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GESTIÓN DE LABORATORIOS CÓDIGO: P-QB-GU-10.002.014 VERSIÓN: 0.0 COLORIMETRÍA Página 1 de 5 OBJETIVO Introducir al estudiante en los fenómenos de absorción de la energía radiante; explicar las leyes que rigen esta absorción y sus aplicaciones. ALCANCE El estudiante comenzará con el conocimiento del manejo del equipo y estará en la capacidad al finalizar la práctica de relacionar los conceptos de estructura molecular y absorción. GENERALIDADES La absorción selectiva de la radiación electromagnética cuando pasa a través de una disolución hace que el haz emergente difiera del incidente. En el caso de la radiación visible, esta diferencia frecuentemente es obvia al ojo humano. Por ejemplo, una luz blanca observada a través de una solución de Sulfato de Cobre aparece azul debido a que los iones cúpricos interaccionan con ella y absorben los componentes rojos del haz, mientras que transmiten las porciones azules de la radiación. LEY DE BEER La ley de Beer se aplica a la absorción de la radiación en soluciones coloreadas. La absorción se mide determinando la disminución de la potencia, experimentada por un haz de radiación monocromática como resultado de las interacciones con las especies absorbentes situadas en la trayectoria de dicho haz. Cuando un haz de radiación monocromática, con una potencia incidente Po pasa a través de una solución que contiene N átomos o moléculas absorbentes, disminuye la energía del haz en un valor P. La energía radiante P, es la energía desprendida que incide sobre un área en la unidad de tiempo. La absorción en la radiación implica reducción en la energía del haz. Para un incremente N tenemos entonces: (1) Donde k es una constante de proporcionalidad. El signo menos es introducido a causa de la disminución de la energía radiante. GESTIÓN DE LABORATORIOS CÓDIGO: P-QB-GU-10.002.014 VERSIÓN: 0.0 COLORIMETRÍA Página 2 de 5 Si hacemos el intervalo infinitamente pequeño, tenemos: Integrando: Para una celda el número de especies absorbentes esta dado por: N= 6.02*1013 especies/mol * 6 mol/ml * b; donde b es el espesor de la celda en cm. O sea: N= K”bC Reemplazando en la ecuación (2) y sacando logaritmos naturales: A lo designamos por la constante € que se denomina absortividad. Si C está expresada en moles por litro, € se denomina absortividad molar. Luego la ecuación (3) queda: GESTIÓN DE LABORATORIOS CÓDIGO: P-QB-GU-10.002.014 VERSIÓN: 0.0 COLORIMETRÍA Página 3 de 5 El término corresponde a la transmitancia (T), o sea: El término –log T se conoce como absorbancia A. La ecuación anterior se relaciona entonces: La ecuación (4) se designa como la ley de Beer – Lambert, la ley de Bouger – Beer o simplemente “Ley de Beer”. Expresando T en porcentaje tenemos: MANEJO DEL ESPECTROFOTÓMETRO Conecte el aparato en corriente de 110 V. Figura 1. Enciéndalo (botón 1) y deje que se caliente durante 5 minutos. Seleccione la longitud de onda, según el procedimiento con el botón 2. Coloque la sustancia a leer en la cubeta o tubo especial. En un tubo coloque el solvente, reactivos, y demás en los cuales ha procesado la muestra, lo anterior se hace con el fin de descontar la E. luminosa que es absorbida por el vidrio, el medio o solvente y los reactivos. Este tubo se denomina tubo blanco (B). GESTIÓN DE LABORATORIOS CÓDIGO: P-QB-GU-10.002.014 VERSIÓN: 0.0 COLORIMETRÍA Página 4 de 5 Cierre. Cuadre el dial moviendo el botón 1, hasta cero de T. Coloque el tubo blanco en el porta cubeta. Cierre y con el botón 3 cuadre el 100% de T. Retire el blanco y coloque el tubo problema y deje que la aguja se estabilice. Lea en la escala. PROCEDIMIENTO En un tubo colorímetro eche la solución coloreada del pigmento. En otro tubo eche únicamente el solvente de la solución anterior. A este tubo le llamaremos blanco. Con el blanco y el tubo de solución de pigmento tome las absorbancias variando la longitud de onda de 400 a 600 nm cada 20 nm. Repita el procedimiento con las otras soluciones de pigmentos. GESTIÓN DE LABORATORIOS CÓDIGO: P-QB-GU-10.002.014 VERSIÓN: 0.0 COLORIMETRÍA Página 5 de 5 INFORME 1. Haga una gráfica de A vs λ para cada una de las soluciones de pigmentos. 2. Determine la(s) λ máxima(s) de absorción de cada pigmento. BIBLIOGRAFÍA 1. SKOOG Y WEST. Fundamentos de Química Analítica. Ed. Reverté. 1980. 915 pp. 2. SKOOG T WEST. Química Analítica. 4ª ed. Ed. McGraw-Hill. Madrid, España. 1988. 725 pp. 3. SKOOG T WEST. Análisis Instrumental. Ed. Interamericana. México D.F. 1983. 718 pp. 4. RAMETTE. Richard W. Equilibrio y Análisis Químico. Ed. Fondo Educativo Interamericano, 1983. 791 pp. ELABORÓ: Manuel E. Palomino R. Carmen E. Mier B. REVISÓ: Adriana Valencia C. Johannes Delgado O. APROBÓ: Carmen Elena Mier Barona CARGO: Profesores Asociados CARGO: Auxiliares de Laboratorio CARGO: Coordinadora de Laboratorio FECHA: 2010 FECHA: 2010 FECHA: 2010
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