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EXAMEN COPROLÓGICO PARASITOLOGÍA DRA. CLAUDIA VALERA Estudio de la materia fecal. Puede ser una sola toma de muestra al fresco (simple) o una muestra por tres días (seriado) Obtención de la muestra fecal La muestra emitida espontáneamente es adecuada para el examen coprológico. Recipiente (frasco o caja plástica), seco y limpio. No debe mezclarse con orina y enviarse al laboratorio inmediatamente después de obtenida EXAMEN COPROLÓGICO Laxantes Solo en casos de constipación, una mayor dilución de los huevos y quistes dificulta su hallazgo. Se usa sulfato de sodio, a la dosis de 20 g para adultos y cantidades proporcionalmente menores en los niños. Número de muestras. En amibiasis y giardiasis crónica es aconsejable hacer dos o tres exámenes en días diferentes. Conservación y envío de muestras fecales. Deben llevarse al laboratorio lo más pronto posible, los trofozoítos pierden la motilidad y las características morfológicas en pocas horas. Refrigeración. El frasco se debe colocar en el refrigerador a 4° C, no en el congelador. Preparaciones selladas en porta objetos. Pueden hacerse con vaselina o barniz de uñas, aplicados en los bordes del cubre-objeto. Formol. Se mezcla 3 g de materia fecal por cada 10 ml de formol diluido al 5% o 10%. Evita la descomposición, disminuye el mal olor y fija los parásitos para estudio posterior. CONSERVACIÓN DE LA MUESTRA Claves para identificación de protozoos intestinales La identificación de los trofozoítos amebianos es más segura cuando se tienen preparaciones coloreadas, permite identificar las características morfológicas, en especial la cromatina. Para trofozoítos de flagelados intestinales, estas coloraciones resaltan también las características del núcleo y el número y distribución de los flagelos os quistes amebianos y de otros protozoos intestinales se diferencian, no solo por la características nucleares como se hace con los trofozoítos, sino por la presencia y forma de los cuerpos cromatoidales y de las vacuolas. Las diferentes características de las coccidias y microsporidios. Examen macroscópico Preparación para el examen microscópico EXAMEN COPROLÓGICO Examen macroscópico Determinar la consistencia de las heces fecales y clasificarlas en líquidas, blandas o duras. El color anormal tiene significado patológico, por ejemplo: negro en melenas, blanco en acolia. Observar si existe moco, sangre, restos alimenticios o helmintos. EXAMEN COPROLÓGICO DIRECTO Identifica huevos, larvas, quistes, etc., de los parásitos intestinales. En un portaobjetos se coloca una gota de solución salina-eosina o solución salina al 0.85% y otra de lugol. Solución salina-eosina..............................................0,25g Solución salina .........................250.00 mL Se toma una pequeña porción de materia fecal y se hace una suspensión en la gota de solución salina, y luego una gota de lugol. Lugol. Yodo ..................................................1.5 g Yoduro de potasio.............................4.0 g Agua destilada ............................100.0 mL EXAMEN MICROSCÓPICO Leucocitos. Generalmente se encuentran asociadas a moco, se observan en diferentes enfermedades intestinales Eritrocitos. En hemorragias del colon, hemorroides y fisuras sangrantes, etc. Aparecen con abundancia en el síndrome disentérico Cristales de Charcot-Leyden. Miden de 10 µ a 30 µ y tienen forma romboidal, alargada, extremos puntiagudos. Son producto de desintegración de los eosinófilos y se asocian a procesos alérgicos de variado origen, entre ellos parasitosis. Restos alimenticios de origen vegetal. Los almidones son frecuentes, se observan como gránulos de forma y tamaño irregulares Es un estudio más completo de la materia fecal, incluye. Se realiza el estudio estudio microscópico y análisis bioquímicos. COPROGRAMA PH, Se mide con papel indicador, normalmente el PH es de 7,0. Azúcares reductores. Se ha encontrado que siempre hay presencia de glucosa y ausencia de lactosa en diarreas de origen bacteriano tóxico, mientras que lo contrario se encuentra en las diarreas virales Sangre oculta Claves para identificación de protozoos intestinales La identificación de los trofozoítos amebianos es más segura cuando se tienen preparaciones coloreadas, permite identificar las características morfológicas, en especial la cromatina. Para trofozoítos de flagelados intestinales, estas coloraciones resaltan también las características del núcleo y el número y distribución de los flagelos os quistes amebianos y de otros protozoos intestinales se diferencian, no solo por la características nucleares como se hace con los trofozoítos, sino por la presencia y forma de los cuerpos cromatoidales y de las vacuolas. Las diferentes características de las coccidias y microsporidios. Aplicadores de madera Portaobjetos Cubreobjetos Rotulador indelible Frascos con suero salino isotonico Solucion yodada de lugol MATERIALES Y REACTIVOS Cultivos para amebas No se usan para fines diagnósticos por la dificultad y el costo. La principal utilidad es para obtener trofozoítos con fines de investigación y docencia. Los cultivos axénicos (sin bacterias) se usan para preparar antígenos, necesarios para pruebas serológicas. Claves para identificación de protozoos intestinales La identificación de los trofozoítos amebianos Mejor con preparaciones coloreadas, permite identificar las características morfológicas, en especial la cromatina. Para trofozoítos de flagelados intestinales Las coloraciones resaltan las características del núcleo, número y distribución de los flagelos, resaltan la presencia de los cuerpos cromatoidales y de las vacuolas. Las diferentes características de las coccidias y microsporidios. COLORACIONES PARA PROTOZOOS INTESTINALES Es un estudio