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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA “RIQUEZA ESPECÍFICA DE LAS AMIBAS DE VIDA LIBRE PRESENTES EN LA RAIZ DE LIRIO ACUATICO DEL LAGO DE XOCHIMILCO” T E S I S QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE BIÓLOGO P R E S E N T A : GASPAR MORALES OSCAR DIRECTOR DE TESIS: M. EN C. ELIZABETH RAMIREZ FLORES Los Reyes Iztacala, Estado de México. 2013 Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ Dedicatoria. A mi Mamá Esther, que siempre ha estado conmigo cuidándome y viendo por mí en todo momento, gracias, porque por ti he llegado a terminar con éxito esta fase de mi vida ya que eres mi inspiración y motivación más grande. A mi Papá Norberto, que es la persona que más admiro en el mundo y ha sido un ídolo para mí desde niño por su fortaleza e inteligencia. Gracias por haberme enseñado tantas cosas y mostrarme lo que es ser un hombre de verdad y que a pesar de que ya no estas entre nosotros, aún seguiré aprendiendo cosas de ti, y cumpliré tu deseo de no parecerme a ti, si no ser aún mejor y llegar más lejos en la vida. A mis hermanas Teresa, Gloria y Alejandra que no podría vivir sin alguna de ellas y sin molestarlas, las amo. A lo largo de mi vida personal y académica no he encontrado a nadie que considere un ídolo y que admire más que a mis padres que me han dado su apoyo incondicional siempre y en todo momento y que a pesar de todas las dificultades que pasaron me dieron la oportunidad de seguir estudiando y terminar una carrera. Este logro es todo suyo, no hay más que decir solo que los amo. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ Agradecimientos. A la M en C. Elizabeth Ramírez Flores por aceptarme como su tesista, por su disponibilidad para enseñarme e introducirme al mundo de las AVL, por ofrecerme su ayuda, tiempo, y por haberme tenido mucha paciencia. A la M en M Emelia Campoy Otero por sus sabios y meticulosos consejos, no solo aplicables para esta tesis sino para cualquier otro trabajo que lleve el nombre de investigación científica. A la Dra. Patricia Bonilla Lemus, a la QFB Esperanza Del Socorro Robles Valderrama Y la M en M Dolores Hernández Martínez, parte fundamental en la realización de este trabajo. Al Dr. Arturo Rocha Ramírez por la coordinación y realización de los muestreos. Laboratorio de Ecología FES Iztacala. A todos los profesores que me ayudaron a mi formación como profesional durante toda la carrera. De todos me llevo un poco. A mis amigos Faby, Mary, Cyndi, Tomas y Diego, y compañeros, Violeta, que tuve la suerte y el grato gusto de conocerlos y que igual aprendí mucho de ellos. A cada uno de ellos gracias por haberme aceptado en sus vidas. Agradecimiento especial a Faby y Mary, por su amistad incondicional más allá de la vida universitaria , por ser constantes en mi vida, por estar conmigo en las buenas y en las malas y deseo, al igual que ustedes, que nuestra amistad perdure a pesar del tiempo. Mis grandes amigas, gracias. A la Facultad de Estudios Superiores Iztacala, orgullosamente UNAM. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ Contenido Resumen. ....................................................................................................................................... 3 Introducción. ................................................................................................................................... 4 Marco Teórico. ................................................................................................................................ 5 Amibas de vida libre (AVL). ............................................................................................................. 5 Lago de Xochimilco. ........................................................................................................................ 6 Lirio acuático. .................................................................................................................................. 8 Ecología ..................................................................................................................................... 8 Morfología. ................................................................................................................................. 9 Daño-beneficio de la presencia del lirio acuático. .................................................................. 9 Antecedentes. ............................................................................................................................... 12 Área de Estudio. ........................................................................................................................... 13 Mapa del sitio........................................................................................................................... 14 Sitios de muestreo. ................................................................................................................. 14 Justificación. ................................................................................................................................. 16 Objetivo general. ........................................................................................................................... 16 Material y Métodos. ....................................................................................................................... 17 Trabajo de Campo. .................................................................................................................. 17 Determinación in situ de parámetros Fisicoquímicos. ......................................................... 17 Trabajo de Laboratorio. .......................................................................................................... 17 Aislamiento y cultivo de AVL. ................................................................................................ 17 Identificación. .......................................................................................................................... 18 Análisis estadístico. ................................................................................................................ 18 Resultados y Discusión. ................................................................................................................ 19 Riqueza especifica. ................................................................................................................. 19 Presencia de AVL. ................................................................................................................... 21 Frecuencia de AVL por género. .............................................................................................. 22 Frecuencia por especie. .......................................................................................................... 23 Distribución Espacial Total. .................................................................................................... 