CUANTIFICACIÓN DE HEMOGLOBINA: Una vez obtenida la curva de calibración., podemos proceder a medir la hemoglobina en muestras de sangre, de la sigu...

CUANTIFICACIÓN DE HEMOGLOBINA: Una vez obtenida la curva de calibración., podemos proceder a medir la hemoglobina en muestras de sangre, de la siguiente manera: 1. Usando pipeta volumétrica., pipetear 5.0 ml de la solución de Drabkin en un tubo de ensayo de 13 x 100mm. 2. Agregar 0.02 ml de sangre con la pipeta de Sahli. 3. Mezclar por inversión y dejar reposar durante 10 minutos. 4. Leer transmitancia a 540 nm ajustando a 100% con blanco de cianometa. 5. Convertir el porcentaje de transmitancia en gramos de hemoglobina por decilitro, usando la curva de calibración. 6. Un método alterno para la cuantificación, sin usar la curva de calibración, puede ser el uso de una solución patrón para obtener el factor de calibración. Un factor de calibración se obtiene de la siguiente manera: Factor = Concentración del estándar Absorbancia Una vez obtenido éste, la concentración de hemoglobina, en una muestra, se obtiene de la siguiente manera: Concentración de Hemoglobina = Absorbancia x Factor