más completo de la materia fecal, incluye. Se realiza el estudio estudio microscópico y análisis bioquímicos. COPROGRAMA PH, Se mide con papel indicador, normalmente el PH es de 7,0. Azúcares reductores. Se ha encontrado que siempre hay presencia de glucosa y ausencia de lactosa en diarreas de origen bacteriano tóxico, mientras que lo contrario se encuentra en las diarreas virales Sangre oculta Claves para identificación de protozoos intestinales La identificación de los trofozoítos amebianos es más segura cuando se tienen preparaciones coloreadas, permite identificar las características morfológicas, en especial la cromatina. Para trofozoítos de flagelados intestinales, estas coloraciones resaltan también las características del núcleo y el número y distribución de los flagelos os quistes amebianos y de otros protozoos intestinales se diferencian, no solo por la características nucleares como se hace con los trofozoítos, sino por la presencia y forma de los cuerpos cromatoidales y de las vacuolas. Las diferentes características de las coccidias y microsporidios. Trofozoítos de Giardia teñidos con Giemsa; Ampliación de 100x. COLORACIONES PARA PROTOZOOS INTESTINALES Técnica con hematoxilina férrica de Heidenhain’ Clásica para protozoos intestinales, amebas, resalta la morfología nuclear, característica importante para la clasificación de género y especie Se observa una encefalitis necrosante con la presencia de elementos del tipo trofozoítos y algunos peculiares quistes de pared externa rugosa con los características descritas para las amebas de vida libre del género Acanthamoeba o Balamuthia (hematoxilina-eosina). Claves para identificación de protozoos intestinales La identificación de los trofozoítos amebianos es más segura cuando se tienen preparaciones coloreadas, permite identificar las características morfológicas, en especial la cromatina. Para trofozoítos de flagelados intestinales, estas coloraciones resaltan también las características del núcleo y el número y distribución de los flagelos os quistesamebianos y de otros protozoos intestinales se diferencian, no solo por la características nucleares como se hace con los trofozoítos, sino por la presencia y forma de los cuerpos cromatoidales y de las vacuolas. Las diferentes características de las coccidias y microsporidios. TINCIONES Técnica de coloración tricrómica Mismos usos que la hematoxilínica, es más rápida. El citoplasma de los protozoos se observa azul verdoso con tintes púrpura, los quistes de E. coli pueden ser más rojizos. La cromatina, los cuerpos cromatoidales, los eritrocitos y las bacterias, se ven de color rojo o púrpura Claves para identificación de protozoos intestinales La identificación de los trofozoítos amebianos es más segura cuando se tienen preparaciones coloreadas, permite identificar las características morfológicas, en especial la cromatina. Para trofozoítos de flagelados intestinales, estas coloraciones resaltan también las características del núcleo y el número y distribución de los flagelos os quistes amebianos y de otros protozoos intestinales se diferencian, no solo por la características nucleares como se hace con los trofozoítos, sino por la presencia y forma de los cuerpos cromatoidales y de las vacuolas. Las diferentes características de las coccidias y microsporidios. TINCIONES Ziehl-Neelsen modificada para Cryptosporidium, Cyclospora e Isospora, modificaciones, como Kinyoun que utiliza verde de malaquita y el Ziehl-Neelsen sin calentar que emplea azul de metileno Coloración combinada con fucsinatricrómica, Cryptosporidium Ooquiste de Cryptosporidium cayetanensis Es un estudio más completo de la materia fecal, incluye. Se realiza el estudio estudio microscópico y análisis bioquímicos. COPROGRAMA PH, Se mide con papel indicador, normalmente el PH es de 7,0. Azúcares reductores. Se ha encontrado que siempre hay presencia de glucosa y ausencia de lactosa en diarreas de origen bacteriano tóxico, mientras que lo contrario se encuentra en las diarreas virales Sangre oculta Claves para identificación de protozoos intestinales La identificación de los trofozoítos amebianos es más segura cuando se tienen preparaciones coloreadas, permite identificar las características morfológicas, en especial la cromatina. Para trofozoítos de flagelados intestinales, estas coloraciones resaltan también las características del núcleo y el número y distribución de los flagelos os quistes amebianos y de otros protozoos intestinales se diferencian, no solo por la características nucleares como se hace con los trofozoítos, sino por la presencia y forma de los cuerpos cromatoidales y de las vacuolas. Las diferentes características de las coccidias y microsporidios. Trofozoítos de Entamoeba histolytica con eritrocitos digeridos en preparación de heces. FORMAS PARASITARIAS FLORA BACTERIANA La flora bacteriana aumentada produce manifestaciones de tipo gastrointestinal. La flora bacteriana disminuida puede dar lugar a una enfermedad por microorganismos oportunistas. Los probióticos lactobacillus y bifidobacterias pueden ayudar a restablecer la flora bacteriana. *Cada tracto del aparato digestivo alberga a diferentes tipos de bacterias que son parte de la flora bacteriana Las técnicas habituales de cultivo sólo permiten conocer entre el 15 y el 50% de las bacterias presentes en el colon. • Las nuevas técnicas de biología molecular (sondas de ácido ribonucleico, hibridación in situ, citometría de flujo o reacción en cadena de la polimerasa) proporcionan herramientas fiables para la identificación y la cuantificación de especies, lo que está contribuyendo a conocer con mayor profundidad las características individuales de la flora y su modificación por factores externos.
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