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Cátedra de 
Histología
Tema: Métodos Histológicos: Técnicas de 
Tinción
Dra Lucila Biedman
Mas antes necesitamos saber 
algo!!!!!
La Histología
▶ Es el estudio de los tejidos.
▶ Esto incluye: el estudio de las células o citología; el estudio de 
los tejidos o histología propiamente dicha; y el estudio de la 
estructura de los órganos o histología especializada.
Organización 
Células células = TEJIDOS 
Tejidos tejidos = ORGANO
Órgano órgano= SISTEMA 
▶ La Célula: es el elemento fundamental de todo ser 
vivo.
▶ El Tejido: se forma por la agrupación de células con la misma 
función.
▶ Los Órganos: con unidades funcionales mayores, compuestas 
por distintos tipos de tejidos, por ej. El hígado y el bazo.
▶ Los sistemas de órganos: comprenden varios órganos con 
funciones relacionadas.
Técnicas Histológicas
Se llama técnica histológica a la serie de pasos
que han de darse para obtener un preparado
observable con el microscopio
Mas antes….
A estudiar PRIMERO al…..
 
MICROSCOPIO
El microscopio
• Instrumento óptico formado 
por un sistema de lentes q 
permiten la ampliación de la 
imagen para la observación 
para la observación de 
objetos pequeños. El mas 
utilizado es el microscopio 
óptico
Partes del microscopio
• Ocular- son las lentes que estan situadas 
más cerca del observador de los 
microscopios.
• Brazo- están ubicados de forma 
perpendicular al pie y pueden tener 
una forma arqueada o de manera 
vertical, para así unirlos al pie.
• Platina- es la parte que soporta el 
portaobjetos, va provista de dos pinzas 
y de un orificio por el cual penetra la luz 
para observar la muestra.
• Ajuste macrométrico- es un tornillo que es 
para enfocar y desplazar de manera 
rápida las lentes.
• Ajuste micrométrico- es un tornillo que es 
para enfocar y realizar desplazamientos 
de las lentes de manera lenta.
• Ajuste de platina- es un tornillo mediante 
el cual se ajusta la platina.
• Pie- sostiene al microscopio.
• Fuente de luz-se utiliza para iluminar las 
muestras u objetos a observar, y se 
encuentra instalada en el pie.
• Condensador- es el conjunto de lentes 
que se encuentran situadas debajo de la 
platina y su función es la de  concentrar la 
luz sobre la muestra u objeto.
• Pinzas- son dos pinzas que están situadas 
sobre la platina y se utilizan para la 
sujeción de las muestras.
• Sistemas de Objetivos- son las lentes que 
esta situada más próxima a la muestra, lo 
que la hace ampliar la imagen de ésta.
• Revolver- es la parte que sostiene el 
sistema de objetivos, y le permite 
girar para cambiar los objetivos.
• Tubo- es la parte donde esta 
ubicado el ocular, que tiene el 
revolver con los objetivos en la parte 
inferior y los oculares en la parte 
superior.
 termino miscroscopio 
 
