LABORATORIO CLINICO UP2 M4

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PRUEBAS DE COAGULACIÓN
Objetivo principal: Conocer las pruebas globales de la coagulación y su utilidad.
Objetivos específicos: Conocer el fundamento de las pruebas de coagulación; realizar las pruebas de PT. PTT, tiempo de sangría y tiempo de coagulación; aprender a interpretar los resultados obtenidos.
* Pruebas globales de coagulación: 
· el recuento de plaquetas
· tiempo de protrombina (PT) 
· el tiempo de tromboplastina parcial (PTT). 
* Estas pruebas permiten verificar en los individuos cómo se encuentran los principales factores que intervienen en el proceso de coagulación cuyo objetivo es la formación de la fibrina a partir de fibrinógeno.
Tiempo de protrombina (PT)
* Mide el tiempo de coagulación del plasma después de adicionar una fuente de factor tisular (Tromboplastina) y calcio.
* Esto genera activación del factor X con la consecuente formación de trombina y por último un coágulo de fibrina.
1. Muestra de PT
- Sangre venosa en tubo tapa azul con el anticoagulante nitrato de sodio 3.2 o 3.8%.
- Proporción de 9 partes de sangre por 1 parte de nitrato.
- La muestra se mezcla suavemente con el anticoagulante inmediatamente después de tomar la muestra.
- Se centrifuga 10 minutos a 2000 rpm.
- Separar el plasma sin dañar la capa de células rojas.
- Tapar la muestra.
2. Procedimiento PT
- Precalentar el reactivo (37 grados).
- Plasma 0,1 ml.
- Incubar 1 minuto (37 grados).
- Reactivo PT 0,2 ml.
- Activar el cronómetro con la adición del reactivo, se anota el tiempo de formación del coágulo.
- Resultado: Segundos o INR.
- Rango normal: En plasma normal de 10 a 14 segundos.
- Prolongado en presencia de: Corticosteroides, EDTA, anticonceptivos, asparaginasa, etanol, tetraciclina y anticoagulantes como la heparina y warfarina.
Tiempo parcial de tromboplastina activada (aPTT)
* Se realiza por la adición a la muestra del reactivo Aptt que contiene un activador del plasma y fosfolípidos.
* Esta muestra se incuba por 3 minutos a 37 grados.
* Después se recalcifica con cloruro de calcio y se contabiliza el tiempo de formación del coágulo.
1. Muestra aPTT
* Es igual que para el PT
2. Procedimiento aPTT
* Precalentar el CaCl2 a 37 grados antes del uso.
* Tubo de muestra.
* Reactivo PTT 0,1 ml.
* Nuestra 0,1 ml.
* Incubar 3 minutos a 37 grados.
* Agregar el CaCl2 precalentado.
* Activar el cronómetro con la adición de CaCl2.
* Anotar el tiempo que se necesito para la formación del coágulo.
* Resultados: Segundos.
* Rango normal: En plasma normal de 25-34 segundos.
* Prolongado en presencia de: EDTA, heparina, anticonceptivos orales, embarazo, drogas tipo cumarínico.
Test del tiempo de coagulación
* Es el tiempo transcurrido desde que sale la sangre al tubo de ensayo hasta la formación del coágulo.
1. Muestra
- Muestra de sangre venosa en tubo tapa roja
2. Procedimiento 
- En el momento en el que se introduce la sangre al tubo, se oprime el cronómetro.
- Se lleva el tubo a baño maría a 37 grados.
- Se inclina el tubo a 45 grados sin que se caiga la sangre.
- Cuando se forma la sangre se para el cronómetro.
- Valores normales: 5 a 10 minutos.
- Valores anormales: Más de 15 minutos.
Test del tiempo de hemorragia o sangría
1. Método Ivy (Modificado)
- Limpiar con alcohol la superficie anterior del antebrazo y dejar secar.
- Colocar por encima del codo un tensiómetro e hinchar hasta un presión de 40 mmHg.
- Elegir una zona que no tenga venas superficiales visibles, se aprieta lateralmente la piel entre pulgar y el índice y se efectúa una punción con un Surgicutt adult 
- En el momento en que se hace la incisión se dispara el cronómetro.
