta por un sistema óptico. Distancia mínima que permite ver “separados” dos puntos. LÍMITE DE RESOLUCIÓN 42 43 M.O. M.E. MECANISMO Dispersión luz Dispersión de e- UTILIZA Lentes Bobinas electromagnéticas AUMENTOS Hasta 1000 veces Un millón de veces COLORACIÓN Sí No FIJACIÓN Formol Glutaraldehído INCLUSIÓN Parafina Resinas CORTE Micrótomo Ultramicrótomo COLORANTES Diversos Contrastantes MONTAJE Porta y cubre de vidrio Grillas de metal o plástico MICROSCOPIOS 44 TÉCNICA HISTOLÓGICA Pasos: Pasos: 1) FIJACIÓN (formol) 2) DESHIDRATACION (c/etanol, para eliminar el agua) 3) INCLUSIÓN (parafina) 5) CORTE (micrótomo) 6) DESPARAFINIZACION 7) COLORACIÓN (colorante) 8) MONTAJE (porta y cubre) Conjunto de pasos de preparación de las muestras para estudiarlas en el microscopio óptico. Conjunto de pasos de preparación de las muestras para estudiarlas en el microscopio óptico. 45 ESTUDIO DE LA CÉLULA saca IN VIVO : la célula permanece viva - IN SITU (VITAL) : la célula se estudia sin ser sacada de su lugar - IN VITRO (SUPRAVITAL): la célula se saca de su lugar natural pero se la mantiene viva. POST MORTEM : se estudia la célula muerta. 46 Virus y Otros agentes infecciosos 47 VIRUS (virus =acido nucleico + proteínas) Micrografías de virus a.: Adenovirus (250.000 x ) (neumonias) b.:Bacteriófago T4 ( 141.000 x ) c. Virus del Ebola ( 200.000 x ) ( fiebre hemorragica) 48 Tipos de Virus Genomas Virales Ejemplo dsADN (bicatenario lineal) Herpes; adenovirus. dsADN (bicatenario circular) HPV (virus del papiloma humano), Bacteriófagos. ssADN (monocatenario lineal) Circovirus (infecciones asintomáticas en humanos) ssARN(+): Se traduce directamente, actúa como ARNm. Rubeola; Algunas hepatitis; fiebre amarilla; etc. ssARN(-):Traen una ARN pol que sintetiza ssARN(+) que actua como ARNm. Ebola; sarampión; rabia, etc. ssARN: (2 moléculas de ARN; retrovirus) HIV; algunos oncovirus 49 Virus desnudos y envueltos 50 Estructura de un virus envuelto 51 HIV retrovirus envuelto 52 Dogma de la Biología Molecular 53 Infección por HIV 54 BACTERIÓFAGOS son virus que infectan a bacterias 55 Replicación Viral Ciclo Lítico Fases: 1 y 2) Adsorción 3) Penetración (viropexis o inoculación) 56 4) Denudación (desintegración viral) Latencia (puede existir o no) Replicación ( de todas las estructuras virales) 5) Armado y Maduración 6) Liberación Viral (lisis celular) 57 Replicación Viral Ciclo Lisogénico Replicación viral y lisis separación ocasional del profago 58 OTROS AGENTES INFECCIOSOS •VIROIDES : moléculas de ARN que infectan células vegetales. • PRIONES: moléculas proteicas con capacidad infecciosa (PrPsc) 59 Proteínas priónicas Son proteínas presentes en SNC - PrPc: protege al SNC de la neurodegeneración - PrPsc: patógena, produce neurodegeneración y muerte neuronal (Kuru en humanos; Scrapie en ganado ovino; Encefalopatía Espongiforme Bovina en ganado bovino) 60 Ciclo Celular • Toda célula proviene de otra célula. • Las células se originan por división de una célula madre. • En procariotas la división de una célula madre por fision binaria origina dos células hijas idénticas entre sí e idénticas a la célula madre que les dio origen. • El eucariotas la división de una célula madre por mitosis origina dos células hijas idénticas entre sí e idénticas a la célula madre que les dio origen. • El tiempo que transcurre entre una división celular y la siguiente se llama CICLO CELULAR. 61 División Celular 62 Ciclo Celular 63 CICLO CELULAR 64 PUNTOS DE CONTROL DEL CICLO CELULAR 65 REGULACION DEL CICLO CELULAR • La regulación es mediada por factores promotores (FP) • El FP está formado por una ciclina (proteína de cc variable durante el ciclo celular) y una quinasa (proteína que fosforila sustratos con gasto de ATP). • Cuando la ciclina aumenta activa a una quinasa, esta “fosforila algo” y esto hace que se pase de una etapa del ciclo a la siguiente. • FPS= ciclinas G1 + cdk2 • FPM= ciclinas M + cdk1 66 Regulación del Ciclo Celular Hay proteínas que activan el ciclo celular y otras proteínas que lo frenan CICLINASCICLINAS CDKCDK Quinasas activadas Quinasas activadas Proteína Rb Proteína Rb Avance Ciclo Celular Avance Ciclo Celular fosforilafosforila estimulaestimula p21 y p53 p21 y p53 inhibeninhiben CDKCDK Ciclo Celular Ciclo Celulardetienedetiene - La proteína Rb es un freno que se encuentra hacia el final de G1. -Las ciclinas D y E aumentan su nivel hacia el final de G1 y activan a la cdk2. -La cdk2 fosforila a la proteína Rb y de esa manera eliminan el freno permitiendo que el ciclo celular avance hacia la etapa S. - La proteína Rb es un freno que se encuentra hacia el final de G1. -Las ciclinas D y E aumentan su nivel hacia el final de G1 y activan a la cdk2. -La cdk2 fosforila a la proteína Rb y de esa manera eliminan el freno permitiendo que el ciclo celular avance hacia la etapa S.
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