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MANUAL DE REFERENCIA De ELAsoRACION De DERIVADOS LÁCTEOS 3.1 Microorganismos La leche es el medio ideal para los microórganismos porque contiene todos los nutrientes necesarios para su crecimient. Le Microbiologia (del griego mikros,pequeñio; bios Vida ylogos, tratado es la ciencia que estudia los organismos de muy pequenas dimensiones para poder ser observados :: a simple vista y por ello se denominan microorganismos. Los microorganismos son seres muy pequeños ( de apenas de milimetros) que no se pueden observar a simple vista y solo se ven al microscopio. La microbiología es la ciencia que estudia las leyes que regulan la vida y la reproducción de los microorganismos, así como las alteraciones que estos provocan en los animales, las plantas y en la naturaleza inanimada. Por tanto en términos generales, dentro del amplio dominio de la microbiología se incluyen todos los organismos con un diámetro de 1mm o inferior. Este estudio comprende el conocimiento de ta forma, estructura, reproducción, fisiología, el metabolismo y la identificación de los microorganismos; trata por tanto de la distribución de estos en la naturaleza, las relaciones entre ellos y con los demás seres vivos, los efectos beneficiosos y perjudiciales para el hombre, así como las transformaciones fisicas y quimicas que ejercen en el medio ambiente. El tipo de microorganismos que existen son: Bacterias Levaduras Mohos Virus Se encuentran presentes en el aire, agqua, suelo, plantas, animales, etc., Su desarrollo, crecimiento y reproducción dependen de muchos tactores, Como son la posibilidad de encontrar un medio que les proporcione los nutrientes necesarios, temperaturas adecuadas y humedad suficiente. 47 MANUAL Dr RsrereNOA DE ELARORACGION Dr DERVADOS LÁGEOS LAS BACTERIAS SE ENCUENTRANEN TODA LA TIERRA 5ON MUY FRECUENTES EN EL AGUA; LAS LEVADURAS SON POCO COMUNES EN MEDIOS ACUOSO5, ESTANDo PRESENTES EN EL SUELO, SOBRE LA CUBIERTA DE LOS FRUTOS HOJAS, ETC. 3.1.2 Bacterías asbacterias son seres mictoscopidos unicelulares de 0,4 a 30 micras de tamane, son de diversas tormas y se reproducen por simple. división. Se necesita la ayuda del microscopio con unos 1000 aumentos o más para poderlas contemplar, además de proceder previamente a su coloración. Las bacterias pueden presentar distintas formas, tres son las más comunes Redondos Bastoncitos Espiral Según su forma exterior (fig 10) las bacterias se dividen en: 8c0 00 con endoaporassplococos micrococo3 staliococos ptooOcos con lagalos Fig. 10 Diversas formas y agrupaciones de bacterias 48 MANUALDe REFeRENCIA De EARORAOÓN DE DERivADOS LÁtT 6Os Cocos, que son bacterias de forma esferica Bacilos, son bacterias de forma alargada, variables en longitud y espesor, según las especies. Espirales, que son bacterias que adquieren la forma espiral, más o menos pronunciada, según las esperies,también varía el espesor y longitud de la espiral. Los cocos son mas pequeños, con una dimensión de 0,5 a 2 micras, mientras que los bacilos y bacterias espirales alcanzan de 2 a 300 micras. Las bacterias pueden ir provistas de flagelos que le proporcionan movilidad en los medios líquidos, estos flagelos son parecidos a pelos Cuyo número y iongitud dependen del número de bacterias. Reproducción de las bacterías La reproducción de las bacterias es asexual, por simple división. En general se reproduce por alargamiento de la célula con división del núcleo y del citoplasma, apareciendo una membrana de separación. El ritmo de reproducción suele ser una división cada veinte a treinta minutos, lo que quiere decir que en unas once horas podemos tener más de 10 millones de células a partir de una sola. Numaro de bacterias (og Tiem po b Fig. 11 Curva de desarrollo y muerte de las bacterías Este ritmo de reproducción depende de muchos factores como ser: dispon ibilidad de nutrientes, concentración de agua presente, productos tóxicos procedentes del propio metabolismo de las bacterias, temperatura del ambiente, aire, ph del medio y concentración de sales del medio. 