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Microbiología II Dra. Evelyn panaderoDr. Miguel Martinez PARÁSITOS Amebas Amebas Parasitas y comensales humanas Clasificación: • Familias: Amoebida, Endamoebidae • Orden: Amoebida • Genero: Entamoeba, Endolimax, Iodamoeba • Familias: Vahlkampfiidae, Acanthamoebidae • Genero: Acanthamoeba • Orden: Schizopyrenida • Familia: Vahlkampfiidae • Genero: Naegleria Entamoeba histolytica . • 1 Amebas del intestino humano: Son las mas numerosas . la de mayor importancia medica es: Entamoeba histolytica. Amebas no patógenas intestinales (comensales): E. coli, E dispar, E hartmanni , Endolimax nana y Iodamoeba butschlii. Entamoeba gingivalis es un comensal de la boca. • 2 Amebas de vida libre (productoras de meningoencefalitis): Capaces de invadir el sistema nervioso central y producir cuadros de meningoencefalitis: son los géneros Acanthamoeba y Naegleria. Clasificación: La clasificación de las amebas del tubo digestivo humano; • teniendo en cuenta la morfología • forma y tamaño de trofozoítos y quistes • la estructuras del núcleo • la presencia y forma de los cuerpos cromatoidales en el quiste. A. Quistes con presencia de cuerpos cromatoidales: 1. Cromatina periférica nuclear regular y en granos finos , cariosoma puntiforme central, cuerpos cromatoidales gruesos de forma ovoide o cigarro. Quistes maduros con 4 núcleos: - Tamaño mayor a 10 um: Entamoeba histolytica , Entamoeba dispar. - Tamaño menor de 10 um: Entamoeba hartmanni. 2. Cromatina periférica nuclear irregular, granos gruesos, cariosoma grande excéntrico, cuerpos cromatoidales cortos finos, de forma astillada. Quistes maduros con 8 núcleos: Entamoeba coli B. Quistes sin cuerpos cromatoidales: 1. Trofozoítos con un solo núcleo, quistes con 1 a 4 núcleos: - Quistes con vacuola yodófila: Iodamoeba butschlii. - Quistes sin vacuola yodófila Endolimax nana. C. Ausencia de quistes (presencia solo en boca) Entamoeba gingivalis. Entamoeba histolytica: Distribución geográfica: La amebiasis por E. histolytica es mas frecuente en los países cálidos y en los estratos económicos y sociales mas bajos. Las cifras de parasitación humana en América muestra porcentajes muy variables, siendo México uno de los países con mayor prevalencia de E. histolytica. Hoy día se sabe que esas cifras de prevalencia involucraban a E. dispar, ambas morfológicamente indistinguibles. En Py se han descrito pocos casos de amebiasis intestinal con ulceras en colon, producidos por amebas con morfología similar a Entamoeba histolytica. Morfología: Presenta las fases trofozoítica y quística El trofozoíto: De medidas 12 a 60 um. Sus seudópodos son digitiformes , y con núcleo visible en fresco. Presenta eritrocitos fagocitados en el citoplasma. Coloreado con hematoxilina férrica presenta en el núcleo cariosoma central puntiforme y cromatina periférica de granos finos en la cara interna de la membrana nuclear. El quiste: Mide 10 a 20 um, de 1 a 4 núcleos con cariosomas centrales y cromatinas periféricas. Dentro de los quistes pueden observarse los cuerpos cromatoidales de formas de lente bicóncavos con extremos lisos y romos. El quiste constituye la forma de resistencia del parasito. Ciclos y modo de transmisión: El quiste de procedencia fecal entra por vía oral con agua y alimentos . En el íleon se produce la exquistación, emergiendo una ameba quística tetra nucleada , que luego de dividir su núcleo dará origen a 8 pequeñas amébulas unicelulares que al alcanzar el colon crecerán hasta alcanzar su tamaño normal. A partir de estos trofozoítos se formaran los quites , luego este divide su nucleó en la luz del intestino o en el exterior desarrollando finalmente hasta 4 núcleos en el quiste maduro e infectivo. Cultivo. Puede realizarse en el medio de Boeck y Drbohlav, a base de huevo y de solución salina. En todos estos medios las amebas necesitan la presencia de bacterias o de microorganismos. El cultivo axénico de las amebas, es