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Otros métodos que no tienen como base la PCR. 1. Hibridación in situ fluorescente11 (FISH): Técnica de citogenética molecular para detectar la loca...

Otros métodos que no tienen como base la PCR.
1. Hibridación in situ fluorescente11 (FISH): Técnica de citogenética molecular para detectar la localización de secuencias de ADN conocidas en determinados cromosomas, empleando sondas (probes) fluorescentes que se unen a determinadas partes del cromosoma con las que muestran un alto grado de similitud. El número de señales fluorescentes observadas mediante microscopía fluorescente indica el número de cromosomas presentes. Los resultados se obtienen entre 24-48 horas.
2. Inmunoprecipitación de ADN metilado (MeDIP)1,12: Su base asienta en que ciertos genes del ADN materno están metilados (silenciados) pero desmetilados en el feto (activos), por lo que es posible distinguir los alelos fetales de los maternos identificando estas regiones. Actúa sobre el ADN enriqueciendo las regiones altamente metiladas mediante uso de anticuerpos específicos para 5-metil-citosina o proteínas de unión a metilo. Posteriormente hibrida el ADN genómico y el anticuerpo.
3. Espectometría de masas (MS)1,12: Técnica experimental analítica basada en la posibilidad de separar especies moleculares según su masa. Es capaz de convertir las moléculas en iones a los que se les pueda dirigir y manipular por aplicación de campos eléctricos y magnéticos. La identificación de cff DNA siguiendo este método consiste en el análisis de la masa exacta de cada fragmento de ADN para determinar su secuencia genética y, por tanto, detectar alelos específicos fetales que se distingan de las secuencias maternas por una diferencia tan mínima como una única base.

Esta pregunta también está en el material:

AETSA_2011_2_7_Diagnostico_aneuploidias
68 pag.

Dna Vicente Villegas ChavezVicente Villegas Chavez

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Los métodos que no tienen como base la PCR son: 1. Hibridación in situ fluorescente (FISH): Técnica de citogenética molecular para detectar la localización de secuencias de ADN conocidas en determinados cromosomas, empleando sondas fluorescentes que se unen a determinadas partes del cromosoma con las que muestran un alto grado de similitud. El número de señales fluorescentes observadas mediante microscopía fluorescente indica el número de cromosomas presentes. Los resultados se obtienen entre 24-48 horas. 2. Inmunoprecipitación de ADN metilado (MeDIP): Su base asienta en que ciertos genes del ADN materno están metilados (silenciados) pero desmetilados en el feto (activos), por lo que es posible distinguir los alelos fetales de los maternos identificando estas regiones. Actúa sobre el ADN enriqueciendo las regiones altamente metiladas mediante uso de anticuerpos específicos para 5-metil-citosina o proteínas de unión a metilo. Posteriormente hibrida el ADN genómico y el anticuerpo. 3. Espectometría de masas (MS): Técnica experimental analítica basada en la posibilidad de separar especies moleculares según su masa. Es capaz de convertir las moléculas en iones a los que se les pueda dirigir y manipular por aplicación de campos eléctricos y magnéticos. La identificación de cff DNA siguiendo este método consiste en el análisis de la masa exacta de cada fragmento de ADN para determinar su secuencia genética y, por tanto, detectar alelos específicos fetales que se distingan de las secuencias maternas por una diferencia tan mínima como una única base.

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