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Organización de la célula 79 dores pueden conseguirla cuando examinan moléculas aisladas, como proteínas y ADN. Este alto grado de resolución permi...

Organización de la célula 79 dores pueden conseguirla cuando examinan moléculas aisladas, como proteínas y ADN. Este alto grado de resolución permite amplifi caciones de más de 1 millón de veces comparadas con las ampliaciones típicas de no más de 1500 a 2000 veces del microscopio óptico. La imagen formada por el microscopio electrónico no es visible directamente. El propio haz de electrones está formado por electrones cargados de energía que, debido a su carga negativa, pueden enfocarse con electroimanes, igual que una imagen se enfoca con las lentes del microscopio óptico (FIGURA 4-4b). Dos tipos de microscopios elec- trónicos son el microscopio electrónico de transmisión (MET) y el microscopio electrónico de barrido (MEB). Los acrónimos MET y MEB también identifi can las micrografías realizadas usando un ME de transmisión o de barrido. Las micrografías electrónicas son en blanco y negro. Con frecuencia son coloreadas para resaltar diversas estructuras. En la microscopia electrónica de transmisión, la muestra se sumerge en resinas y después se hacen cortes extraordinariamente fi nos (50 a 100 nm de grosor) con una cuchilla de vidrio o de diamante. Después se coloca un corte sobre una pequeña rejilla metálica. El haz de electrones pasa a través de la muestra y después incide sobre una placa fotográfi ca o sobre una pantalla fl uorescente. Cuando observe las micrografías electrónicas de transmisión (MET) en este capítulo (y en cualquier otra parte), debe considerar que cada una representa sólo un corte delgado de una célula. Los investigadores pueden detectar ciertas moléculas específi cas en las imágenes del microscopio electrónico, con el uso de moléculas de anticuerpos, a las que se unen partículas de oro diminutas. Las densas partículas de oro bloquean el haz de electrones, identifi cando la locali- zación de las proteínas reconocidas por los anticuerpos, que se observan como puntos negros precisos en la micrografía electrónica. En el microscopio electrónico de barrido, el haz de electrones no pasa a través de la muestra. En su lugar, la muestra se recubre con una fi na película de oro o algún otro metal. Cuando el haz de electrones golpea varios puntos de la superfi cie de la muestra, se emiten electrones se- cundarios cuya intensidad varía dependiendo del contorno de la super- fi cie. Los patrones de emisión registrados de los electrones secundarios proporcionan una imagen 3-D de la superfi cie (FIGURA 4-4c). El MEB da información acerca de la forma y características externas de la mues- tra que no se pueden obtener con el MET. Observe que el MO, el MET y el MEB se enfocan utilizando principios similares. Un haz de luz o un haz de electrones se proyecta por medio de un condensador sobre la muestra y ésta se amplifi ca a través del objetivo y el ocular en el caso del microscopio óptico y por el objetivo y el proyector en el caso del MET. La imagen del MET se proyecta en una pantalla fl uorescente y la imagen del MEB se ve en una especie de pantalla de televisión. Realmente, las lentes del microscopio electrónico son imanes que desvían el haz de electrones. En la actualidad algunos otros tipos de microscopios están disponibles, incluso dos clases más de microscopios electrónicos. También se han inventado microscopios digitales que utilizan cámaras para enviar una imagen digital a un monitor. Los biólogos utilizan técnicas bioquímicas para estudiar los componentes de la célula El ME es una herramienta potente para estudiar las estructuras celulares, pero tiene limitaciones. Los métodos que se utilizan con el fi n de prepa- rar las células para microscopia electrónica produce su muerte y pueden alterar su estructura. Además, la microscopia electrónica proporciona pocas pistas acerca de las funciones de los orgánulos o de otros compo- nentes de la célula. Para determinar qué hacen realmente los orgánulos, los investigadores utilizan diversas técnicas bioquímicas. óptica en el interior de la célula (FIGURA 4-3d y e); las


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Biología - Eldra Solomon, Linda Berg, Diana Martin - 9 Edición-comprimido-113
1 pag.

Biologia Universidad de Buenos AiresUniversidad de Buenos Aires

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