Descarga la aplicación para disfrutar aún más
Vista previa del material en texto
1 Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Zaragoza Carrera de Cirujano Dentista Contaminación de conos de gutapercha nuevos y la alternativa para su desinfección. TESIS QUE PARA OBTENER EL TITULO DE CIRUJANO DENTISTA PRESENTA: LÓPEZ PÉREZ KAREN Director de tesis: Dra Ma. Teresa de Jesús Zaragoza Meneses México, D.F., Agosto 2018 UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. 2 Agradecimientos Alguna vez alguien me dijo que de nada vale llegar a la cima si nos olvidamos del camino andado... Dentro de mi recorrido por la vida me pude dar cuenta de que hay muchas cosas para las que soy buena, encontré destrezas y habilidades que jamás pensé; pero lo realmente importante es que pude descubrir que por más que disfrute trabajar solo, siempre obtendré un mejor resultado si lo realizo con la ayuda y compañía perfecta, entendí que la ayuda idónea no llega cuando tú la solicitas, si no que la ayuda idónea, siempre llega justo a tiempo. Por eso doy gracias.... A mi padre, por ser mi ejemplo para salir adelante y por los consejos que han sido de gran ayuda para mi vida y crecimiento. Esta tesis es el resultado de lo que me has enseñado en la vida, ya que siempre has sido una persona honesta, entregada a tu trabajo, y un gran líder, pero más que todo eso, una gran persona que siempre ha podido salir adelante y ser triunfador. Es por ello que hoy te dedico este trabajo de tesis. A mi Madre, por ser la amiga y compañera que me ha ayudado a crecer, gracias por estar siempre conmigo en todo momento. Gracias por la paciencia que has tenido para enseñarme, por el amor que me das, por tus cuidados, por los regaños que me merecía y que no entendía. Gracias Mamá por estar al pendiente durante toda esta etapa, eres mi motor. A mis hermanos Felipe, Marco y Violeta, que con su amor me han enseñado a salir adelante. Gracias por sus consejos, por ser mi espejo, por preocuparse por su hermana menor, por compartir sus vidas, pero sobre todo, gracias por estar en otro momento tan importante en mi vida. A mi cuñada Socorro, que siempre ha creído en mí y me ha dado mucho amor, por sus conversaciones y compañía. Por cada día preguntar cómo iba mi tesis; te ganaste mi corazón y cada que me necesites estaré incondicionalmente para ti. A mis sobrinos Marco, Alberto y Daniel, sus risas me motivan, me hacen crecer y sentirme muy afortunada de tenértelos conmigo. A Adrián, quien se convirtió en el ingrediente perfecto para haber podido lograr esta meta; gracias por preocuparte por mí a cada momento, por tu motivación y comprensión, por ser mi apoyo incondicional en los momentos más difíciles; tú sabes que este logro es también tuyo, gracias, sin tu apoyo no hubiera sido posible. 3 A la Dra. Ma. Teresa de Jesús Zaragoza Meneses, mi directora de tesis y mi guía durante el trabajo de laboratorio, me siento afortunada de que en los momentos difíciles estuvo ahí para ayudarme. Gracias por sus consejos y toda su experiencia. A la Mtra. Olga Taboada por poner a mi disposición todo su conocimiento metodológico, pero sobre todo por tomarse el tiempo para atenderme y siempre recibirme con una sonrisa. A mi honorable jurado, gracias por la oportunidad y por el tiempo que me han dedicado para leer este trabajo. Mtro. Jorge Balduino Aguirre González CD. Axeel Becerril Ramírez Mtro. Diego Ulises Arellano García A Yair por haber sido un excelente compañero de laboratorio y amigo, por haberme tenido la paciencia necesaria y por motivarme a seguir adelante en los momentos de desesperación. 4 INTRODUCCIÓN 6 JUSTIFICACIÓN 8 MARCO TEÓRICO 10 Endodoncia 10 Historia de la endodoncia 11 Limpieza, conformación y obturación del sistema de conductos 15 Obturación del conducto radicular 16 Materiales de obturación 17 Propiedades biológicas 17 Propiedades físico químicas 17 Clasificación de los Materiales de Obturación 18 Materiales en estado sólido 18 Materiales en estado plástico 18 Conos de gutapercha 19 Historia de los conos de gutapercha 19 Composición de los Conos de Gutapercha 20 Formas de los cristales de los conos de gutapercha 21 Ventajas y desventajas de los conos de gutapercha. 22 Descontaminación 26 Soluciones antisépticas y desinfectantes 26 Desinfectante 27 Soluciones desinfectantes utilizadas 28 Hipoclorito de sodio 28 Efecto antibacteriano 29 Viarzoni-T 30 5 Ventajas 30 Modo de empleo 30 Clorhexidina 31 Presentaciones 32 Mecanismo de acción 32 Microbiología Básica 33 Microbiología endodóntica 35 Microorganismos después de retirar el material de obturación. 37 Medios de cultivo 38 Esterilidad del medio 39 Especies bacterianas 40 Candida albicans 40 Staphylococcus 41 Staphylococcus Aureus 41 Enterococcus faecalis 42 Escherichia coli 43 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 44 HIPÓTESIS 45 OBJETIVOS 46 MATERIALES Y MÉTODOS 47 RESULTADOS 60 DISCUSIÓN 65 CONCLUSIONES 70 ANEXOS 71 Referencias 73 6 Introducción El concepto filosófico define a la Endodoncia como la parte de la Odontología que se ocupa de la etiología, diagnóstico y tratamiento de las enfermedades de la pulpa dentaria y sus posibles complicaciones con el periodonto. La descontaminación completa del sistema de conductos es uno de los objetivos del tratamiento endodóntico pero, al día de hoy, es más un objetivo académico que realista, ya que existen factores que impiden dicha descontaminación. Por eso es importante el uso complementario de los instrumentos de endodoncia del líquido irrigante y desinfectante de los conos de gutapercha, que constituyen la base para disminuir la probabilidad de fracaso. El desarrollo de las infecciones secundarias se produce por microorganismos que no se encontraban en la infección primaria, este tipo de infecciones pueden ser causadas por fallas en la cadena aséptica durante el tratamiento, puede ocurrir debido a la presencia de un biofilm supragingival, cálculos o caries coronal, perforaciones en los diques de hule y la contaminación de los instrumentos de endodoncia, sustancias irrigadoras o materiales de obturación. La obturación es un procedimiento importante en el tratamiento endodóntico, ya que previene una reinfección del conducto radicular y con esto terminar en una exodoncia. 7 Se debe tener cuidado durante este procedimiento evitando la contaminación cruzada del conducto radicular por los instrumentos o materiales de relleno. En este punto, la descontaminación de los conos de gutapercha es un paso fundamental en el tratamiento endodóntico, porque son materiales que no pueden ser sometidos a procesos de esterilización debido a sus propiedades físicas, lo cual impide la eliminación total de los microorganismos presente en su superficie, provocando así la ruptura de la cadena aséptica en la terapéutica endodóntica. La mayoría de los profesionales utilizan diferentes sustancias a diversas concentraciones y tiempos variables; pero es importante conocer cuál de las soluciones desinfectantes es lamás adecuada, y a qué concentración y tiempo se debería utilizar, por este motivo en este estudio se utilizaron dos soluciones que han sido investigadas en la práctica, como son: el Hipoclorito de sodio; en sus presentación comercial y odontológicas, el gluconato de clorhexidina; para determinar su eficacia así como el tiempo apropiado con el que se debería trabajar. Es importante mencionar que se deben aplicar medidas que reduzcan al mínimo la presencia de microorganismos durante el acto operatorio,motivo por el cual en el presente estudio, se evaluarán las condiciones de desinfección y contaminación en las que se encuentran los conos de gutapercha que se comercializan en los alrededores de la FES Zaragoza, los cuales son utilizados por los alumnos de esta facultad. 8 Justificación Uno de los objetivos primordiales en el tratamiento endodóntico es la eliminación o reducción de los microorganismos presentes en los conductos radiculares. Los microorganismos infecciosos pueden ser eliminados con la preparación biomecánica de los conductos. Sin embargo, en contraste con el cuidado que se toma en la descontaminación y conformación de los conductos, la obturación puede ser un procedimiento para la re-contaminación de los mismos, sí instrumentos no estériles o materiales de relleno contaminados entran al sistema de conductos. Se ha argumentado que la prevención de la contaminación se convierte en un problema porque los conos de gutapercha que se utilizan para obturar el espacio del conducto radicular, no son aptos para esterilizar en el calor. La literatura muestra estudios donde los conos de gutapercha son contaminados intencionalmente con diversas cepas de bacterias antes de probar la eficacia de algunos descontaminantes químicos. Sin embargo hay pocos estudios publicados en los que se evalúa la contaminación de conos de gutapercha tomados directamente de su empaque sellado. Un inadecuado manejo de los materiales durante el tratamiento endodóntico, como los conos de gutapercha, pueden aumentar el riesgo de contaminación. 