decir, exento de otros microorganismos fue realizado por Diamond. En la práctica los cultivos son importantes para los estudios metabólicos, la fabricación de antígenos para pruebas serológicas y la tipificación. Cuadro clínico: Intestinal ( ciego, colon y recto ). La amebiasis intestinal se caracteriza por la formación de úlceras a nivel de la mucosa. El daño producido por las úlceras es mayor al observado en la superficie, ya que poseen una pequeña apertura a la luz del colon pero se extienden ampliamente debajo de la mucosa intestinal con una forma de "botella". Las úlceras también pueden confluir extendiéndose a grandes porciones de la superficie mucosa. Las regiones más afectadas son el ciego, colon ascendente y rectosigmoideo. Síndrome diarreico y disentérico ( diarrea con sangre, fiebre , inapetencia , decaimiento, dolores espasmódicos) Diarrea (10 a 15 deposiciones al día) , ulceras a nivel de las mucosas. Perforaciones con peritonitis, etc. Cuadro clínico: Extra intestinal (diseminación vía sanguínea o linfática) . Las amebas pueden trasladarse mediante la circulación portal hasta el hígado y producir abscesos hepáticos, los cuales se presentan con dolor continuo en hipocondrio derecho, hepatomegalia y edema de la pared costal. Menos frecuentemente pueden ocurrir abscesos amebianos cerebrales o de otros órganos como pulmones, bazo, pericardio, riñones y tejido subcutáneo. También pueden producirse ulceración cutáneas en zonas peri anales y genitales debidas a E.histolytica. Hepático: “Absceso hepático amebiano”. Otros: abscesos en pulmón, cerebro, bazo. Ulceraciones cutáneas en zonas perianales y genitales. Diagnostico: Métodos directos: (materiales de examen: heces recién emitidas, hisopado de la mucosa intestinal mediante rectosigmoideoscopía) exámenes directos al microscopio, para una mejor observación se puede utilizarlas coloraciones de Tionina, Lugol. Los trofozoítos y quistes amebianos con caracteres morfológicos correspondientes a E. histolytica, deben ser cuidadosamente diferenciados de los de E. hartmanni, para lo cual se debe tener en cuenta la presencia de eritrocitos intracitoplásmicos dentro de los trofozoítos, el tamaño del parásito y el número de núcleos contenidos en los quistes Métodos indirectos: Detección de anticuerpos mediante técnicas de hemoaglutinación, aglutinación de partículas de látex recubiertas con el antígeno, inmunoflorecencia indirecta y ELISA; utilizando como antígeno cultivos de E. histolytica Tratamiento: Para las formas agudas intestinales se usan los Nitroimidazólicos: 1. Tinidazol: 50mg/ kg/ día por 2 días. 2. Metronidazol: 30mg/kg/ día por 5 días. 3. Nimorazol: adultos 1 gramo diario por 5-10 días. Medidas preventivas: Control sanitario en la eliminación de heces , control de agua potable. Educación medica protección de los alimentos, control de moscas y cucarachas y el tratamiento de los enfermos y portadores de quistes. Entamoeba Hatmanni Amebas comensales intestinales: Entamoeba hartmanni: muy parecido a E. histolytica, se diferencian por el tamaño. E hartmanni forma quística mide entre 5 a 10 um , pose 1 a 4 núcleos, forma trofozoitica 4 a 12um. con movimientos activos y direccionales, seudópodos digitiformes de formación rápida similares a los de E. histolytica. Su citoplasma tiene bacteria y diversos materiales. El núcleo es habitualmente invisible en fresco, cariosoma es puntiforme la cromatina periférica nuclear de granos pequeños. Su acción patógena se considera nula por lo que no se indica ningún tratamiento . Entamoeba Coli 2. Entamoeba coli: mide 15 a 50 um, seudópodos de base ancha, granulosos y romos, de formación lenta, lo que le confiere lentitud ; de núcleos visibles en fresco. Teñido con hematoxilina férrica presenta gránulosde cromatina grandes adheridos a la cara interna de la membrana nuclear. El cariosoma es grande y excéntrico. Los quistes miden 12 a 33 um, esféricos . La forma de 1 a 8 núcleos. Los cuerpos cromatoidales son finos, filiformes de extremos aislados. No es patógena . 