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Metabolismo Microbiano M. C. Julio Henoc Monjardín Heráldez Facultad de Medicina UAS Que es el Metabolismo? Metabolismo – Es la suma de todas las reacciones bioquímicas requeridas para producir energía y su uso para sintetizar el material celular a partir de pequeñas moléculas. Metabolismo Posee dos componentes: Anabolismo - biosíntesis Construcción de moléculas complejas a partir de moléculas pequeñas Require ENERGIA (ATP) Catabolismo - degradación Degrada las moléculas complejas en moléculas pequeñas Genera ENERGIA (ATP) Se utilizan tres mecanismos Bioquímicos Respiración Aerobia (Utilizan oxígeno) Respiración Anaerobia (Utilizan azufre o nitrógeno) Fermentación DIVERSIDAD METABÓLICA El metabolismo bacteriano está clasificado en grupos nutricionales en base a tres criterios principales: 1. Fuente de energía, utilizada para el crecimiento 2. Fuente de carbono y 3. Fuente de donadores de electrones utilizados para el crecimiento. Quimioheterótrofos Tanto la energía como la fuente de carbono son compuestos orgánicos y el mismo compuestos puede proveer ambos. Específicamente, su fuente energía son los átomos de hidrógeno. Este grupo (llamado quimioorganoheterótrofos) incluye la mayoría de las bacterias así como todos los protozoarios, hongos, y animales. Todos los microbios de importancia médica están incluídos en este grupo. Bioenergética Producción Energía Se utilizan tres reacciones Bioquímicas Respiración Aerobia (utilizan O2 ) Respiración Anaerobia (no utilizan O2 ) Fermentación Respiración Aeróbica y Anaeróbica Respiración Aeróbica – El aceptor final de electrones es el oxígeno transformándose en agua. Respiración Anaeróbica– El aceptor final de electrones es otro compuesto inorgánico distinto al oxigeno(ejemplo nitrógeno, azufre y otros.) Respiración Aerobia El oxígeno molecular (O2) sirve como aceptor final de electrones O2 es reducido a H2O Es el modo de generación de energía usado por quimioheterotrófos Termino general aplicado a la mayoría de los patógenos humanos Fuente de energía= Oxidación de compuestos orgánicos Fuente de carbono = Carbono orgánico Se utilizan tres vías acopladas Glucólisis Ciclo de Kreb’s Cadena respiratoria o cadena de transporte de electrones (ETC) 1. Glucólisis Vía para el Catabolismo de los Carbohidratos (CHO´s) Oxidación de la Glucosa en 2 moléculas de Piruvato Los CHO’s están altamente reducidos (por lo tanto, donadores de e-s); son excelentes combustibles Los CHO´s atraviesan por una serie de reacciones oxidativas Productos finales de la Glucólisis: 2 Piruvatos 2 NADH2 2 ATP 2. Ciclo de Krebs (Ácido Cítrico o TCA) Serie de reacciones químicas que inicia y terminan con el ácido cítrico 1. Sustrato Inicial – Producto final de la glucólisis modificado • 2 Piruvato son modificados a 2 Acetil-CoA, los cuales entran al ciclo de Krebs 2. Circuito de ácidos orgánicos – serie de oxidaciones y reducciones • Eucariotas – Matriz Mitocondrial • Procariotas – Citoplasma de bacterias y Membrana Celular Productos: 2 ATP 6 NADH2 2 FADH2 4 CO2 3. Sistema de Transporte de Electrones Ocurre dentro de la membrana celular de las bacterias Respiración Anaerobia Utiliza las misma tres vías acopladas como la respiración aerobias Es utilizada como una alternativa a la respiración aerobia El aceptor final de electrones es distinto al oxígeno: NO3- : Pseudomonas, Bacillus. SO4-: Desulfovibrio CO3-: metanogénicas Se realiza en: Organismos Facultativos y Anaerobios obligados La producción de ATP es baja porque solo opera una parte del ciclo de Krebs y la cadena de electrones. Fermentación Oxidación incompleta de la glucosa u otros CHO´s en ausencia de oxigeno Se utilizan compuestos orgánicos como aceptor final de elctrones Efecto – Poca producción de ATP Producción etanol por las levaduras que actuan sobre la glucosa Formación de ácido, gas y otros productos por la acción de varias bacterias sobre el piruvato Productos Finales de la Fermentación 1. Tipo de organismo 2. Sustrato original 3. Enzimas que están presentes y son activas Muchas vías del metabolismo son bidireccionales o anfibólicas Los Metabólitos pueden servir como bloques constructores o fuentes de energía El piruvato puede ser convertido en aminoácidos a través de la aminación Los aminoácidos pueden ser convertidos en fuentes de energía a través de la desaminación El gliceraldehido-3-fosfato puede ser convertidos en precursores de aminoácidos, CHO´s y lípidos Destino y origen de los nutrientes Nutrición. Crecimiento y Multiplicación Bacteriana Crecimiento y Multiplicación Modo: Fisión Binaria División de la célula bacteriana 1. Replicación del cromosoma 2. Extensión de la pared celular 3. Formación del septum transverso 4. Unión del ADN a la membrana empuja a la nueva célua Es un incremento de todos los componentes celulares, los cuales terminan en multiplicación de la célula conduciendo a un incremento de la población. Esto involucra – un incremento en el tamaño de la célula y un incremento en el número células individuales. Las bacterias se dividen por fisión binaria Crecimiento Tiempo de Generación Intervalo de tiempo entre dos divisiones celulares. El tiempo requerido para que de una bacteria surjan dos células hijas bajo condiciones óptimas de desarrollo. Tambien llamado tiempo de duplicación de población. Tiempo de Generación Los bacilos coliformes como E. coli y otras bacterias de importancia médica – 15 min Staphylococcus aureus - 15 – 20 min Mycobacterium tuberculosis - 792-932 min Treponema pallidum -1980 min Colonia – formado por el crecimiento bacteriano en un medio sólido. (20-30 divisiones celulares) Cada colonia bacteriana representa una clona de células derivadas de una única célula. Turbidez – medio líquido - 107-109 cel/mL Formación de biocapa – delgada diseminación sobre una superficie inerte. Forma de crecimiento en el Laboratorio Medio Sólido Colonia Medio Líquido Cuando una bacteria es agregada a un medio líquido adecuado e incubada, esta crece y sigue un curso definido. Si la bacteria se cuenta en intervalos hechos después de la inoculación y graficado en relación al tiempo se obtiene una curva de crecimiento. Muestra 4 fases : Lag o adaptación Log o exponencial, Estacionaria Declinación o muerte. Curva de crecimiento bacteriano Fases de la Curva de Crecimiento 1. Fase Lag o adaptación – No hay incremento en el número pero puede haber un incremento en el tamaño de la célula. 2. Fase logarítmica o de crecimiento exponencial – Las células inician la división y su número se incrementa exponencialmente. 3. Fase Estacionaria –La división celular se detiene debido al agotamiento de los nutrientes y la acumulación de sustancias tóxicas. 4. Fase de Muerte – La población disminuye debido a la muerte de las células y la presencia de enzimas autolíticas Fases de la Curva de Crecimiento Fases de la Curva de Crecimiento Disponibilidad de nutriente y H2O Temperatura Atmosfera – O2 y CO2 pH Humedad y desecación Efectos osmóticos Radiación Estrés mecánico y sónico Factores que Afectan el Crecimiento Bacteriano
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