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Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Química Percepción gustativa salina provocada por NaCl y otras sales en bebidas no alcohólicas y queso panela México, D.F. 2010 T E S I S QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE Q U Í M I C A D E A L I M E N T O S P R E S E N T A : IRERI HARUMI ESCOBEDO GARCÍA UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. 2 México, D.F. 2010 Jurado asignado: Presidente: Prof. FEDERICO GALDEANO BIENZOBAS Vocal: Prof. DULCE MARÍA GÓMEZ ANDRADE Secretario: Prof. PATRICIA SEVERIANO PÉREZ 1er Suplente: Prof. CARLOS IVÁN MÉNDEZ GALLARDO 2o Suplente: Prof. MARIA DE LOURDES GÓMEZ RIOS Sitio donde se desarrolló el tema: Laboratorio 4-C, Edifico A. Departamento de Alimentos y Biotecnología. Facultad de Química, UNAM Este trabajo de investigación forma parte de los proyectos PAPIME (Programa de Apoyo a Proyectos para la Innovación y Mejoramiento de la Enseñanza): Clave: PE 202906, DGAPA, “Determinación selectiva de iones en alimentos aplicada a la enseñanza y a la evaluación sensorial” Clave: PE201210 “Mejora de la enseñanza del análisis estadístico de datos provenientes de pruebas sensoriales y análisis fisicoquímico e instrumental de alimentos utilizando el software FIZZ” Asesora: Dra. Patricia Severiano Pérez _________________________________ Sustentante: Ireri Harumi Escobedo García _________________________________ 3 AGRADECIMIENTOS Una meta más se cumple, se hace un sueño realidad y con ello más feliz mi vida. Gracias a Dios por cuidar mis pasos y guiarme. Le doy gracias a mis padres y a mi hermano por haber estado conmigo en este largo camino, por apoyarme en todo momento incondicionalmente sin cuestionar mis decisiones y aguantar mis lapsos de quimiquita loca. Me encanta compartir mis logros con ustedes, mis logros son suyos. Estoy orgullosa de formar parte de esta bella familia. Gracias a P. Israel Santamaría por haber sido una pieza clave en mi desempeño académico y en mi vida escolar, por estar siempre apoyándome y acompañándome en momentos difíciles que solo alguien de la misma profesión entendería y más aún porque a pesar de las diferencias nunca dejo de creer en mí. Cada momento compartido se quedará grabado en mi mente y en mi corazón. Eres importante en mi vida. Amiga, como tú no hay ninguna, las aventuras que vivimos juntas estos cinco años de la carrera no tienen comparación. Cuando necesité un hombro para llorar, reír o simplemente porque sí, ahí estabas tú. Gracias Angie. A Juan Gómez, porque esa primera clase de química en secundaria, junto con su entusiasmo por la enseñanza, marcaron mi persona y fueron fundamentales para que decidiera que la química complementaría mi vida y mi alma. A mis padrinos, a los Escobedo, a los García y amigos de la familia les agradezco infinitamente que siempre estuvieron al pendiente, no tan solo de mí sino de mi familia. Sus bendiciones, buenos deseos y buenas vibras fueron un gran faro cuando parecía que el camino se cerraba. Gracias a la Dra. Patricia Severiano P. por ser una gran mentora y mostrarme el camino al fascinante mundo del análisis sensorial; sus enseñanzas y experiencias enriquecieron mi persona y me hicieron crecer. Eres un magnífico ejemplo. A la MB Isadora Martínez Arellano porque no solo encontré en ti a una excelente compañera de laboratorio sino a una amiga, gracias por todo. A los chicos del jurado, al M. en C. Armando Conca Torres y a Marcela Cerón Silva, gracias por su participación en mi tesis, sin su entusiasmo y dedicación no hubiera sido posible. A la Dra. Patricia García Camacho y a la M. en C. Norma Ruth López Santiago por su importante colaboración en el análisis instrumental de este proyecto. A los miembros del jurado por enriquecer este trabajo y complementarlo para hacerlo mejor. Finalmente, le doy gracias a la máxima casa de estudios, UNAM, y a mi preciosa Facultad de Química que me abrieron sus brazos y me acogieron como una hija todos estos años, porque en cada una de sus aulas, pasillos y jardines me llené de conocimientos y de ese espíritu UNAMita que me acompañará toda la vida. Orgullosamente Puma hoy y siempre. Con todo mi cariño, Ireri H. Escobedo García. 4 Pour toi, Merci bien UNAM mais pas seulement par la vie universitaire. Je veux te remercier mais c’est dur à l’exprimer avec des mots. La raison, le grand cadeau, de t’avoir connue. Tout a commencé au deuxième semestre a la faculté de chimie, tu étais là, cette figure-là forte et magnétique ; et sans me rendre compte, tu es entrée dans moi. Au début tu étais un rêve intouchable, un prétexte encore pour entrer aux cours, mais la vie m’a étonnée et quand on a parlé, je n’ai pas pu m’éloigner de toi. Pendant ma vie universitaire tu as été une grande inspiration et un moteur dans mon cœur, tes conseils, tes enseignements, tes expériences, tes mots d’encouragement, tendres et plus m’ont aidé à me maintenir debout et réveillée. Quand je sentais que je tombais, tu étais là, quand je voulais jeter tout, tu étais là, quand je sentais que le monde finissait, tu étais là, toi, toi, toi, toujours toi, sans questions, sans plaintes, toujours prête à m’aider, je savais qu’avec un de tes sourires, tout serait bien. A côté de toi, j’ai appris que je suis forte que je peux conquérir ce que je veux et que je ne dois jamais me rendre. Avec toi, j’ai connu la joie et la passion, tu m’as appris ce que c’est le bonheur, ce que c’est aimer vraiment. Je sais que tout n’est pas parfait que qu’il y a des barrières au chemin, néanmoins j’ai trouvé mon âme sœur, ma complice et ma meilleure amie. Et même si je ne connais pas l’avenir, je remercie mon Bon Dieu de t’avoir mis sur mon chemin. Ma vie n’avait pas été la même, si je ne t’avais pas connue, moi, je ne serais pas qui je suis. Par tout cela et plus, je te dédicace ma thèse, merci du fond de mon cœur. π 5 En este día perfecto en que todo madura y no sólo la uva toma un color oscuro, acaba de posarse sobre mi vida un rayo de sol: he mirado hacia atrás, he mirado hacia delante, y nunca había visto de una sola vez tantas y tan buenas cosas. ¿Cómo no había de estar agradecido a mi vida entera? Y así me cuento mi vida a mí mismo. Ecce homo, Cómo se llega a ser lo que se es F. Nietzsche 6 ÍNDICE Página 1. Resumen------------------------------------------------------------------------ 12 2. Introducción ------------------------------------------------------------------ 13 3. Objetivos ----------------------------------------------------------------------- 15 4. Antecedentes ----------------------------------------------------------------- 16 4.1 Gusto 16 4.2 Olfato 16 4.3 Estímulos químicos y mecanismos de percepción del gusto salado 17 4.4 La sal y la hipertensión 18 4.5 Estudios previos 18 4.6 Análisis sensorial 21 4.6.1 Pruebas sensoriales 224.6.1.1 Pruebas discriminativas 23 4.6.1.2 Pruebas cuantitativas 24 4.6.1.3 Prueba de umbral 25 4.6.2 Análisis descriptivo 25 4.6.2.1 Perfil de sabor 27 4.6.2.2 Perfil de textura 27 4.6.2.3 Análisis descriptivo cuantitativo (QDA) 29 4.7 Pruebas instrumentales de textura y color 31 4.7.1 Perfil de análisis de textura (TPA) 31 4.7.2 Color 34 4.8 Alimentos en estudio 38 4.8.1 Bebidas no alcohólicas 38 4.8.2 Queso Panela 39 5. Hipótesis ----------------------------------------------------------------------- 41 6. Metodología ------------------------------------------------------------------ 42 6.1 Diagrama 42 6.2 Descripción de la metodología 44 6.2.1 Selección de jueces (panel) 44 6.2.2Entrenamiento en el uso de pruebas cuantitativas 50 6.2.3 Pruebas de umbral de las sales NaCl, KCl y MgCl2 50 6.2.4 Evaluación de sales en muestras acuosas mediante pruebas cuantitativas 51 6.2.5 Entrenamiento en Análisis Descriptivo Cuantitativo QDA 51 6.2.6 Evaluación instrumental de queso Panela 56 6.2.7 Análisis estadístico 59 7. Resultados y discusión----------------------------------------------------- 61 7.1 Selección de jueces 61 7.1.1 Cuestionario de hábitos 61 7.1.2 Pruebas de umbral gustos básicos 62 7.1.3 Pruebas triangulares 67 7.1.4 Pruebas olfatorias 70 7.2 Entrenamiento pruebas cuantitativas 72 7.3 Pruebas de umbral de las sales NaCl, KCl y MgCl2 72 7.4 Evaluación sensorial de sales en muestras acuosas mediante pruebas cuantitativas 74 7 Página 7.4.1 Pruebas de ordenación 74 7.4.2 Pruebas de intervalo con sales puras 76 7.4.2.1 NaCl 77 7.4.2.2 KCl 77 7.4.2.3 MgCl2 78 7.4.3 Prueba de intervalo con mezclas de sales 79 7.4.4 Efecto de los ingredientes en la percepción de la nota Salada 82 7.4.5 Efecto del sabor en a percepción de la nota salada 84 7.4.6 Evaluación de la percepción salina en bebidas no alcohólicas de marca comercial 85 7.5 Correlación de la evaluación sensorial y la evaluación instrumental en bebidas no alcohólicas 86 7.6 Evaluación sensorial de sales en queso panela 87 7.6.1 Entrenamiento 87 7.6.1.1 Generación de descriptores 87 7.6.1.2 Anclaje de escalas 90 7.6.1.3 Evaluación de atributos y revisión de escala 90 7.6.1.4 Evaluación sensorial de queso Panela 93 7.6.1.4.1 Atributos de apariencia 93 7.6.1.4.2 Atributos de olor 96 7.6.1.4.3 Atributos de textura 98 7.6.1.4.4 Atributos de sabor 103 7.6.1.4.5 Perfil sensorial de la mezcla control 100% NaCl 107 7.6.1.4.6 Comparación de las seis formulaciones de queso Panela 108 7.7 Evaluación instrumental de queso Panela 109 7.7.1 Textura: Análisis de Perfil de Textura (TPA) 109 7.7.2 Color: Determinación de diferencias significativas 114 7.8 Correlación de la evaluación sensorial y la evaluación instrumental del queso Panela 118 7.9 Análisis por componentes principales (P.C.A) del queso Panela 121 8. Conclusiones------------------------------------------------------------------- 125 9. Bibliografía -------------------------------------------------------------------- 129 10. Anexo Cálculos y Resultados---------------------------------------------- 136 11. Anexo Cuestionarios-------------------------------------------------------- 153 11.1 Cuestionario de hábitos de consumo 153 11.2 Cuestionario de pruebas de umbral, gustos básicos 155 11.3 Cuestionario de pruebas triangulares 156 11.4 Pruebas de identificación y reconocimiento de olores 157 11.5 Pruebas discriminativas de olores 158 11.6 Pruebas de umbral de olores 159 11.7 Generación de descriptores 160 11.8 Evaluación de atributos 161 11.9 Cuestionario de pruebas de ordenación 163 11.10 Cuestionario de pruebas de intervalo 164 8 ÍNDICE DE TABLAS Página 4.6.1. A. Clasificación de pruebas analíticas. 