3. Entamoeba dispar: morfológicamente indistinguible de E. histolytica, se lo considera no patógena. Ante un informe laboratorial de hallazgo en heces de un paciente deben tenerse en cuenta los síntomas clínicos a fin de realizar o no un tratamiento adecuado . 4. Endolimax nana: tamaño de 6 a 15um, de seudópodos hialinos romos, de formación rapida. No presentan eritrocitos en su citoplasma. La ameba coloreada no muestra cromatina adherida a la membrana nuclear ; su cariosoma es grande y ligeramente lateral en algunos casos. El quiste mide 5 a 14 um de forma esférica, con 1 a 4 núcleos y cuerpos cromatoidales ausente. No es una ameba patógena. 5. Iodamoeba butschlii: el trofozoito mide 5 a 20 um con seudópodos similares a E. nana, sin glóbulos rojos en su citoplasma. En las coloraciones con hematoxilina férrica; se observa la membrana desprovista de gránulos de cromatina. El quiste, ovalado, de 5 a 20 um. Posee un solo núcleo. No tiene habitualmente cuerpos cromatoidales y presenta una típica vacuola de glucógeno que se tiñe de marrón oscuro con Lugol. No es patógena. 6. Entamoeba gingivalis: se encuentra presente en la boca de algunas personas, no forma quiste. El trofozoíto mide 12 a 35 um. De movimientos rápidos y seudópodos largos y lobulados o bien , cortos y romos. Fagocitan bacterias y restos celulares; raramente glóbulos rojos. El núcleo coloreado es muy parecido al de E. histolytica. Habita en la encía peri dentaria, favoreciendo su presencia la mala higiene, las prótesis y los cuadros gingivales. Amebas de vida libre AGENTES DE MENINGOENCEFALITIS Géneros: Naegleria, Acanthamoeba Las amebas de vida libre son numerosas, pudiendo habitar charcos lagunas arroyos, ríos e incluso piscina cloradas. Algunas especies pueden ser parasitas humanas produciendo cuadros de meningoencefalitis. Entre ellas las mas frecuente son Naegleria fowleri y Acanthamoeba culberstoni. Distribución geográfica: Se han descrito casos de amebas de vía libre en todo el mundo con una baja frecuencia. Morfología y ciclo biológico N. Fowleri en vida libre desarrolla trofozoítos, forma flagelada y quistes. Los trofozoítos observados en LCR. únicamente presenta la forma ameboidea. Miden entre 10 a 35 um predominando las formas pequeñas. Núcleo con cariosoma grande central. Al transferirlas en tubo con agua se transforma en la forma flagelada, con dos flagelos en la parte mas ancha del parásito (generalmente con forma de pera).Los quistes que se forman en los medios de cultivo son casi esféricos de 7 a 10um con un solo núcleo. Acanthamoeba culbertsoni también desarrolla trofozoítos y quiste en la vida libre. Los trofozoítos miden alrededor de 20um. Los quistes miden de 14 a 25 um de forma bicóncava y presentan endoquistes estrellados. La diferencia entre los géneros Naegleria y Acanthamoeba resulta fácil debido a la formación de flagelos en agua por parte de Naegleria. Mecanismo de transmisión La infección por Naegleria fowleri se adquiere bañándose en aguas contaminadas por las amebas, como suelen ser los lagos, lagunas, tajamares y piscinas. Se estima que la mucosa nasal es la vía de penetración y que los parásitos seguirían el camino de los nervios olfatorios para llegar de esta manera a las meninges. Menos frecuente las infecciones por Acanthamoeba que también puede ser vehiculizada por agua y polvo. NERVIO OFTALMICO MUCOSA NASAL MENINGES VIAS DE PENETRACION Cuadro clínico Meningoencefalitis producida por Naegleria: pacientes jóvenes que luego de 3 a 7 días de bañarse en aguas contaminadas hacen un cuadro de cefalalgia, nauseas vómitos fiebre y signos meníngeos habitualmente fatal. LCR purulento debido a la presencia de Neutrofilos, aumento de proteínas y baja cifra de glucosa . Las amebas se ven mejor en fresco aunque pueden confundirse con macrófagos móviles, así que debe recurrirse a coloraciones especiales para identificación