Produção de Toxoide Tetânico

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UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE TECÁMAC 
 
DIVISIÓN QUÍMICO BIOLÓGICAS 
 
Materia: Procesos de la Salud 
 
Actividad: Toxoides (TETANICO) 
 
Profesor (a): Marcos Igancio Jimenez Zuñiga 
 
 
Integrantes: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Grupo: 5QBT3 
DE LUCIO HERNANDEZ CRISTIAN 
EMMANUEL 
• IBAÑEZ MEJIA DANIEL ALBERTO 
• JUAREZ PEREZ JAHZEEL 
• MANILA MARTINEZ CINTIA REGINA 
• RUANO MENESES GABRIELA 
ALESSANDRA 
• VEGA HERNANDEZ CESAR URIEL 
INTRODUCCIÓN 
La necesidad de satisfacer la demanda de vacuna antitetánica, impone la 
necesidad de mejorar la productividad y la tecnología de la fermentación del 
Clostridium tetani para la producción de toxina tetánica. El Clostridium tetani es 
el agente causal del tétanos, enfermedad que desde la antigüedad ha cobrado 
víctimas por infecciones producidas en heridas que favorecen la germinación 
de la espora del microorganismo, el cual produce una potente toxina. 
El tétanos es una enfermedad bacteriana infecciosa causada por Clostridium 
tetani. En condiciones anaerobias favorables, como en heridas sucias y 
necróticas, este bacilo ubicuo puede producir tetanoespasmina, una 
neurotóxica extremadamente potente que bloquea los neurotransmisores 
inhibidores del sistema nervioso central y provoca la rigidez muscular y 
espasmos característicos del tétanos generalizado. La enfermedad puede 
afectar a cualquier grupo de edad, y las tasas de letalidad son altas incluso 
cuando se dispone de medios avanzados de cuidados intensivos. 
La producción de toxoide tetánico se realiza a partir de la toxina tetánica 
detoxificada y purificada por métodos químicos. Un buen rendimiento de la 
toxina tetánica reviste gran importancia, pues éste es fundamental para obtener 
el número de dosis necesarias a un bajo costo. Se presentan los resultados 
obtenidos en la producción de toxina tetánica a partir de hidrolizado de caseína 
de producción nacional, mediante la realización de pruebas químicas, 
microbiológicas e inmunológicas, y se comprueba que el rendimiento es 
superior al obtenido con el hidrolizado de caseína de importación. (OMS, 
Documento de posición de la OMS, 2017) 
Un toxoide, es una toxina de origen bacteriano que ha sido modificada para 
sustraerle su capacidad de producir la enfermedad, pero que conserva su poder 
inmunológico. Provoca una respuesta inmune de características similares al 
inmunobiológico de microorganismos inactivados o muertos (Smith, 2010). 
 REFERENCIAS: 
 
(1996)WHO. State of the world's vaccine and immunization.WHO/GPV196.04. 
 
(1993) OPS. Reunión sobre vacuna DTP mejorada y combinada 
basada en DTP. Informe final. OPS/HDP/HDR-RDV/HPM/EPI; 
CEPA PRODUCTORA Y MEDIO DE CULTIVO 
El toxoide formolizado se prepara a partir de la toxina producida por cultivo de 
Clostridium tetani. 
 
En la producción de la toxina tetánica, a partir de la cual se obtiene el toxoide, 
se debe utilizar un sistema de cultivo de lote de semilla que conserve la 
toxigenicidad del microorganismo. En caso de ser necesario restaurar por 
reselección deliberada a partir de los lotes de semilla. Los cultivos se deben 
realizar en un medio líquido apropiado y con una cepa altamente toxigénica de 
Clostridium tetani de procedencia e historia documentadas. Al final del periodo 
de incubación debe comprobarse la pureza de cada cultivo y descartar los 
contaminados. El medio conteniendo la toxina se debe cosechar asépticamente 
y se debe determinar el contenido en toxina (Lf por mL) para monitorear la 
consistencia de la producción. Para la preparación del granel del toxoide 
purificado se pueden mezclar cosechas individuales de toxina tetánica. La 
toxina se debe purificar con el objeto de eliminar sustancias que pudieran 
causar efectos adversos en humanos. La toxina purificada es detoxificada por 
tratamiento con formaldehído por un método que evite la destrucción de la 
potencia inmunógenica del toxoide así como su reversión a toxina, 
particularmente si se expuso al calor. (FARMACOPEA, 2018) 
 REFERENCIAS : 
 