23 4.6.1.1.A. Descripción de pruebas discriminativas. 23 4.6.1.2.A. Descripción de características de pruebas cuantitativas. 24 4.6.2.A. Características de los principales tipos de análisis descriptivos utilizados en la evaluación sensorial. 26 4.6.2.3.A. Algunos descriptores para chocolate y sus referencias. 31 4.7.1.A. Descripción de la clasificación de Scott-Blair (1985) para las técnicas instrumentales empleadas para medir la textura de los alimentos. 32 4.7.1.B. Parámetros de textura a partir de la curva de TPA 34 6.2.1.A. Muestras para pruebas triangulares. 46 6.2.1.B. Olores evaluados en la prueba de identificación. 48 6.2.1.C. Olores evaluados en la prueba discriminativa. 49 6.2.1.D. Concentraciones del estándar de olor a café utilizadas para la prueba de umbral. 49 6.2.5.A. Quesos panela comerciales empleados para que los jueces generen descriptores. 52 6.2.5.B. Estándares de referencia para los atributos. 53 6.2.6.A. Condiciones de evaluación de color. 59 7.1.1.A. Información de la “Encuesta General para la Selección de Jueces Entrenados”. 61 7.1.2.A. Gusto SALADO. Concentraciones de cloruro de sodio utilizadas para la prueba de gusto básico salado. El porcentaje de aciertos es respecto a las respuestas de los panelistas. 64 7.1.2.B. Valores de umbrales para los cuatro gustos básicos del grupo de panelistas y los reportados por Casillas, 1996; Utrera, 2007; Jardón, 2006 y Hernández, 2006. 65 7.1.2.C. Comparación de umbrales de los panelistas respecto a los el grupo. 66 7.1.3.A. Aleatorización de las muestras para las pruebas triangulares. 67 7.13.B. Comparación entre la X2 experimental y la X2 obtenida de tablas para 2 grados de libertad y una probabilidad de 0,05 (Salchicha de cerdo). 67 7.13.C. Comparación entre la X2 experimental y la X2 obtenida de tablas para 2 grados de libertad y una probabilidad de 0,05 (Refresco de cola). 68 7.13.D. Comparación entre la X2 experimental y la X2 obtenida de tablas para 2 grados de libertad y una probabilidad de 0,05 (Salchicha de pavo). 68 7.13.E. Comparación entre la X2 experimental y la X2 obtenida de tablaspara 2 grados de libertad y una probabilidad de 0,05 (Chicharrón de cerdo). 68 7.13.F. Comparación entre la X2 experimental y la X2 obtenida de tablas para 1 grado de libertad y una probabilidad de 0,05 (Bebidas energéticas). 69 7.13.G. Comparación entre la X2 experimental y la X2 obtenida de tablas para 1 grado de libertad y una probabilidad de 0,05 (Jugo de uva). 69 7.1.3.H. Porcentaje de aciertos obtenido por cada juez durante las seis pruebas discriminativas y porcentaje de aciertos total. 70 7.1.4.A. Porcentaje de aciertos de los jueces en las pruebas de olores. 71 7.1.4.B. Panelistas seleccionados para participar como jueces entrenados en el proyecto. 72 7.3.A. Concentraciones de cloruro de potasio (KCl) utilizadas para la prueba de umbral de KCl. El porcentaje de aciertos es respecto a las respuestas de los panelistas. 73 7.4.1.A Contenido de iones en diversas muestras hidratantes y dietéticas. 75 7.4.3.A. Porcentaje de cada sal (NaCl/KCl) empleada en las mezclas de sales. 79 7.5.a. Correlación entre variables de las Bebidas no alcohólicas. 86 7.6.1.1.a Descriptores de apariencia, textura en mano, textura en boca y sabor generados para queso panela. 87 7.6.1.1.b Principales descriptores para queso panela. 88 7.6.1.1.c. Definición y forma de evaluación, así como la escala de cada atributo en queso panela. 88 7.6.1.3.a. Resultados del queso panela Comercial 3 obtenidos por los jueces entrenados. 91 9 Página 7.6.1.4.a. Porcentaje de cada sal (NaCl/KCl) empleada en la elaboración de seis formulaciones de queso panela. 93 7.7.1.a Comparación de los atributos de textura obtenidos por TPA en diferentes formulaciones de queso panela a 35% de compresión y a una velocidad de ensayo de 1 mm/s. 109 7.7.2.a. Comparación de atributos del SCI (componente especular incluido) obtenidos con el espectrofotómetro Minolta CM-3600d. 115 7.7.2.b. Comparación de atributos del SCE (componente especular excluido) obtenidos con el espectrofotómetro Minolta CM-3600d. 117 7.8.a. Matriz de correlación entre variables de apariencia sensorial, textura sensorial y textura instrumental del queso Panela. 120 7.8.b. Matriz de correlación entre variables de color instrumental del queso Panela (continuación 1). 121 7.8.c. Matriz de correlación entre variables de sal del queso Panela (continuación 2). 121 7.9.a. Resultado del análisis de componentes principales para los seis quesos Panela elaborados con mezclas de sales. 122 7.9.b. Contribución de las variables a los componentes principales de queso Panela. 124 10 ÍNDICE DE FIGURAS Página 4.6.2.2.A. Percepción de la textura de un alimento cuando es consumido. 29 4.6.2.3.A. Escala de intensidad empleada para la evaluación sensorial de cada descriptor en el QDA. 30 4.6.2.3.B. Diagrama de coordenadas polares o de “araña” para muestras de queso Cotija auténtico. 30 4.7.1.A. Curva ejemplo para el cálculo de los parámetros de TPA. 33 4.7.2.A. Estructura molecular de los pigmentos de la leche 35 4.7.2.B. Longitudes de onda de los principales colores a las cuales es sensible el ojo humano. 36 4.7.2.C. Representación gráfica de las coordenadas L*a*b*. 36 4.7.2.D. Ángulos representativos de los parámetros de color*. 38 4.7.2.E. Esquema de las partes más importantes de un colorímetro (espectrofotómetro). 38 4.8.2.A. Queso Panela. 40 6.2.1.A. Pruebas de umbral, orden de presentación y evaluación de las muestras. 45 6.2.1.B. Pruebas de umbral, evaluación de las muestras. 45 6.2.1.C. Presentación de las triadas para la evaluación de refresco de cola y salchichas. 47 6.2.1.D. Presentación de las triadas para la evaluación de jugo de uva y chicharrones. 47 6.2.1.E. Presentación de las triadas para la evaluación de bebidas energéticas y salchichas. 47 6.2.5.A. Escala de intensidad empleada para la evaluación sensorial de cada atributo. 53 6.2.6.A. Texturómetro TA.XT2 (Stable Micro System). 56 6.2.6.B. Sonda cilíndrica P/50 SMS. 57 6.2.6.C. La línea punteada indica la zona del queso de donde se obtuvieron los cubos para el análisis instrumental de color. 57 6.2.6.D Espectrofotómetro Konica Minolta CM-3600d. 58 7.1.2.A. Umbral Gusto Dulce. Porcentaje de aciertos de los panelistas respecto a la concentración de sacarosa. 62 7.1.2.B. Umbral Gusto Amargo. Porcentaje de aciertos de los panelistas respecto a la concentración de cafeína. Por medio de la ecuación de la recta, al 50% de aciertos se calculó el umbral del gusto amargo. 63 7.1.2.C. Umbral Gusto Ácido. Porcentaje de aciertos de los panelistas respecto a la concentración de ácido cítrico. Por medio de la ecuación de la recta, al 50% de aciertos se calculó el umbral del gusto ácido. 64 7.1.2.D. Umbral Gusto Salado (repetido). Porcentaje de aciertos de los panelistas respecto a la concentración de cloruro de sodio. Por medio de la ecuación de la recta, al 50% de aciertos se calculó el umbral del gusto salado. 65 7.3.A. Umbral de KCl (repetido). Porcentaje de aciertos de los panelistas respecto a la concentración de cloruro de potasio. Por medio de la ecuación de la recta, al 50% de aciertos se calculó el umbral de KCl. 73 7.3.B. Umbral de MgCl2. Porcentaje de aciertos de los panelistas respecto a la concentración de cloruro de magnesio. Por medio de la ecuación de la recta, al 50% de aciertos se calculó el umbral de MgCl2. 74 7.4.1.A. Contenido se iones sodio, potasio y cloruros en las bebidas hidratantes empleadas en el proyecto. 76 7.4.1.B. Contenido se iones sodio, potasio y cloruros en las bebidas comerciales empleadas en el proyecto. 