49 MANUAL Ds RtrexeNCA De EtABORAGOw De DeVAoos LAcTEDS Cuando las condiciones del medio son adversas (sequedad, falta de oxigeno, etc.), algunas bacterias tienen la capacidad de formar esporas. Las esporas tienen la capacidad de sobrevivir mucho0s años en ambiente seco, con el metabolismo totalmente detenido. Cuando las condiciones vuelven a ser favorables se desarrollar dando lugar a la formación de bacterias. En cualquier caso es preciso puntualizar que la formación de esporas no es una formna de reproducción sino es la de resistir condiciones adversas; además no todos los tipos tienen la posibilidad de formar esporas. Las esporas son mas resistentes que las bacterias al calor, para destruirlas es necesario subir la temperatura del medio hasta 120°C y mantenerla durante 20 minutos. La fig.11 nos presenta la curva tipica de crecimiento de las bacterias, que se divide en las siguientes etapas: a) Aclimatación al medio b) Crecimiento logaritmico c) Fase estacionaria d) Fase de muerte a) Durante esta fase las bacterias deben adaptarse al nuevo medio; esto ocurre cuando se prepara un fermento nuevo por primera vez. El aumento de las bacterias es lento. Durante esta primera fase la bacteria debe aclimatarse al medio; la duración de esta fase depende de la composición del medio y lo favorable que sea este para la bacteria (temperatura, nutrientes, humedad ett.), si las condiciones son adecuadas el tiempo de aclimatación es minimo o casi nulo. b) La segunda fase corresponde a la de crecimiento rápido (logaritmico), ya que el medio es el apropiado. En el caso del fermento anterior significa que las bacterias se han adaptado a la leche, consumen lactosa y producen ácido láctico, la población crece a gran velocidad, la leche se Coagula. 50 MANIIAL De Rereaane Dr lanoRAIÓN Dr DamiVAOos LACTHOs c) Las bacterias se siguen reproduciendo pero una cantidad similar muere, lo que se puede observar en la curva donde se ve una linea casi horirontal, en el ejemplo del ferrnento significa que el fermento se torna ácido y las bacterias comienzan a morir. d) Los nutrientes empiezan a faltary los deshechos metabólicos de las bacterias alcanzan niveles inhibitorios para las mismas, en nuestro ejemplo del fermento tenemos que falta de lactosa y la acidez excesiva produce la muerte de las bacterias. EL RITMO DE REPRODUCCIÓN DE LAS BACTERIAS SUELE SER UNA DIVISION CADA VEINTE A TREINTA MINUTOS, LO QUE QUIERE DECIR QUE EN UNAS ONCE HORAS PODEMOS TENER MÁS DE 10 MILLONE5 DE CELULAS A PARTIR DE UNA SOLA. Factores externos que condicionan la vida de las bacterías Existen ciertos factores externos del medio que las rodea que las bacterias requieren para poder desarrollarse adecuadamente, dentro de estos tenemos Energía, que la sacan de azúcares como la glucosa, que toman de materias orgánicas descompuestas solubles en agua. También necesitan proteinas y sales para formar su propia estructura orgánica. La segunda condición para el desarrollo de las bacterias es la suficiente humedad que sirve de vehiculo para sus movimientos metabólicos, si falta agua las bacterias mueren inmediatamente o forman esporas las que tienen esa posibilidad. De acuerdo a la temperatura las bacterias pueden clasificarse en: Termófilas que se desarrollan a temperaturas entre 45 55°C. Mesófilas cuya temperatura óptima de desarrollo está entre 20 a 44 °C. Psicotrofas, que se desarrollan a una temperatura inferior a 7°C 51 MANUAL DE REFERENCIA DE ElaoRAcKON Dr DEAIVAD0S LACTEOS Otro de los factores importantes en el desarrollo de las bacterias es el oxígeno, la mayoría de las bacterias requieren de oxigeno para su desarrollo, a este tipo de bacterias se las denomina aeróbicas. Otras bacterias no requieren oxígeno para su desarollo a estas se las denomina anaeróbicas,para las cuales el oxigeno viene a ser un veneno. Un tercer grupo de bacterias esta constituida por las bacterias anaerobias facultativas que aunque normalmente necesitan oxígeno, cuando este falta pueden adaptarse a esta circunstancia El pH del medio es otro factor limitante para su desarrollo siendo para la mayoria de las bacterias 7 el pH óptimo, aunque cste depende de las especies. Bacterias más comunes en la leche y en los productos lácteos Bacterias lácticas Son muy abundantes en la naturaleza y en los alimentos (carnes, vino helados, leche, quesos, embutidos, etc.). Se