25 Distribución temporal total. .................................................................................................... 26 Distribución estacional por sitio de muestreo. ..................................................................... 27 Distribución estacional de las especies más frecuente. ...................................................... 29 Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/Parámetros fisicoquímicos. ........................................................................................................... 31 Oxígeno disuelto. .................................................................................................................... 31 Temperatura............................................................................................................................. 32 pH. ............................................................................................................................................ 33 Promedio de los parámetros por sitio de muestreo. ............................................................ 33 Correlación de parámetros fisicoquímicos-presencia de amibas. .................................................. 35 Conclusiones. ............................................................................................................................... 36 Referencias. .................................................................................................................................. 37 Anexo. .......................................................................................................................................... 41 Valores de los parámetros fisicoquímicos. ........................................................................... 41 Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 3 | P á g i n a Resumen. El deterioro y la contaminación del agua es uno de los problemas de mayor importancia que afronta México en la actualidad. Tal es el caso del lago de Xochimilco, el cual se encuentra reducido a canales que son alimentados agua del acuífero que subyace en la zona, agua pluvia y aguas del Cerro de la Estrella. Recibe las agua residuales proveniente de los asentamientos humanos irregulares de la zona, las cuales no reciben tratamiento alguno. Las condiciones del sistema acuático favorece el crecimiento de una gran cantidad de flora acuática como el lirio acuático, que es la especie más abundante. Es una planta vascular acuática originaria de América del sur que se distribuye ampliamente en las regiones tropicales y subtropicales. Su reproducción por semillas y estolones la hacen ser muy exitosa bajo diversas condiciones climáticas. Su raíz proporciona un hábitat adecuado para el establecimiento de los microorganismos. Se determinó la riqueza específica de las amibas de vida libre en la raíz del lirio acuático, para ello se realizaron un total de 10 muestreos mensuales en 3 zonas de crecimiento de lirio acuático, de Noviembre de 2008 a Agosto del 2009. Se aislaron un total de 39 especies pertenecientes a 16 géneros de AVL, los géneros más frecuentes fueron Vannella, Naegleria y Thecamoeba. De las amibas que se han reportado con potencial patógeno se aislaron los géneros A. polyphaga y A. astronyxis, pero en muy baja frecuencia. Por sus características morfológicas, la raíz del lirio proporciona una gran superficie de contacto que la hace un excelente hábitat para el establecimiento de las Amibas de Vida Libre. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 4 | P á g i n a Introducción. El agua, esencial para la existencia de cualquier tipo de vida, juega un papel destacado en muchas actividades propias de los seres humanos, desde la agricultura hasta la industria y como del abastecimiento de agua potable y con usos recreativos (Llamas et al, 2000). Uno de los principales problemas que afrontamos actualmente es el deterioro del ambiente que nos rodea, siendo el agua uno de los recursos que se ha visto seriamente afectado debido, en gran medida, a que los ríos y lagos han sido utilizados para depositar los desechos provenientes de las descargas tanto domésticas como industriales, provocando con ello su contaminación. En estas condiciones se encuentra el lago de Xochimilco que es considerado Patrimonio de la Humanidad por la UNESCO (UNESCO, 2005). El aporte de agua que tiene este lago se limita a agua pluvial, agua residual tratada de las plantas de tratamiento, agua residual sin tratamiento proveniente de los asentamientos humanos irregulares de la zona, escurrimientos de la Sierra del Chichinautzin, manantiales internos (recarga natural) y el aporte de agua de los ríos Santiago, San Buenaventura, San Lucas, San Gregorio y Milpa alta (Sandoval, 2008). La flora y la fauna de Xochimilco son abundantes y variadas, en la superficie del agua existe una gran cantidad de flora acuática como el lirio acuático (Eichhornia crassipes). Esta planta actualmente es la mas abundante dentro de los canales del lago, introducida a Xochimilco a fines del siglo XIX y que a pesar de que es una planta no nativa, ha sido un substituto de las plantas acuáticas desaparecidas (UNESCO, 2005). Es una planta vascular acuática originaria de América del Sur que se distribuye ampliamente en las regiones tropicales y subtropicales (Aguirre et al., y 1989). Su reproducción por semillas y estolones la hacen ser muy exitosa bajo diversas condiciones climáticas. Por ello ha tenido que ser controlada con distintas técnicas. Son más los aspectos negativos que lo acompañan que los positivos, ya que se le asocia con una alta tasa de evapotranspiración, bloqueo de penetración de luz, aporte de detritus, reservorio de microorganismos potencialmente patógenos (UNESCO, 2005). Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 5 | P á g i n a Las amibas de vida libre (AVL) son protozoos cosmopolitas que habitan ambientes húmedos como el suelo y el agua, aunque también se pueden encontrar en el aire, vehículo que utilizan como medio de dispersión en sus estructuras de resistencia o quistes. A mediados del siglo pasado se descubrió que algunas amibas pequeñas del suelo y del agua, que hasta entonces se consideraban inocuas, podían invadir al hombre y a otros animales, llegando a causarles la muerte o daño cerebral irreversible. Debido a su habilidad para vivir como organismos de vida libre y como endoparásitos (Bonilla y Ramírez, 2004). Las AVL patógenas pueden atacar al sistema nervioso central produciendo dos tipos de lesiones características, infecciones oportunistas como Encefalitis amibiana granulomatosa (EAG) causada por Acanthamoeba spp, Balamuthia mandrillaris y Sappinia diploidea, aunque en el caso de esta última no se forman granulomas e infecciones como la Meningoencefalitis amibiana primaria (MAP) por Naegleria fowleri. Además, el género Acanthamoeba produce lesiones oculares como queratitis y úlceras corneales, así como lesiones