76 7.4.2.1.A. Prueba Intervalo NaCl: Relación entre la intensidad teórica de las muestras de NaCl y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 77 7.4.2.2.A. Prueba Intervalo KCl: Relación entre la intensidad teórica de las muestras de KCl y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 78 7.4.2.3.A. Prueba Intervalo MgCl2: Relación entre la intensidad teórica de las muestras de MgCl2 y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 79 11 Página 7.4.3.A. Mezcla comercial A (34,9%NaCl+65,1%KCl): Relación entre la intensidad teórica y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 80 7.4.3.B. Mezcla comercial B (46%NaCl+54%KCl): Relación entre la intensidad teórica y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 80 7.4.3.C. Mezcla C (62,5%NaCl+37,5%KCl): Relación entre la intensidad teórica y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 81 7.4.3.D. Mezcla D (25%NaCl+75%KCl): Relación entre la intensidad teórica y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 81 7.4.3.E. Mezcla E (50%NaCl+50%KCl): Relación entre la intensidad teórica y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 82 7.4.4.A. Efecto de cada ingrediente en la percepción salina de una solución de 62,5% NaCl + 37,5% KCl. 83 7.4.4.B. Efecto de todos los ingredientes en la percepción salina de una solución de 62,5% NaCl + 37,5% KCl. 83 7.4.5.A. Relación entre la intensidad teórica de las muestras preparadas con y sin sabor y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 84 7.4.6.A. Relación entre la intensidad teórica de las bebidas comerciales (parte 1) y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 85 7.4.6.B. Relación entre la intensidad teórica de las bebidas comerciales (parte 2 y 3) y la intensidad experimental percibida por los jueces entrenados. 85 7.6.1.3.A. Coeficientes de variación de atributos obtenidos del queso panela Comercial 3. 92 7.6.1.3.B. Coeficientes de variación de cada atributo menores a 35%, obtenidos de la evaluación de la muestra Comercial 3 de queso panela. 92 7.6.1.4.1.A. Atributo de homogéneo evaluadoen diversas formulaciones de queso panela. 94 7.6.1.4.1.B. Atributo de color evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 94 7.6.1.4.1.C. Atributo de limpieza al corte evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 95 7.6.1.4.1.D. Atributo de humedad evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 96 7.6.1.4.2.A. Atributo de leche evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 97 7.6.1.4.2.B Atributo de salado evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 98 7.6.1.4.2.C. Atributo de almidón evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 98 7.6.1.4.3.A. Atributo de dureza evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 99 7.6.1.4.3.B. Atributo de masticabilidad evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 100 7.6.1.4.3.C. Atributo sensación plástica evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 101 7.6.1.4.3.D. Atributo de jugosidad evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 102 7.6.1.4.3.E. Atributo de sensación grasa evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 102 7.6.1.4.3.F. Atributo de cohesividad evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 103 7.6.1.4.4.A. Atributo de salado evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 104 7.6.1.4.4.B. Atributo de lácteo evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 105 7.6.1.4.4.C. Atributo de amargo evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 106 7.6.1.4.4.D. Atributo de agrio evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 107 7.6.1.4.5.A. Perfil sensorial obtenido para el queso panela elaborado con 100% NaCl. 107 7.6.1.4.6.A. Perfiles sensoriales obtenidos para las seis formulaciones de queso panela elaborado con las diferentes mezclas de sales. 108 7.7.1.A. Atributo de dureza evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 110 7.7.1.B. Atributo de adhesividad evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 111 7.7.1.C. Atributo de cohesividad evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 112 7.7.1.D. Atributo de elasticidad evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 113 7.7.1.E. Atributo de masticabilidad evaluado en diversas formulaciones de queso panela. 114 7.7.2.A. Comparación de color (SCI) en diversas formulaciones de queso panela. 115 7.7.2.B. Distribución de color en los diferentes quesos panela. 116 7.7.2.C. Comparación de color (SCE) en diversas formulaciones de queso panela. 117 7.7.2.D. Distribución de color en los diferentes quesos panela. 118 7.9.A. Gráfico de Análisis de Componentes Principales (P.C.A.) para queso Panela. 123 12 1. RESUMEN El objetivo de este trabajo fue desarrollar una metodología sensorial de cuantificación de las sales NaCl, MgCl2, y KCl, que permita evaluar la sensación salina que proporcionan en bebidas no alcohólicas y queso panela. Adicionalmente, se realizó un estudio de correlación de la medida salina sensorial con la obtenida instrumentalmente por el departamento de Química Analítica de la Facultad de Química de la UNAM. Para la elaboración de las pruebas, se realizó un proceso de selección de jueces mediante la aplicación de cuestionarios de hábitos, pruebas de umbral y pruebas triangulares. Como resultado, se consolidó un jurado compuesto de 73% de mujeres y 27% de hombres, en un intervalo de 21 a 23 años de edad, con la condición de no presentar alergias a bebidas hidratantes, dietéticas, quesos y a las sales bajo estudio. Posteriormente se aplicaron pruebas de umbral de NaCl, MgCl2, y KCl para determinar la sensibilidad de percepción de los jueces. A partir de estos resultados y del contenido de iones de las bebidas comerciales se establecieron las escalas que se usaron en las pruebas de ordenación e intervalo, empleadas para determinar la capacidad de detección de los jueces al estímulo salino. Por medio de las pruebas anteriores se observó que el NaCl provee un gusto salado limpio a diferencia del sabor amargo asociado con el cloruro de potasio y más intensamente en el cloruro de magnesio. En las pruebas con mezclas de sales se estableció que las concentraciones que permitieron sustituir el NaCl en bebidas fueron de 46%NaCl +54%KCl y 50%NaCl +50%KCl (porcentaje m/v). Con lo anterior se obtuvo una intensidad salina muy parecida a la producida por NaCl puro sin alterar el sabor final de la bebida. Después de la realización de las pruebas experimentales con bebidas, fue posible sentar las bases para desarrollar una metodología sensorial de cuantificación de sales para NaCl y KCl, en bebidas comerciales hidratantes y dietéticas, que permitió evaluar la sensación salina que producen y comparar la intensidad sensorial de las sales con la medida instrumental, estableciendo que el sabor cítrico potencia la percepción del gusto salado, y los sabores frutales (como moras y fresa-kiwi) lo disminuyen. En lo referente al queso Panela, se realizaron pruebas sensoriales (análisis descriptivo) y los resultados obtenidos se relacionaron estadísticamente con las pruebas instrumentales realizadas (textura y color), concluyendo que con la mezcla de 46% NaCl + 54 % KCl (porcentaje m/m) la modificación de las características sensoriales del queso Panela fue mínima, logrando un producto con bajo contenido de sodio. Finalmente se logró establecer una metodología sensorial de cuantificación de sales en queso panela. 13 2. INTRODUCCIÓN La sal es un compuesto químico formado por cationes y aniones, por medio de una reacción química entre una base y un ácido. Un ejemplo es el cloruro de sodio (NaCl) o también llamada sal de mesa, la cual es el producto de la reacción entre ácido clorhídrico (HCl) e hidróxido de sodio (NaOH). Tradicionalmente el cloruro de sodio era utilizado como conservador y condimento en los alimentos, actualmente se ha demostrado que también interviene en las características sensoriales de textura, sabor, olor y color, por ello su adición en los alimentos es fundamental para la aceptación del consumidor. Por otro lado, también se le ha asociado a la sensibilidad al sodio y a la hipertensión arterial, esta última, es una enfermedad que se encuentra entre las diez principales causas de mortalidad en la población mexicana reportada de 2007 a la fecha, de acuerdo a la Secretaría Salud de México y el Sistema Nacional de Información de Salud (SINAIS). La sensibilidad al sodio se presenta, entre otras razones, porque el riñón desarrolla un daño progresivo a múltiples factores, entre otros el estrés oxidativo y la predisposición genética. Es el incremento en la sensibilidad al sodio lo que determina un aumento relativo, pero suficiente, de volumen intravascular para despertar mecanismos de elevación de la presión arterial, es decir, el incremento en la presión arterial es el mecanismo inicial de defensa que usa el organismo para incrementar la natriuresis (excreción de cantidades anormales de sodio en la orina). Desafortunadamente, la gran mayoría de los hipertensos se detecta en forma tardía (después de 40 años de edad), y hasta que no existan los mecanismos epidemiológicos para detectarlos en forma más temprana, más del 75% habrá desarrollado hipersensibilidad al sodio cuando acuda al médico, por lo que, de manera general es mejor recomendar la dieta baja en sodio, que buscar quienes son o no son sodiosensibles (Rosas y Pastelín, 2004). Por tal motivo, la OMS recomienda la reducción de sal (NaCl) en los alimentos y una ingesta máxima de 5g de sal al día, por lo que la reducción del contenido de sodio en los alimentos sin modificar la aceptación del consumidor se ha 14 convertido en un importante reto para la industria alimentaria. Una de las principales consecuencias