les 1lama así porque entre sus productos metabólicos figura el ácido láctico; toman los azúcares de los alimentos y los transforman en: Acido láctico y otros ácidos (acético, por ejemplo). Hidrógeno, Anhídrido carbónico Energía. Son tanto bacilos como cocos, pero no tienen la propiedad de formar esporas. Son anaerobias facultativas y son destruidas por el calor a una temperatura de 72 a 75° C durante quince a veinte segundos. Entre las más importantes podemos destacar: Streptococus thermophilus y Lactobacillus bulgaricus, que son utilizados en combinación para la elaboración de yogurt a partir de la leche a base de añadirle cultivos de estos microorganismos a una temperatura de 43- 45° C, que es mantenida de tres a cinco horas, alcanzándose un pH final de 4,5. Estos microorganismos transforman la lactosa o azúcar de la leche en ácido láctico. 52 MANUAL De RveENCIA De ELABORACON De DERIvADOs LACTEOS Streptococus diacetilactis y Leuconostoc cremoris, que se utilizan en la elaboración del queso. Al transformar la lactosa en ácido láctico, diacetilo y anhidrido carbónico, dan lugar a un sabor especial y si ef CO, qucda ocluido en la masa se forman los típicos agujeros u ojos del queso. Streptococcus agalactiae, que produce la mastitis de 1as vacas. Otras bacterias lácticas son Lactococo lactis, Lactobacillus cremoris, L. casei, etc. ES NECESARIO QUE APRENDA LOS NOMBRES DE LAS BACTERIAS QUE LE INTERESAN PARA COMPRAR LOS CULTIVOS QUE NECESITA EN LA FABRICACON DE QUESO. Bacterías coliformes Las Bacterias Coliformes son bacilos de pequeña longitud anaerobios facultativos que se encuentran presentes en el itestino, astiércol suelo, aguas ecales plantascontaminadas etcy pueden Contaminar elqueso y todos los productos lacteos, 5u temperatura óptima de desarrollo es 37° C y transforman los azúcares en ácido láctico, anhidrido carbónico e hidrógeno, desprendiendo un olor y sabor desagradable. El más conocido de los microorganismos coliformes es la Escherichia coli y su presencia en los alimentos indica falta de higiene. Por ello, en los sistemas de limpieza de equipos, utensilios, suelos y demásS instalaciones, en las industrias lácteas se toma como prueba definitiva la presencia o ausencia de coli. 53 MANUAL De REPERENCa De ElaBoRACIÓN DE DsRVADos LACTLOS Bacterias Butiricas Son muy corrientes en la naturaleza, presentándose en suelos, plantas, estiercol, etc. Las bacterias Butiricas son bacilos capaces de formar esporas en condiciones adversas. Son anaerobicasy Su temperatura óptima de crecimiento es de 37 C Se las llama asi por su capacidad de formar ácido butirico entre los productos deshecho de sSu metabolismo. La más conocida de estas bacterias es el Clostridium botulinum, conocido así por producir una grave enfermedad llamada botulismo, que puede llegar a producir la muerte en dos a diez dlas, cuando se han ingerido conservas en malas condiciones u otros alimentos infectados con esta bacteria. El pacíente sufre vómitos, fatiga, fiebre, parálisis muscular y fallo respiratorio en la última etapa de la infección. Es necesario detectar pronto el problema y aplicarle antisueros específicos para salvar al paciente. Por lo tanto son bacterías muy peligrosas. PARA EVTAR EL RIESGO DE INTOXICAGIONES POR TOXINAS BOTULINICAS ASCONSERVAS OTROS ALIMENTOS DEBEN SR ESTERILIZADOS CON 2 El nitrato de potásio es capaz de inhibir el desarrollo de bacterias formadoras de ácido butirico. También el cloruro de sodio tiene esta propiedad. En la fabricación de queso, si se centrifuga la leche previamente, se eliminan las bacterias butíricas y sus esporas, que son mas pesadas que las lácticas; a esta técnica se la llama bactofugación. Las bacterias butiricas no resisten los medios ácidos. 