primarias en piel (Schuster y Visvesvara, 2004). Marco Teórico. Amibas de vida libre (AVL). Las AVL presentan una distribución cosmopolita y son inocuas en la naturaleza. En los ecosistemas acuáticos desempeñan un papel muy importante en el mantenimiento del flujo de energía y el reciclado de los nutrimentos. Su eficiencia en el uso de los recursos los convierte en un enlace fundamental entre los organismos desintegradores y aquéllos pertenecientes a niveles tróficos superiores. Algunas amibas son patógenas por sí mismas pero también pueden actuar como vectores de bacterias patógenas como Legionella pneumophila y Vibrio spp (Bonilla y Ramírez, 2004). Las AVL patógenas son más frecuentes en cuerpos de agua con temperatura por arriba de los 25º C y aguas naturales de los trópicos y subtrópicos. Su hábitat principal es el suelo y desde ahí pueden llegar a los cuerpos de agua arrastradas por escurrimientos o a Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/)http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 6 | P á g i n a través del aire, se encuentran en mayor proporción en la microcapa superficial, debido a la abundancia de nutrimentos y al establecimiento de quistes aéreos, y se encuentran en menor proporción en los sedimentos (Bonilla y Ramírez, 2004). Las AVL que pertenecen a los géneros Naegleria, Acanthamoeba y Balamuthia son protozoarios patógenos oportunistas que se ubican más comúnmente en la naturaleza. Estas amibas se encuentran en muestras de aire, agua y suelo (Martínez y Visvesvara, 1997). Entre los muchos géneros de Amibas de Vida Libre que existen en la naturaleza solo cuatro se encuentran asociados con enfermedades humanas: Acanthamoeba spp., Balamuthia mandrillaris, Naegleria fowleri y Sappinia diploidea (Schuster y Visvesvara, 2007). Acanthamoeba ssp., y B. mandrillaris son patógenos oportunistas causantes de infecciones en el sistema nervioso central, pulmones, fosas nasales y en humanos inmunosuprimidos. Balamuthia es también asociada a enfermedades en niños inmunocompetentes y Acanthamoeba spp., causante de una infección en los ojos denominada queratitis, principalmente en usuarios de lentes de contacto. De más de 30 especies de Naegleria solo una especie, N. fowleri, causa una aguda y fulminante meningoencefalitis en niños y adultos jóvenes. Solo se conoce de un caso de encefalitis por Sappinia diploidea, por tanto las generalizaciones acerca de este organismo como un agente causante de enfermedades es prematura (Schuster y Visvesvara, 2007). Lago de Xochimilco. El lago de Xochimilco, ubicado en la delegación Xochimilco en el Distrito Federal, representa una de las pocas regiones naturales con las que aún cuenta la Ciudad de México. Sus áreas forestales, agrícolas y cuerpos de agua, son generadores de oxígeno, humedad y alimento, además de favorecer la recarga del acuífero y ser refugio de especies silvestres endémicas y migratorias (UNESCO, 2005). Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 7 | P á g i n a Es uno de los lugares más visitados de la ciudad de México por el turismo nacional e internacional. Entre sus principales atractivos turísticos se encuentran los canales del lago donde se puede navegar en embarcaciones llamadas trajineras, su comida y artesanías típicas que se venden en los alrededores de los embarcaderos. Hoy se conservan aun numerosos canales y el parque ecológico Xochimilco (UNESCO, 2005). El lago de Xochimilco es uno de los cinco lagos que conforman la cuenca lacustre del valle de México, en el centro de la República Mexicana. Aunque en la actualidad se encuentra reducido a unos pocos canales, su superficie abarcaba una parte importante de lo que hoy son las delegaciones Iztapalapa y Coyoacán. En el pasado se alimentaba de las aguas de numerosos manantiales que bajaban de la sierra de Ajusco-Chichinauhtzin y el volcán Teuhtli. Sin embargo, a partir del Porfiriato (principios del siglo XX), los manantiales fueron canalizados para abastecer de agua a la ciudad de México. Por esa misma época quedaron concluidas las obras del Gran Canal del desagüe, que terminaron por desecar extensas zonas de los vasos lacustres del centro de México, proceso del que no quedó exento el lago Xochimilco. También fue en este período cuando, para estimular el carácter turístico de Xochimilco se introdujeron especies vegetales y animales que pusieron en grave peligro la supervivencia de las especies nativas como el ajolote y el tule. El lago es único por sus características de ser poco profundo (menos de un metro en la mayor parte), está conectado por una red intricada de canales y tiene un gran valor histórico ya que ha sido habitado por poblaciones indígenas durante varios siglos. El uso que se le dio al agua desde nuestros antepasados fue agrícola y acuícola, en donde se desarrolló el sistema de cultivo conocido como chinampa, que se sigue empleando en la actualidad. Las chinampas consisten en una especie de islas artificiales construidas con estacas de ahuejotes y petate de tule, sobre los que se deposita. Ello les provee de una singular fertilidad que permitía la recolección de varias cosechas anuales. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 8 | P á g i n a El lago en la actualidad se encuentra reducido a canales que son alimentados con aguas tratadas del cerro de la Estrella. La flora y la fauna de Xochimilco son abundantes y variadas, en la superficie del agua existe una gran cantidad de flora acuática, algunas de estas plantas son el lirio acuático. Lirio acuático. Es una planta que pertenece a la familia de las Pontederiaceae, conocido también como Jacinto acuático, cuyo nombre científico es Eichhornia crassipes (Figura 1) Es propia de los países de climas cálidos y templados, es originaria de América del Sur e introducida a México a principios del siglo pasado (Salcedo, 1978). Su distribución en el país es sumamente amplia, ya que crece en una gran diversidad de hábitats (Novelo y Gallegos, 1988). Es una planta hidrófita flotante altamente adaptable a una amplia gama de condiciones ambientales y climáticas. Su tasa de reproducción es muy elevada, parece no tener depredadores naturales en México y numerosos intentos de controlarla han fracasado (Aguirre et al., 1989). Ecología El lirio acuático habita lagos, embalses, ríos, pantanos, canales, estanques y abrevaderos, prosperando de igual manera en todos ellos y principalmente en hábitats contaminados o considerados eutróficos, aunque también es capaz de sobrevivir en aguas oligotróficas por largos periodos, su tamaño se relaciona con el hábitat que ocupa (Aguirre et al., 1989). Es una planta perene, herbácea y libre flotante que llega a formar densos tapetes, frecuentemente se arraiga al sustrato, y exhibe una alta plasticidad morfológica en respuesta a diferentes condiciones de crecimiento. En estado adulto se constituye de raíces, rizomas, estolones, peciolos, hojas, inflorescencias y frutos. Se reproduce de forma asexual por medio de semillas) y sexualmente por estolones y regeneración, su ciclo vegetativo es de 65 a 70 días, su tasa de crecimiento es exponencial (Aguirre et al.1989; Salcedo, 1978). Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 9 | P á g i n a La presencia o ausencia del lirio está determinada por la temperatura, pH, humedad, salinidad, nitratos, nitritos, sulfatos, fosfatos y otras sustancias orgánicas e inorgánicas en el agua (Aguirre et al.1989). Morfología. Tamaño muy variable, normalmente alrededor de 30 cm (Figura 1). Puede formar matas flotantes grandes; Tallo reducido, estolonífero, aunque un tallo horizontal (rizoma) alargado conecta a diferentes individuos; sus hojas se hayan formando una roseta basal, los pecíolos largos y cilíndricos en las plantas fijas al sustrato (de 3 a 60 cm de largo), y cortos y globosos en las plantas flotantes, las láminas de las hojas casi circulares o más anchas que largas, de 2.5 a 16 cm de largo y 3 a 12 cm de ancho, ápice truncado, redondeado a ligeramente obtuso, base truncada a algo cordada; Inflorescencia Espiciforme, con 4 a 16 flores solitarias y alternar a lo largo del pedúnculo, sésiles, pedúnculo de 6 a 26 cm de largo, grueso, glabro a ligeramente pubescente; flores: Grandes (hasta de 5 cm de largo) de color lila, variando del azul a morado, rara vez blanca, con pelillos, con la base tubulosa y hacia el ápice dividida en 6 segmentos desiguales, 3 externos y 3 internos, uno de éstos más ancho y con una mancha amarilla; 6 estambres con pelos glandulares en los filamentos,3 de ellos más largos, las anteras aflechadas, de un tono azul; frutos y semillas. El fruto es una cápsula elíptica, de más o menos 1.5 cm de largo, con 3 ángulos. Las semillas numerosas, de poco más de 1 mm de largo, con 10 costillas longitudinales, de color negruzco; raíz fibrosas, comúnmente coloreadas, en forma de plumas (Guevara y Benítez, 2004) Daño-beneficio de la presencia del lirio acuático. Su presencia ha alcanzado proporciones de malezas que generan problemas como incremento en la evapotranspiración, interferencia en la navegación, obstrucción en el flujo de canales y ríos, entorpecimiento de sistemas hidroeléctricos y de irrigación, dificultad de pesca, azolvamiento de los cuerpos de agua y desarrollo de poblaciones animales vectores de enfermedades (Aguirre et al., 1989). Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 10 | P á g i n a La producción de biomasa del lirio es sumamente alta, llegando a ser hasta 10 veces más productivo que algunas leguminosas. Se puede aprovechar como alimento para organismos dulceacuícolas, forraje para ganado, ensilaje y materia orgánica para suelos, así como su empleo para la obtención de harina, obtención de pulpa para papel y gas natural (Aguirre et al., 1989). Se ha considerado como buen elemento para el tratamiento de aguas residuales por su alta capacidad de remoción de macro y micro nutrientes. Sin embargo forma, dada su alta tasa reproductiva tiende a formar una capa que impide la penetración de luz en el agua, reduciendo la actividad fotosintética de algas y bacterias. Se ha visto que es capaz de eliminar bacterias patógenas, disminuye los sólidos suspendidos volátiles aclarando el agua y puede absorber los detergentes. La capacidad de remoción depende directamente del área, tiempo de retención y profundidad del sistema por descontaminar. Es necesario cosechar continuamente la planta, de no hacerlo presentara zonas necróticas que en lugar de tratar el agua, la ensuciarían liberando los iones absorbidos (Aguirre et al., 1989). Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 11 | P á g i n a Figura 1. Aspecto general del Lirio acuático Eichhornia crassipes (Martius) Solms- Laubach Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 12 | P á g i n a Antecedentes. El sistema acuático de Xochimilco ha sido estudiado por varios años por investigadores de la UNAM. Sin embargo, de manera reciente investigadores de diferentes institutos, centros de investigación y facultades han comenzado a generar proyectos conjuntos para conocer mejor este sistema tan perturbado. Estos esfuerzos han sido observados por autoridades de la Delegación de Xochimilco y del Gobierno del Distrito Federal quienes han solicitado en varias ocasiones el apoyo de la UNAM para resolver problemas relacionados con el manejo de esta zona. A la fecha no existen estudios relacionados a la determinación de AVL en este sistema acuático Entre los estudios sobre la determinación de las AVL en medios acuáticos destacan los realizados por Ramírez y colaboradores (2005), quienes determinaron la presencia de AVL patógenas y bacterias indicadoras en un humedal de agua tratada de una casa habitación, en la cual aislaron 32 especies pertenecientes a 12 géneros, donde el género Acanthamoeba fue el más frecuente. Vargas (2005) realizó un estudio de detección de AVL potencialmente patógenas en el agua de los canales de riego en Mexicali, Baja California encontrando a Naegleria fowleri, A. castellanii, A. culberstoni y A. polyphaga, se detectaron en casi toda la zona con menor frecuencia en la zona de donde se alimentaba el canal de agua. Chiquillo (2004) realizó un estudio de detección de Gimnamebas en agua residual doméstica de un tanque anaerobio en Hidalgo donde identificó a 18 especies, distribuidas en 5 familias y 6 géneros, siendo Acantamoeba el género más abundante. En cuanto a parámetros fisicoquímicos se tuvo una correlación significativa directa entre el crecimiento de las Gimnamebas y el pH no así para la temperatura, oxígeno disuelto y conductividad. Gudiño (2003) realizó un estudio cuantitativo de AVL en un sistema de tratamiento de humedal artificial en Hidalgo, se encontró con 34 especies pertenecientes a 14 géneros en 8 familias, donde Acanthamoeba fue el género mas frecuente. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 13 | P á g i n a Bonilla y colaboradores (1993) realizaron una investigación de AVL patógenas y no patógenas en una planta de lodos activados, donde aislaron un total de 13 especies en 9 géneros encontrándose con 3 especies del género Acanthamoeba (A. castellanii, A. culberstoni y A. polyphaga) que resultaron ser patógenas en ratones con diferentes grados de virulencia Rivera y Calderón (1993), realizarón un estudio donde investigaron la presencia de las AVL patógenas y no patógenas en un sistema de tratamiento que utiliza el método de la zona de la raíz, donde se aislaron 13 especies en 9 géneros, algunas fueron Acanthamoeba astronyxis, A. polyphaga, A. rhysodes, Echinamoeba exundans y Mayorella. Área de Estudio. El lago de Xochimilco se localiza a una latitud de 19o 16` 30``, una longitud de 99o 08` 20`` y una altitud de 2260 msnm (Figura 2) (INEGI, 2005), puede clasificarse como un lago tropical, su temperatura superficial oscila entre los 20oC y 30oC. El área de los canales se localiza en la llamada zona de llanura, la cual se divide en tres zonas principales; Xochimilco, San Jerónimo Atlapulco y San Luis Tlaxialtemalco. Su importancia ecológica radica en sus 189 Km. de canales que constituyen un sistema que comunica y riega los 25km de chinampas (Sandoval, 2008). La zona recibe agua de lluvia, agua residual tratada de cuatro plantas de tratamiento operadas por el sistema de agua del Gobierno del Distrito Federal (Cerro de la Estrella y San Luís Tlaxialtemalco) y por la Delegación Xochimilco (Planta de Xochimilco, Planta de San Lorenzo Tezonco), así como una serie de descargas de aguas residuales de origen doméstico, pecuario e industrial (pequeñas industrias), las cuales permiten el mantenimiento de un complejo sistema de canales (UNESCO, 2005). Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 14 | P á g i n a Mapa del sitio. Figura 2. Localización de los sitios de muestreo, Club España (A), Laguna Chilac (B), canal (C). . Sitios de muestreo. Figura 3. Sitio A Club España. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 15 | P á g i n a Figura 4. Sitio B Laguna Chilac. Figura 5. Sitio C El Canal. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 16 | P á g i n a Justificación. El interés sobre la presencia de las AVL en cuerpos de agua natural, tratada o de rehusó se ha incrementado en los últimos años debido a la patogenicidad mortal en humanos de algunos de los miembros de este grupo de organismos, la mayor parte de los estudios han sido enfocados en la descripción de la acción patógena de las AVL en humanos y animales, mencionando solo aspectos muy generales en cuanto a su distribución en el ambiente y las condicionesambientales que las pueden afectar. Por lo que es necesario realizar estudios más específicos sobre la relación entre su presencia en el agua con las condiciones ambientales. En este sentido, el lago de Xochimilco representa un ecosistema propicio para estudiar la relación que guardan los parámetros fisicoquímicos del agua con las presencia de las amebas de vida libre, dado sus condiciones geográficas, las prácticas humanas como el comercio, agricultura, turismo y por ser un área importante de conservación ecológica del Distrito Federal. Más que una posibilidad de estudio, representa una obligación el mantenerlo libre de contaminación por los residuos sólidos, químicos o biológicos, provenientes de descargas de diversas fuentes, que altera el estado natural de este ecosistema y que lo convierten incluso en un foco de infección para los habitantes y turistas que visitan el lugar, de aquí la importancia de detectar la presencia de AVL en el sistema de raíz del lirio acuático, el cual tiene la capacidad de retener contaminantes y microorganismos. Objetivo general. Determinar la riqueza especifica de las amibas de vida libre en la raíz del lirio acuático del lago de Xochimilco. Objetivos específicos. Aislar las amibas de vida libre de la raíz de lirio. Identificar morfológicamente las amibas presentes en la raíz de lirio. Relacionar la presencia de las amibas con algunos parámetros fisicoquímicos del agua: temperatura, pH y oxígeno disuelto. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 17 | P á g i n a Material y Métodos. Trabajo de Campo. Se realizarón un total de 10 muestreos mensuales del lirio acuático en los canales del lago de Xochimilco, en tres sitios: Sitio A Club España (Figura 3); Sitio B Laguna Chilac (Figura 4); Sitio C Canal (Figura 5). De lirio acuático en los canales del lago de Xochimilco. Para la determinación de las amibas de vida libre, se colectaron ejemplares de lirio acuático de la zona y se colocaron en envases esterilizados, se transportaron al laboratorio de microbiología ambiental (UIICSE) a temperatura ambiente para evitar cambios en la estructura de las amibas ya que son muy sensibles a los cambios de temperatura. Determinación de parámetros Fisicoquímicos. En el sitio de muestreo se midieron los siguientes parámetros: pH (potenciómetro Oakton Water Proof pH test 1), Oxígeno Disuelto y Temperatura (Oakton DO100 Series). Trabajo de Laboratorio. Aislamiento y cultivo de AVL. De los ejemplares de lirio acuático colectados, se cortó en condiciones estériles aproximadamente 1 gr de raíz y se colocó en placas de medio Agar no Nutritivo con bacteria Enterobacter aerogenes (NNE) para el aislamiento de las amibas. Este procedimiento se realizó por triplicado. Las placas se incubaron a 30, 37 y 42 °C para favorecer el crecimiento de las amibas, se revisaron después de 3 días en el caso de las incubadas a 42 °C y después de ocho días las placas incubadas a 30 y 37 °C. La presencia de amibas de vida libre se determinó, usando un microscopio invertido marca Zeiss. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 18 | P á g i n a Identificación. La identificación de las amibas se realizó tomando en cuenta sus características morfológicas tanto de la forma trófica como quística, observando preparaciones en fresco al microscopio de contraste de fases a 400 y 1000 aumentos y siguiendo las claves taxonómicas de Page (1988). Análisis estadístico. Se utilizó el análisis de Coeficiente de Correlación Lineal Producto-Momento de Pearson para relacionar los parámetros fisicoquímicos (pH, Oxigeno Disuelto, y Temperatura °C) con la presencia de las amibas (Durán et al., 2003). El análisis de Coeficiente de Correlación Lineal Producto-Momento de Pearson (Cuadro 1) proporciona una medida de la asociación lineal entre las variables, los valores de la correlación están entre -1 y +1. Si las variables están perfectamente asociadas, entonces el coeficiente de correlación será de 1 ó -1, si por el contrario, las variables no están asociadas, entonces el coeficiente tendrá un valor cercano a cero (Durán et al., 2003). Cuadro 1. Valores considerados para el coeficiente de correlación. Valor absoluto de R Grado de Asociación 0.8-1.0 Fuerte 0.5-0.8 Moderada 0.2-0.5 Débil 0-0.2 Insignificante Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 19 | P á g i n a Resultados y Discusión. Riqueza especifica. En el cuadro 2 se muestran un total de 39 especies pertenecientes a 16 géneros de AVL aisladas de la zona de raíz del lirio acuático, en los tres sitios de muestreo durante los 10 meses. Cuadro 2. Riqueza especifica de amibas de vida libre aisladas de la raíz de lirio. GÉNERO ESPECIE GÉNERO ESPECIE Acanthamoeba griffini triangularis polyphaga quina astronyxis Platyamoeba placida stenopodia Cochliopodium minus actinophorum Mayorella penardi cantabrigiensis cultura Dactylamoeba stella Saccamoeba stagnicola limax wakulla Echinamoeba exundans Vexillifera bacillipedes granatiensis Naegleria sp Naegleria sp Paradermamoeba valamo Hartmannella vermiformis cantabrigiensis Vahlkampfia aberdonica avara Vannella platypodia cirrifera miroides lata simplex Polychaos timidum fasciculatum Thecamoeba corrugata quadrilineata similis striata sphaeronucleolus verrucosa Leptomyxa reticulata Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 20 | P á g i n a El número de géneros y especies encontrados fueron mayores que los reportados