en los alimentos al disminuir el contenido de sodio es que las características sensoriales se ven afectadas (Lawrence y Salles, 2009). En cuanto se cambia el tamaño de algunos de los iones (Na+) el gusto salado deja de ser puro:el ejemplo más conocido es el cloruro de potasio (KCl), cuyo gusto amargo se une al salado, que a su vez es más débil que en el del homólogo sódico (Durán y Costell, 1999). En la industria alimentaria existen diversos métodos e instrumentos para la cuantificación de sales en alimentos, por ejemplo, la técnica de medición selectiva de iones con electrodos de sodio, cloruros, potasio y magnesio, cuantificación de sodio en cenizas disueltas en HCl 1M seguido de un análisis de espectrometría de absorción atómica (Floury et al., 2009; Aly, 1995), disolución en agua caliente y titulación con solución estándar de nitrato de plata 0.171 N (método de la Sociedad Australiana de Tecnología Láctea, 1966), Quantab® Chloride Titrator para sal en queso (AOAC, método oficial 971.19), entre otros. Debido a que los métodos anteriores requieren de material y equipo muy específico, a veces costoso y en algunos casos se requiere de mucho tiempo para obtener un resultado, en este trabajo se propone una metodología sensorial para cuantificar las sales cloruro de sodio (NaCl), cloruro de magnesio (MgCl2), y cloruro de potasio (KCl) que permita evaluar la sensación salina que producen en diversas bebidas y en queso Panela. Asimismo, se pretende sentar las bases para el desarrollo de alimentos bajos en NaCl, pero con una sensación salina que cumpla con las expectativas de los consumidores. Se trabajó con jueces entrenados en metodologías cuantitativas como pruebas de intervalo y ordenación que permitió cuantificar sensorialmente la sensación salina a diferentes concentraciones y cuyos resultados permitirán correlacionar la medida sensorial con la instrumental a cargo del departamento de Química Analítica de la Facultad de Química de la UNAM mediante la técnica de medición selectiva de iones con electrodos de sodio, cloruros, potasio y magnesio. 15 3. OBJETIVOS • Desarrollar una metodología sensorial de cuantificación de las sales NaCl, MgCl2, y KCl que permita evaluar la sensación salina que éstas proporcionan en diversas bebidas no alcohólicas, como hidratantes y reducidas en calorías. • Correlacionar la medida salina sensorial con la instrumental de las bebidas realizada por el departamento de Química Analítica de la Facultad de Química. • Determinar como afectan las mezclas de sales de NaCl/KCl el perfil sensorial del queso evaluado por medio de la técnica de Análisis Descriptivo Cuantitativo (QDA) y el Análisis de perfil de textura (TPA). • Correlacionar los resultados sensoriales (perfil sensorial) e instrumentales (color, textura, contenido de iones) del queso Panela. 16 4. ANTECEDENTES 4.1 Gusto La sensación de sabor que percibe el ser humano la realiza utilizando dos sentidos corporales simultáneamente: el gusto detectado en la boca, principalmente en la lengua, y el olfato, radicado en las fosas nasales, en donde se detecta el aroma. Los sentidos responsables de los gustos son producidos por sustancias no volátiles y que originan las sensaciones básicas de dulce, ácido, salado y amargo, fundamentalmente. La lengua está provista de papilas gustativas de diferentes tipos, compuestas por grupos de células sensibles, en las que tienen lugar las interacciones entre las moléculas responsables de los estímulos y los receptores presentes en cada célula. Hasta hace algunos años se admitía que las papilas sensibles al dulce se localizaban principalmente en la punta de la lengua, las sensibles al amargo en la zona posterior y las sensibles al ácido y al salado eran más abundantes en las zonas laterales. Hoy se considera que la sensibilidad a los distintos gustos se reparte uniformemente por toda la lengua. 4.2 Olfato La nariz es el principal órgano del olfato, tiene nervios olfativos que perciben las sustancias químicas volátiles responsables del aroma, éstas sustancias se difunden a través de la membrana mucosa para ponerse en contacto con las terminales nerviosas y así mandar la señal al cerebro. Los nervios olfativos también son importantes para diferenciar el sabor de las sustancias que se encuentran dentro de la boca, es decir, muchas sensaciones que se perciben como sensaciones gustativas tienen su origen en el sentido del olfato (Severiano-Pérez et al., 2010). Un experimento muy ilustrativo de lo anterior es el realizado por Frank y Byram (1998), en el que demostraron que el aroma de manteca de cacahuate no influye sobre el gusto dulce mientras que el de fresa lo incrementa claramente. La 17 asociación conceptual del aroma frutal con el gusto dulce parece ser responsable de este fenómeno. Por otro lado, en estudios realizados por Moio et al. (1993) establecen que los olores pueden enmascararse unos a otros, en un análisis del aroma de queso por cromatografía de gases, los componentes encontrados por sí solos no tenían aroma a queso, por lo que este aroma se percibió como tal cuando todos los aromas se mezclaron (Tomado de Martínez, 2009). Algunos de éstos fenómenos podrían calificarse de interacciones gusto-aroma, sin embargo, Nahon et al. (1996) dice que en realidad se trata de interacciones físico- químicas entre los estímulos. Por ejemplo, al añadir azúcares (mono o disacáridos) a una disolución acuosa de compuestos aromáticos se produce un aumento de la producción de sustancias volátiles como consecuencia del aumento de concentración efectiva en la solución, provocado por la reducción de la proporción de agua disponible. El efecto sensorial es una mayor intensidad del aroma, lo que se produce con independencia de la percepción del gusto dulce. 4.3 Estímulos químicos y mecanismos de percepción del gusto salado Como se mencionó anteriormente, el gusto salado que percibimos es producido por iones, tanto el anión como el catión de una sal intervienen en la iniciación de la señal que da lugar a la sensación, por lo tanto el estímulo es de naturaleza iónica y produce la despolarización celular de forma directa. Por ello dentro de cada tipo de sal, la intensidad del gusto depende sólo de su concentración. El gusto salado se ve disminuido en su percepción cuando la sal forma parte de un hidrocoloide iónico (gomas xantana y k-carragenato) a diferencia de cuando se encuentra en uno no iónico (gomas guar y de garrofín) y se atribuye a que, en el primer caso, el hidrocoloide retiene a los cationes, que dejan de estar disponibles para activar los receptores humanos. (Durán y Costell, 1999) Se cree que los cationes presentes en las sales que ingerimos estimulan al humano a buscar alimentos ricos en minerales pero a evitar los muy salados para mantener la 18 homeostasis ion-agua. La necesidad de consumir iones tales como el sodio, es debido a la incapacidad de almacenarlos en el cuerpo, a diferencia del calcio. Se ha postulado por años que el canal de sodio epitelial es el receptor del gusto salado, sin embargo, esto ha sido más estudiado en roedores que en humanos. No obstante, se han descrito otros canales iónicos de diferentes papilas gustativas, como el de K+ y el de Cl-. (Hummel y Welge-Lüssen, 2006) 4.4 La sal y la hipertensión Actualmente la OMS recomienda la reducción de sal (NaCl) en los alimentos a una ingesta máxima de 5 g al día con la intención de prevenir el padecimiento de hipertensión sensible a sodio, ya que esta enfermedad crónica esencial del adulto (ECEA) es un problema de salud pública debido a que los efectos que provoca (como enfermedades del corazón, infartos cerebrales, angina de pecho, daños en la visión, daños en los riñones, daños de los pulmones) tienen un impacto importante en la salud y representan la primera causa mundial de muerte en el adulto. La hipertensión arterial (HTA) es la ECEA predominante a nivel mundial. En México en el año 2000 la prevalencia informada de HTA en personas entre 20 y 69 años de edadfue del 30,05%, es decir, más de 15 millones de mexicanos. Los estados del norte de la república, alcanzaron cifras aún mayores. Lamentablemente el 61% de los hipertensos detectados en esta encuesta desconocían ser portadores del mal, situación alarmante ya que, por lo general, en México las personas acuden al médico cuando la HTA probablemente ha provocado daño en sus órganos. (Martín y Pastelín, 2004) 4.5 Estudios previos Debido a lo antes mencionado, se han realizado diversos estudios donde se busca reducir la cantidad de cloruro de sodio (NaCl) en los alimentos mezclando dicha sal con cloruro de potasio (KCl). A continuación se exponen algunos de ellos. Terri et al., (1997) elaboraron dos soluciones de goma xantana (0,1% y 0.3%, p/v) y una de goma frijol de langosta (0,3%, p/v) con tres concentraciones de sales (0,08% 19 NaCl, 0,14% NaCl, 0,08% NaCl + 0,08% KCl). Las concentraciones de dichas sales fueron seleccionadas debido a que: 0,08% de NaCl se encuentra cercano al umbral de reconocimiento del gusto salado de NaCl en agua, 0,08% de NaCl más 0,08% de KCl, en la industria alimentaria, es el estándar para sustituir el 50% en peso de NaCl por KCl utilizado en alimentos procesados bajos en sodio; y la concentración de 0,14% de NaCl es equivalente a añadir 0,08% de NaCl más 0,08% de