9 Valorar la capacidad de descontaminación que presentan; el hipoclorito de sodio, Viarzoni-T y la clorhexidina en diferentes concentraciones e intervalos de tiempo. Por esta razón, el presente estudio se justifica en la necesidad de estudiar las condiciones de las puntas de gutapercha y cómo beneficia el uso de las soluciones descritas anteriormente a los alumnos de la FES Zaragoza para el éxito de su tratamiento de conductos. 10 Marco Teórico Endodoncia Endodoncia se refiere al interior (endo) de los dientes (doncia). La pulpa dental es el tejido que se encuentra en el interior de los dientes y está compuesto de nervios, vasos sanguíneos y células especializadas.1 Podemos definir la endodoncia como la parte de la Odontología que se ocupa de la etiología, diagnostico, prevención y tratamiento de las enfermedades de la pulpa dental así como sus posibles secuelas, esto con el fin de conservar un órgano dentario. 2,3 Los microorganismos son los principales agentes etiológicos de la enfermedad pulpar y periapical. Dos de los principios de la terapia endodóntica son la eliminación de microorganismos del sistema de conductos radiculares y la prevención de la reinfección posterior; de aquí surge la necesidad de tomar todas las medidas necesarias para la eliminación de toda bacteria. 4, 5, 6, 7 11 Historia de la endodoncia La Odontología hace evidente el papel primordial desempeñado por pastas y preparados medicamentosos a la hora de calmar el dolor dental y desinfectar las cavidades de caries junto al tejido pulpar. La primera endodoncia encontrada data de hace 2200 años, del periodo helenístico (200 años a.c.). Fue realizada en un guerrero nabateano, la obturación radicular consistía en un alambre de bronce que bloqueaba únicamente la entrada del conducto. La razón de esta técnica se atribuye al hecho de que por aquella época consideraban que la causa de la enfermedad dental era un gusano que entraba en el diente, de manera que si bloqueaban su entrada evitarían el dolor dental. Esta teoría del gusano dental viene del S.XIII a.c.8, 9, 10 Los chinos se adelantaron al uso de arsenicales para tratar la pulpitis, unos 1500 años y también utilizaron la amalgama desde el año 659 de esta era, este arsénico era asociado a "Hovang-Tan" -(excrementos de murciélago)- en el fondo de las cavidades con el fin de "matar gusanos". En el período comprendido entre los años 3 700 y 1 500 antes de Cristo, los egipcios usaron diversas sustancias que eran aplicadas dentro de las cavidades, para aliviar el dolor. Para ello emplearon comúnmente la pasta de comino, incienso y cebolla, a partes iguales. 11 12 En la Grecia clásica, Hipócrates practicó la cauterización introduciendo finas agujas calientes en el interior del diente, así como aceite hirviendo o fomentos de apio y beleño. 12 La Endodoncia fue practicada desde el siglo I, cuando Arquígenes describe por primera vez un tratamiento para la pulpitis con la extirpación de la pulpa para conservar el diente y para aliviar el dolor. 13,14 Entre los árabes, Serapion en el siglo X, colocaba opio en la cavidad de caries para combatir el dolor. En el siglo XI, Albucasis recomendaba para las afecciones dentarias el uso del cauterio que era introducido.15 El dolor era considerado un castigo divino, lo que justificaba remedios extraordinarios para las distintas afecciones dentarias como ratas, patas de insectos, purgantes etc., con el fin de fortificar al paciente y expulsar el demonio del mal. Este estado de superstición, trajo como consecuencia la creencia en el poder de los santos para aliviar y curar las afecciones. Entre los santos a los que se imploraba, se destaca Santa Apolonia, reconocida como patrona de la Odontología. Leeuwenhoek construyó el primer microscopio y estudió la estructura dentaria haciendo en 1678 una descripción exacta de los conductos dentinarios, señalando también la presencia de microorganismos en los conductos radiculares. 16 13 Maynard en 1838, fabrica el primer instrumento endodóntico, partiendo de una cuerda de reloj que era usado para ensanchar y dar forma cónica al conducto, Bowman en 1867, emplea por primera vez los conos de gutapercha, para la obturación de los conductos radiculares; mientras que Howard en 1874 preconizaba la gutapercha disuelta en cloroformo (cloropercha) para el mismo proposito. En ese mismo año Magitot sugiere el uso de una corriente eléctrica para la prueba de la vitalidad de la pulpa. 17, 18 Ningún adelanto científico por sí solo ha contribuido tanto a mejorar la salud dental, como el descubrimiento de las propiedades asombrosas de los rayos, por el profesor Wlihelm Konrad Roentgen, en noviembre de 1895. Las significativas posibilidades de aplicación a la Odontología fueron materializadas 14 días después del pronunciamiento de Roentgen, cuando el Dr. Otto Walkoff obtuvo la primera radiografía dental de su propia boca. A los 5 meses James describió el aparato de Roentgen y mostró varias radiografías. Tres meses después Kells dio la primera clínica en este país sobre el uso de la radiografía con propósitos dentales. Tres años más tarde, en 1899, Kells usaba las radiografías para medir la longitud de los dientes durante la terapéutica de conductos radiculares. Un año después, en 1900, Prize sugirió que las radiografías se utilizaran para verificar la calidad de las obturaciones de los conductos radiculares. 19, 20 14 A fines del siglo XIX y principios del siglo XX, la endodoncia se denominaba terapia de los conductos radiculares. Harry B. Johnston, de Atlanta, Georgia, fue el primer profesional que limitó su ejercicio a laEndodoncia y acuñó el término a la misma. 21 Rosenow, en los Estados Unidos, en 1922, desvitalizó la pulpa en perros, provocando una infección artificial. Las bacterias de este foco de infección artificial ganaban el torrente circulatorio a través de una bacteremia, se fijaban en un órgano de selección y de menor resistencia y producían allí una alteración patológica. En 1943, un grupo de profesionales se reunió en Chicago, formaron la organización American Association of Endodontists. La American Dental Association reconoció a la Endodoncia como especialidad en 1963. Shilder, en 1967, introdujo el concepto de limpieza y conformación. La limpieza hace referencia a la eliminación de todos los contenidos del sistema de conductos radiculares. La conformación se refiere a una forma específica de cavidad, realizado con cinco principios o reglas de oro en la especialidad.22 En los últimos años ha sido notoria la influencia que la tecnología ha tenido en la práctica de la Endodoncia. A tal grado ha sido así, que tanto las técnicas de procedimientos tan comunes como la conductometría, la preparación biomecánica la desinfección y la obturación de los conductos tienen que ser reaprendidas por los endodoncistas; puesto que la técnica ha introducido instrumental, aparatología y materiales novedosos. 23 15 Limpieza, conformación y obturación del sistema de conductos El tratamiento endodóntico tiene dos fases iniciales que son cruciales y una más de relleno: La fase mecánica, que implica la instrumentación La fase química, que implica el uso de soluciones antimicrobianas como agentes de irrigación. 24 La tercera fase del tratamiento endodóntico es el relleno del sistema de conductos donde los materiales de obturación contaminados pueden introducir microorganismos a un sistema de conductos previamente desinfectado e impedir el éxito del tratamiento 25 el cual debe ser sellado herméticamente y a la vez, tener un buen selle apical como coronal, 26 para evitar el crecimiento de estos microorganismos, los materiales de relleno endodónticos deberán tener idealmente un efecto antibacteriano y anti fúngico 27. Es un hecho universalmente aceptado que el resultado exitoso en el tratamiento endodóntico depende de: la limpieza y conformación, desinfección y obturación tridimensional del sistema de conductos radiculares. Aun cuando es imposible determinar cuál de los tres factores es el más importante, lo que sí es indispensable es que el clínico debe conceder la misma atención a todos los pasos en el tratamiento endodóntico. 28 16 En la práctica clínica, el odontólogo se enfrenta ocasionalmente con el problema de la infección que ocurre después de la obturación del espacio del conducto radicular, una posible explicación para esto fenómeno puede ser la introducción de conos de gutapercha contaminados en el conducto radicular. 29 Obturación del conducto radicular De acuerdo a la Asociación Americana de Endodoncia (AAE), una obturación adecuada se define y se caracteriza por el llenado tridimensional de todo el conducto radicular, lo más cercano posible de la unión cemento-dentinaria. La obturación es la última etapa operatoria del tratamiento de conductos radiculares, y tiene valor fundamental en el éxito a mediano y largo plazo. 30 Al ocupar el espacio creado por la conformación evita el estancamiento de líquidos, ofrece condiciones para que se produzca la reparación y contribuye así, de manera decisiva, con el éxito de la terapéutica endodóntica. 