Integración ciclo 2 para 3IM1

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INTEGRACIÓN CICLO II.
1. ¿Para qué se utiliza la curva tipo que se obtuvo en la segunda sesión de ciclo 2 y qué parámetros se grafican?
Para conocer el tipo de azucares reductores, donde en el eje de las y se coloca la absorbancia y en las x los μmoles de azucares reductores.
2. Escriba la reacción (fórmulas) que se utilizó para obtener la curva tipo de azúcares reductores, especificando las condiciones para que se lleve a cabo la reacción.
Las condiciones se dieron en medio básico a 92° C por 5 minutos
3. De los reactivos empleados en la reacción de los azúcares reductores con el 3,5 DNS: Glucosa 0.005M, Fructosa 0.005 M, Sacarosa 0.2 M, regulador de fosfatos, 3,5 DNS. ¿Cuál o cuáles varían su volumen en los tubos problema y por qué?
La Glucosa 0.005M y Fructosa 0.005 M
4. Explique ¿mediante qué parámetro determinó la formación de los productos de la reacción química?
Se usó la absorbancia cómo parámetro
5. Esquematice el equilibrio ceto-enólico que se produce entre los azúcares reductores.
6. Determine con ayuda de la curva tipo los micromoles de azúcares reductores para dos muestras con absorbancias de 0.378 y 0.933
Para 0.378 me dio 0.34
Para 0.933 me dio 7.6
7. ¿Cómo obtuvieron las U.I=Vo?
Al interpolar el valor de la absorbancia en la curva tipo se tiene la concentración de azucares en μmoles, se dividen entre 10 para obtener los valores de Vo
8. En la práctica en donde se evaluó el efecto del pH sobre la velocidad de reacción. Describa cómo se observa la serie de tubos que se obtienen. Sin leer en el espectrofotómetro podría indicar el pH óptimo, de la sacarasa. Argumente su respuesta.
Se observan coloraciones son leves y van en aumento hasta el tubo del medio, para después volver a decrecer, por lo que se intuye que el pH optimo está alrededor de este tubo. Sin embargo no es posible determinar el pH ya que no es posible cuantificarlo a “ojo de buen cubero”.
9. ¿Qué elementos del sistema requiere mantener constante cuando se evalúa el efecto del pH sobre la velocidad de reacción enzimática?
La concentración de sustrato, de enzima, la temperatura y agua. Es decir, el único que varía es el pH, ya que es el que se va a trabajar, por lo que el resto deben ser constantes.
10. Indique la utilidad del DNS
Le brinda color a la reacción, generar un equilibrio ceto-enólico y generar una reacción de oxido-reducción para inactivar (desnaturalizar) la enzima.
11. En la evaluación del efecto de la concentración de enzima, que condición o condiciones se requieren para que la proporcionalidad con respecto a la velocidad de reacción no se pierda.
Que exista una cantidad suficiente o en exceso de sustrato (concentración)
12. En el siguiente gráfico, explique qué representa los valores de pKa. 
Indican 
13. Explique, desde el punto de vista energético ¿de qué manera funcionan las enzimas?
Con la gráfica de energía libre de Gibbs, se da la energía de activación, que es la diferencia de energía que hay entre el estado de transición (el complejo enzima-sustrato) y el sustrato en su estado base. Si la energía de activación disminuye, la velocidad de reacción aumenta.
14. ¿Qué es la Ea y cómo la determinó?
La energía de activación, que es la diferencia de energía que hay entre el estado de transición (el complejo enzima-sustrato) y el sustrato en su estado base.
15. Describa cómo realizó el experimento del efecto de la temperatura
Se deben preparar 6 tubos testigos y 6 tubos problema (esto debido a que se pueden dar reacciones de azucares reductores sin estar presente la enzima), a los que se le añaden 0.5 mL de sacarosa, 0.5 mL de regulador de acetatos a pH 4.7 y 0.75 mL de agua. Posteriormente se preincuban por 5 minutos los tubos 1 (problema y testigo) a 0 ° C, los tubos 2 a 25° C, los tubos 3 a 37° C, los tubos 4 a 50° C, los tubos 5 a 75° C y los tubos 6 a 92°C. Una vez calentados, se añaden o.25 mL de invertasa exclusivamente a los tubos problema Para posteriormente incubar todos los tubos por 5 minutos a las temperaturas de la preincubación. Una vez pasados esos 5 minutos, se añaden 0.5 mL de 3,5-DNS y 0.25 mL de enzima a los tubos testigo, mientras que a los tubos problema solo se le añaden 0.5 mL de 3,5-DNS para inactivar (desnaturalizar) la enzima. Para desarrollar el color, todos los tubos deben calentarse en baño maría por 5 minutos a 92° C e inmediatamente enfriar en baño de hielo y diluir todos los tubos con 2.0 mL de agua. Para obtener las lecturas, se debe leer en un espectrofotómetro a 540 nm de longitud de onda.
16. Si estuviera frente a los tubos de la reacción enzimática, evaluando el efecto de la temperatura ¿Cómo demostraría que se llevó la reacción de manera esperada?
Se observaría una intensidad de color variada, teniendo los primeros más tenues que el de en medio para después volver a disminuir, lo que significaría que la temperatura fue importante en el desarrollo de la velocidad de la reacción en los tubos.
17. ¿Qué representa la siguiente figura? ¿Qué información puede obtener?