por Chiquillo (2004); Vargas 2005; Ramírez et al (2005), Gudiño (2003) y Rivera y Calderón (1993) en sistemas de aguas de tratamiento o agua residual tratada o agua de riego. De los 16 géneros encontrados 12 han sido reportados por los autores mencionados, no así los 4 géneros restantes (Cochliopodium, Paradermamoeba, Polychaos y Leptomyxa). Los géneros más diversos fueron Thecamoeba representado por 6 especies, Acanthamoeba y Vannella con 5 especies respectivamente, le sigue Saccamoeba y Mayorella con 3 especies; Cochliopodium, Polychaos, Vexillifera, Vahlkampfia, Platyamoeba con 2 espécies y Leptomyxa, Dactylamoeba, Paradermamoeba, Naegleria con una especie. La variedad de géneros y especies en el lirio puede deberse a que las características morfológicas de la raíz (Figura 1) proporcionan una gran superficie de contacto que la hace un excelente hábitat para el establecimiento de los microorganismos (Aguirre et al., 1989) como las AVL, estas se encuentran con regularidad flotando en la capa superior del agua y por lo general buscan una superficie a la cual adherirse, además de eso, les proporciona un medio rico en materia orgánica y bacterias de las cuales las amibas pueden alimentarse. De acuerdo con Chiquillo (2004) la cantidad de Gimnamebas está estrechamente relacionada con la cantidad de materia orgánica. Cabe mencionar que 2 especies de Acanthamoeba, A polyphaga y A. astronyxis, son reconocidas por su patogenicidad en ratones (Schuster y Visvesvara 2004; Schuster et al., 2007; Bonilla y Ramírez 1993). En cuanto a la especie de Naegleria encontrada (se observó también la fase flagelada), probablemente pertenezca a la especie N. gruberi, por la temperatura de crecimiento (30°C) y por las características de su quiste; esta especie, a la fecha no se ha reportadocomo patógena por lo que no representa peligro para los usuarios del lago. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 21 | P á g i n a Una cepa de Hartmannella que fue aislada por Vargas (2005) en canales de riego en Baja California, fue reportada como patógena en ratones por otro lado la especie H. vermiformis estuvo asociada con un caso de Meningoencefalitis en humanos, pero no se pudo confirmar que fuera la responsable de la enfermedad (Centeno et al., 1996). Hartmannella, Vannella y Vahlkampfia se han aislado de lentes de contacto y raspados corneales de pacientes con queratitis, pero tampoco se ha comprobado su papel como agente etiológico de la queratitis (Aitken et al., 1996; Centeno et al., 1996; Dua et al., 1998; Inoue et al., 1998; Michel et al., 2000; Lorenzo et al., 2007; Scheid, 2007). Presencia de AVL. En el cuadro 3, se presentan las AVL en los 10 meses, y la relación que guardan con la temperatura y sitio, se puede observar que a 30 y 370C en los tres sitios su crecimiento fue homogéneo en todos los meses esto puede deberse a que estas temperaturas se encuentran dentro del intervalo óptimo para su crecimiento. Las amibas que predominaron a estas temperaturas pertenecen a los géneros Naegleria. Dactylamoeba, Thecamoeba y Vannella. Esto es interesante porque la temperatura ambiente del lago estuvo en un intervalo de 13 a 19°C, lo que sugiere que a pesar de esto las amibas tiene la capacidad para crecer a otras temperaturas diferentes a las de su ambiente, lo que le da la ventaja de poder adaptarse a ambientes a diferentes temperaturas. A una temperatura de 420C se obtuvo el crecimiento de los géneros Naegleria sp, Hartmannella y Acanthamoeba, solo para los últimos 5 meses del estudio, en los tres sitios. Bonilla et al., (2004), reportó que las AVL con potencial patógeno de los géneros Acanthamoeba y Naegleria pueden crecer a esta temperatura. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 22 | P á g i n a Cuadro 3. Presencia de las AVL a cada temperatura de incubación. Frecuencia de AVL por género. En cuanto a la frecuencia, en el gráfico 1 se muestra el total de los géneros de AVL en todo el estudio, donde se observa que los géneros Vannella (20%), Naegleria, (18%) y Thecamoeba (16%) tuvieron las frecuencias más altas, los demás géneros tuvieron un porcentaje por debajo del 8%. En el caso de Acanthamoeba se presentó con 6% de aparición, a pesar de que se ha reportado como una de las amibas más frecuentes en el ambiente (Bonilla et al., 2004). El género Vannella se ha reportado como poco frecuente en cuerpos de agua que reciben descargas de diferentes contaminantes, probablemente porque las amibas de este género no presentan una estructura de resistencia o quiste, no pudiendo soportar bajas concentraciones de oxígeno y altas concentraciones de materia orgánica presentes en estos ambientes (Page, 1988). Sin embargo, en este estudio presento la mayor frecuencia de aparición, esto se pudo deber a que la raíz del lirio sirvió de refugio a estas amibas y favoreció su proliferación. Sitios Sitios Meses °C A B C Meses °C A B C Nov-08 30 ✚ ✚ ✚ Abr-09 30 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 42 ▬ ▬ ▬ 42 ✚ ▬ ✚ Dic-08 30 ✚ ✚ ✚ May-09 30 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 42 ▬ ▬ ▬ 42 ▬ ▬ ✚ Ene-09 30 ✚ ✚ ✚ Jun-09 30 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 42 ▬ ▬ ▬ 42 ✚ ✚ ▬ Feb-09 30 ✚ ✚ ✚ Jul-09 30 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 42 ▬ ▬ ▬ 42 ✚ ▬ ✚ Mar-09 30 ✚ ✚ ✚ Ago-09 30 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 37 ✚ ✚ ✚ 42 ▬ ▬ ▬ 42 ✚ ✚ ✚ Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 23 | P á g i n a El género Naegleria se encuentra regularmente dentro de sistemas de aguas de desecho, canales de riego y de lagos artificiales (Bonilla et al., 2004), y aunque se sabe que es mucho más sensible que otros géneros a condiciones extremas (Gudiño, 2003) en este trabajo fue uno de los más abundantes, seguramente debido a la disponibilidad de alimento como las bacterias alojadas en los rizomas del lirio. La frecuencia del género Thecamoeba en este estudio (la tercera más alta), es interesante, porque no se había reportado en cuerpos de agua con aporte de deshechos de tipo residual, como es el caso del lago de Xochimilco; esto puede deberse al refugio que le proporciona la raíz de lirio y la disponibilidad de alimento, como en el caso de Vannella y Naegleria. Gráfico 1. Frecuencia total de amibas de vida libre por género Frecuencia por especie. En el cuadro 4 se muestra la frecuencia total por especie, en donde se observa que Naegleria sp. (18%), V. platypodia (9%) y T. striata (8%) fueron las más frecuentes. Como ya se ha mencionado, Naegleria sp., es de las AVL más comunes en aguas con Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 24 | P á g i n a descargas de tipo residual, V. platypodia y T. striata son comunes en medios acuáticos, aunque poco frecuentes, sin embargo en este estudio resultaron con una frecuencia alta. Bonilla y Ramírez (1993) mencionan que la variedad de las amibas en medios acuáticos depende del tipo de deshechos contenidos en ella, los deshechos que recibe el