31 17 Materiales de obturación De los materiales que son utilizados durante el procedimiento de obturación se requiere de una serie de propiedades que pueden ser divididas en biológicas y físico-químicas. Desde hace tiempo se buscan materiales para obturar conductos radiculares que se aproximen a lo ideal. Propiedades biológicas Buena tolerancia tisular Acción antimicrobiana No desencadenar respuesta inmune en los tejidos apicales y periapicales No ser mutagénico o cancerígeno Propiedades físico químicas Facilidad de introducción en el conducto radicular Ser plástico en el momento de la introducción y sólido posteriormente Propiciar buen tiempo de trabajo Permitir un sellado del conducto radicular lo más hermético posible No experimentar contracciones No ser permeable Debe tener buena fluidez Tener buena viscosidad y adherencia No solubilizarse en el interior del conducto radicular Tener pH próximo a neutro 18 Ser radiopaco No manchar las estructuras dentales Ser fácil de remover Clasificación de los Materiales de Obturación Materiales en estado sólido o Conos de gutapercha o Conos de resina Materiales en estado plástico o Cemento18 En la etapa de relleno se usan materiales de obturación que reemplazan al tejido pulpar removido, como las puntas o conos de gutapercha, que constituyen el núcleo de la obturación, y que se complementan con cementos selladores que se disponen entre ellos y las paredes del conducto. 32 19 Conos de gutapercha Historia de los conos de gutapercha Actualmente se cuenta con muchas técnicas, dispositivos y materiales para lograr la obliteración del conducto radicular, con el fin de lograr el sellado. En la antigüedad, para este fin, se utilizaron materiales como: amalgamas, parafina, puntas de plata, pastas a base de óxido de zinc y pastas yodoformadas. 33 Mucho antes de que la gutapercha fuera utilizada como un material obturador, está fue introducido en el mundo occidental, utilizada en forma cruda por los nativos del archipiélago malayo para la fabricación de mangos de cuchillos, bastones, entre otros fines. 34 La palabra deriva de los vocablos gatahque significa goma y pertjaque significa árbol. La gutapercha es el exudado coagulado purificado de un árbol sapotáceo originario de las islas del Archipiélago Malayo y se ha utilizado en odontología desde el siglo XIX. 35 La primera persona en descubrir este material fue John Tradescant después de sus viajes al Oriente en 1656, lo nombró como "Mazerwood". Pero William Montogmerie, que era un médico en el servicio de la India. Él fue el primero en apreciar el potencial de este material en la medicina y fue galardonado con la medalla de oro por la Royal Society of Arts, Londres en 1843. 36 20 La gutapercha se introdujo por primera vez en el campo de la odontología por un Asa Hill, en 1847 quien lo utilizó como material restaurador de plástico. 37,38 En 1887, la SS White Company comenzó a comercializar puntas de gutapercha como material de obturación endodóntico, y así, este material se mantiene como el estándar de oro desde hace más de 100 años. 39 Composición de los Conos de Gutapercha Después de purificar la materia prima, originalmente obtenida para confeccionar los conos, se le agregan varias sustancias para mejorar sus propiedades físico químicas, principalmente la dureza, la radiopacidad, la maleabilidad y la estabilidad. Entre esas sustancias podemos mencionar el óxido de zinc, el carbonato de calcio, el sulfato de bario, el sulfato de estroncio, el catgut pulverizado, las ceras, las resinas, el ácido, los colorantes y el aceite de clavo;40 la gutapercha es una resina natural, insoluble en agua, poco soluble en eucalipto y soluble en éter, cloroformo y xilo, 4118es rígida a temperatura ambiente, se vuelve maleable entre 25 y 30 °C, se ablanda a los 60 °C y se funde a los 100°C con una descomposición parcial. 42 Son biocompatibles, dimensionalmente estables, radiopacos y termoplásticos. Gossman clasifica los materiales de obturación en plásticos sólidos, cementos y pastas; a su vez formula requisitos para el material ideal.43 21 Formas de los cristales de los conos degutapercha La gutapercha se presenta en dos formas cristalinas: alfa y beta, que confieren distintas propiedades a cada tipo de gutapercha. La forma alfa es natural y de baja viscosidad, a menor temperatura. La forma cristalina beta se obtiene por calentamiento de la forma alfa y su enfriamiento brusco. Su temperatura de fusión y su viscosidad son altas. Es en esta forma cristalina que se presenta la gutapercha de los conos convencionales. La forma beta, al ser calentada se vuelve más maleable, mientras que la forma alfa se hace más pegajosa. En las técnicas de obturación que emplean la plastificación de la gutapercha, ésta se encuentra generalmente en forma alfa. 44 Antiguamente los conos de gutapercha se fabricaban de medidas arbitrarias, clasificándose en finos, medianos y gruesos, largos y cortos, luego se confeccionaron numerados; en la actualidad tienen prioridad los estandarizados al igual que los instrumentos, obteniéndose así una mayor concordancia con el diámetro del último instrumento usado en la preparación del conducto. En función de su uso, los conos de gutapercha pueden ser divididos en principales y secundarios o accesorios. En las técnicas que requieren del ajuste apical del cono se denomina conos principales o conos maestros a aquellos que sellan los 2 o 3 mm apicales del conducto. Los conos secundarios o auxiliares, sirven para rellenar los espacios existentes entre el cono principal y las paredes en el resto del conducto radicular, para este objeto se pueden emplear conos estandarizados o bien puntas de gutapercha de gran conicidad.45, 46 22 Ventajas y desventajas de los conos de gutapercha. Ventajas. Compresibilidad: Se adapta perfectamente a las paredes de los conductos preparados cuando se utiliza en la técnica de compresión, se compacta. Inerte: Es el material menos reactivo que la plata y el oro. Estabilidad Dimensional: Presenta cambios dimensionales después de endurecida, a pesar de la temperatura. Tolerancia hística: Es aceptada por los tejidos periapicales. Opacidad radiográfica. Plastificación al calor: el calentamiento de la gutapercha permite su compactación. Se disuelve con facilidad: Con sustancias solventes generalmente eucalipto y cloroformo. Esta propiedad constituye una ventaja importante respecto a otros materiales de obturación. El cloroformo disuelve por completo la gutapercha. 23 Desventajas. Falta de rigidez: Se dobla con facilidad cuando se comprime lateralmente, lo cual dificulta su aplicación en conductos de tamaño pequeño (menos de 30). Falta de control longitudinal: además de la compresibilidad, la gutapercha puede deformarse verticalmente por distensión. 47 Las puntas de gutapercha son elaboradas empleando materias primas de alta calidad, mediante un proceso estandarizado y certificado bajo la Norma ISO 9001:2008 e ISO 13485:2003. Además, en el Laboratorio de Control de la Calidad se verifica, para el producto terminado puntas de gutapercha, el cumplimiento de los requerimientos de calidad según Norma “International Standard ISO 6877 Dental Root – Canal ObturatingPoints 1995 “. 48 Aun cuando los conos de gutapercha se producen en condiciones asépticas y presentan propiedades antimicrobianas potenciales, especialmente debido a su componente de óxido de zinc, pueden ser contaminados por la manipulación, incluso si se retiran cuidadosamente de sus envases. 32, 47,49 ,50 24 Debido a la característica termoplástica de los conos de gutapercha no pueden ser esterilizados por el proceso convencional, en el que se utiliza calor húmedo o calor seco, ya que esto provocaría una alteración en la estructura de la gutapercha, es por ello que estos conos deben ser desinfectados por soluciones químicas como: povidona yodada, glutaraldehído, hipoclorito de sodio, peróxido de hidrógeno, clorhexidina, paraformaldehído, alcohol etílico y algunos más. 49,51 Tomando en cuenta lo anterior, se hace imprescindible utilizar durante los procesos de obturación sustancias que nos ayuden por medio de acciones físicas y químicas a eliminar estas bacterias. 5 Se debe realizar la descontaminación para remover los microorganismos presentes en el sistema de conductos radiculares y prevenir que otros entren; sin embargo, a pesar del cuidado que se tiene al limpiar el conducto, la obturación a menudo se realiza usando conos de gutapercha directamente de los contenedores de almacenamiento sin tomar en cuenta su estado estéril. 41 El uso del dique de goma provee seguridad ante la contaminación salival; una preparación químico mecánica apropiada del canal radicular es efectiva en la remoción de las bacterias que están presentes desde el inicio del tratamiento. El odontólogo, al realizar el tratamiento de conductos radiculares se debe tener presente no sólo a la micro- flora oral, sino también la contaminación bacteriana exógena. 25 En la práctica clínica, el odontólogo se enfrenta, con el problema de infección que ocurre después de la obturación del espacio del conducto radicular, lo que conduce al fracaso de la terapia endodóntica. Una posible explicación para este fenómeno puede ser la introducción de conos de gutapercha contaminados dentro del conducto. 52,53 Se ha demostrado que los conos de gutapercha tomados de un empaque sellado, una vez expuestos al ambiente, se encuentran contaminados por una variedad de microorganismos como los cocos, filamentos y levaduras. Aunque la mayoría del instrumental endodóntico puede esterilizarse en autoclave de calor húmedo o seco, la gutapercha no pues, se deformaría, por lo tanto se deben usar otros métodos para la descontaminación, con el propuesto de mantener la cadena aséptica en la terapéutica endodóntica, la cual es esencial en el éxito de la misma. 