54 MANUAL De RErErENaA De ELasoRACIÓN De DERiVADos LACTEOs Otras bacterías (Salmonella, Shigella) Salmonella, perteneciente a la fámilia de las enterobacteriaceae Son bacilos que fermentan as azucares produciendo ácidos y anhidrida Carbonico. m www Son muy abundantes en suelos, plantas, heces, intestino de los animales, agua etc. y son de carácter patógeno produciendo Fiebres tífoideas. Salmonelosis. Se transmite de plantas y animales a los seres humanos, causando intoxicaciones graves al ingerir alimentos tales como huevos, mayonesas, pescados, carnes, etc. Se destruyen las salmonellas por el calor y son unas de las bacterias más temidas en los alimentos; por ejemplo, entre las caracteristicas microbiológicas que deben cumplir los productos derivados de los huevos (yema, clara, huevo desecado), se exige en todos los casos la ausencia de salmoneilas. Cuando se ingieren alimentos contaminados por salmonellas a las diez o veinte horas aparecen los primeros síntomas de intoxicacion, tales como náuseas, vómitO5, diarrea, etc., no siendo en general mortal. Pero principalmente causan defectos en los quesos. Lshigela es otrabacteria patógena pertenieciente ala familia de las enterobacteriaceae que se desarrollan a temperaturas de 37 40 Caerobias y que se encuentran en el suelo, estiérco aguas Kontaminadas, tubo digestivo etcY producen trastornos intestinales comO la disenterla. : :: :::::: :: : 55 MAUAL De REEENCx De EaoAoón De DuVADos LicTEOS 3.1.3 Levaduras Son seres de mayoresdirmensiones quelas bacteias tambiér unicelulares-y con formas vartabies fesféricas ovaladas clindritas, Pueden teneroe2 aincluso 100 micras de löngitud y de 2a 10 micras Fde diámetro, Al igual que las bacterias, tienen núcleo, citoplasma, pared celular y membrana citoplasmática. El núcleo no tiene membrana de separación y queda incluido dentro del citoplasma. En este último puede haber una o mas vacuolas, que son bolsas con material de reserva (azúcares, grasas) o con productos de desecho del metabolismo celular. Globuos de grasa Nucleo Pared celuar Citoplasma Membrana citoplasmática Vacuola Fig.12 Estructura de las levadura La membrana citoplasmática es semipermeable, dejando pasar los elementos nutritivos que necesita la célula y permitiendo la salida de los desechos de la misma. 56 Se reproducen por gemacióón o por esporas que se forman dentro de la célula que se abre cuando estas maduran. Las esporas se encuentran presentes de forma abundante en suelos, frutas, verduras, etc. Condiciones para el desarrollo de la levadura Como cualquier ser vivo, las levaduras necesitan una serie de condiciones yelementos para poder desarrollarse, entre los que podemos citar como más importantes: Nutrientes, las levaduras necesitan hidratos de carbono, proteínas, vitaminas y sales minerales; Los hidratos de carbono o azucares son quemados, produciendo la energía necesaria para las actividades vitales de las células y junto a esa energía hay productos como el anhídrido carbónico, etanol, etc. Esta facultad de las levaduras para producir alcohol y CO, es la que se aprovecha en la elaboración de cerveza, vino, champán, etc. Humedad, aunque es necesaria, lo es menos que para las bacterias. Hay levaduras que pueden vivir en sustratos con un 45-50 % de azúcares (mermeladas, miel) Acidez, el pH óptimo para el desarrollo de las levaduras es de 4,5 a 5,0, aunque pueden sobrevivir desde 3 a 7,5. Temperatura, son menos resistentes a loscambios de temperatura que las bacterias, ya que no aguantan temperaturas por debajo del punto de congelación, siendo 20-30° Cel intervalo óptimo para su crecimiento. A los 45 - 47° C mueren, por lo que cuando se las quiere eliminar de cualquier alimento o bebida basta calentarla a 50 60° C durante cinco minutos. Las esporas son algo más resistentes al calor, siendo necesaria una temperatura de 60 68° C durante unos minutos para destruirlas. Oxigeno, con referencia a sus necesidades de oxigeno, las levaduras son anaerobias facultativas, es decir, pueden vivir con o sin oxígeno. Con Oxígeno se desarrollan más rápidamente, produciendo dióxido de carbono y agua como productos de desecho de su metabolismo. En ausencia de oxigeno crecen más lentamente produciendo etanol, aguua y CO. Controlando la cantidad de oxigeno disponible podemos 57 MANUAL De ReFERENGA De ELasoRAGON De DERIVADos LAcTEos encauzar su desarrollo en el sentido que nos convenga; por ejemplo, si queremos producir alcohol, vino o cerveza, la fermentación se hará con poco 0,, mientras que si queremos producir levadura (levadura de panadería, por ejemplo) se ventilará la masa en fermentación. Al aumentar el porcentaje de etanol en un medio de fermentación, la actividad de las levaduras va decreciendo, ya que el alcohol actúa como un inhibidor. Las levaduras pueden provocar problemas en el queso y en la mantequilla. Entre las levaduras más comunes en alimentos y bebidas podemos citar las siguientes: Sacharomices cerviseae. Torulas, que aparecen en alimentos refrigerados. Cándida, que produce enranciamiento de la margarina. Mycoderma, que una capa espesa en la superficie de algunos alimentos. 