FACIL FACIL
Continuando….
Como se prepara una 
lamina???
Pasos para la Preparación 
de Tejidos Histológicos
⦿ Obtención de la muestra del tejido
⦿ Fijación
⦿ Deshidratación
⦿ Aclaramiento
⦿ Inclusión
⦿ Corte
⦿ Coloración
⦿ Montaje
Guarden de memoria !!
1.Obtención de la muestra: El material humano puede 
provenir de tres fuentes: 
Necropsias: son las piezas que se obtienen
 de un cadáver.
Biopsias: son trozos de tejido que se obtienen
de un sujeto con vida.
 Piezas operadas: los tejidos que han sido 
extraídos de las intervenciones quirúrgicas.
Preparación Histológica de los tejidos
2.- Fijación: Su propósito es mantener 
la morfología del tejido lo más parecida 
posible a lo que ésta tenía antes de hacer 
la extracción. Esto se logra al inactivar 
ciertas enzimas celulares que iniciarían la 
Autólisis.
Métodos: Químico → inmersión
Físico: congelación
Los más usados son:
Formaldehído preserva la estructura 
general de la célula, reaccionan con los 
grupos aminos de las proteínas
http://www.monografias.com/trabajos5/enzimo/enzimo.shtml
Preparación Histológica de los tejidos
3.- Deshidratación: se elimina 
completamente el agua para que se pueda 
embeber adecuadamente el tejido en aquellos 
medios de inclusión que no sean hidrosolubles. 
(Alcohol etilíco en concentraciones crecientes)
4.- Aclaramiento: Se llama aclaramiento ya 
que el tejido se torna transparente o claro en el 
xileno, esto se debe a que cambia su índice de 
refracción. La sustancia comúnmente utilizada 
es el Xileno o Xilol. 
5.- Inclusión: Proceso que tiene por objeto 
“rellenar o infiltrar” completamente la muestra 
histológica con el medio que se va a usar para la 
imbibición del tejido. (Baños sucesivos de 
parafina fundida) Debido al calor, el xilol se 
evaporan y los espacios anteriormente ocupados 
por ellos son ahora ocupados por la parafina. 
http://www.monografias.com/trabajos15/transf-calor/transf-calor.shtml
Preparación Histológica de los tejidos
6.- Corte: Ahora se puede cortar en 
secciones lo suficientemente delgadas 
como para permitir el paso
 de la luz.
7.- Coloración: Los cortes se colocan 
sobre portaobjetos a los que se les ha 
agregado una pequeña cantidad de 
Albúmina, la cual actúa como adhesivo. La 
parafina se elimina en un solvente 
orgánico, de nuevo se incluyen en Xilol, y 
la muestra se rehidrata haciéndola pasar 
por una serie de graduaciones 
decrecientes de alcohol etílico hasta llegar 
a una solución 100% de agua. 
Ya rehidratado se TIÑE EL TEJIDO. Los colorantes más utilizados
 son la HEMATOXILINA Y la EOSINA. 
http://www.monografias.com/trabajos5/natlu/natlu.shtml
Coloraciónes
▶ Los cortes de tejidos se suelen montar sobre portaobjetos y se 
colorean.
Reducción de la pieza Fijación Introducción en cassette 
de deshidratación
Deshidratación en 
alcoholes 
Penetración de la parafina 
Preparación Histológica de los tejidos
Corte en micrótomo
Bateria de coloración 
H&E
Fundamentos Generales de la Preparación Histológica de los tejidos
Coloraciones Utilizadas en Microscopía Óptica
Hematoxilina-Eosina (HE): utiliza dos tipos de 
colorantes. La hematoxilina, que es un colorante básico, 
colorea los componentes ácidos de la célula (núcleo) de 
color morado; y la eosina, que es un colorante ácido, se 
une a estructuras básicas de la célula (citoplasma) 
otorgándole una tonalidad rosada.
Tinción de Giemsa
 Colorante neutro
Tinción Azul de Toluidina
Colorante metacromático
Impregnación con sales 
de plata
Coloración indiferente
Coloraciones Utilizadas en Microscopía Óptica
Fundamento: Radica en la propiedad que
tienen todos los tejidos para incorporar y 
fijar de modo variable diversas sustancias 
Coloreadas. Según su afinidad tisular:
• Colorantes Básicos: poseen una carga global
positiva (catiónicos), reaccionan con los componentes aniónicos de las 
células. Ej. Hematoxilina
• Colorantes Ácidos: poseen una carga global negativa (aniónicos), 
reaccionan con los componentes catiónicos de las células. Ej. Eosina
• Colorantes neutros: su carga global es neutra. Propiedad de colorear 
junta o separadamente diversas estructuras. Ej. Giemsa
• Colorantes metacromáticos: colorantes básicos reaccionan con 
componentes histicos que hacen que su color normal del azul al rojo
Coloraciones Utilizadas en Microscopía Óptica
• Coloración con PAS (ácido periódico-Shiff): se usa 
para determinar la presencia de macromoléculas ricas 
en glúcidos como glucógeno, glucoproteínas . 
• Coloración con metales: actúan impregnando a ciertos
 componentes celulares. Se usan para demostrar Aparato
 de Golgi.
• La orceína y la fucsina resorcina: son colorantes para fibras 
elásticas. Se observan entre bordeau y castaño oscuro.
Color Colorante Qué tiñe?
Rosado Eosina (ácido) BASE (sustancia acidófila)
Violeta Hematoxilina (base) ÁCIDO (sustancia basófila)
http://histologia.bigthicketdirectory.net/unidad6a/imagenes/neurag.JPG
http://histologia.bigthicketdirectory.net/unidad6a/imagenes/neurag.JPG
Fácil verdad ☺
Elementos celulares que presentan basofilia, es decirafinidad por los colorantes básicos (¿con qué se tiñería? 
H_________A) y se ven de color morado al microscopio 
óptico
Elementos celulares que presentan acidofilia, es decir 
afinidad por los colorantes ácidos 
(se tiñen con? E _ _ _ _ A) 
Eso es todo! Aún hay varias técnicas 
no descritas aquí; pero ya tenemos 
Varias para divertirnos!
A leer! :D
 
 
 Chausito!!