019 CARBOHIDRATOS

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OBJETIVO 
 
Identificación y clasificación de carbohidratos, por medio de reacciones químicas 
específicas. 
 
ALCANCE 
 
El estudiante empezará con el conocimiento de las pruebas de identificación de 
carbohidratos y al finalizar la práctica estará en la capacidad de reconocer 
diferentes familias de carbohidratos por la utilización de dichas pruebas. 
 
GENERALIDADES 
 
Los carbohidratos son aldehídos o cetonas polihidroxílicos o sustancias que al 
hidrolizarse dan estos compuestos; los carbohidratos incluyen a los azúcares, 
almidones, celulosa y otras sustancias encontradas en raíces, tallos y hojas de 
todas las plantas. Estos compuestos que se hallan contenidos en los alimentos 
son una fuente de energía importante para los animales y humanos. Entre los 
muchos productos basados en los carbohidratos están: el papel, el rayón, algodón, 
dulces. 
 
Los carbohidratos se subdividen en tres clases: monosacáridos, oligosacáridos 
(del griego oligos, pocos) y polisacáridos. La primera de ellas implica todos los 
azúcares que contienen una sola unidad de carbohidratos; los monosacáridos no 
pueden dar carbohidratos más simples por hidrólisis. Aunque los monosacáridos 
pueden tener como mínimo tres átomos de carbono, las estructuras que cuentan 
con cinco y seis carbonos se denominan pentosas y hexosas, respectivamente y 
son las más numerosas e importantes. Si el azúcar contiene el grupo aldehído, ya 
sea libre o combinado en forma hemiacetálica o acetálica, se le conoce como 
aldosa, mientras que si contiene el grupo cetona se le llama cetosa. 
 
Los oligosacáridos contienen un número relativamente pequeño de unidades 
monosacáridos unidas mediante enlaces acetálicos, los cuales se denominan 
uniones glicosídicas, en la química de los carbohidratos. Dichas uniones se 
encuentran entre el aldehído o cetona de un monosacárido y el grupo hidróxilo de 
otro. La hidrólisis total de la unión glicosídica produce los respectivos 
monosacáridos. Dos unidades de monosacáridos se combinan para formar un 
disacárido, tres para un trisacárido y así sucesivamente. 
 
Los polisacáridos contienen de cientos a miles de unidades de monosacáridos 
unidos por una serie de enlaces glicosídicos. Estas moléculas constituyen un 
ejemplo de polímeros que se encuentran en la naturaleza, otros son las proteínas 
y los ácidos nucleicos. 
 
 
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EQUIPOS Y REACTIVOS 
 
 6 Tubos de ensayo 
 1 pipeta 
 1 pinza para tubos de ensayo 
 1 baño maría 
 1 soporte para tubos de ensayo 
 1 mechero aro y rejilla 
 Glucosa 1% NaOH 10%; Sacarosa 1%; CuSO4 1%; Xilosa 1%; Ácido 
Acético; Arabinosa 1%; Anilina; Fructosa 1%; HCl 10%; Almidón; solución 
problema de un carbohidrato; Maltosa 1%; Lactosa 1%; Glucosa 5%; Ácido 
Sulfúrico concentrado. 
 Reactivo de Molish 
 Reactivo de Barfoed 
 Reactivo de Seliwanoff 
 Solución de Lugol 
 
PROCEDIMIENTO 
 
Para diferenciar mejor los resultados que se obtienen en cada prueba es 
conveniente que se desarrolle paralelamente con las demás muestras de 
carbohidratos que se necesitan. Este procedimiento le ahorra tiempo y la permite 
visualizar mejor y comparar cuándo la prueba es positiva o negativa. 
 
 
Reactivo de Molish 
 
El Ácido Sulfúrico concentrado hidroliza los enlaces glicosídicos para dar 
monosacáridos que pueden ser luego deshidratados dando furfural y sus 
derivados. Estos productos se combinan luego con Alfa-Naftol originando un 
complejo púrpura. 
 
 
 
 
 
 
 
 
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En un tubo de ensayo adicione 1 ml de Glucosa y en otro tubo 1 ml de solución de 
otro carbohidrato y en un tercer tubo 1 ml de muestra problema. Agregue a cada 
uno una o dos gotas del reactivo de Molish. Agítelos bien. Incline cada tubo y por 
las paredes deje caer lentamente 1 ml de Ácido Sulfúrico concentrado, de tal 
manera que forme una capa bien definida en la interface (no agite). La prueba es 
positiva cuando aparece una coloración violeta en la interfase. 
 