lago en su mayoría son de origen fecal, trayendo consigo una variedad de bacterias y otro tipo de microorganismos que pueden quedar atrapados en las raíces de los lirios, proporcionando alimento y favoreciendo la proliferación de estas amibas. Cuadro 4. Frecuencia de las especies de amibas de vida libre aisladas. ESPECIE %Frec. ESPECIE % Frec. Naegleria sp. 18.4 A. quina 1.1 V. platypodia 8.9 P. fasciculatum 1.1 T. striata 7.8 E. exundans 0.8 D. stella 6.1 M. penardi 0.8 H. vermiformis 5.6 P. timidum 0.8 T. similis 5.6 T. quadrinelata 0.8 V. lata 5.3 M. cantabrigiensis 0.5 V. granatensis 4.4 V. miroides 0.5 P. placida 3.6 A. astronyxis 0.2 S. stagnicola 3.6 A. triangularis 0.2 V. simplex 3.6 C. actinophorum 0.2 A. polyphaga 2.5 C. minus 0.2 V. bacillipedes 2.5 L. reticulata 0.2 H. cantabrigiensis 2.2 M. cultura 0.2 S. limax 2.2 P. stenopodia 0.2 V. avara 1.6 S. wakulla 0.2 A. griffini 1.4 T. sphaeronucleolus 0.2 P. valamo 1.4 T. verrucosa 0.2 T. corrugata 1.4 V. aberdonica 0.2 V. cirrifera 1.4 Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 25 | P á g i n a Distribución Espacial Total. En el gráfico 2 se muestra que la diferencia de aislamientos entre los sitios fue variable, el sitio A (Club España) tuvo el mayor número de aislamientos con 35, le sigue el B (Laguna Chilac) con 27 aislamientos y por último el C (Canal) con 24 aislamientos. La especie que resultó ser la más frecuente en los tres sitios de muestreo fue Naegleria sp. (Cuadro 4). El mayor número de aislamientos obtenidos en el sitio A, probablemente se deba a que en general, en ese sitio la concentración de oxígeno disuelto fue mayor que en los otros (Anexo 1). Gráfico 2. Distribución espacial total de AVL en los tres sitios. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 26 | P á g i n a Distribución temporal total. En el gráfico 3 se muestra que los meses de Noviembre y Diciembre fueron los más bajos en aislamientos, en cambio en Eneroy Febrero aunque son los meses fríos se observó un número considerable de aislamientos, de Marzo a Abril se observo una disminución y en los meses cálidos de Mayo a Agosto se observo un aumentó, por lo tanto podría decirse que no se presento una variación muy grande entre el número de aislamientos de cada mes, salvo los primeros meses, aun así puede verse una diferencia entre los meses fríos y los cálidos. La diferencia en el número de aislamientos en los meses fríos (15oC) y cálidos (19oC) en este estudio concuerda con trabajos como el de Gudiño (2003) que menciona a la temperatura como un factor determinante para la presencia de las amibas. Bonilla y colaboradores (2000), observaron en un sistema acuático que las AVL se presentan en mayor medida en la época de secas que en la época de lluvias. Anderson y Rogerson (1995) reportaron picos de abundancia en Mayo y Junio, siendo los meses más cálidos, concordando con este estudio, ya que se tuvo un aumento en el número de aislamientos a partir de esos meses, también establecen que la abundancia de las amibas están relacionadas directamente con la temperatura del agua de ahí que se observe una variación estacional. En los países templados y fríos las amibas proliferan durante los meses más cálidos lo que lleva aun patrón estacional, en cambio los países tropicales y subtropicales no ocurre así, dado que las condiciones son favorables durante casi todo el año como ocurre en la mayor parte de México (Bonilla y Ramírez, 1995), podría decirse que esto explica la cantidad considerable de aislamientos en Enero y Febrero, a pesar de que fueron los meses con temperaturas bajas. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 27 | P á g i n a Gráfico 3. Distribución temporal total de AVL. Distribución estacional por sitio de muestreo. En el sitio A (Gráfico 4), se presentó una variación en el número de aislamientos a lo largo del tiempo que se llevo el estudio, sobresaliendo el mes de Enero que fue el que presento el mayor número de aislamientos, a pesar que este es un mes donde las temperaturas son frías, lo que no fue impedimento para el desarrollo de las AVL. Esto pudo deberse a las variaciones de temperatura en el sitio y a los microambientes proporcionados por las raíces del lirio acuático. En el sitio B (Gráfico 5), no se observa una diferencia estacional tan marcada. En el sitio C (Gráfico 6), los aislamientos van en aumento durante los primeros meses, después disminuye en los meses intermedios y en los últimos cuatro meses aumentan, en este sitio igualmente se presentaron variaciones en la temperatura del agua. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 28 | P á g i n a Gráfico 4. Distribución temporal del sitio Club España (A). Gráfico 5. Distribución temporal del sitio Laguna Chilac (B). Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 29 | P á g i n a Gráfico 6. Distribución temporal del sitio el Canal (C). Distribución estacional de las especies más frecuente. En cuanto a la distribución estacional de las especies más frecuentes, se tiene que la presencia de Naegleria sp fue constante durante todo el muestreo (Gráfico 7), teniendo un mayor número de aislamientos en los últimos 5 meses. Se sabe que esta amiba requiere de un ambiente acuático cálido y bacterias de las cuales alimentarse (Visvesvara, 2004), sin embargo, las temperaturas del agua no rebasaron los 20oC, aun así esto no fue un impedimento para su aislamiento, esto pudo deberse a que su quiste le ayuda a soportar temperaturas bajas. La siguiente fue Vannella platypodia (Gráfico 8), su aislamiento a lo largo de los meses fue variable; se presentó en todos los meses, exceptuando Noviembre y en mayor medida en los meses fríos. Es importante mencionar que este es uno de los géneros que no presenta quiste, sin embargo fue de las más frecuentes. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 30 | P á g i n a Gráfico 7. Distribución espacial de Naegleria sp. Gráfico 8. Distribución espacial de V. platypodia. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 31 | P á g i n a Parámetros fisicoquímicos. Oxígeno disuelto. En el gráfico 9 se muestran los promedios mensuales de oxígeno disuelto expresados en mg/L, con valores que van de 5.2 a 13.2 mg/L. Los valores variaron de mes en mes, sin embargo se mantuvieron en niveles altos debido a que la mayor parte del oxígeno lacustre y de otros cuerpos lóticos, como el lago de Xochimilco, proviene de la actividad fotosintética, entre otros factores bióticos (actividad respiratoria de plantas, animales, microorganismos y materia orgánica oxidable) y abióticos (Luz, temperatura, minerales, morfología del fondo del lago). El contenido de oxígeno en el agua es de importancia fundamental en la distribución de las AVL, éste determina la ausencia o presencia de estos organismos (Bonilla et al., 2005) y dado a que los niveles de este elemento fueron altos se puede explicar la abundancia de las amibas, ya que se ha mencionado que algunos protozoos resisten niveles de 10 ppm de oxígeno como Naegleria sp (Sigee, 2006), la cual no es muy resistente a niveles bajos de oxígeno (Gudiño, 2003). Gráfico 9. Valores promedio de oxígeno disuelto registrados en el período de estudio. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 32 | P á g i n a Temperatura. En promedio la temperatura vario a lo largo de los meses, no hubo una diferenciación estacional marcada, la más baja fue de 13oC (Enero) y la más alta de 19oC (Abril) (Gráfico 10). Las temperaturas en este estudio se encontraron por debajo del rango óptimo para el desarrollo de las AVL patógenas (arriba de los 30°C), lo que tal vez fue un factor por el cual no se encontraron en los sitios de estudió. Ya que se ha reportado que la temperatura del agua incide de manera directa en la presencia, abundancia y distribución de las AVL patógenas en cuerpos de agua naturales (Vargas 2005; Gudiño 2003; Bonilla et al., 2000). Al contario de las AVL no patógenas, que fueron las que predominaron en el lago, porque pueden encontrarse a temperaturas menores, como las registradas en este estudio. Gráfico 10. Valores promedio de temperaturas registradas en el período de estudio. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 33 | P á g i n a pH. El pH fue alcalino con rangos de 7.7 a 9.1 (Gráfico 11). Los intervalos de tolerancia de pH para las AVL fluctúan de 4.6 a 9.5 (Bonilla y Ramírez, 1993) por lo que no fue un factor limitante para el desarrollo de las amibas. Bonilla y colaboradores (2000) mencionan que los géneros Acanthamoeba y Naegleria toleran un amplio rango de pH por lo que no es un factor que limite su crecimiento. Gráfico 11. Valores promedio de pH registrados en el período de estudio. Promedio de los parámetros por sitio de muestreo. En los gráficos12 a 14 se muestra el promedio de cada parámetro por sitio de muestreo. La concentración de oxígeno fue alta y no varió mucho entre el sitio A (10.265 mg/L) y B (10.771 mg/L), el sitio C (7.158 mg/L) tuvo la menor concentración de los tres, pero aun así presento un valor aceptable para la presencia de las AVL (Grafico 12). La temperatura fue muy parecida en los tres sitios, la variación fue solo de 1oC entre ellos (Gráfico 13). El pH se mantuvo con un valor de 8 en los tres sitios (Gráfico 14). Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 34 | P á g i n a Gráfico 12. Valores promedio de oxígeno disuelto registrados en los tres sitios de muestreo. Gráfico 13. Valores promedio de temperaturas registradas en los tres sitios de muestreo. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 35 | P á g i n a Gráfico 14. Valores promedio de pH registrados en los tres sitios de muestreo. Correlación de parámetros fisicoquímicos-presencia de amibas. Cuadro 5. Análisis del Coeficiente de Correlación Lineal Producto-Momento de Pearson. Sitio O2 mg/L pH oC Club España (A) -0,71518909 0,15278883 -0,0842855 Laguna Chilac (B) 0,01501552 0,30163882 0,12611481 El canal (C) -0,66831274 -0,26157992 0,08522915 En general, los valores resultantes de la comparación del número de aislamientos amibianos con las variables fisicoquímicas estuvieron por debajo 0.8 y de acuerdo con el análisis de Coeficiente de Correlación Lineal Producto-Momento de Pearson, no hay relación entre dichas variables y las AVL, solamente en el caso del oxígeno disuelto en los sitios A (Club España) y C (Canal) se observó una relación inversa moderada (Cuadro 5). Sin embargo, hay que tomar con cautela este resultado, porque esto no concuerda con la fisiología de las AVL, ya que estas amibas son aerobias y se ha reportado que concentraciones por arriba de 2 mg/L de oxigeno favorecen su presencia y proliferación. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 36 | P á g i n a Conclusiones. . Se obtuvieron un total de 39 especies pertenecientes a 16 géneros de AVL. Los géneros más diversos fueron Thecamoeba representado por 6 especies, Acanthamoeba y Vannella con 5 especies. Se identificó a dos especies de Acanthamoeba, reconocidas por su patogenicidad (A. polyphaga y A. astronyxis). Los géneros Vannella, Naegleria sp. y Thecamoeba fueron los más frecuentes, siendo las especies Naegleria sp, V. platypodia y T. striata las que más se presentaron. El sitio A (Club España) tuvo el mayor número de aislamientos, debido a que las concentraciones de oxígeno fueron mayores en ese sitio. Naegleria sp. resultó ser la especie más frecuente en los tres sitios de muestreo. Se presentó una ligera diferencia en el número de aislamientos en los meses fríos y cálidos. No existió relación entre el número de aislamientos amibianos y cada uno de los parámetros fisicoquímicos, lo que sugiere que son diversos los factores que pueden influir en la presencia y distribución de las amibas. . La raíz del lirio fue un excelente hábitat para las Amibas de Vida Libre, por su estructura fibrosa en forma de pluma, que proporciono una gran superficie de contacto para el establecimiento de estos protozoos. Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 37 | P á g i n a Referencias. Aguirre, M.J., Díaz, Z.G., Olvera, V.V. y Romero. L.F. (1989). Control y aprovechamiento del lirio acuático en México. Instituto Mexicano de Tecnología del Agua. CONAGUA. 148 pp. Aitken, D., Hay, J., Kinnear, F.B., Kirkness, C.M., Lee, W.R. y Seal, D.V. (1996). Amebic keratitis in a wearer of disposable contact lenses due to a mixed Vahlkampfia and Hartmannella infection. Ophthalmology. 103: 485-494. 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Valores de Oxígeno disuelto por sitio en cada mes O2 mg/L Club España (A) Laguna Chilac (B) Canal (C) Noviembre 13.17 14.4 9.88 12.48 Diciembre 12.43 19.48 7.93 13.28 Enero 6.55 9.16 7.16 7.62 Febrero 12.39 12.21 7.08 10.56 Marzo 9.96 11.86 8.89 10.23 Abril 14.37 8.14 8.25 10.25 Mayo 6.48 9.8 2.66 6.31 Junio 6.57 4.41 4.65 5.21 Julio 11.63 11.32 8.83 10.59 Agosto 9.1 6.93 6.25 7.42 10.265 10.771 7.158 Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ 42 | P á g i n a Cuadro 8. Valores de Temperatura por sitio en cada mes. oC Club España (A) Laguna Chilac (B) Canal (C) Noviembre 15.9 17.4 17.6 16.9 Enero 12.4 11.6 16.4 13.4 Febrero 16.7 20.8 17.1 18.2 Marzo 13 14 15 14 Abril 17.4 21.2 19.1 19.2 Mayo 16.1 17.4 17.2 16.9 Junio 18.4 18.9 19.3 18.8 Julio 18.6 18.7 19.1 18.8 Agosto 18 18.2 17.9 18 16.43 17.29 17.44 Cuadro 9. Valores de pH por sitio en cada mes. pH Club España (A) Laguna Chilac (B) El Canal (C) Noviembre 7.3 7.6 8.4 7.7 Diciembre 7.6 7.8 8.1 7.8 Enero 8.6 8.9 9.5 9 Febrero 16.7 20.8 17.1 18.2 Marzo 8.6 8.9 9.5 9 Abril 8.9 9.2 9.4 9.1 Mayo 8 8.2 8.1 8.1 Junio 7.8 8 7.6 7.8 Julio 8.3 8.4 8.4 8.3 Agosto 8.1 8.3 7.8 8 8.99 9.61 9.39 Print to PDF without this message by purchasing novaPDF (http://www.novapdf.com/) http://www.novapdf.com/ http://www.novapdf.com/ Portada Contenido Resumen Introducción Marco Teórico Antecedentes Área de Estudio Justificación Objetivo General Objetivos Específicos Material y Métodos Resultados y Discusión Conclusiones Referencias Anexo