54 Para este efecto, debido a que es el último paso en el tratamiento de conductos radiculares, se debe evitar la inoculación de microorganismos exógenos para evitar una reagudización del proceso o el fracaso terapéutico, la literatura recomienda agentes químicos, como el Hipoclorito de sodio, Clorhexidina entre otros; los cuales pueden lograr una acción antimicrobiana, para la desinfección de los conos de gutapercha previo a la obturación de sistemas de conductos radiculares. 54 26 Descontaminación La Asociación Americana de Endodoncistas define la descontaminación como un término no específico que implica la destrucción de microorganismos patógenos, pero no necesariamente de esporas; usualmente con agentes químicos. 55 Soluciones antisépticas y desinfectantes Se ha estudiado el efecto de los antisépticos y químicos para reducir las cargas bacterianas no solo en la cavidad oral, sino también en el resto del cuerpo humano, además de las superficies. Pero comúnmente se habla de antisépticos cuando se refiere a soluciones que inhiben o impiden el crecimiento de microorganismos para ser utilizados sobre tejidos vivos como piel y mucosas, y por el contrario se habla de desinfectantes cuando son sustancias que eliminan o inhiben el desarrollo de microorganismos en elementos inertes. 56 Otra definición sugiere que, los desinfectantes son agentes antimicrobianos que se encargan de la eliminación de todos los microorganismos patógenos con excepción de las esporas bacterianas57 alterando su estructura o su metabolismo, independientemente de su estado fisiológico. Para la (FDA) los desinfectantes son sustancias químicas capaces de destruir en 10 o 15 minutos los microrganismos depositados sobre el material inerte; deben alterar lo menos posible el sustrato donde actúan.51 27 Aun cuando las soluciones más usadas son la clorhexidina, el hipoclorito de sodio y el alcohol en distintas concentraciones y presentaciones, no seha establecido claramente la solución más efectiva, ni el tiempo necesario para desinfectar los conos de gutapercha;58 pero cabe señalar que el hipoclorito de sodio ha sido usado en diferentes concentraciones por más de 70 años. 4 Desinfectante Es el que elimina microorganismos hasta niveles aceptables, no los elimina todos ni sus esporas, producen la Desinfección, es un germicida que no se puede usar sobre los tejidos vivos (diferencia del antiséptico), se usan para desinfectar instrumental y utensilios. 59 De los tres desinfectantes mencionados anteriormente estudiaremos al hipoclorito de sodio en concentraciones de 0.5 % 1 %, 2%(Viarzoni-T), 3% y 5%, la clorhexidina al 0.12% para esto se debe mencionar sus características 28 Soluciones desinfectantes utilizadas Hipoclorito de sodio Es un compuesto químico resultante de la mezcla de cloro, hidróxido de sodio y agua, fue desarrollado por el francés Bertholleten 1787 para blanquear telas. 60 A fines del siglo XIX, Luis Pasteur comprobó su poder de desinfección, extendiendo su uso a la defensa de la salud contra los gérmenes y bacterias. El hipoclorito de sodio pertenece al grupo de los compuestos halogenados, su uso en odontología se inició en 1792, cuando fue producido por primera vez y recibió el nombre de Agua de Jevele. La Asociación Americana de Endodoncistas ha definido al hipoclorito como un líquido claro, pálido, verde-amarillento, extremadamente alcalino y con fuerte olor clorino. 61 Según Teixeira, De Vasconcelos, Cecchin y Jaju, destacan que es una sal hipertónica y alcalina, tiene un pH mayor a 11,62, 63, 64 65 su amplia utilización en endodoncia se debe a su capacidad para disolver tejidos y a su acción antibacteriana; posee un amplio efecto contra esporas, hongos y virus. Sus concentraciones clínicas varían entre el 0.5% al 6%. 66 29 El hipoclorito de sodio en tratamiento endodontico tiene dos características fundamentales: acción solvente de tejidos blandos como resultado de la oxidación, efecto antiséptico por liberar Cl y la reducción del NaOCl a productos no tóxicos (Na+, Cl), cuando en contacto con materia orgánica. El cloro liberado constituye un bactericida notable, promoviendo todavía la desodorización y la aclaración de la dentina. La liberación de oxigeno es particularmente antiséptica y por acción mecánica arrastra para el exterior los productos sólidos y semisólidos encontrados en el canal radicular. 67 Efecto antibacteriano El hipoclorito de sodio presenta un alto espectro contra microorganismos patógenos: bacterias (aerobios y anaerobios), hongos, esporas, virus; incluyendo el de inmunodeficiencia humana. Reportándose una actividad antimicrobiana residual que se puede extender hasta por 72 horas. 68 Boucher señaló que la eficiencia antibacteriana del hipoclorito de sodio es directamente proporcional a la cantidad de ácido hipocloroso presente en la solución. Se acredito que el cloro combinado con las proteínas de membranas celulares forma compuestos que interviene en el metabolismo celular.69 Dentro de las soluciones de hipoclorito de sodio usadas en el consultorio odontológico se encuentra el Viarzoni-T® marca comercial del hipoclorito al 2% 30 Viarzoni-T Elaborado por el laboratorio Viarden, libera oxígeno que potencializa su acción bactericida y favorece la eliminación mecánica del debrídentinario. Ventajas pH alcalino En uso normal no es irritante Facilita el desprendimiento de restos orgánicos de las paredes del conducto Penetra en los conductos accesorios eliminando de ellos los residuos orgánicos Neutraliza la acción del tejido orgánico necrótico Modo de empleo Se emplea con jeringa de aguja de punta roma de calibre adecuado al conducto. En la concentración que se presenta o, se puede diluir a partes iguales con agua destilada. 70 31 Clorhexidina Se ha utilizado por más de 30 años, en los inicios de los setenta fue incorporada al 0.2% en forma de colutorios en Europa y en 1986 fue incorporado al 0.12 % en los colutorios de Estados Unidos.71 La Clorhexidina es químicamente una Bis-guanidina unidas a un puente de metileno con seis carbonos: la forma más estable es de sal y es comercializada comúnmente como una sal de digluconato por su alta solubilidad en agua, es activa contra un largo espectro de aerobios y anaerobios, bacterias Gram positivas y Gram negativas así como especies de Cándida principalmente la Cándida albicans 67 Denton indica que la clorhexidina tiene una actividad antibacteriana de amplio espectro que abarca bacterias Gram positivas y Gram negativas, levaduras, dermatofitos y algunos virus lipofilicos, 72, 73 Gjermo asevera que la clorhexidina difiere de los antibióticos comúnmente usados en no provocar fenómeno de resistencia bacteriana. 74 32 Presentaciones Existen distintas presentaciones de Clorhexidina como geles, barnices, aerosoles (spray) microships, chicle, comprimidos, tabletas, y en seda dental. Pero la forma más común usada es en colutorios en concentraciones: 0.1%, 0.12%, 0.2%, 1% y 2%. 75 Dentro de sus características se destacan su gran peso molecular, baja toxicidad, pH fisiológico, sustantividad, agente antimicrobiano de amplio espectro y alto costo. 76 Mecanismo de acción La Clorhexidina a pH fisiológico, distribuye su carga positiva sobre los átomos de hidrogeno en ambos lados del puente hexametileno y así tiene la habilidad de asociarse a las superficies cargadas negativamente como la hidroxiapatita del esmalte, la película adquirida y las proteínas salivales. 77 33 Microbiología Básica En 1674 el biólogo holandés Antón Van Leeuwenhoek examinó con microscopio una gota de agua y descubrió un mundo formado por millones de microorganismos, cien años después el biólogo danés Otto Müller amplió los estudios de Van Leeuwenhoek y, siguiendo los métodos de clasificación de Carlos Linneo, organizó a las bacterias en géneros y especies. Se trataba del inicio de la clasificación taxonómica de los microorganismos. 78 En 1840, el anatomopatólogo alemán Friedrich Henle propuso unos criterios para demostrar que lo microorganismos eran responsables de la aparición de enfermedades en el ser humano la denominada teoría de los gérmenes de las enfermedades79. En los años setenta y ochenta del mismo siglo, Robert Koch y Louis Pasteur confirmaron esta teoría mediante una serie de elegantes experimentos en los que demostraron que los microorganismos eran responsables de la aparición del carbunco, la rabia, la peste, el cólera y la tuberculosis. Más adelante, otros científicos confirmaron que una amplia variedad de microorganismos producían otras enfermedades. 