 
Prueba de la Anilina 
 
Cuando se calientan pentosas con ácido se forma furfural que se condensa con la 
Anilina para dar coloración rojo cereza. El calentamiento prolongado de algunas 
hexosas produce Hidroximetil furfural que también reacciona con Anilina, dando 
complejos coloreados. 
 
 
 En un tubo de ensayo vierta 1 ml de solución de Xilosa, en otro tubo 1 ml de 
solución de Arabinosa y en otro 1 ml de la solución de muestra problema. 
Agregue a cada tubo 1 ml de Ácido Acético y 2 gotas de Anilina. Caliente 
luego hasta que aparezca un color rojo cereza que es la prueba positiva. 
Compare los resultados. 
 
 
Prueba de Seliwanoff 
 
Prueba positiva para carbohidratos que tengan un grupo cetónico. Las cetosas se 
deshidratan más rápidamente que las aldosas dando derivados de furfural que se 
condensan con Resorcinol para formar un complejo rojo. Hay que evitar un 
calentamiento prolongado de la muestra. 
 
 
 
 
 
 
 En tres tubos de ensayo vierta en cada uno 0.5 ml del reactivo de 
Seliwanoff. Agregue al primero 5 gotas de Fructosa; al segundo 5 gotas de 
Glucosa y al tercero 5 gotas de la muestra problema. Mézclelos bien y 
colóquelos en un baño maría de agua hirviendo por 3-4 minutos. Observe la 
formación del precipitado rojizo, como prueba positiva. 
 
 
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Prueba de Barfoed 
 
Prueba que distingue monosacáridos de disacáridos comparando las velocidades 
de reacción. 
 
El reactivo de Barfoed es débilmente ácido y solamente puede ser reducido por 
monosacáridos. Si se deja hervir por largo tiempo, existe la posibilidad de 
hidrolizar disacáridos dando así reacciones falsamente positivas. El precipitado de 
óxido cuproso es menos denso y se recomienda dejar el tubo hasta que el 
precipitado sedimente. El color del óxido cuproso tiende a rojo ladrillo. 
 
 
 En tres tubos de ensayo vierta 1 ml del reactivo de Barfoed. Agregue al 
primero 0.5 ml de Glucosa, al segundo 0.5 ml de Maltosa y al tercero 0.5 ml 
de muestra problema. Mézclelos bien y colóquelos en un baño de agua 
hirviendo por 5-6 minutos. Pase luego los tubos a un baño de agua a 
temperatura ambiente. Observe el precipitado rojo. 
 
 
Prueba para azúcares reductores 
 
Esta prueba es positiva para carbohidratos con grupos aldehídos y alfa 
hidroxicetonas libres, que tienen propiedades reductoras en soluciones alcalinas. 
El ión Cúprico se reduce a Óxido Cuproso de color café rojizo. 
 
 
 
 
 
Prueba de Trommer 
 
En tres tubos de ensayo vierta 1 ml de solución de NaOH al 10% luego agregue al 
primer tubo 1 ml de solución de Glucosa, al segundo 1 ml de solución de Sacarosa 
y el tercero 1 ml de solución de muestra problema. Agítelos. Añada 0.5 ml de 
Sulfato de Cobre al 1%. Caliente en baño maría. Observe los resultados. 
 
 
Prueba de Fehling 
 
En tres tubos de ensayo vierta 0.5 ml de solución de Fehling A y 0.5 ml de 
solución de Fehling B respectivamente. Agítelos bien asta obtener una solución 
homogénea. Caliente a ebullición en un baño maría. Añada luego al primero 0.5 ml 
 
 
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de Fructosa, al segundo 0.5 ml de Lactosa y al tercero 0.5 ml de la muestra 
problema. Agite. Caliente nuevamente durante 2-3 minutos. Observe los 
resultados. 
 
 
Hidrólisis de la Sacarosa 
 
Cuando la sacarosa se hidroliza por medio de soluciones ácidas o por la enzima 
invertasa se produce igual cantidad de D (+) Glucosa y D (-) Fructosa. 
 