KCl. Estos nueve estímulos fueron usados para el análisis sensorial en pruebas discriminativas, clasificación de atributos e identificación. El análisis estadístico de los datos se realizó, entre otras, por medio de la prueba de Tukey’s HSD la cual mostró que la intensidad de percepción de las sales fue 0,08% NaCl < 0,08% NaCl + 0,08% KCl < 0,14% NaCl. Por medio de la teoría de decisión límite (Decision Boundary DB) se obtuvo una diferencia significativa en el gusto salado entre 0,08% NaCl y 0,08% NaCl + 0,08% KCl, y entre 0,08% NaCl + 0,08% KCl y 0,14% NaCl. Finalmente se concluyó que en las gomas de frijol de langosta se percibían en general más saladas que las muestras de goma xantana (ambas a la misma concentración de sal), esto se debe a que las gomas iónicas suprimen el sabor salado en comparación con las no iónicas. (Rosett y Klein, 1997) En otro estudio realizado por Lawrence et al. (2009), se investigó la interacción olor- salado en soluciones acuosas, en un primer experimento, 81 consumidores indicaron la intensidad del gusto salado en soluciones acuosas, posteriormente se les añadió a dichas soluciones aromas comerciales asociados al gusto salado teniendo como resultado un aumento en la percepción de la sal. Lawrence et al. (2009) llegaron a la conclusión que ciertos aromas pueden inducir el gusto salado y pueden ser usados para compensar la reducción de cloruro de sodio en los alimentos. Katsiari, et al. (1998) elaboraron queso Kefalograviera bajo en sodio al remplazar el cloruro de sodio (NaCl) por cloruro de potasio (KCl). Se prepararon cinco muestras de queso, una salada con NaCl (control) y las otras con mezclas de NaCl/KCl (3:1 o 1:1, p/p). Los resultados mostraron que fue factible una reducción de hasta 50% del contenido de sodio en el queso, con una sustitución parcial de NaCl por KCl, sin un efecto adverso en su calidad. Se encontró que los quesos elaborados con mezclas 20 de NaCl/KCl no presentaron diferencia significativa (p > 0,05) en cuanto a la composición (humedad, grasa, proteína, sal), aspectos fisicoquímicos (pH, aw), o en la textura (fuerza y resistencia a la fractura, dureza, cohesividad, gomosidad, masticabilidad, palatabilidad) en comparación con el queso control. Así mismo, no hubo diferencia significativa (p > 0,05) en las características sensoriales (aspecto, textura y cuerpo, sabor) respecto al queso que se uso como control, por lo que la manufactura de los quesos puede hacerse con una mezcla de NaCl y KCl en lugar de solo NaCl. (Katsiari y Voutsina, 1998) Por otro lado, Phelps, et al., 2006, evaluaron el perfil sensorial de sustitutos de sal en soluciones acuosas, y los candidatos más sobresalientes fueron evaluados en alimentos donde la sal cumple una función meramente sensorial. El primer obstáculo encontrado fue que ninguno de los sustitutos de sal proveía el gusto salado limpio del cloruro de sodio. El sabor amargo asociado con el cloruro de potasio a las concentraciones necesarias para dar un sabor salado es la limitante principal en la industria de alimentos, así el límite empleado para estas sales fue de 50:50 NaCl:KCl, para reducir el sabor amargo se utilizó lactato de potasio. La adición de DHB (ácido 2,4-dihidroxibenzoico) redujo las notas amargas de cloruro de potasio en soluciones acuosas, pero no en alimentos procesados. Los potenciadores de sal son sustancias que por si solas no dan notas saladas, pero incrementan el gusto salado cuando se usan en combinación con el cloruro de sodio. Varios tipos de ingredientes fueron probados incluyendo aminoácidos y compuestos relacionados, lactatos y otros compuestos en soluciones acuosas y en grupos claves de alimentos como sopas, aderezos, frituras, salsas y galletas de mantequilla. Los aminoácidos utilizados fueron glicina, lisina, arginina y taurina, así como glicin-etil- eter hidroclorato (glicin-ester). Los aminoácidos no propiciaron el incremento en el gusto salado en las soluciones ni en los alimentos. El glicin-ester compensó satisfactoriamente el gusto salado en alimentos con una reducción del 30% de sal. Fue más exitoso en las frituras aunque les añadía una nota ácida. En los otros productos impartía notas ácidas, amargas y de umami al perfil de sabor. El lactato de potasio y la trehalosa también fueron investigados como potenciadores. El primero, 21 fue por mucho el potenciador de sal más efectivo en soluciones y en los alimentos. Este producto compensó el sabor salado al reducir la cantidad de sal en un 30% sin contribuir en notas extrañas. La trehalosa no mostró efecto potenciador. Para la modificación física de la sal, se cortaron los cristales más pequeños lo que proporcionó en los alimentos un incremento en la rapidez de percepción del gusto salado, lo anterior se atribuye a la hipótesis de que el sabor salado depende del tamaño de los cristales de sal y del grado en el que se disuelve la sal en la boca. Esto tiene importantes aplicaciones en la industria panadera donde se añade sal en la parte externa de los panes, de esta manera se puede agregar menor cantidad de sal fina que da la misma sensación que la gruesa. (Phelps y Angus, 2006) En general se ha observado que, la disminución del contenido de sal en los alimentos se puede hacer de distintas maneras, mediante la reducción gradual de sal en los alimentos (esto implica que el consumidor se vaya adaptando a comer cada vez menos sal), el uso de sustitutos de sal, el uso de potenciadores del gusto salado y modificaciones de la forma física de la sal. La primer propuesta, ha sido usada extensamente por la industria, pero su uso potencial es limitado por dos grandes barreras. Primero, las limitantes tecnológicas que dan como resultado problemas en el procesamiento, estructura y seguridad del alimento. Segundo, el rechazo del consumidor hacia el alimento si percibe un contenido de sal bajo. Los últimos tres enfoques tecnológicos han sido investigados en el Leatherhead Food International en un proyecto de colaboración entre proveedores de ingredientes, la industria manufacturera y minoristas, estas dificultades también fueron observados por Phelps, et al., 2006. 4.6 Análisis Sensorial Las técnicas del análisis sensorial se han desarrollado como poderosas herramientas para entender como los atributos de apariencia, sabor y textura conducen las preferencias de los consumidores. Las técnicas sensoriales modernas pueden ayudar a los productores a desarrollar productos nuevos que son altamente 22 atractivos para el consumidor. También permitenmejorar el sabor, textura y color de cierto producto para llegar a un mercado específico, así como monitorear su calidad. Estas herramientas pueden ayudar a determinar variaciones en los atributos sensoriales asociados con las variables de la producción, estación del año y región geográfica de producción, etcétera, y ayudar a resolver otros asuntos importantes para el productor y comercializador. Todas las pruebas sensoriales tienen en común que usan humanos como el instrumento de medida. Existen varios tipos de pruebas sensoriales, siendo de las más usadas las pruebas discriminativas, descriptivas y afectivas. Diferentes pruebas incluyen la prueba triangular, donde el grupo de jueces entrenados intenta detectar cuál de las tres muestras es diferente de las otras dos, y la prueba dúo-trío, donde el grupo de jueces entrenados selecciona cual de las dos muestras es diferente o igual de la referencia. Otras pruebas estiman la magnitud de las diferencias sensoriales entre muestras, sin embargo, una deficiencia de estas pruebas es que la naturaleza de las diferencias no está definida. En la mayoría de los casos, para resolver un problema se utilizan combinaciones de diferentes pruebas y el análisis descriptivo. 4.6.1 Pruebas sensoriales Existen distintas pruebas sensoriales que permiten recabar, de manera ordenada y sistemática, información de las observaciones humanas. Para saber que prueba sensorial se debe de aplicar, primero se debe tener un objetivo claro y posteriormente identificar con cual o cuales pruebas sensoriales se pueden obtener datos para cumplir dicho objetivo. Las pruebas sensoriales se pueden clasificar en dos grupos, primero está el constituido por pruebas analíticas (Tabla 4.6.1.A), las cuales se ejecutan en condiciones controladas de un laboratorio, con jueces entrenados y proporcionan información acerca de la naturaleza del producto. Al segundo grupo lo integran las pruebas afectivas, las cuales detectan gustos y preferencias, se realizan con consumidores (personas no entrenadas en técnicas sensoriales) en condiciones que 23 no les sean ajenas o extrañas para utilizar o consumir el producto en estudio (Pedrero y Pangborn, 1989). Tabla 4.6.1.A Clasificación de pruebas analíticas. Métodos analíticos Pruebas Sensitivo Diferenciación o discriminativas Umbral Cuantitativo Intervalo Ordenación Cualitativo y cuantitativo Análisis descriptivo (Pedrero y Pangborn, 1989) 4.6.1.1 Pruebas discriminativas Tabla 4.6.1.1.A Descripción de pruebas discriminativas. Prueba Descripción/pregunta a realizar Orden de presentación Probabilidad de acertar por casualidad Análisis Ventaja Limitación Comparación por pares Comparación direccional: ¿Cuál es “más dura”? Comparación sin dirección: ¿Son diferentes? AB, BA p = 1/2 Prueba binomial 1 