 
 
 
 
CONDICIONES Y TIEMPO DE INCUBACIÓN 
 
VACUNA CONTRA EL TÉTANOS, ADSORBIDA 
 
Vaccinum tetani adsorbatum 
 
La Vacuna contra el Tétanos, Adsorbida es una preparación de toxoide tetánico 
formolizado, adsorbido sobre un soporte mineral. El toxoide formolizado se 
prepara a partir de la toxina producida por cultivo de Clostridium tetani. La 
Vacuna contra el Tétanos, Adsorbida debe cumplir con los siguientes 
requisitos. (FARMACOPEA, 2018). 
(1990) WHO. Requirements for diphtheria, tetanus, pertussis and combined vaccines. WHO 
Technical Report Series. . No. 800, Annex 2.:109-125. 4. LaemliV.K.Nature. (1970) Vol. 
227:680-685. 5. 
(1994) Corbel M. Control testing of combined vaccines: A consideration of potencial 
problems and approaches. Biologicals. ; Vol. 22, 353-360. 
El cultivo de cepas toxígenas de C. tetani en un medio líquido que favorece la 
producción de la toxina, la extracción de la toxina mediante filtración, su 
destoxificación con formaldehído y varias etapas de purificación y esterilización. 
Para aumentar su inmunogenicidad, se adsorbe el toxoide sobre sales de 
aluminio o de calcio. El toxoide tetánico adsorbido se administra mediante 
inyección intramuscular. El toxoide tetánico es estable y puede resistir la 
exposición a una temperatura aproximada de 20 °C durante meses y el 
almacenamiento a 37 °C durante algunas semanas sin experimentar una 
pérdida de potencia significativa. No obstante, si se expone a una temperatura 
de 56 °C, la vacuna se destruye en un plazo de dos horas. Las vacunas que 
contienen el toxoide tetánico deben almacenarse a +4 (2–8) °C; las que hayan 
sido congeladas no deben utilizarse. 
Todas las vacunas con componente antitetánico deben conservarse entre +2 y 
+8 ºC, no congeladas y protegidas de la luz solar. Si por accidente la vacuna 
se congela, no se podrá utilizar. En condiciones adecuadas de conservación la 
vida media es de unos 3-4 años aproximadamente, aunque hay que consultar 
la fecha de caducidad. Algunos preparados como la vacuna Infanrix Hexa o la 
vacuna Infanrix-IPV+Hib deben ser reconstituidas. En el caso de Infanrix Hexa 
se ha demostrado estabilidad durante 8 horas a +21·ºC tras la reconstitución. 
En el caso de la vacuna Infanrix- IPV+Hib, la vacuna debe inyectarse 
inmediatamente tras la reconstitución. Las vacunas Hexyon, Vaxelis, Infanrix y 
Pentavac ya vienen preparadas para administrar y no precisan manipulación 
para la reconstitución 
 
