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INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS INGENIERIA BIOQUIMICA LABORATORIO DE BIOQUIMICA PRACTICA EFECTO DEL pH Y EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE ENZIMA INTEGRANTES Roberto Popoca Rivas Linares Cerón Bruno Jair GRUPO 3IM1 SECCION V FECHA DE ENTREGA 04/10/2021 INTRODUCCIÓN En toda reacción enzimática si se incrementa la concentración de la enzima, se formará una mayor cantidad de producto por unidad de tiempo. El incremento en la concentración de enzima es directamente proporcional al incremento de la velocidad de reacción siempre y cuando la cantidad de sustrato no sea limitante, es decir, que el sustrato no llegue a agotarse. Vo= K [ E ] La gráfica típica que se obtiene al expresar velocidad de reacción en función de la concentración de enzima es una recta con pendiente positiva. La concentración de H+ afecta la velocidad de reacción en muchas formas. El proceso catalítico usualmente requiere de que la enzima y el sustrato tengan grupos químicos en una forma iónica para poder interactuar, el pH modifica el estado y por tanto la velocidad de reacción. OBJETIVOS · Demostrar que la concentración de enzima es directamente proporcional a la velocidad de reacción. · Analizar la importancia del pH del medio sobre la velocidad de reacción enzimática y su efecto sobre el carácter iónico de la enzima y del sustrato. RESULTADOS Vol. Enzima Concentración enzima (ug/ 2.0ml) Absorbancia 540nm Azúcares reductores Vo (ug de A R/min) 1 1 0.161 540.47 54.047 2 2 0.270 864.76 86.476 3 3 0.423 1369.20 136.919 4 4 0.574 1747.52 174.753 5 5 0.706 2125.86 212.586 DISCUSIÓN En la primera gráfica se obtuvo una curva de cinética enzimática de primer orden, observamos que antes de alcanzar su Vmax, el comportamiento de la curva es lineal depende de la concentración de enzima [E] a ciertas cantidades de sustrato. En este punto si aumentamos la concentración de enzima la La velocidad aumentaría de forma proporcional. En cuanto a la representación gráfica de Velocidad contra pH, se pudo observar una parábola en la cual el punto máximo representaba el pH óptimo en el cual la enzima encuentra su trabajo óptimo, el cual se encontró en un pH igual a 4. Después de este pH la velocidad de reacción decae de manera brusca y puede ser por la desnaturalización de la enzima y/o del azúcar reductor. De forma teórica se encontró que el pH óptimo de la invertasa se encuentra en un pH de lo cual fue comprobado en el laboratorio. Bibliografía · Enzimas. Regulación de la actividad anzimática. (s. f.). Ehu Eus. Recuperado 1 de octubre de 2021, de http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz22.htm · Baez-Suarez, A. J. (s. f.). Efecto de Temperatura, pH, Concentración de Sustrato y Tipo de Enzima en la Hidrólisis Enzimática de Vísceras de Tilapia Roja (Oreochromis spp.). SciELO. Recuperado 26 de septiembre de 2021, de https://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718-07642016000600007 · Repaso de enzimas (artículo) | Enzimas. (s. f.). Khan Academy. Recuperado 1 de octubre de 2021, de https://es.khanacademy.org/science/high-school-biology/hs-energy-and-transport/hs-enzymes/a/hs-enzymes-review#:%7E:text=Concentrtaci%C3%B3n%20de%20la%20enzima%3A%20aumentar,de%20sustrato%20al%20cual%20unirse.&text=Concentraci%C3%B3n%20del%20substrato%3A%20aumentar%20la,reacci%C3%B3n%20hasta%20un%20cierto%20punto. · Guerra, J. J. M. (s. f.). Efecto del pH y la temperatura sobre la actividad de las enzimas | LIBRO ELECTRÓNICO DE BIOQUÍMICA | Juan José Martínez Guerra. UAA. recuperado 26 de septiembre de 2021, de https://libroelectronico.uaa.mx/capitulo-6-enzimas/efecto-del-ph-y-la-temperat.html Vo vs [E ] 1 2 3 4 5 54.046999999999997 86.475999999999999 136.91900000000001 174.75299999999999 212.58600000000001 Concentración enzima (ug/ 2.0ml) Vo (ug de A R/min)
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