cola (direccionada) o 2 colas (sin dirección) Decisión forzada Atributo a definir (sólo en direccional) Dúo-trío ¿Cuál es igual a R? ¿Cuál es diferente de R? RA AB, BA RB AB,BA p = 1/2 Prueba binomial 1 cola Decisión forzada, sin atributo No es tan sensitivo como comparación por pares Triangular ¿Cuál muestra es diferente de las otras dos? AAB, ABA, BAA, BBA, BAB, ABB p = 1/3 Prueba binomial 1 cola Decisión forzada, sin atributo Más tiempo, más cantidad de muestra A-no A ¿Es igual a A o no? Referencia mental: A A, B o B, A p = 1/2 Chi-cuadrada 1 cola No hay atributo Fatiga en la memoria de los jueces 2 de 5 ¿Cuáles dos muestras son iguales entre sí? (y diferentes a las otras tres) AABBB ABABB ABBAB ABBBA BBBAA p = 1/10 Prueba binomial o z=(k- 0,1n)/(0,09n)1/2 Más eficiente estadísticamente que la triangular Fuertemente afectada por la fatiga 2-AFC (Alternative Forced Choice) ¿Cuál es “más dulce”? AB, BA p = 1/2 Binomial (comparación por pares direccional), 1 cola (direccional) o 2 colas (sin dirección) Enfoca a un atributo entre otros Definir el atributo 3-AFC (Alternative Forced Choice) ¿Cuál es la más diferente en lo crujiente? AAB, ABA BAA, BBA BAB, ABB p = 1/3 Prueba binomial 1 cola Decisión forzada, con atributo.Enfoca a un atributo entre varios Atributo a definir, es más estricta para probar diferencias 24 Son métodos analíticos que permiten diferenciar entre muestras y determinar si las muestras son perceptiblemente diferentes o si son suficientemente similares para ser usadas indistintamente. Existen diversas pruebas disciminativas, en la Tabla 4.6.1.1.A se muestran algunas. 4.6.1.2 Pruebas cuantitativas Se refieren a las diferentes formas de cuantificar las respuestas sensoriales. Sirven para unificar los criterios de decisión y cuantificar los juicios (Severiano-Pérez et al., 2010). La cuantificación de juicios pertenece al área de psicofísica, la cual es la ciencia que estudia las relaciones cuantitativas entre estímulo y respuesta. En esta relación existen dos continuos: el psicológico y el físico. Un continum o continuo se visualiza como una representación lineal de eventos continuos. Una vez que se han asignado valores numéricos a los continuos psicológico y físico, se tiene una escala de medición. La escala psicológica, que representa la magnitud percibida de un estímulo, está diseñada para que sus valores correspondan a cada valor numérico conocido asignado en el continum físico (Severiano-Pérez etal., 2010). Los métodos de medición se basan en que un juez asigne un valor que indique la intensidad de una respuesta basándose en una escala (Tabla 4.6.1.2.A). Tabla 4.6.1.2.A Descripción de características de pruebas cuantitativas. Prueba Intervalo Ordenación Escala Número continuo Número discreto Tipo de número Intervalo Ordinal Estadístico de prueba Paramétrico. Ejemplo: T Student (dos muestras), Anova (tres o más muestras) No Paramétrico. Ejemplo: Newell-McFarlane 25 4.6.1.3 Prueba de umbral Su objetivo es determinar el umbral absoluto, que es la concentración a la cual el 50% de los jueces reconoce el gusto básico del que se trata. (Utrera, 2007) El umbral debe elegirse entre un gradiente de concentraciones de un mismo estímulo, representado en una serie de muestras cuyo cambio en concentración ha sido establecido. La presentación de las muestras debe incluir concentraciones subumbral y supraumbral, se ordenan de forma ascendente, es decir, comenzando con la menor concentración hasta la mayor. 4.6.2 Análisis descriptivo Las pruebas de análisis sensorial descriptivo involucran la detección (discriminación) y la descripción tanto de los componentes cualitativos como cuantitativos del producto, a través de un panel de jueces entrenados (Meilgaard et al., 1991). El aspecto cualitativo incluye el aroma, apariencia, sabor, textura, resabio y propiedades sonoras, todo lo anterior es específico para cada producto y con ello se le puede identificar o diferenciar. Una ventaja del análisis descriptivo es que se puede relacionar con resultados instrumentales o preferencias del consumidor. Otra ventaja es que se puede usar para el control de calidad del producto, comparación de prototipos, así como en la investigación del efecto de los ingredientes o variables del proceso en la calidad sensorial final (Gacula, 1997; Murray et al., 2001). Existen diferentes métodos del análisis descriptivo, como el Método de perfil de sabor (Cairncross y Sjöstrom, 1950), Método de perfil de textura (Brandt et al., 1963), Análisis descriptivo cuantitativo QDA (Stone et al., 1974) y el Perfil de libre elección (Langron, 1983; Thomson y MacFie, 1983), a continuación se describen sus características (Tabla 4.6.2.A). 26 Tabla 4.6.2.A Características de los principales tipos de análisis descriptivos utilizados en la evaluación sensorial. Método Objetivo Características Procedimiento Análisis Perfil de saborAnalizar el sabor (aroma y gusto) integral de un producto -Sólo de aroma y gusto. -Intensidad relativa de casa atributo. -Orden de aparición de cada atributo. -Generación de descriptores. -Selección de referencias. -Evaluación grupal. -Consenso grupal. -Definición del perfil. -Acuerdo grupal. -Gráficos (histograma) Perfil de Textura Describir desde el punto de vista de las características mecánicas, geométricas y de intensidad, la textura de un producto Definición de los atributos mecánicos, geométricos, contenido en grasa y en humedad. Intensidad de cada atributo. Orden de aparición (visual, primera mordida, durante masticación y fase residual). -Evaluación grupal y consenso. -Evaluación individual. -Análisis de resultados. -Definición de perfil. -Medidas y desviación estándar. -Análisis de la varianza. -Gráficos (coordenadas polares) Análisis descriptivo cuantitativo (QDA) Identificar y cuantificar los atributos sensoriales de un producto Descripción de atributos diversos. Referencia física por atributo. Intensidad de cada atributo. Orden de aparición de los atributos. -Generación de descriptores. -Selección de referencias. -Evaluación grupal. -Evaluación individual. -Análisis de resultados. -Definición de perfil. -Medias y desviación estándar (desviación típica). -Análisis de la varianza. -Gráficos (histograma, coordenadas polares) -Análisis de componentes principales. Perfil de libre elección Construir matemáticamente una configuración media o de consenso en función de los descriptores individuales de cada juez Libertad de utilizar los términos descriptivos que se deseen de manera individual -Generación de descriptores individualmente. -Realización de hoja de cata individual. -Evaluación individual. -Análisis de resultados. -Definición del perfil. -Análisis Generalizado de Procrustes (GPA) (Severiano-Pérez et al., 2010) 27 4.6.2.1 Perfil de sabor Este método sensorial fue desarrollado a finales del 1940 y principios de 1950 por Lören Sjostrom, Stanley Cairncross y Jean Caul de la compañía Arthur D. Little, es el único procedimiento descriptivo considerado como cualitativo ya que el tipo de datos que se obtienen no permiten la aplicación de tratamientos estadísticos y los resultados se representan en forma de gráfico (Costell y Duran, 1981). Se utiliza para describir el sistema complejo de sabor de los alimentos, donde el vocabulario utilizado se desarrolla mediante sesiones grupales con los panelistas. El tiempo de entrenamiento varía dependiendo del producto y de la cantidad de referencias y descriptores de sabor, aroma, textura en boca y resabio. El perfil obtenido representa el sabor global y las notas individuales del producto, así mismo muestra la intensidad y amplitud de los descriptores. Si los panelistas son entrenados apropiadamente, la tabulación es reproducible (Lawless y Heymann, 1998). 4.6.2.2 Perfil de Textura Fue desarrollado por científicos que trabajaban para General Foods Corporation en 1960 y posteriormente fue actualizándose, su objetivo inicial fue el de crear una técnica sensorial que permitiera evaluar todas las características de textura de un producto, desde la primera mordida hasta la completa masticación (Szczesniak, 1975; Lawless y Heymann, 1998). El Perfil de Textura (TP) fue definido por Civille y Liska (1975) como “El análisis sensorial de la textura de un alimento en términos de sus características mecánicas, geométricas, de grasa y humedad, la intensidad de cada una y el orden en que aparecen desde la primera mordida hasta su completa masticación”. Hoy en día, Severiano P. P. (2002) y Severiano-Pérez et al. (2010) establecen que la evaluación sensorial de la textura se basa en la evaluación de los atributos según el orden de su aparición y se divide en varias fases ligadas a las medidas de: 28 1. Características de superficie (atributos percibidos visualmente). 2. Fase inicial (atributos percibidos al morder el alimento). 3. Fase masticatoria (atributos percibidos durante la masticación). 