 
FERMENTACIÓN 
 
 
El efecto de la concentración de glucosa y del tiempo de esterilización se 
estudiaron simultáneamente en cultivos sin agitación de 200 mL, en los 
intervalos 0 y 10 g/L, para 10 y 60 minutos respectivamente. Un cultivo 
desarrollado en un medio con 6 g/L de glucosa y esterilizado por 20 minutos a 
121° C, produce la mayor cantidad de toxina respecto a los otros valores 
evaluados, con un promedio de 85 unidades de opacidad por mililitro (Lf/mL). 
Se realizaron fermentaciones en un reactor de tanque agitado de 5 L, variando la 
concentración inicial de glutamato entre 0 y 16 g/L. Se encontró que este factor no 
afecta la concentración final de toxina en la fermentación, induce incrementos en la 
biomasa producida y en la velocidad específica de crecimiento y reduce el tiempo 
de fermentación un 41% comparado con cultivos sin glutamato. La aireación 
superficial se estudió en cultivos con y sin agitación, se observó un aumento cercano 
al 50% en la producción de toxina en cultivos aireados no agitados, mientras que en 
cultivos agitados este efecto no fue significativo. 
En 1920 Descomby preparó un toxoide, tetánico (toxina tratada con formaldehído 
y calor) y demostró que podía estimular la formación de anticuerpos en animales de 
experimentación. 
Mueller y colaboradores (1940) informaron sobre la producción de toxinatetánica por fermentación del Cl. tetani en un medio semi-sintético con extracto 
de carne y un digerido de caseína. Latham y colaboradores (1962), modificaron 
el medio desarrollado por Mueller eliminando el extracto de carne. 
Desde finales de los 60s se presenta una disminución de las publicaciones 
asociadas a la producción por fermentación del toxoide tetánico, solo algunos 
países como México, Brasil, Venezuela y ahora Colombia, están haciendo 
estudios de manera aislada para mejorar sus procesos. (Quintero J., 1998). 
 
 
Lote final 
 
La vacuna final a granel se debe distribuir asépticamente en envases estériles, 
para inyectables, con cierre inviolable. Los envases deben ser cerrados de tal 
manera de evitar la contaminación. Solo los lotes finales que cumplan los 
requisitos indicados en Ensayos y Valoración, pueden ser liberados para su 
uso. Los ensayos de Formaldehído libre, 80. 
Conservantes y la Valoración pueden omitirse en los lotes finales de vacuna, 
siempre que se demuestre que se han llevado a cabo en la vacuna final a granel 
con resultados satisfactorios. (FARMACOPEA, 2018). 
 REFERENCIAS : 
 
(1997)Committee for proprietary medicinal products. Note for guidance on pharmaceutical and 
biological aspects of combined -vaccines. The European Agency for the Evaluation . 
 
PRUEBAS DE CALIDAD TOXINAS TETÁNICA 
La toxina empleada se obtuvo a partir de un liofilizado de la cepa de Clostridium 
tetani Massachusetts, suministrada por el laboratorio de tétanos del Instituto 
Nacional de Salud (INS). 
Se emplean ratones exógenicos de la cepa (NIH) del National Health Intitute de 
Estados Unidos, con un peso de 18 - 20 g y 21 días de nacidos 
aproximadamente. 
Las pruebas de control de calidad se realizaron empleando cobayos de la cepa 
Hartley, con un peso entre 250 - 350 g. Se realizó un diseño experimental 
factorial, para 6 ensayos por cada lote, teniendo en cuenta dos variables: 
porcentaje de formaldehído y agitación, estos ensayos fueron realizados por 
duplicado. Como variables de respuesta se tomaron el título (Lf/mL) y el 
porcentaje de mortalidad. 
 