79 La era de la quimioterapia comenzó en 1910, cuando el químico alemán Paul Ehrlich descubrió el primer compuesto antibacteriano, un compuesto que resultó efectivo contra la espiroqueta causante de la sífilis.79 34 Los años posteriores asistieron al descubrimiento de la penicilina por Alexander Fleming en 1928, la sulfanilamida en 1935 por Gerhard Domagk y la estreptomicina por SelmanWaksman en 1943.79 En 1946, el microbiólogo estadounidense John Enders fue el primero en cultivar virus celulares, proporcionando así un medio para la producción a gran escala para el desarrollo de vacunas. Los primeros pasos de estos innovadores investigadores han sido seguidos por miles de científicos que, trabajando con los fundamentos establecidos por sus predecesores, han añadido más y más datos para ampliar los conocimientos sobre los microorganismos y el papel que ejercen en la aparición de las enfermedades.79 El descubierto de Van Leeuwenhoek arrojó un micro cosmo formado por protozoos y bacterias de todas las formas ytamaños, en la actualidad se sabe que existen miles de diferentes tipos de microorganismos que viven en el interior, la superficie o alrededor del ser humano y asimismo, pueden contarse por centenares los que son capaces de provocar en enfermedades graves.80 35 Microbiología endodóntica En la cavidad bucal se encuentran una variedad de microorganismos, estos desempeñan un papel muy importante en el ecosistema humano; esta comunidad ecológica ha sido denominada biofilm, que corresponde a un conjunto de biomasa microbiana. 81 Los microorganismos son inofensivos la mayor parte de veces, pero en algunos casos, especialmente cuando consiguen la nutrición apropiada o la defensa del huésped es baja, pueden aumentar de número hasta que son capaces de causar un daño considerable al huésped. 82 Según Canalda, de las 600 especies microbianas relacionadas con la cavidad oral, en cada individuo, solo se identifican de 50 a 150. En la cavidad bucal hay diversos elementos anatómicos susceptibles de ser colonizados superficialmente por los microorganismos. Las diferentes características de los elementos constituyentes de la cavidad bucodental favorecen la aparición de 55 microsistemas bacterianos específicos. Los tejidos duros del diente actúan como barreras mecánicas defensivas impidiendo la invasión microbiana de la pulpa, su destrucción parcial o completa, determina la progresión de los microorganismos hacia el interior de la cavidad pulpar y causa una inflamación en la pulpa que puede evolucionar hacia su necrosis y afectar a los tejidos periapicales. 83 36 Los microorganismos desempeñan un papel importante como iniciadores y contribuyentes significativos de la enfermedad inflamatoria de la pulpa dental y tejidos periapicales. Su disminución o eliminación durante los procedimientos terapéuticos es decisiva para la reparación posterior al tratamiento y la evolución satisfactoria del caso. 83 La contaminación endodontica es caracterizada por una flora mixta, la presencia de microorganismos anaerobios facultativos en un 57 % gram positivos, 80% de alta resistencia como E. faecalis el cual fue el de mayor frecuencia así mismo este presenta una relación directa con la persistencia de lesiones y resistencia a los agentes desinfectantes de uso endodóntico. 84 . 37 Microorganismos después de retirar el material de obturación. En un estudio mostro lo siguiente: Enteroccus faecalis encontrados en nueve casos. Actinomyces israeli encontrados en tres casos. Bacteroides gracilis encontrados en tres casos. Streptococcus anginosus encontrados en dos casos. Peptostreptococcus micros encontrados en dos casos. Candida albicans encontrados en dos casos. Streptococcus Intermedius encontrados en un caso. Streptococcus Contellatus encontrados en un caso. Streptococcus Mitis encontrados en un caso. Streptococcus Parasanguis encontrados en un caso. Pseudoramibacter alactolyticus encontrados en un caso. Eubacterium timidum encontrados en un caso. Lactobacilus catenaforme encontrados en un caso. Propionibacterium propionicum encontrados en un caso. 85 38 Medios de cultivo El sistema más importante para la identificación de microorganismo es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el medio de cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el cultivo. Se han desarrollado más de 10,000 medios de cultivo diferentes.86 Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxigeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimientos necesarios y debe estar exento de todo elemento contaminante. La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes.87 39 El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licua completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan su licuación Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él. .83 88 Esterilidad del medio Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especímenes inoculados en dichos medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave.89 40 Especies bacterianas Candida albicans Es considerado como uno de los principales hongos patógenos con manifestaciones clínicas en boca, fue descubierto en el año de 1839 por Laangerbeck quien observó la formación de placas en las mucosas de la boca y otros órganos. 90 En 1842 Gruby confirmo esta observación denominándola Oidiumalbicans, y para el año1923 Burkhoutlaa la denomino Candida, terminología utilizada actualmente. Candida Albicas suele presentarse como una célula oval que mide de 2 a 4 micras, se considera dentro del grupo de las levaduras ya que se reproducen asexualmente por gemación, tiene una forma alargada semejante a hifas, desarrolla seudo filamentos y produce clamidosporas. Asimismo tiene la capacidad de producir tubos geminales o germinativos cuando las colonias son inoculadas en 0.5 ml de suero a temperatura de 37 °C observándose los resultados después de 2 a 3 horas. Candida albicas crece “in vitro” en condiciones de anaerobiosis en medios de cultivo con agar, peptona, dextrosa, maltosa, sacarosa y harina de maíz, a pH con rango de 2.5 a 7.5 y temperatura que oscila en tre los 20 °C y 38 °C. En agar Sabouraud las colonias muy pequeñas aparecen en un lapso de 24 a 36 horas, miden de 1.5 a 2 mm de diámetro, con de color blanco y aspecto cremoso, pero adquieren un color requemado al continuar envejeciendo, son lisas, suaves, 41 húmedas, de consistencia blanda y rápidamente proyectan filamentos hasta la profundidad del agar.91 Staphylococcus Los Staphylococcus son células esféricas, cuyo tamaño oscila de 0,5 a 1 m de diámetro, que generalmente se agrupan en racimos, son Gram (+) y aerobios facultativos no son móviles, resistiendo altas temperaturas. Crecen rápidamente en varios medios de cultivo, fermentan carbohidratos y producen pigmentos que varían del blanco al amarillo oscuro. Son miembros de la flora normal de la piel humana, tracto gastrointestinal, respiratorio y membranas mucosas. El género Staphylococcus se divide tradicionalmente en dos grupos, en función de la capacidad de las bacterias para producir coagulasa, la que es una enzima que causa la coagulación de la sangre: los estafilococos coagulasa positivos, que incluye a las especies más conocidas como lo es el Staphylococcus aureus; y los estafilococos coagulasa negativos (CoNS), que son comensales comunes de la piel.92 Staphylococcus aureus El nombre aureus se refiere al hecho de que las colonias formadas en medios ricos sólidos, tienen un color dorado, causado por la presencia de carotenoides, en oposición a las colonias pálidas, translúcidas y blancas quizás el representante más patógeno. Forma colonias de color que van desde el gris al amarillooscuro, hemoliza sangre, coagula plasma y produce una variedad de enzimas extracelulares y toxinas. 42 Patógeno para los humanos, causa infecciones con presencia de abscesos y origina neumonía, meningitis, endocarditis y septicemia. 93 Enterococcus faecalis El E. faecalis es un coco gram positivo anaerobio facultativo que ocurren solo en pares o en cadenas cortas; que se encuentra en el 30% a 90% de los dientes tratados endodónticamente. La probabilidad de que se encuentre E. faecalis en un diente endodonciado es nueve veces mayor que en un diente con infecciones primarias. E. faecalis tiene la habilidad de sobrevivir duro ambientes que incluyen pH alcalino extremo, sal concentraciones; resiste sales biliares, detergentes, pesados metales, etanol y desecación. Puede sobrevivir a una temperatura de 60°C. La prevalencia de E. faecalis en la infección endodóntica primaria es del 40% y en infección endodóntica persistente del 24 % al 77%. 94,95 El Enterococcus faecalis es el microorganismo que con más frecuencia es aislado de los dientes con fracaso endodóntico (80%a 90%), lo que sugiere que es un patógeno cuya persistencia en el conducto radicular representa un problema terapéutico importante.96 E. faecalis está asociado con diferentes enfermedades periapicales incluyendo la infección primaria e infecciones persistentes. Dentro de la infección primaria está asociado más frecuentemente con lesiones periapicales crónicas asintomáticas que en periodontitis apical aguda o en absceso periapical agudo. Se encuentra en 43 el 40% de las infecciones primarias endodónticas y su frecuencia en lesiones periapicales persistentes es más alta. De hecho, se ha encontrado hasta nueve veces más E. faecalis en los tratamientos de conductos fracasados que en la infección primaria.97 Escherichia coli El tamaño promedio de los bacilos es de 0.5 µ de ancho por 3 µ de largo, cuando se utiliza la tinción de Gram se tiñen de rojo (gram negativas). Algunas especies son móviles (por flagelos perítricos), no esporuladas, fermenta la glucosa y la lactosa son catalasa positivos, oxidasa negativos y reduce nitratos a nitritos. El género Escherichia incluye siete especies (E. adecarboxylata, E. alberti, E. blattae, E. fergusonii, E. hermannii, E. vulnerisy E. coli).98, 99 Además, fermenta la glucosa y la lactosa con producción de gas. 100 Escherichia coli es la especie bacteriana más común de la microbiota intestinal; se presenta como un comensal del intestino humano pocas horas después del nacimiento. Es raro encontrar cepas comensales asociadas a enfermedad. Empero, existen varios patotipos de E. coli implicados en un amplio espectro de enfermedades agrupados en tres síndromes clínicos. 