 En tres tubos de ensayo que contengan 1 ml de solución de Sacarosa al 
5%, se añade al primero 1 ml de Agua, al segundo 1 ml de Ácido 
Clorhídrico al 10% y al tercero1 ml de Hidróxido de Sodio al 10%. Agítelos. 
Se calientan en un baño maría durante 5 minutos. Mientras calienta, en tres 
tubos de ensayo vierta 0.5 ml de solución Fehling A y 0.5 ml de Fehling B 
respectivamente. Agítelos, hasta obtener las soluciones homogéneas. 
Luego agregue a un tubo cinco gotas de la solución de Sacarosa con ácido 
y al otro agregue cinco gotas de Sacarosa en medio básico. Agítelos y 
caliente de nuevo en baño maría durante 1 minuto. Observe cual de ellos 
da la prueba positiva de la oxidación. 
 
 HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA 
NaOH HCl Agua 
 
 
 
Prueba del Almidón 
 
Prepare una solución de Almidón: 2 g de Almidón en 10 ml de agua y agregando 
esta mezcla en 200 ml de agua en ebullición. 
 
 
Prueba de Yodo 
 
Vierta 3 ml de solución de Almidón en un tubo de ensayo. Agregue 2 gotas de 
solución de Yodo en Yoduro de Potasio de color rojizo. Se produce luego una 
coloración azul violácea. Caliente el tubo a ebullición y observe que el color 
desaparece. Luego enfríe nuevamente con un baño de agua de la llave y el color 
aparecerá de nuevo. Esto se debe a la estructura helicoidal del polisacárido que 
se desordena por el calentamiento y se reordena al enfriase. 
 
 
 
 
 
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Hidrólisis del Almidón 
 
A 10 ml de solución de Almidón se agregan 0.6 ml de Ácido Clorhídrico 
concentrado. Agite. Tome 1 ml y agregue 1 gota de solución de Yodo. Note el 
color. Al resto de la solución de Almidón caliéntela a ebullición y a intervalos 
sucesivos de 3 minutos se saca 1 ml de la solución y se le agrega 1 gota de 
solución de Yodo. Repita el procedimiento hasta la desaparición del color. 
Compare los colores de las soluciones. 
 
Con el Ácido Clorhídrico se facilita la ruptura de los enlaces glicosídicos del 
polímero, para formar moléculas más pequeñas de carbohidrato que no reacciona 
con el Yodo. 
 
 
INFORME 
 
 Complete el siguiente cuadro indicando con un (+) si la prueba fue positiva y 
(-) si fue negativa: 
 
 
 REACTIVOS 
 
 
CARBOHIDRATOS 
 
MOLISH 
 
ANILINA 
 
SELIWANOFF 
 
BARFOED 
 
TROMMER 
 
FEHLING 
 
MUESTRA 
PROBLEMA 
 
 
 
GLUCOSA 
 
 
 
XILOSA 
 
 
 
ARABINOSA 
 
 
 
FRUCTOSA 
 
 
 
MALTOSA 
 
 
 
SACAROSA 
 
 
 
LACTOSA 
 
 
 
 
 
 
 
 
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PREGUNTAS 
 
1. ¿Por qué los carbohidratos son ópticamente activos? ¿Cómo puede 
predecir este hecho? 
 
2. ¿Por qué la Maltosa y la Lactosa reaccionan con el reactivo de Tollens 
mientras que la Sacarosa no? 
 
3. ¿Qué es Glucógeno? ¿Para qué sirve? ¿Dónde se encuentra? 
 
4. ¿A qué se le llama azúcar invertido y por qué? 
 
5. Nombre otros carbohidratos de importancia agrícola 
 
 
 
BIBLIOGRAFÍA 
 
 
-BOHINSKI. R.C. Bioquímica. Fondo Educativo Interamericano. S.A. 1978. 
 
-PASTO, D.J. Y C.R. JOHNSON. Determinación de Estructuras Orgánicas. 
Reverté. 1977. 
 
-PINE, S.: HENDRICKSON, J.B. Química Orgánica. McGraw-Hill. 1982 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ELABORÓ: 
Manuel E. Palomino R. 
Carmen E. Mier B. 
 
REVISÓ: 
Adriana Valencia C. 
Johannes Delgado O. 
APROBÓ: 
Carmen Elena 
Mier Barona 
 
CARGO: 
Profesores Asociados 
 
CARGO: 
Auxiliares de 
Laboratorio 
 
CARGO: 
Coordinadora de 
Laboratorio 
 
FECHA: 
2010 
 
FECHA: 
2010 
 
FECHA: 
2010