VERIFICACIÓN DE LA CALIDAD DEL TOXOIDE OBTENIDO, DE ACUERDO A 
LOS ESTÁNDARES ESTABLECIDOS POR LA OMS. 
Prueba de toxicidad 
Se tomó como base el título obtenido después de la detoxificación se preparó 
10 mL con 500 Lf/mL, para inocular 1 mL en cada cobayo por lote, con un 
período de observación de 21 días. En caso se haya una toxicidad se lleva a 
sugerir que se debe aumentar el tiempo de detoxificación para asegurar la 
estabilidad del polímero. 
Prueba de potencia 
Se preparó con 100 mL de vacuna según su título para cada lote, inoculando 1 
mL vía subcutánea a cada cobayo y se observó por 45 días. Consisten en las 
pruebas de inmunización. 
Prueba de reversión 
Se prepararon 300 mL por lote teniendo en cuenta el título de cada uno; de 
estos 300 mL, se tomaron alícuotas de 100 mL en frascos Schott y se 
mantuvieron a tres temperaturas diferentes (4°C, 20°C y 37°C) por lote, se 
inocularon 5 mL del toxoide para cada cobayo y se observaron por 21 días. Se 
someter el toxoide a diferentes temperaturas no pierde su estabilidad, y según 
la Farmacopea americana es el período de tiempo durante el cual un producto 
retiene, dentro de los límites especificados y de principio a fin de su tiempo de 
almacenamiento y uso (vida útil), las mismas propiedades y características que 
poseía en el momento de su manufactura. 
Prueba de esterilidad 
Se tomaron 5 mL del toxoide tetánico, se sembró 1 mL de muestra estéril en 
cada uno de los cuatro tubos de medio de cultivo (2 de tripticasa de soya y 2 
de tioglicolato fluido) y posteriormente se incubaron los tubos con tioglicolato a 
25°C y los de tripticasa de soya a temperatura ambiente; estos tubos se 
observaron los 4 primeros días y luego a intervalos regulares por 10 días más. 
Así se verifica la calidad del toxoide y ver algún crecimiento microbiano y 
determinar si es satisfactoria o no. 
TOXINAS DIFTÉRICA 
 