101 . 44 Planteamiento del problema La contaminación de los conos de gutapercha, constituye un problema, debido a que son materiales que no se los pueden esterilizar en autoclave o calor seco impidiendo así la eliminación total de los microorganismos presentes en su superficie provocando con esto un desequilibrio en la terapéutica endodontica. Algunos autores consideran que es necesario descontaminar la gutapercha antes de la obturación de los conductos debido a que pueden aumentar el potencial de contaminación. La mayoría de los profesionales de la salud utilizan, varias sustancias a diferentes concentraciones y en tiempos variables para lograr la desinfección, por lo que es importante conocer cuál es la solución y que concentración es la más adecuada. Por este motivo se planteó el siguiente problema de investigación: ¿Los conos de gutapercha nuevos que se comercializan en los alrededores están libres de contaminantes previo a su uso? ¿Cuál es la sustancia desinfectante más efectiva para descontaminar las puntas de gutapercha? 45 Hipótesis La literatura científica muestra que los conos de gutapercha nuevos y sellados que se comercializan, no se encuentran libres de contaminantes por lo que suponemos que las marcas que se utilizan cotidianamente en la práctica diaria se encuentran contaminadas. Estudios recientes muestran la gama de productos de desinfección para el uso odontológico, pero lo que no consideran que no tienen el mis o grado de inhibición de crecimiento bacteriano. 46 Objetivos Identificar si los conos de gutapercha nuevos de distintas marcas comerciales presentan contaminación bacteriana previa a su uso. Identificar la eficiencia del Hipoclorito de sodio a diferentes concentraciones y la Clorhexidina para la desinfección de las puntas de gutapercha. 47 Materiales y Métodos a) Tipo de estudio. Experimental, longitudinal, prolectivo, comparativo. b) Población de estudio. Puntas de gutapercha de calibres de la primera serie de las marcas, Dentsply, ABC Dental, Viarden, Meta biomed, e Hygienic c) Variables. Definición y Operacionalización Variable Definición Medición Operacionalización Gutapercha Material de obturación para la práctica odontológica. Cualitativa nominal Dentsply ABC Dental Viarden Meta biomed Hygienic Microorganismo Microorganismo capaz de producir daño a un órgano dentario. Cualitativa nominal C. albicans S. aureus E.faecali E.coli Desinfectante Sustancia mediante la cual se reduce o se eliminan las bacterias de un objeto. Cualitativa continua Hipoclorito al 0.5% Hipoclorito al 1% Hipoclorito al 3% Hipoclorito al 5% Clorhexidina 0.12% Viarzoni-t 2% Crecimiento bacteriano Incremento de los componentes de ese sistema Cualitativa nominal Ausencia Presencia Tiempo Magnitud física con la que medimos la duración o separación de acontecimientos Cuantitativa continua 1 min 3min 5min 48 d) Técnica Se realizó el análisis en conos de gutapercha provenientes de empaques de la primeria serie sellados por el fabricante de las marcas: Dentsply, ABC Dental, Viarden, Meta biomed, e Hygienic, disponibles en los depósitos de los alrededores de la FES Zaragoza, la muestra a utilizada fue de 10 conos de gutapercha de cada marca tomados al azar. Como medio de enriquecimiento se utilizó el Caldo tioglicolato, posterior a su preparación se pipeteo 1ml en 50 tubos eppendorf (Figura 1). Figura 1. Se observa cómo se llevó a cabo el caldo y el pipeteo 49 Se procedió a la preparación de los medios de cultivo Agar sal-manitol, Agar Bilis Esculina, EMB y Biggy de acuerdo a las indicaciones de fabricante (Figura 2). Figura 2. Se observa matraz con agar EMB listo para ser colocado en cajas Petri. Todos los medios se esterilizaron en autoclave a 121° C durante 15 min, posterior a este tiempo se distribuyeron en cajas de Petri estériles. Una vez estériles se limpió el espacio de trabajo y con mecheros prendidos se destapo cada una de las marcas de conos de gutapercha a utilizar, se tomaron 10 muestras al azar de cada marca -dos por cada calibre (Figura 3) y se fueron sumergiendo en los tubos eppendorf (Figura 4) (Figura 5). 50 Figura 3. Paquetes de puntas de gutapercha abiertos cerca del mechero. Figura 4. Colocación de punta en Caldo Tioglicolato 51 Se pusieron a incubar por 48 horas a 37°C (Figura 6), transcurrido este tiempo se procedió a la siembra en los medios selectivos. Figura 5. Al colocar la punta se sellaron perfectamente. Figura 6. Colocación en incubadora. 52 Se sembró por estría simple con la ayuda de un hisopo estéril para cada una de las muestras en Agar EMB, Agar Sal y Manitol y Agar Bilis Esculinase incubaron en anaerobiosis parcial por un periodo de 48 horas a 37° C; el Agar Biggy se incubo por 7 días a 37 °C y se leyeron resultados (Figura 7) (Figura8). Figura 7. Se observa crecimientopositivo en la siembra realizada. Figura 8. Reacción catalasa + 53 2a fase: descontaminación Siguiendo instrucciones del fabricante se preparó caldo, se pipeteó 1 ml de caldo Tioglicolato en 360 tubos eppendorf (Figura 9) y se esterilizaron a 121°C en autoclave posteriormente se dejaron enfriar. Figura 9. Se etiquetaron los 360 tubos a utilizar. Se utilizaron 360 puntas de gutapercha de las marcas anteriormente mencionadas y se contaminaron con Staphylococcus aureus, Candida albicas, Enterococcus faecalis y Escherichia coli. Se prepararon las suspensiones con las cuatro bacterias mencionadas según el tubo # 2 Mcfarland, con solución salina estéril, allí se colocaron 90 puntas de gutapercha en cada una de las cuatro soluciones bacterianas; se incubaron por 24 horas a 37°C. 54 Como soluciones desinfectantes se utilizó hipoclorito de sodio al 0.5%, 1%,2% (Viarzoni-t), 3% y 5%, la clorhexidina al 0.12 %. Se hicieron las diluciones correspondientes para obtener las concentraciones de hipoclorito mencionadas anteriormente utilizando al formula V · C = V’ · C’ una vez hechas se colocaron en recipientes estériles (Fifura10). Figura 10. Frascos contenedores de soluciones desinfectantes Posterior a la contaminación se sacaron del frasco tomándolos con pinzas de curación estériles y para poder retirarles el exceso de caldo fueron colocados en gasas estériles. (Figura 11). 55 Figura11. Se observa caldo tioglicolato con la 90 puntas de gutapercha contaminadas con E faecalis Para su descontaminación se utilizó la siguiente secuencia: Candida Hipoclorito 0.5% Hipoclorito 1% Hipoclorito (Viarzon 2% Hipoclorito 3% Hipoclorito 5% Clorhexidina 0.12% 1 min Se sumergieron 5 puntas contaminadas con Cándida en la concentración de hipoclorito al 0.5%, 1%, viarzon al 2%, 3%. 5%, clorhexidina al 0.12% por 1 min. 56 Siguiendo la secuencia, lo que da un total de 30 puntas. Se realizó la desinfección de las siguientes 30 puntas contaminadas con Candida, pero ahora con la variación de tiempo de 3 min. Candida Hipoclorito 0.5% Hipoclorito 1% Hipoclorito (Viarzon 2% Hipoclorito 3% Hipoclorito 5% Clorhexidina 0.12% 3 min Lo mismo se realizó para los 5 min. Obteniendo un total final de 90 puntas Candida Hipoclorito 0.5% Hipoclorito 1% Hipoclorito (Viarzon 2% Hipoclorito 3% Hipoclorito 5% Clorhexidina 0.12% 5 min 57 Después de trascurrido el minuto se tomaron con pinzas estériles y se colocaron en otra gasa nueva y estéril, para que el exceso de solución fuera absorbida. Cada punta fue sumergida en el tubo correspondiente con 1 ml de caldo tioglicolato, cerrado de manera inmediata, fueron cuatro cepas utilizadas en este estudio y se realizó todo el procedimiento descrito anteriormente con S. aureus, E. faecalis y E. coli dando así un total de 360 muestras desinfectadas. Se incubaron por 48 horas a una temperatura de 37°C, se sacaron y se pasaron por el vortex (Figura 12) 8Figura 13). Figura 12. Se muestra la agitación realizada en cada tubo. 58 Figura 13. Tubos después de ser agitados Una vez agitado el tubo y con la ayuda de un hisopo estéril se sembró por estría simple; se incubaron por un periodo de 24 hrs a 37° C y se leyeron resultados (Figura 14). Figura 14. Se observa crecimiento en agar Bilis Esculina. 59 e) Diseño estadístico Los datos obtenidos fueron procesados en el paquete estadístico SPSS v20.0 a partir del cual se obtuvo la estadística descriptiva de las variables de estudio; las pruebas de significancia estadística fueron para las variables cualitativas la Q Cochran y como prueba post- hoc la de Mac Neman. 