Meningoencefalitis producida por Acanthamoeba: afectan principalmente a personas con trastornos inmunitarios. Va precedido generalmente por un cuadro de bronconeumonía aguada a continuación del cual se produce la patología denominada meningoencefalitis granulomatosa amebiana, la cual es mas lenta que la producida por N fowleri. Se describe también localizaciones en páncreas y piel. Se a identificado a A. poliphaga y A. castellani en ulceras de corneas, queratoconjuntivitis y uveítis. El LCR presenta alteraciones similares a la Meningoencefalitis producida por Naegleria excepto que el predominio celular es a base de linfocitos. Diagnostico Se debe hacer exámenes de LCR en fresco y coloreados para precisar el diagnostico de amebiasis. Se debe tener en cuenta la propiedad de producir flagelos en agua. Para diferenciación de las especies se utilizan inmunoflorecencia. Tratamiento •Anfotericina b,sulfadiazina, miconazol y rifampicina podrían alcanzar resultados positivos en meningoencefalitis por N fowleri. •Todavía no se ha obtenido una droga realmente útil para tratar estas meningoencefalitis Protozoarios de clasificación controvertida Blastocystis hominis: Clasificado actualmente como protozoario de patología dudosa, tal vez oportunista, habitante de intestino humano y de animales Clasificación: A pesar de su alta prevalencia en todo el mundo, aun permanece en la incertidumbre su patogenicidad y su taxonomía. Algunos análisis de secuencia de ADN lo ubican cerca del genero Amebidae, sin embargo otros lo alejan de las amebas, los flagelados, los mohos y levadura. En base a esto ultimo se ha propuesto crear un nuevo Phyllum: Blastocysta. Lo cierto es que B. hominis es de clasificación incierta . Como complicación posee gran variabilidad morfológica y diversos cariotipo lo que hace pensar que hay mas de una especie. Tampoco se ha resuelto la diferenciación de especies dentro del genero Blastocystis y la implicancia de la transmisión de las especies procedente de animales. Han sido propuesta varias especies aisladas de gallinas patos gansos serpientes. La única especie formalmente aceptada es B. hominis. Morfología y ciclo biológico: presenta 4 formas básicas : vacuolada, ameboide, granular y quística. 1. La forma vacuolada es predominante en las heces , esférica, de 5 a 200 um de diámetro, multinucleada con una vacuola central grande que ocupa la mitad de la célula. Se divide por fisión vinaria. 2. La forma ameboide es de menor tamaño e a 8 um, posee pseudópodos y es de contorno irregular. Es frecuente en medios de cultivo y heces. Se divide por fisión binaria. 3. La forma granular es similar a la vacuolar mide entre 3 y 80 um rango de 15 a25 um. Se caracteriza por los corpúsculos en la vacuola central del tipo mielina gránulos cristalino o gotitas lipídicas , la vacuola central presenta gránulos reproductivos. 4. La forma quística de 3 a 5 um de diámetro de pared multilaminar que puede ser fina o gruesa la cual explica el mecanismo fecal oral de transmisión debido a su resistencia para sobrevivir en el medio ambiente. También se ha descrito la s formas multivacuoladas, avacuoladas y pre quística. Epidemiologia: Es un protozoario relativamente frecuente en humanos (20-80%). De transmisión fecal oral. Aun no se sabe si las especies encontradas en los animales puede habitar el intestino humano. Cuadro clínico Se lo encuentra a veces con cuadro de anorexia, nauseas, vómitos, dolor abdominal, flatulencia , diarrea acuosa, estreñimiento , heces sanguinolenta. Generalmente estos cuadros suelen cesar sin tratamiento alguno ,aunque la diarrea puede durar variassemanas. Diagnostico Por observación de las formas vacuoladas (forma mas fácilmente reconocible) en heces. Es importante informar su cantidad relativa para campo microscópico de 400 aumentos. Tratamiento En adultos se utiliza Metronidazol en dosis de 750 mg cada 8 horas durante 5 días.
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