Preparación de abasto de la cepa Corynebacterium diphtheriae PW-8 a partir de la 
semilla de trabajo para producción experimental de Toxina Diftérica 
Se realizó la apertura de vial del cultivo liofilizado de Corynebacterium 
diphtheriae Cepa PW-8 denominado CMH-CD2-LI en cuatro tubos conteniendo 
medio de cultivo Michigan, los cuales se incubaron a 35 °C por 72 h, se 
realizaron pruebas de pureza (cultivo y morfología microscópica), 
posteriormente, se realizaron tres pases adicionales en tubos con medio de 
cultivo Michigan (48 h por pase) incubándose bajo las mismas condiciones de 
trabajo; al finalizar el tiempo de incubación del último pase se sembraron tres 
matraces conteniendo 100 mL de medio de cultivo Müller & Miller y se 
incubaron a 35 °C durante 48 h determinándose Lf’s y absorbancias de cada 
pase. 
Al concluir el tiempo de incubación se procedió a sembrar dos garrafones 
conteniendo 1.5 L de medio de cultivo Müller & Miller con el volumen total de 
los matraces, uno por cada garrafón, se incubaron a 35 °C durante 48 h en 
agitación a 250 rpm, durante esta etapa del proceso se realizaron las pruebas 
de: límite de floculación, morfología microscópica y pureza. 
A las 48 h se realizó la cosecha del cultivo bacteriano y se obtuvo el 
sobrenadante por decantación, al sobrenadante se le realizó la prueba de límite 
de floculación y se determinó la pureza mediante la observación de la 
morfología microscópica del paquete celular. 
El paquete celular obtenido de la cosecha se re suspendió con leche 
descremada estéril en relación 1:1 (v/v), se homogeneizó y se dosificó en viales 
estériles, se codificó con la denominación CTH-CD7-LE y se conservó en un 
intervalo de temperatura -20 a -35°C. 
Propagación de la cepa Corynebacterium diphtheriae PW-8 
La cepa Corynebacterium diphtheriae Cepa PW-8 se descongeló directamente 
en el vial donde se encontraba congelada a temperatura ambiente, el volumen 
total se transfirió a un tubo conteniendo medio de cultivo Michigan, cuidando 
que el inóculo quedara en la superficie del medio, se incubó en condiciones 
estacionarias a 35°C durante 72 h, a partir de este cultivo se realizó un cultivo 
secundario empleando 3 tubos con el medio de cultivo y las condiciones 
descritas anteriormente pero con un tiempo de incubación de 48 horas, una vez 
transcurrido el tiempo de incubación se determinó el Límite de Floculación a 
cada tubo por el método de Dean Webb (Lf/mL), la cual es una prueba de 
reacción antígeno-anticuerpo empleada para conocer la cantidad de toxina 
producida por C. diphtheriae. Además, se realizó la determinación de la 
morfología microscópica (técnica de Gram) con la finalidad verificar la pureza 
del cultivo y la densidad óptica para determinar la concentración celular. De la 
misma forma se realizaron seis transferencias consecutivas de cultivo de tubo 
a tubo realizando las determinaciones mencionadas para estandarizar los 
pases que se emplearán en la transferencia a nivel de matraz. 
Es importante puntualizar que por razones de bioseguridad este procedimiento 
se llevó a cabo en Área Aséptica en una Campana de Seguridad Biológica 
Clase A. 
Determinación de la concentración de Hierro (Fe++) óptima para la producción de 
la toxina diftérica 
Debido a que la producción de la Toxina Diftérica es dependiente de las 
concentraciones de hierro (Fe++) en el medio de cultivo, se realizó una prueba 
de producción de Toxina Diftérica a nivel matraz con medio de Müller & Miller. 
Se determinó la concentración óptima de este elemento existente en el medio 
de cultivo que se produce en Birmex mediante la producción de toxina diftérica 
en los matraces con cultivo bacteriano. Lo anterior se realizó determinando la 
concentración de Fe en el medio de cultivo empleando un Kit comercial (Kit 
Hach 2007, Kit para determinación de Fe++). 
Valoración dela concentración de Hierro (Fe++) óptima para la producción de la 
toxina diftérica 
Una vez determinadas las concentraciones de hierro se procedió a realizar las 
pruebas de producción de Toxina a nivel matraz, para lo cual se utilizó el 
crecimiento bacteriano en tubo en medio Michigan del paso anterior y con los 
cuales se inocularon matraces conteniendo 100 mL de medio de cultivo Müller 
& Miller conteniendo 0.5, 0.75 y 1.0 mg/L de Hierro, se incubó a 
35°C/250rpm/48h, al final se realizaron las siguientes determinaciones: 
concentración de Toxina (Lf/mL), concentración de proteínas totales (D.O. a 
280 nm) y determinación de la morfología microscópica (técnica de Gram), esto 
con la finalidad de estandarizar la propagación a nivel de matraz. 
Escalamiento a nivel garrafón 
Establecida la concentración óptima de Fe++ para la producción de la toxina en 
el medio de cultivo Müller & Miller, se realizaron subcultivos a nivel matraz a 
partir de los tubos de propagación del crecimiento en medio Michigan, 
seleccionando el número de pase óptimo (con mejor producción de toxina y 
mayor densidad óptica) y utilizando las mismas condiciones descritas 
anteriormente. 
De los cultivos obtenidos a nivel de matraz se tomaron 300 mL y con ellos se 
inocularon, cinco garrafones conteniendo 1.5 L de medio de cultivo cada uno, 
manteniendo una relación inóculo-volumen de medio del 5% (v/v). 
Se incubaron los cultivos bacterianos en garrafón bajo condiciones de 
fermentación a 35°C/ 250rpm/ 48h, tiempo durante el cual se realizó la cinética 
de crecimiento del microorganismo con el propósito de determinar el tiempo de 
producción de la toxina diftérica, para ello se tomaron muestras del garrafón 
cada 3 h a cada muestra se le determinó: pH, D.O. a 280 nm, Límite de 
floculación (Lf/mL) y morfología microscópica. Se corrieron tres lotes 
experimentales en esta etapa. 
Obtención de la toxina diftérica 
Establecidas las condiciones óptimas de producción de Toxina Diftérica a nivel 
garrafón de 4 L, se procedió a centrifugar el cultivo para separar el paquete 
celular. Esto se realizó bajo las siguientes condiciones: 250 rpm, 6°C, 15 m in, 
se separó el paquete celular residual y al sobrenadante resultante se le 
determinó el Título de la Toxina Diftérica (Lf/mL) y determinación de proteínas. 
Prepurificación y detoxificación de toxina diftérica 
Para la destoxificación de la Toxina Diftérica en primera instancia se precipitó 
el sobrenadante con sulfato de amonio al 27 % y se centrifugó a 3000 rpm por 
20 min, se eliminó el sedimento, posteriormente el sobrenadante recuperado 
del proceso anterior se diafiltró con solución salina 0.85% y concentró hasta un 
volumen de 2 L, utilizando un sistema de filtración por flujo tangencial con un 
cassette de 10KDa de corte molecular. A la Toxina Diftérica prepurificada y 
concentrada se le realizó determinación de Límite de Floculación (Lf/mL) y 
determinación de proteínas por el método de BCA y se ajustó el volumen de la 
Toxina diftérica para tener una concentración de 80 ±10 Lf´s/mL con solución 
salina 0.85%. 
A la Toxina Diftérica prepurificada se le adicionó formaldehído concentrado 
para obtener una concentración final del 0.7 % de acuerdo a las 
recomendaciones de la OMS (2005). (42) 
La Toxina Diftérica se incubó de acuerdo, al método de producción actual 36 ± 
1 °C por 42 días (6 semanas) con una agitación manual diaria homogenizando 
el producto; durante este tiempo se tomaron muestras del garrafón cada 
semana y se evaluó para determinar si se había logrado la detoxificación del 
producto mediante la prueba de Toxicidad Residual en cobayo, descrita en la 
Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (FEUM 2011). 
 REFERENCIAS : 
 