4. Fase residual (atributos relacionados con las transformaciones producidas durante la masticación). Clasificación de la textura En 1963 Szczesniak clasificó a los atributos de textura en tres grupos como se muestra a continuación. -Características mecánicas: Son manifestadas por la reacción de la comida al estrés aplicado durante el consumo de los alimentos. Se dividen en primarias y secundarias. Primarias: Dureza, cohesividad, viscosidad, elasticidad y adhesividad. Secundarias: Fracturabilidad, masticabilidad y gomosidad. -Características geométricas: Son percibidas durante la inspección visual del alimento, se dividen en dos tipos. a. Relacionadas con el tamaño y forma de partícula, como granulosidad y arenosidad. b. Relacionadas con la estructura y orientación de las partículas, como la fibrosidad. -Otras características: Relacionadas con el contenido de grasa y humedad del alimento. Durante el consumo de un alimento, el proceso de percepción de la textura consta de varias etapas, durante las cuales se producen diversos estímulos (Figura 4.6.2.2.A). 29 Figura 4.6.2.2.A Percepción de la textura de un alimento cuando es consumido*. * (Utrera, 2007) Para una óptima evaluación sensorial de la textura, se deben de estandarizar el lenguaje utilizado por los jueces, las técnicas de medición y el manejo y presentación de las muestras, así mismo se debe prestar atención a la preparación de las muestras, su tamaño, forma y si es necesario también la temperatura. Todo los factores anteriores son necesarios para lograr la repetibilidad de la prueba. Los datos obtenidos del perfil de textura para los distintos atributos pueden analizarse con distintas técnicas estadísticas univariantes y los resultados representarse en forma de tablas o gráficos (Stone y Sidel, 1993). 4.6.2.3 Análisis descriptivo cuantitativo (QDA) El objetivo de esta prueba es identificar y cuantificar las características sensoriales de un producto. La información generada sirve para constituir un modelo multidimensional cuantitativo que perfila los parámetros que definen o describen a uno o varios productos. Algunas particularidades de esta prueba son las siguientes: a) El grupo de jueces genera y acuerda en sesión abierta una serie de términos que definen al producto en estudio, y en sesión privada califica (asigna un valor) cada parámetro. b) Para calificar cada parámetro los jueces utilizan una escala de intensidad (Figura 4.6.2.3.A) para cada descriptor: 30 Figura 4.6.2.3.A Escala de intensidad empleada para la evaluación sensorial de cada descriptor en el QDA. c) Esta prueba se apoya en el análisis estadístico, por ejemplo en los análisis de varianza, de regresión y de componentes principales, para cuantificar variaciones, determinar diferencias significativas, estructurar arreglos dimensionales o por coordenadas polares (Figura 4.6.2.3.B), para representar de manera gráfica a cada descriptor (Stone et al., 1980). Figura 4.6.2.3.B Diagrama de coordenadas polares o de “araña” para muestras de queso Cotija auténtico* *Tomado de Utrera (2007) Es importante que para el momento del análisis sensorial definitivo se cuente con las referencias para cada atributo, de esta manera se puede ubicar al juez en el atributo (descriptor) sensorial y las diferencias dentro de cada escala. Los materiales que se utilicen como referencia deben surgir del acuerdo general del grupo de jueces y ser proporcionados por el coordinador del dicho grupo, en la siguiente tabla se muestran algunos ejemplos de descriptores y sus referencias: 31 Tabla 4.6.2.3.A Algunos descriptores para chocolate y sus referencias. Descriptor Referencia Amargo Cocoa en soluciónCremoso Crema de leche Dulce Jarabe de azúcar Graso Manteca de cacao (Pedrero y Pangborn, 1989) El grupo de jueces seleccionados y entrenados debe constar de entre 10 y 12 personas como mínimo para obtener resultados confiables. Durante la selección debieron de haber demostrado su habilidad para percibir diferencias, reproducir sus juicios sensoriales, verbalizar experiencias sensoriales y para trabajar en equipo (Pedrero y Pangborn, 1989). Murray et al. (2001) establece que una limitación de esta prueba es la dificultad de comparar resultados entre paneles. Asimismo, no se ha utilizado frecuentemente con adultos mayores debido a su declive en el sentido del olfato (Cain y Stevens, 1989) y sensibilidad a la textura (Stevens et al., 1995). A pesar de dichas desventajas, Stone et al. (1974) menciona que una gran ventaja del QDA es que permite que todas las propiedades sensoriales de un producto o alimento puedan ser identificadas y cuantificadas, en orden de ocurrencia. 4.7 Pruebas instrumentales de Textura y Color 4.7.1 Perfil de análisis de textura (TPA) Szczesniak (1963) definió la textura como “la manifestación sensorial y funcional de las propiedades estructurales y mecánicas de los alimentos, detectadas a través de los sentidos de la vista, oído y tacto, junto con las propiedades cinestéticas”. Mientras que la British Standard Institution la definió como “el atributo de una sustancia resultado de una combinación de propiedades físicas (las cuales incluyen tamaño, forma, número, naturaleza y conformación de los elementos estructurales) y 32 percibida por los sentidos del tacto (incluyendo cinestéticas y sensación bucal), oído y vista (Utrera, 2007). Actualmente la Norma ISO 5492 la define como “Conjunto de todos los atributos mecánicos, geométricos y superficiales de un producto perceptibles por medio de receptores mecánicos, táctiles y, si es apropiado visuales y auditivos”. Según la clasificación de Scott-Blair (1985) (Tabla 4.7.1.A), para las técnicas instrumentales utilizadas para medir la textura de los alimentos, el TPA pertenece a los ensayos imitativos ya que pretende simular las condiciones a las que el alimento está sometido en la boca, es decir, imita la acción natural de los dientes y mandíbulas. Tabla 4.7.1.A Descripción de la clasificación de Scott-Blair (1985) para las técnicas instrumentales empleadas para medir la textura de los alimentos. Método Descripción Ejemplo Fundamental Mide propiedades físicas bien definidas Viscosidad en fluidos y material visco-elástico, deformación de sólidos. Empírico La medición se basa en la resistencia de la muestra a una fuerza deformante Prueba de punción, corte, compresión, extrusión. Imitativo Simula las condiciones a las que el material está sometido en la boca Adhesividad, Cohesividad, Masticabilidad, Dureza. Esta prueba está basada en la Fuerza-Compresión del alimento, donde una pequeña porción, del tamaño de una mordida, es sometida a dos deformaciones sucesivas (compresión y descompresión) imitando la primera y segunda mordida sobre el 33 alimento en la boca. El resultado es una serie de parámetros que se dividen en primarios (dureza, cohesividad y adhesividad) y secundarios (fracturabilidad, masticabilidad y gomosidad). Figura 4.7.1.A Curva ejemplo para el cálculo de los parámetros de TPA* *Tomada de Fox et al. (2000) El instrumento utilizado en esta prueba es un texturómetro, Szczesniak et al. (1963) mencionan que General Foods fue quien desarrolló el primero, mediante dicho instrumento se obtiene una curva fuerza-tiempo (Figura 4.7.1.A) que refleja la historia completa de la fuerza que se requirió para la simulación masticatoria (Bourne 1978). Finalmente, se obtienen siete parámetros de textura, cinco resultantes de la medición directa y dos calculados mediante los parámetros medidos, en la Tabla 4.7.1.B se describe cada uno de ellos. 34 Tabla 4.7.1.B Parámetros de textura a partir de la curva de TPA. Parámetro Descripción Fracturabilidad Altura del primer pico (H1) en la primera mordida (A1). Dureza Altura del segundo pico (H2) en la primera mordida (A1). Cohesividad Proporción del área de la segunda mordida respecto al área de la primera (A2/A1). Adhesividad Área (A3) de la parte negativa del pico formado cuando el émbolo es jalado de la muestra después de la primera mordida, debido a la adhesión del alimento al émbolo. Elasticidad Diferencia entre la distancia B (medida del punto inicial del contacto con la muestra en la segunda mordida) y la distancia C (la misma medida hecha en un material completamente inelástico como arcilla) B-C. Masticabilidad Dureza x Cohesividad x Elasticidad (A1*[A2/A1]*[B-C]). Gomosidad Dureza x Cohesividad x 100 (A1*[A2/A1]*100). (Szczesniak, 1975) 4.7.2 Color En los alimentos y productos procesados, el consumidor relaciona la calidad inicial con el color y apariencia, así mismo, existe una relación entre el color del producto y el sabor que el consumidor espera. El color es la percepción que resulta de la detección de la luz después de que ha interactuado con un objeto. El color percibido de un objeto es afectado por su composición física y química, la luz que lo ilumina y la capacidad sensitiva del observador. En física utilizan el término color para referirse a las variaciones en las distribuciones espectrales de las luces, ya sean emitidas directamente por fuentes lumínicas o indirectamente reflejadas o transmitidas por objetos (Meilgaard et al., 1991). Los químicos utilizan la palabra color para referirse a diferencias espectrales debidas a 35 variaciones en la constitución molecular o en las configuraciones de los compuestos químicos. Una de las razones por las cuales los objetos tienen diferente color es porque están constituidos de diferentes compuestos químicos, por ejemplo, Utrera (2007) menciona que el color del queso se debe a los carotenoides, principal pigmento de la leche, los cuales se obtienen de la dieta animal. Debido a las dobles ligaduras en la molécula de los carotenoides (Figura 4.7.2.A), estos absorben la luz UV y luz visible impartiendo colores que van del amarillo al rojo. Figura 4.7.2.A Estructura molecular de los pigmentos de la leche* *Tomada de Utrera (2007) La percepción del color es un fenómeno físico y fisiológico, ya que se hace uso del sistema visual, respondiendo a estímulos de luz que se registran por la retina, transmitidos por señales eléctricas al cerebro donde son interpretados. El ojo humano es capaz de percibir longitudes de onda de 400 a 500 nm para el color azul, de 500 a 600 nm para el verde y amarillo, y de 600 a 800 nm para el rojo (Kostyla y Clydesdale, 1978; Meilgaard et al., 1991), Figura 4.7.2.B, al conjunto de estas longitudes de onda se le llama espectro visible. 