- A los 30 segundos se absorbe la sangre mediante papel de filtro.
- Se absorbe de manera similar cada 30 segundos hasta que la sangre ya no tiña el papel filtro. 
- Parar el cronómetro. 
- Retirar el tensiómetro, limpiar el antebrazo y colocar la cura. 
- Valores normales: Hasta 9 minutos y se anotará si continua sobrepasados los 15 minutos.
LECTURA DE LABORATORIO
La formación de coágulos para evitar hemorragias en lesiones.
1. Se toma un tapón plaquetario y luego un coágulo de fibrina.
2. La fibrina se puede formar por:
· mecanismos extrínsecos: 
· se da por el factor tisular (factor III)
· están en superficies celulares que no se contactan con la circulación 
· mecanismo intrínsecos 
factores VIII, IX, XI, XII
Ambos mecanismos se unen y se utilizan factor I (fibrinógeno)
factor v, ii, x
· mecanismo intrínseco: el fibrinógeno se convierte por último en fibrina.
· Los factores de coagulación están en la superficie de las plaquetas.
La fibrinolisis se destina cuando el coágulo ya no es necesario o también para evitar la formación de coágulos innecesarios.
· Se da por el activador del plasminógeno tisular (AP-I) que convierte el plasminógeno en plasmina.
· Las fibrinolisis se conecta con el mecanismo intrínseco activando el factor XII por la plasmina.
· La antiplasmina y el inhibidor de (AP-I) es la regulación para evitar una hemorragia debido a la obstrucción de coágulos.
A. La PTT: es para determinar los mecanismo intrínsecos y común (coágulo de fibrina)
B. cuando los tiempos de las pruebas aumentan es por deficiencia de los factores, inhibición de estas o por factores externos como medicamentos.
PT: mide la vía extrínseca (factor 7-3) y la vía común (factor 10, 5,2,1) 
PTT: mide la vía Intrínseca (factor 8-9)
INR: razón normalizada internacional 
tiempo del paciente / tiempo estandarizado (0.9-1.3)
elevado al ISI= un índice.
El factor tisular activa el proceso de coagulación
se activan las plaquetas y después la coagulación que tiene las proteínas, calcio y vitamina K.
Las pruebas de coagulación se realizan en pacientes:
1. pacientes con problemas hepáticos
2. pacientes con mala nutrición
3. pacientes con compromiso inmunitario 
4. pacientes con deficiencia de glóbulos rojos
5. hemorragias (menstruales, o que no se cierren) 
6. procedimientos quirúrgicos 
7. problemas dentales
8. trombosis-anticoagulantes
ANTICOAGULANTES 
· HEPARINA (PT)
· WARFARINA (PTT)
PLAQUETAS: se dan estudios de hemograma para medir su cantidad (150000-400000) 
La función es la adherencia plaquetaria (agregación plaquetaria) y después la formación del coágulo.
tubo verde heparina (anticoagulante)
tubo azul obtiene plasma (anticoagulante, citrato de sodio)
tubo rojo-amarillo obtiene suero (sin aditivos)
tubo morado EDTA (anticoagulante)
SUERO: TIENE TODAS LAS PROTEÍNAS
PLASMA: TIENE EL FACTOR DE COAGULACIÓN
PT
muestra: la sangre venosa se centrifuga y queda el plasma (plasma) 100 microL
reactivo: tromboplastina 200 microL 
VÍA EXTRÍNSECA 
10-15 seg
· El citrato de sodio se une al calcio y no se activa la coagulación.
· las plaquetas activan la coagulación
· La tromboplastina tiene fosfolípidos, calcio y factor tisular.
PTT
muestra: (plasma) 100 microL
reactivo: (tromboplastina, fosfolípidos) 100 microL
VÍA INTRÍNSECA 
25-34 seg
· Se hace una mezcla por 3 min a 37°C 
· Se activa la coagulación CaCl (100 microL)
· Aquí no se saca INR
TIEMPO DE SANGRÍA 
· método IVY 
· método DUKE
10 min
TIEMPO DE COAGULACIÓN 
· 37°C 
· 5-10 min
· tubo rojo sin anticoagulante