 
 
 
 
 
APLICACIONES 
Propiedades farmacológicas 
Exotoxina producida durante el crecimiento de Clostridium tetani en medio 
semisintético, libre de proteínas. La toxina producida por el bacilo se somete a 
un proceso de destoxificación con formaldehído, que inactiva a la toxina y no 
afecta su capacidad antigénica. Su administración intramuscular confiere 
inmunidad activa contra el tétanos. La forma adsorbida del toxoide tetánico se 
obtiene por la adición de hidróxido de aluminio o fosfato de aluminio a la 
solución del toxoide tetánico inactivado con formaldehído. La administración de 
la forma adsorbida vuelve más lenta la absorción del material antigénico, induce 
una titulación mayor de anticuerpos y la inmunidad activa persiste por más 
tiempo. Su aplicación está indicada como profiláctico a fin de evitar la infección 
tetánica y sus complicaciones en individuos expuestos a heridas 
potencialmente contaminadas con el clostridio. También se usa en combinación 
con toxoide diftérico y vacuna contra la tosferina para la inmunización activa 
primaria de niños menores de seis años. 
Indicaciones 
Inmunización activa contra el tétanos. Profiláctico en personas con inmunización 
incompleta y que han sufrido heridas con riesgo de ser infectadas por esporas de 
Clostridium tetani. 
(1997)Medicinal Products. Human Medicines Evaluation Unit. CPMP/BWP. Vol. 
477:1-14. RECUPERADO DE LA BAS DE DATOS ,OMS. 
(1994) Weiss A. and S. Falkow. Genetic analysis of phase change in Bordetella 
pertussis. Infection and Immunity, 1984, Vol. 43:263-269. 
 (1995) Weiss A. and E. Hemlett. Virulence factors of Bordetella pertussis. Ann. Rev. 
Microbio/. 1986, Vol. 40, 661-686 
Contraindicaciones y precauciones 
La inmunización con toxoide tetánico está contraindicada en pacientes con 
enfermedad respiratoria aguda u otras infecciones activas, así como en 
aquellos con insuficiencia hepática o renal y en sujetos inmunodeprimidos o 
con fiebre. En casos de infección tetánica, se debe emplear la antitoxina 
tetánica o la inmunoglobulina tetánica. Si hay hipersensibilidad, se deben 
considerar los riesgos y los beneficios de su administración. Se recomienda 
disponer de la medicación apropiada para el control de las reacciones graves 
de hipersensibilidad. Las respuestas locales y sistémicas ocurren con mayor 
frecuencia y son más intensas después de varias administraciones del toxoide. 
No se recomienda en menores de ocho semanas de edad. 
-Reacciones adversas 
 
Frecuentes: reacciones locales (enrojecimiento, edema, nódulos). 
 