3.1.4 Mohos moustos poreluas individuatsque tieren S caratersticaSLLE AEOGLnagifadrS eS deci Doseenug puceo.cemeal envuaO por e gitoplasma una rmembrana semipermeable.gue A veces en los núcleos están incluidos varios de ellos en una masa citoplasmática sin separaciones; otras veces existe separación entre cada citoplasma que contiene un núcleo. 58 MANUAL De RereRENA De ElAnoRACON De DERVADos LACIKOS La reunión de diversas formas de todas estas células constituyen un micelio, que puede ser tan qrande que llega a verse incluso a simple vista. Un micelio tiene varias ramificaciones o hifas, en cuyos extremos se desarrollan las esporas que pueden quedar protegidas (esporangios) o al exterior (conidias). Las esporas se pueden formar también en una célula cualquiera del micelio, que se cubre de una espesa y rígida pared (clamidosporas). La formación de esporas es la forma más común de reproducción de los mohos, formándose cantidades enormes de ellas que son arrastradas por el viento y conducidas a cualquier rincón. Por ello en las industrias alimentarias se deben limpiar bien paredes, suelos, etc., para evitar problemas con los mohos. Las esporas son más dificiles de destruir que el micelio y aguantan bien la sequedady altas temperaturas (30-50° C) durante largos períodos de tiempo. Los mohos tienen un metabolismo clásico a base de intercambiar nutrientes y productos de desecho a través de la membrana citoplasmática que es semipemeable. Lasal común inhibe su desarrollo a porcentajes del 3 % y al &-10 %, los destruye. Factores que condicionan el desarrollo del moho. Como en el caso de levadurasy bacterias, los factores más importantes que controlan el desarrollo de los mohos son: Nutrientes, como azúcares, proteinas, sales, etc., que son indispensables. Humedad Temperatura, la óptima es de 20-30° C. Oxigeno, los mohos son aerobios. Acidez, aunque aguantan un pH de 2 a 8,5, el óptimo es 4,5-5. 3.1.5 Virus Los virus son estructuras que dificilmente se pueden catalogar, ya que no tienen metabolismo propio para desarrollarse a partir de un medio d- cultivo por muy completo que sea en nutrientes 59 MANUAL DE REreRENCA De ELABORACoN De D«mVADOS LAcTLos Necesitan infectar un ser viviente es decir células de plantas y animales. Sus dimensiones son muy reducidas (0,02 a 0,06 micras), de forma redonda y oval, normalmente con pequeña cola que utilizan para penetrar en las células que infectan. Los virus que atacan a bacterias se les Ilama bacteriófagos que afectan a las bacterias que componen los fermentos lácticos. La multiplicación de los bacteriofagos pueden ser tan enorme que pueden acabar rápidamente con el fermento acidificante y pueden causar graves problemas en las industrias alimentarias. Por ejemplo en la maduración de los quesos atacan a las bacterias lácticas responsables de la misma, evitando que está tenga lugar. En caso del YOGURT atacan a los lactobacillus destruyéndolos, con lo que se rompe el equilibrio entre bacilos y cocos, se alargan los tiempos de coagulación, se cambia el sabor etc. Los bacteriófagos crecen a temperaturas de 7 -47 °Cy se destruyen a 65 -100 °C durante 20 a 30 minutos. Se encuentran presentes en el suelo, el aire, estiercol, etC. En general la lucha contra los bacteriófagos incluye una buena limpieza de las instalaciones, paredes y suelos con detergentes y soluciones tales como hipoclorito de sodio con una concentración del 0,05 de cloro libre. Los tratamientos por calor de los alimentos por encima de los 75°C también los destruyen. ES MPORTANTE CONoCER TODOS ESTOS CONCEPTOS SOBRE LA VIDA DE LOS EMICROORGANISMOS, PORQUE ASí PODREMOS DESTRUIR A LOS PERJUDICIALES YUTILIZAR LOS BENEFICOS PARA NUESTRO PROVECHO 60
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