La grafica representa la interacción que tiene la temperatura con relación a la velocidad de reacción de una enzima. De esta grafica se puede obtener la temperatura optima para que la enzima desempeñe su fusión en el menor tiempo posible, además de mostrar el rango en que la enzima es útil, ya sea por que está inactiva gracias a que no hay energía cinética para iniciar la reacción (en el caso de la zona de la gráfica antes de llegar a la temperatura optima) o que se haya desnaturalizado debido a las altas temperaturas (que se representó en la zona de decremento después de llegar a la temperatura optima)
18. Explique de qué manera afecta la concentración del sustrato a la velocidad de una reacción enzimática
La enzima, al trabajar con su sustrato, va a depender directamente de cuanto sustrato disponga, ya que si existe una menor concentración, la probabilidad de que una enzima encuentre una molécula de sustrato gracias a las colisiones efectivas, será menor, por lo que la velocidad va a llegar a un punto de equilibrio una vez que el sustrato se agote. Mientras que si el sustrato tiene altas concentraciones, las colisiones efectivas serán más probables, por lo que las enzimas tendrán siempre sustrato para accionar, por lo que la velocidad de reacción se va a disparar.
19. ¿Cuáles son los principales parámetros que se encuentran en el gráfico de Michaelis-Menten y cómo los determina?
Principalmente se encuentran la velocidad máxima y Km, representando la velocidad de reacción en la gráfica, para que el punto más alto en el que la grafica sube, será la velocidad máxima. Para obtener Km se debe descubrir cual es la mitad del valor de la velocidad de reacción, para después interpolarlo en la grafica y descubrir el valor de la concentración de sustrato. La Km representa la afinidad que tiene una enzima hacia su sustrato.
20. ¿Cuáles son los principales parámetros que se observan en la gráfica de Lineweaver-burk?
Esta grafica permite identificar la Km (constante de Michaelis-Menten) y Vmax (velocidad máxima). 
El punto de corte con el eje de las y es el equivalente a la inversa de Vmax, y el de las x es el valor de –1/ Km.
21. Realice los gráficos de inhibidores reversibles
22. ¿Qué son los carbohidratos, como los define?
Son moléculas compuestas de carbono, oxigeno e hidrogeno, que pueden generar cadenas muy largas que se unen por enlaces glucosídicos, sirven de forma estructural, energética y son precursores de otras moléculas más grandes. 
23. ¿Cómo se pueden clasificar los carbohidratos de acuerdo con su grupo funcional?
Se pueden clasificar debido a su estructura (número de monómeros, es decir, monosacáridos, disacáridos, oligosacáridos y polisacáridos), por número de carbonos (hexosas, pentosas), por sus grupos añadidos (polihidroxialdehidos en caso de unirse con aldehído y polihidroxicarboxilo en caso de unirse a un grupo carboxilo)
24. Cuáles son las pruebas que le permiten estudiar carbohidratos, explique el fundamento.
Reacción de Molish: Esta prueba está basada en laformación de furfural o derivados de este a partir de los carbohidratos, los cuales se condensan con el alfa-naftol.
Reacción de Tollens: Esta prueba es característica para pentosas, basada en la formación de furfural a través de estas las cuales se condensan con floroglucinol.
Reacción de Seliwanoff: Esta prueba se usa para diferenciar aldosas de cetosas. Está basada en el hecho de que al aplicarles calor en un medio ácido a las aldosas y cetosas se deshidratan a diferentes velocidades, siendo con mayor rapidez las cetosas en comparación de las aldosas. Se utiliza el HCl ya que ambas al estar en un medio ácido se deshidratan formando el hidroximetilfurfural el cual, al reaccionar con el resorcinol, en la reacción de condensación se produce un color rojo fuego el cual indica que se trata de una cetosa o que en la estructura hay cetosas, y de igual forma con las aldosas que serán de un color rosa o próximo a este.
Reacción de Fehling: Esta reacción se basa en la acción reductora de algunos azúcares sobre los iones cúpricos en un medio alcalino (reactivo Fehling que es constituido de sulfato de cobre y tartrato de sodio y potasio). El poder reductor de los polisacáridos depende del número de carbonilos potencialmente libres que no estén involucrados en los enlaces glucosídicos. 
Prueba de Solubilidad: Esta prueba se basa en el tamaño de los carbohidratos ya que de acuerdo con sus propiedades como el peso molecular dependerá su solubilidad, si es bajo son solubles en agua y tienen poder edulcorante alto, las cuales son características opuestas a los carbohidratos de alto peso molecular siendo muy poco solubles en agua.
Reacción del yodo: En esta prueba el yodo es atrapado por los polisacáridos formando citratos y dependiendo de este habrá un color diferente, así para polisacáridos lineales el color que se obtendrá será azul, pero si es ramificada la coloración obtenida variará de la púrpura al rojo.
25. Qué pruebas realizaría para estudiar la siguiente muestra
Molish, yodo, Seliwanoff, solubilidad.
26. Al realizar la prueba de Fehling ¿cuál sería el resultado para la siguiente figura?, explique
Daría un resultado negativo ya que no es un azúcar reductor 
27. En qué condiciones se forman los siguientes productos
En medio acido a partir de una hidrolisis de pentosas 
28. De las muestras A, B y C indique cuáles darían positivo a las pruebas de laboratorio 
A
Esta solamente daría positivo a la prueba de yodo mostrando un color azul.
B
Esta no daría positivo a ninguna.
C 
Esta daría positivo unicamente a Fehling ya que es un azucar reductor.
29. Determine qué tipo de inhibidor se presenta a partir de los siguientes datos
Inhibidor acompetitivo