36 Figura 4.7.2.B Longitudes de onda de los principales colores a las cuales es sensible el ojo humano. Los instrumentos de medición de color simulan la manera en la cual los ojos humanos perciben el color de un objeto, bajo determinadas condiciones de iluminación y proporcionan una medida cuantitativa. Figura 4.7.2.C Representación gráfica de las coordenadas L*a*b* La luz que incide en un objeto puede ser refractada, reflejada, transmitida o absorbida (Lawless 1998), produciendo variación en el color, lo cual se manifiesta en forma esquemática como: 37 π luminosidad (L), es la relación entre la luz absorbida y reflejada y también es llamada brillo de un objeto. π saturación o cromaticidad (chroma, C), que se refiriere a la pureza del color o que tanto difiere del gris. π tono (hue angle, h°), resulta de diferencias en la absorción de energía radiante a distintas longitudes de onda y es lo que el consumidor llama “color”. En la industria de alimentos,el método de medición de color más utilizado es el L*a*b*, también conocido como el sistema CIELAB, originalmente definido por el CIE por sus siglas en francés “La Comission Internationale de l’Eclairage”, en 1976 (McCaig, 2001; Lawless y Heymann, 1998). Instrumentalmente, el color puede estimarse cuantitativamente mediante un colorímetro, el cual es un instrumento analítico cuyo funcionamiento está basado en principios de espectrofotometría. Con dicho instrumento es posible utilizar el método L*a*b*, donde se mide el grado de luminosidad o de claridad (L) de blanco (100) hasta negro (0), la variación de tonalidades del rojo (+a) hasta el verde (-a) y del amarillo (+b) hasta el azul (-b), permitiendo la cuantificación de diferencias no perceptibles para el ojo humano (O’Sullivan et al., 2002). La representación gráfica de las coordenadas L*a*b* se muestra en la Figura 4.7.2.C. Lawless (1998) establece que el parámetro h° se encuentra estrechamente ligado a los parámetros a* y b*, ya que indica el ángulo donde se ubica el color de la muestra, simulando que los atributos a* y b* se encuentren en un gráfico circular (Figura 4.7.2.D). 38 Figura 4.7.2.D Ángulos representativos de los parámetros de color* *Tomado de Escamilla (2006) El sistema espectrofotométrico del colorímetro usado para medir muestras no fluorescentes (cuerpos opacos), se muestra en la Figura 4.7.2.E. Figura 4.7.2.E Esquema de las partes más importantes de un colorímetro (espectrofotómetro). 4.8 Alimentos en estudio 4.8.1 Bebidas no alcohólicas En este estudio se emplearon bebidas para deportistas y bebidas saborizadas no alcohólicas debido a su contenido en sales y popularidad en el mercado. A continuación se definen dichas bebidas según el proyecto de Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-218-SSA1/SFCI-2002: ‐ Bebida para deportistas: bebidas saborizadas no alcohólicas que son elaboradas por la disolución de sales minerales, edulcorantes u otros 39 ingredientes con el fin de reponer el agua, energía y electrolitos perdidos por el cuerpo humano durante el ejercicio. ‐ Bebidas saborizadas no alcohólicas: productos elaborados por la disolución en agua o leche para uso y consumo humano, de edulcorantes e ingredientes opcionales, adicionados o no de aditivos, que pueden estar o no carbonatadas. 4.8.2 Queso Panela Se define como queso a los productos elaborados con la cuajada de leche estandarizada y pasteurizada de vaca o de otras especies animales, con o sin adición de crema, obtenida por la coagulación de la caseína con cuajo, gérmenes lácticos, enzimas apropiadas, ácidos orgánicos comestibles y con o sin tratamiento ulterior por calentamiento, drenada, prensada o no, con o sin adición de fermentos de maduración, mohos especiales, sales fundentes e ingredientes comestibles opcionales, dando lugar a las diferentes variedades de quesos pudiendo por su proceso ser: fresco, madurado o procesado (NOM-121-SSA1-1994). El queso Panela (Figura 4.8.2.A) es considerado un tipo de queso fresco, la Norma Oficial Mexicana NOM-121-SSA1-1994 lo define como un producto que cumple en lo general con lo señalado en la definición de queso y se caracteriza por ser un producto de alto contenido de humedad, sabor suave y no tener corteza, pudiendo o no adicionarle ingredientes opcionales y tener un periodo de vida de anaquel corto, requiriendo condiciones de refrigeración. Por otro lado, la Subsecretaría de Desarrollo Rural en la SAGARPA lo define como: queso fresco elaborado con leche natural de vaca, pasteurizada, no acidificada y que puede ser entera o parcialmente descremada. Como todos los quesos frescos mexicanos, contiene un elevado porcentaje de agua (58%) lo que lo hace altamente perecedero y por ello es necesario mantenerlo en refrigeración. Es esencial que para su elaboración se utilice leche de buena calidad porque contribuye en gran medida al sabor, al aroma, a la textura y demás 40 características sensoriales importantes en el queso. (http://www.sagarpa.gob.mx/desarrolloRural/Documents/fichasaapt/Elaboraci%C3%B3n%20de%20quesos.pdf). Figura 4.8.2.A Queso Panela. Se decidió trabajar con queso Panela debido a que los productos lácteos contribuyen aproximadamente en un 11% del total del sodio consumido en la dieta de América (Forsythe y Miller, 1980). Por tal motivo la industria láctea está en busca de maneras de reducir el cloruro de sodio en alimentos tales como queso fresco y procesado, los cuales contienen más sodio que otros productos lácteos. 41 5. HIPÓTESIS Si se desarrolla una metodología sensorial de cuantificación de sales tales como NaCl, MgCl2, y KCl que permita evaluar la sensación salina que estas confieren en diversas bebidas y queso Panela, entonces se podrá correlacionar la medida salina sensorial con la instrumental. 42 6. METODOLOGÍA La metodología para la evaluación sensorial de sales en bebidas no alcohólicas y queso panela constó de varias etapas que a continuación se describen. 6.1 Diagrama: Metodología general de trabajo. Selección del panel. Evaluación de bebidas no alcohólicas • Cuestionario de hábitos. • Pruebas umbral gustos básicos. • Pruebas triangulares. • Pruebas de olores • Familiarización con el análisis cuantitativo. • Fijar escalas de referencia. Segunda etapa: Pruebas de umbral de las sales a evaluar durante el proyecto (NaCl, MgCl2 y KCl). Tercera etapa: Evaluación de muestras acuosas mediante pruebas cuantitativas. Evaluación de queso Panela a) Generación de descriptores y revisión de estos. b) Evaluación de la terminología. c) Determinación de estándares. d) Fijar escalas de referencia. e) Evaluación de muestras comerciales* Primera etapa: Entrenamiento en Análisis Descriptivo Cuantitativo (QDA) Primera etapa: Entrenamiento pruebas cuantitativas (intervalo y ordenación). 43 *Las muestras comerciales de queso panela se utilizaron para comprobar que el entrenamiento se realizó adecuadamente y como referencias para anclar las escalas de evaluación. Análisis y discusión de resultados Conclusión Segunda etapa: Evaluación de queso panela (sensorial e instrumental) Evaluación sensorial: generación del perfil sensorial de las diferentes muestras de queso panela Evaluación instrumental Capacitación en el uso del equipo Preparación de muestras Evaluación instrumental de las diferentes muestras de queso panela Correlación de la evaluación sensorial e instrumental 44 6.2 Descripción de la metodología 6.2.1 Selección de jueces (panel) • Cuestionario de hábitos En la primera sesión se aplicó un cuestionario de hábitos alimenticios y de consumo a las personas interesadas en participar como jueces entrenados en el proyecto, esto con el objetivo de conocer si eran fumadores, alguna intolerancia y/o alergia a algún alimento, etc. (Anexo, Cuestionario 11.1). • Pruebas de umbral de gustos básicos El segundo paso fue aplicarles pruebas de umbral de los gustos básicos ácido, salado, amargo y dulce (Anexo, Cuestionario 11.2). Fundamento, Hay personas que pueden percibir con mucha agudeza un determinado gusto, pero su capacidad de percibir los gustos básicos restantes es pobre o nula. Es necesario determinar, pues, qué gustos básicos puede detectar cada juez para posteriormente hacer la selección en función de aquellos que tengan umbrales bajos para el gusto salado. Para las pruebas de gustos básicos fue necesario conocer la habilidad de los jueces para la percepción de dichos gustos, así como el umbral de cada gusto básico para el grupo de jueces. Para esto se elaboró un gráfico de percepción en función de las concentraciones del estímulo y posteriormente se realizó
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