60 Resultados En el cuadro 1 se muestra la presencia de contaminación bacteriana, presenta en un 20% para la gutapercha de ABC Dental mientras que, para Viardent e Hygenic el porcentaje de contaminación fue de en un 10 %; en el caso de Metabiomed y Dentsply el crecimiento fue negativo. Cuadro 1. Frecuencia de contaminación en empaques de gutapercha. Marca Crecimiento Positiva Negativa Metabiomed Viardent Hygenic ABC Dental Dentsply 0 (0) 1 (10) 1 (10) 2 (20) 0 (10) 10 (100) 9 (90) 9 (90) 8 (80) 10 (100) 61 Se observó que a pesar de que se tomaron de empaques sellados y aunque se tiene el supuesto de que los conos de gutapercha son estériles existe un crecimiento bacteriano del 8 % en el total de las muestras. Concluyendo que los conos de gutapercha que se venden comercialmente no se encuentran estériles dentro de sus empaques sellados (Figura 15). Metabiomed Viardent Hygenic ABC Dental Dentsply 0 1 1 2 0 10 9 9 8 10 Presencia Ausencia Figura15. Presencia bacteriana en empaques sellados 62 Para la segunda fase de la investigación de la eficacia de los desinfectantes de puntas de gutapercha, muestran la eficiencia del Hipoclorito de sodio como desinfectante de elección según lo recomienda la literatura. Cuadro 2 .Frecuencia de presencia bacteriana por tiempos de exposición a las diferentes soluciones desinfectantes por tiempos Desinfectante Crecimiento 1 min 3 min 5 min + - + - + - Hipoclorito al 0.5% Hipoclorito al 1% Hipoclorito al 2% (Viarzoni-T) Hipoclorito al 3% Hipoclorito a 5 % Clorhexidina al 0.12% 20 15 20 5 0 20 0 5 0§ 15 20 0‡ 20 0 2 0 0 10 0 20 18 20 20 10 5 0 0 0 0 5 15* 20† 20 20 20 15 Prueba Q de Cochran con Mc Neman con post- hoc;* 1 min vs 5 min y 3 vs 5 min p˂ 0.0001; † 1 min vs 5 min y 1 min vs 3 min p˂ 0.0001;‡ 1 min vs 5 min p˂ 0.0001, 1 in vs 3 in p˂ 0.002; § 1 min vs 5 min y 1 min vs 3 min p˂ 0.0001 63 Al observar las diferencias entre las 6 concentraciones utilizadas y los tiempos de desinfección probados se obtiene que el Hipoclorito al 0.5 % no presenta efectividad en ninguno de los tiempos probados. Para el Hipoclorito al 1% se muestra que al minuto 1 no se alcanzó la desinfección de las bacterias presentes, logrando su efectividad hasta el minuto 3 y 5. Por su parte la concentración del 3% de Hipoclorito no tiene efectividad al minuto 1 observando un 25% de crecimiento, logrando así la desinfección al 100 % hasta el min 3 y 5 al igual que la concentración de 1%. Mientras que el Hipoclorito al 5% presenta efectividad del 100% de nulo crecimiento desde el minuto 1 y así mismo en el minuto 3 y 5. En el caso de la Clorhexidina al 0.12 %, la efectividad del producto al minuto 1 es nula, mientras que al minuto 3 presenta un 50% de efectividad, al minuto 5 no alcanza la desinfección esperada del 100%. En cuanto al Hipoclorito de sodio -Viarzoni-T®- que se comercializa al 2% los resultados obtenidos no mostraron desinfección al min 1; al minuto 3 revelo la presencia de bacterias en el 10 % (contaminación que no se observó si comparamos este resultado con el obtenido en la concentración de Hipoclorito al 1% en el mismo tiempo) logrando así su desinfección total al minuto 5. 64 Para esta parte de los resultados es importante saber la resistencia de las bacterias utilizadas ante nuestros desinfectantes, teniendo como resultados que al minuto 5 se logra una completa desinfección de los conos de gutapercha con las bacterias responsables del fracaso endodóntico. Cuadro 3 .Frecuencia de la eliminación de contaminación de los conos de gutapercha por la bacteria a utilizar. BacteriaTiempo 1 min 3 min 5 min + - + - + - C. albicans S. aureus E. faecalis E.coli 15 20 20 25 15 10 10 5 5 12 10 5 25 18 20 25 0 5 5 0 30 25 25 20 Prueba Q de Cochran con Mc Neman con post- hoc;* concentración de hipoclorito al 1%, 2%, 3%y 5% a 5 min de exposición p˂ 0.0001 65 Discusión El propósito de este estudio fue realizar un análisis en la contaminación de los conos de gutapercha, ya que dos de los principales objetivos de la terapia endodontica son la eliminación de microorganismos del sistema de conductos radiculares y la prevención de la reinfección posterior; de este hecho surge la necesidad de tomar las medidas necesarias para la eliminación de bacterias. 4, 5,6 ,102 A pesar de que los conos de gutapercha son producidos bajo condiciones asépticas, la contaminación puede ocurrir antes o después de la apertura del envase como resultado de la exposición al ambiente, su manipulación o bien a su almacenamiento. 47,49, 50,99 Nuestros resultados muestran que aun cuando los conos de gutapercha son producidos bajo condiciones asépticas y que presentan propiedades potencialmente antimicrobianas, especialmente debido a su composición de óxido de zinc, pueden contaminarse durante su manipulación, por aerosoles y contacto físico, lo que coincide con lo expuesto por Motta y col. 54 66 Montgomery observó que el 8% de los conos de gutapercha de empaques sellados que se comercializan se encontraban contaminados; en nuestro estudio se observó el crecimiento de bacterias en el mismo porcentaje en los conos de gutapercha de empaques sellados que se comercializan en los alrededores de la FES Zaragoza; lo que se concuerda con su estudio. 67 De la misma forma, Gomes et al. En el 2005 evaluaron la contaminación de conos de gutapercha en sus empaques y mostraron que el 94.5% de los conos no mostraba contaminación, mientras que el 5.5% mostró crecimiento.98 Para Ozalp y colaboradores, analizaron un total de 80 conos de gutapercha y los expusieron al ambiente de la clínica por treinta minutos al día, durante un mes; encontró que el 100% de los conos estaban contaminados con Bacillussubtilis (ATCC 6633). 29 Da Motta et al. Señalan que la sola exposición de los conos al medio ambiente no es de mayor importancia.54 Sin embargo para el profesional de la salud es importante que se respetarse el principio básico del control de la infección, pues diversos estudios han demostrado la contaminación microbiana durante la frecuente manipulación de los paquetes de gutapercha. 37, 52, 58,88 67 Se considera que, cuando el cono de gutapercha es cubierto con el sellante, algunas zonas pueden permanecer descubiertas durante la inserción en el canal, o incluso durante el recubrimiento de los conos con el sellante. Justificar la presencia de espacios en los sellantes del canal radicular sin aplicar un sellador ha sido señalado frecuentemente por la literatura, siendo un problema grave, 04 debido a la imposibilidad de esterilizar los conos de gutapercha debido a sus características termoplásticas.100 Según Teixeira, De Vasconcelos, Cecchin y Jaju, destacan que es una sal hipertónica y alcalina, tiene un pH mayor a 11 62, 63, 64, 65 y su amplia utilización en endodoncia se debe a su capacidad para disolver tejidos y a su acción antibacteriana; posee un amplio efecto contra esporas, hongos y virus. Sus concentraciones clínicas varían entre el 0.5% al 6%. 66 Denton indica que la clorhexidina tiene una actividad antibacteriana de amplio espectro que abarca bacterias Gram positivas y Gram negativas, levaduras, dermatofitos y algunos virus lipofilicos.70 Valois y cols. , compararon los efectos de la clorhexidina 2% y del hipoclorito de sodio 5.25% sobre la estructura del cono gutapercha, sumergieron en clorhexidina al 2% no encontraron deterioro de las propiedades físicas concluyendo que la clorhexidina al 2% no produjo cambios a la estructura de los conos hasta los 30 minutos de exposición lo que no ocurre con el hipoclorito al 5,25% el cual causó cambios elásticos después de 1 min de exposición. 105 68 . Cardoso y Gomes confirman los resultados demostrando que la gutapercha sufre de perdida de color; el cual cambia a un color rosa claro y su consistencia se vuelve más blanda.52, 103 Valois afirma que el hipoclorito de sodio al 0.5% no altera la estructura de los conos de gutapercha, pero nuestros resultados demuestran que nos es buen desinfectante a los 5 min en contacto con los conos de gutapercha.105 Vahdaty et al realizaron estudios con clorhexidina al 2% e hipoclorito de sodio al 2%, concluyeron que estas soluciones son igualmente efectivas como agentes antibacterianos a concentraciones similares en la reducción del número de bacterias de túbulos infectados. 106 Nabeshima, y cols. , compararon la eficacia de diferentes métodos químicos para desinfectar las puntas de gutapercha. Los conos estaban contaminados con saliva y Enterococcus faecalis. Se utilizó el hipoclorito de sodio 1% y la clorhexidina 2% durante 1 y 10 min. Los conos de gutapercha inmersos en de clorhexidina al 2% por 1 min mostró ser el método más eficaz para la desinfección lo que, mientras que para el hipoclorito de sodio al 1% fueron necesarios 10 min, es esto no coincidimos debido a que en nuestro estudio el hipoclorito al 1% fue efectivo a partir de 3 min.107 69 La literatura plantea que el hipoclorito al 5.25% o bien al 2.25% y la clorhexidina al 2% ayudan en la desinfección de los conos de gutapercha; pero en el caso del hipoclorito se reporta que a la concentración de 5.25 de 5 a 10 min de exposición altera la composición de los conos y deja cristales, por lo que quisimos buscar una concentración más baja y un tiempo menor con el fin de evitar que la gutapercha sufra modificaciones. 108 Encontramos que, el hipoclorito al 1% presenta efectividad en la desinfección de los conos de gutapercha desde el minuto 3; con esto observamos que esta concentración es efectiva y se tendrá la seguridad que no alterara las condiciones de los conos. Respecto a la clorhexidina se puede decir que en la presentación de 2% es efectiva según la los artículos revisados pero al 0.12% no fue eficaz a los 5 min, por lo que se recomienda su uso por más tiempo, ya que no fue igual de eficaz para cada una de las 4 bacterias utilizadas. 