Poco frecuentes: reacciones sistémicas (fiebre moderada y transitoria, malestar 
general). 
Raras: fiebre alta, reacción anafiláctica. 
 
-Advertencias para el paciente 
 
Hay que informar al médico si se presentan reacciones locales graves, fiebre 
alta, erupción cutánea, dificultad respiratoria. 
Vía de administración y dosis 
Adultos: 
Intramuscular. Inmunización activa contra el tétanos, una dosis de 0.5 ml y una 
segunda dosis de 0.5 ml, cuatro a ocho semanas después de la primera dosis. 
Revacunación, 0.5 ml al año de la segunda dosis, y después cada 10 años. 
Niños: 
Intramuscular. Para mayores de ocho semanas, misma dosis que los adultos. 
Presentaciones 
 
TETANOL PUR. NOVARTIS. Suspensión inyectable. Jeringa pre-llenada. Cada 
jeringa pre llenada con 0.5 ml contiene 40 UI de toxoide tetánico adsorbido en 
hidróxido de aluminio. Cajas con una y 10 jeringas. 
 REFERENCIAS : 
 
(1986) Weiss A. and S. Falkow. Genetic analysis of phase change in Bordetella 
pertussis. Infection and Immunity, 1984, Vol. 43: (1 ):263-269. 9. Weiss A. and E. 
Hemlett. Virulence factors of Bordetella pertussis. Ann. Rev. Microbio/, Vol. 40, 661-
686 
(1970) Pittman M. Bordetella pertussis-Bacterial and host factors in the 
pathogenesis and prevention of whooping cough. In: Mudd S, ed. Infectious Agent 
and Host Reactions. Philadelphia:WB Saunders Co 239-27 
REFERENCIAS 
 
(FARMACOPEA, 2018) (Quintero, 1998) (Access Medicina, 2016) (OMS, 2006) 
(Céspedes, 2003) (RODRÍGUEZ, 1997) 
 
Referencias 
 
 
 
Access Medicina.(2016). Obtenido de Toxoide Tetánico: vacunas y toxoides: 
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1552&sect 
ionid=90375779 
Céspedes, M. D. (2003). EVALUACIÓN DE LA INFLUENCIA DE LA 
AGITACIÓN Y DE LA 
CONCENTRACIÓN DE FORMALDEHÍDO EN LA DETOXIFICACIÓN DE 
LA TOXINA TETÁNICA. 
Universitas Scientiarum Vol. 8, N° 2, 23-30. 
 
FARMACOPEA. (30 de Marzo de 2018). FARMACOPEA. Obtenido de Vacuna 
contra el tetanos adsorbida: 
http://www.anmat.gov.ar/webanmat/fna/flip_pages/Farmacopea_Vol_III/f 
iles/assets/bas ic-html/page751.html 
OMS. (2006). Vacuna contra la Difteria . Organiazación Mundial de la Salud, 1- 
8. 
OMS. (Febrero de 2017). Documento de posición de la OMS. Obtenido de 
Vacuna antitetánica: 
www9.who.int/immunization/position_papers/pp_tetanus_2017_ES.pdf 
 
Quintero, J. (1998). Instituto Nacional de la Salud. Obtenido de Estudio de la 
Producción por 
Fermentación de Tóxina Tetánica : 
file:///C:/Users/PC1/Downloads/30025-108065-1PB.pdf 
http://www.anmat.gov.ar/webanmat/fna/flip_pages/Farmacopea_Vol_III/f
RODRÍGUEZ, C. y. (1997). Evaluacion de la Influencia del pH y concentración 
de formaldehído en la disminución del valor floculante de la toxina de la 
vacuna tetánica en el proceso de detoxificación. Universidad Colegio 
Mayor de Cundinamarca: Facultad de Ciencias Bogotá, 1-81. 
Smith, J. (2010). CONCEPTOS Y PRINCIPIOS GENERALES DE 
INMUNIZACIÓN. Normas PAI, 15-32.