70 Conclusiones En este estudio se encontró un 8% de conos de gutapercha contaminados en empaques sellados, lo que nos alerta de la importancia de la cadena aséptica por parte de los diferentes profesionales de la salud, especialmente de los odontólogos y especialistas en endodoncia; estos resultados demuestran la importancia de aplicar un estricto protocolo de desinfección antes de usar los conos de gutapercha, debido a lo frecuente que son las contaminaciones. Se recomienda dejar de utilizar el Hipoclorito de sodio a concentraciones mayores al 5% y por más de 5 min para evitar que los conos de gutapercha sufran alteraciones en cuanto a su estructura y composición, ya que en este estudio se comprobó que en una concentración de 1% por 3 min es efectiva. 71 Anexos Instrumentos de recolección de datos Nombre de la marca de los conos de gutapercha Caldo tioglicolato AGAR EMB AGAR SAL MANITOL AGAR BILIS- ESCULINA AGAR BIGGY No de muestra Contaminación Catalasa Manitol E.coli + - + - S. aureus E. faecalis C. albicans 1 2 3 4 5 6 7 8 910 CONTROL 72 Bacteria N° de muestra Tiempo 1min ( crecimiento ) Hipoclorito 0.5% Hipoclorito 1% Hipoclorito 3% Hipoclorito 5% Clorhexidina 0.12% Viarzoni-t 2% 1 2 3 4 5 Bacteria N° de muestra Tiempo 3min ( crecimiento ) Hipoclorito 0.5% Hipoclorito 1% Hipoclorito 3% Hipoclorito 5% Clorhexidina 0.12% Viarzoni-t 2% 1 2 3 4 5 Bacteria N° de muestra Tiempo 5min ( crecimiento ) Hipoclorito 0.5% Hipoclorito 1% Hipoclorito 3% Hipoclorito 5% Clorhexidina 0.12% Viarzoni-t 2% 1 2 3 4 5 73 Referencias 1. Barzuna M, Ulate R. Comparación del Selle Apical de dos técnicas de obturación en endodoncia: Lateral modificada vs. Ultrasonido. Revista IDental [Internet]. 2008 [Citado 12 Feb 2018]; 1 (1): 11-23. Dispinible en: http://www.ulacit.ac.cr/files/documentosULACIT/IDental/volumen%201/iD10 2.pdf 2. Roig M, Morelló S. Manual de Endodoncia [Internet]. 1ª Edicion. Barcelona,España. Editorial Rode 2006; 5-20. 3. Barrancos M. Operatoria Dental integración Clínica. 4ta edición. Buenos Aires. Editorial Médica Panamericana; 2011. 4. Ercan E, Zekinci OT, Atakul F, Gu K. Antibacterial Activity of 2% Chlorhexidine Gluconate and 5.25% Sodium Hypochlorite in Infected Root Canal: In Vivo Study. Journal of Endodontics [Internet]. 2004 [Citado 12 Feb 2018] 30(2):84-7.Dsponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ 14977302 5. Balandrano PF. Soluciones para irrigación en endodoncia: hipoclorito de sodio y grluconato de clorhexidina. Revista Científica Odontologica [Internet]. 2007 [Citado 12 Feb 2018]. (3): pag. 11-14. Disponible en: http://www.redalyc.org/html/3242/324227906004/ 6. Silva E, Rocha A, Ferreir C a, et al. Assessment of the tip surface of gutta- percha cones after different cutting methods. Acta Odontologica Latino Americana [Internet]. 2011 [Citado 12 Feb 2018]; 24 (3) : 236-9 Disponible en http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1852- 48342011000300003&lng=es https://www.researchgate.net/journal/0099-2399_Journal_of_Endodontics https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1852-48342011000300003&lng=es http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1852-48342011000300003&lng=es 74 7. Noiri Y, Ehara A, Kawahara T, Takemura N, Ebisu S. Participation of bacterial biofilms in refractory and chronic periapical periodontitis. J Endod. [Internet] 2002 [Citado 13 de feb 2018]; 28(10):679–83. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0099239905604566 8. Harty F. Endodoncia en la práctica. 4ed. México DF: McGraw-Hill interamericana; 1999. 9. Martínez K, Figueredo L, Figueredo M. De su historia: surgimiento y desarrollo de la endodoncia. Revista 16 de Abril [Internet]. 2008 [Citado 13 feb 2018], 233.Disponible en: http://www.16deabril.sld.cu/rev/233/09.html 10. Endoreport.com, México; Endoreport: [Actualizado 5 Jun 2015; citado 13 feb 2018] Disponible en http://www.endoreport.com/?p=56 11. Bueno R. Manual de Endodoncia. Parte 2 Historia de la Endodoncia [Internet].1ª Edición. Barcelona, España. Rode. 2006; 5:23. 12. Inamoto, K, Kojima K, Nagamatsu K, Hamaguchi, A, et al. A survey of the incidence of single-visit endodontics. J Endod, [Internet.] 2002 [Citado 13 feb 2018]; 28(5): 371-4.Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0099239905604967 13. Oliet, S. Single-visit endodontics: A clinical study. J Endod [Internet].1983 [Citado 13 feb 2018]; 9(4): 147-52. Disponible en: https://www.jendodon.com/article/S0099-2399(83)80036-3/abstract 14. Pekruhn R. The incidence of failure following single-visit endodontic therapy. J Endod [Internet}. 1986 [Citado 13 feb 2018]; 12(2): 68-72. Disponible en: https://www.jendodon.com/article/S0099-2399(83)80036-3/abstract. http://www.endoreport.com/?p=56 https://www.jendodon.com/article/S0099-2399(83)80036-3/abstract 75 15. Árboles de España. Manual de identificación [internet]. 2003 [Consultado 13 feb 2018]. Disponible en: www.arbolesomamentales.com/eucornmiaceae.htm 16. Hofheinz, R. Immediate root filling. Dent Cosmos, 1892, 34: 182-6. 17. Lin LM, Lin J, Rosenberg PA. One-appointment endodontic therapy: biological considerations. J Am Dent Assoc[ Internet]. 2007 [citado 14 feb 2018]; 138(11):1456-62 18. Leonardo MR. Endodoncia. Tratamiento de conductos radiculares.Principios técnicos y biológicos. 3ra Edición. Argentina: editorial Médica Panamericana. 2002. 19. Stock C. Atlas en color y texto de endodoncia. 2da edición, Harcourtbrace; 1997. 20. Syngcuk, K. Color atlas of microsurgery in endodontics. 1 ed. 2002 Editorial Harcourt health Sciences Company. 2001. 21. Sidow S, West LA, Liewehr FR, Loushine RJ. Root canal morphology of human maxillary and mandibular third molars. J. Endod [Internet].2006 [Citado 14 feb 2018]; 26 (11):675-8. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0099239905608151 22. Gulabivala K, Aung TH, Alavi A, Ng YL. Root and canal morphology of Burmese mandibular molars. Int. Endod J [Internet]. 2005 [Citado 14 feb 2018]; 34:359-370. 23. Velvart P, Hecker H, Tillinger G. Detection of the apical lesion and the mandibular canal in conventional radiography and computed tomography. l http://www.arbolesomamentales.com/eucornmiaceae.htm https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Lin%20LM%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=17974642 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Lin%20J%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=17974642 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Rosenberg%20PA%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=17974642 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17974642 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=West%20LA%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11469300 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Liewehr%20FR%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11469300 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Loushine%20RJ%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11469300 https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0099239905608151 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Gulabivala%20K%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11482719 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Aung%20TH%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11482719 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Alavi%20A%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11482719 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Ng%20YL%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11482719 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Velvart%20P%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11740486 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Hecker%20H%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11740486 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Tillinger%20G%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11740486 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11740486 76 Radio Endod [Intenet]. 2004 [Citado 14 feb 2018]; 92:682-8. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1079210401324848 24. Sena NT, Gomes BP, Vianna ME, Berber VB, et al. In vitro antimicrobial activity of sodium hypochlorite and chlorhexidine against selected single- species biofilms.International Endodontic Journal [Internet]. 2006 [Citado 14 feb 2018]; 39(11):878-85. Disponible en: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/j.1365-2591.2006.01161.x 25. Jiménez K, Montero, Cortes C., Rojas N., Zeledón R. Eficiencia de diferentes protocolos de desinfección de conos de gutapercha con NAOCL, ante las especies S. Aureus y E. Faecalis, Investigacion. Rev. Cientifica. Odontologica [Internet]. 2014 [Citado 14 feb 2018]; 10 (1): 37-1. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/284172887_Eficiencia_de_diferent es_protocolos_de_desinfeccion_de_conos_de_gutapercha_con_NaOCl_ant e_las_especies_S_Aureus_y_E_Faecalis
Compartir