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Formato preinforme Reconocimiento de Aminoácidos y separación por Cromatografía Nombre Grupo ______________ I. CUESTIONARIO DE CONSULTA PARA EL PREINFORME Responda las siguientes preguntas en forma concreta, ordenada y con citas en normas APA: 1) Consulte los nombres, símbolos, estructuras desarrolladas y la clasificación de los aminoácidos proteicos desde los siguientes puntos de vista y realice una tabla ilustrativa clasificándolos en: esenciales y no esenciales para el hombre, ácidos y básicos, aromáticos, alifáticos, iminoácido, azufrados, hidroxilados, polares con carga y sin carga y apolares. (Organice un cuadro para clasificar los aminoácidos con los criterios establecidos en el punto y que después le permita encerrar la cadena lateral e identificar los grupos funcionales (punto 2) 2) Dentro de la anterior tabla, para cada aminoácido, encierre la cadena lateral o el grupo R e identifique los grupos funcionales presentes. 3) Defina Aminoácidos libres, oligopéptido, polipéptido, péptido y proteína. Fuente: Bohinski, Robert C. Bioquímica. (2002). 5 ed. España: Addison Wesley Iberoamericana. p. 83 (si consigue otro cuadro MUCHO mejor) Aminoácidos libres: compuestos orgánicos, cuyos dos grupos funcionales unidos al carbono α o central son el carboxilo y el amino. Oligopéptido: algunos aminoácidos (2 a 13) unidos por enlaces peptídicos,por ejemplo, la hormona oxitocina que contiene 9 aminoácidos en su estructura. Cambell Mary y Farrell Shawn. Bioquímica. (2012).4 ed. México:Thomson. p.96. Péptido: ……………….. Polipéptido: moléculas nitrogenadas de elevada masa molecular formada por varias unidades peptídicas, por ejemplo, la hemoglobina proteína transportadora de gases (CO2 y O2) en el organismo de los animales vertebrados. (Devlin, 2009, p.79) Proteína:…………………………… No olvide citar su consulta 4) Realice una tabla de composición de aminoácidos en la espinaca y en su muestra proteica para reacciones de reconocimiento. (cambie el cuadro) 5) ¿Describa la naturaleza química de la celulosa y tipos de sustancias que pueden usarla como fase estacionaria en la CCD? Los diferentes tipos de sustancias que se han utilizado como fase estacionaria en la cromatografía en capa son: celulosa, almidón, azúcares (sacarosa), sílica gel (gel de sílice), óxido de aluminio (alúmina), carbón activado (carbón en polvo) y kieselguhr (tierra de diatomeas). (Polo. 2015, p.9.) La celulosa es un homopolisacárido abundante en la naturaleza, a pesar de eso no se puede utilizar como fuente de energía por la mayoría de los animales por cuanto éstos carecen de enzimas necesarias para degradar los enlaces β(14) que mantienen unidas las unidades de glucosa (Feduchi, 2021, p.37). Sin embargo, los rumiantes tienen una multitud de microorganismos en uno de los compartimentos de su estómago, que sintetizan enzimas hidrolíticas capaces de degradar la celulosa. Usos y aplicaciones del acetato de celulosa ……………………………………….. (consulte) no olvide citar 6) ¿Qué es el Rf en cromatografía, cómo se mide el Rf y para qué se utiliza? (consulte) no olvide citar II. RESULTADOS ESPERADOS Y DIAGRAMAS DE FLUJO 1. Separación e identificación de aminoácidos por cromatografía Complete el resultado esperado ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Diagrama de flujo del procedimiento de la extracción Procedimiento para hacer la extracción http://practicasbioquimicacosminab.blogspot.com/2015/12/practica-5-cromatografia-en-capa-fina.html para hacer el diagrama del procedimiento de la extracción de aminoácidos a partir de espinaca 2. Identificación de aminoácidos por reacciones cualitativas Reacción con la Ninhidrina. Resultados esperados La muestra proteíca utilizada producirá un color azul violeta característico de la reacción de ninhidrina con los grupos amino de los aminoácidos de su estructura, los patrones: prolina, serina, asparragina darán colores amarillo (prolina amina secundaria), violeta serina (amina primaria) y café para la asparragina Reacción de Millón ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Reacción de Sakaguchi ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Reacción de Pauly ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 3. Fichas técnicas. LOS AMINOÁCIDOS NO SON PELIGROSOS POR LO TANTO NO SE LES HACE FICHA Nombre Fórmula Aspecto Peligrosidad* Forma de eliminar el reactivo Etanol C2H6O No olvide utilizar subíndices para las fórmulas Una descripción muy corta de cómo eliminar el reactivo finalizada la práctica Metanol CH3OH Ninhidrina Hidróxido de sodio Carbonato de sodio Nitrito de sodio Ácido clorhídrico α -naftol Acido nítrico Mercurio Bromo Butanol Acido acético Acetona *Indique la peligrosidad con el símbolo correspondiente: explosivo (E), comburente (O), inflamable (F), extremadamente inflamable (F+), tóxico (T), muy tóxico (T+), corrosivo (C), nocivo (Xn), irritante (Xi) y/o peligroso para el medio ambiente (N). Los símbolos SGA 5. Bibliografía (normas APA) Devlin, Thomas. (2009). Bioquímica. Libro texto con aplicaciones clínicas. 4 ed. España: Reverté. Feduchi C, Elena., Romero M, Carlos., Yáñez C, Esther., García, Carlota. 2021. Bioquímica. Conceptos Esenciales. 3 ed. Bogotá: Médica Panamericana. Polo Diez, Luis María. 2015. Fundamentos de Cromatografía. 9 ed. España: Dextra editorial. DIAGRAMA DE FLUJO Es una representación abreviada de un procedimiento, es un esquema que requiere un mínimo de palabras, ahorra tiempo y espacio. Se debe elaborar antes de cada sesión de laboratorio y se debe tener a mano durante ella. La información que contiene un diagrama de flujo facilita la realización del experimento, el registro de observaciones, el análisis posterior y evaluación de los procedimientos, observaciones y datos. Para su elaboración se tienen en cuenta las siguientes instrucciones: los nombres, fórmulas y cantidades de los materiales de partida (reactivos) se escriben en un rectángulo situado al comienzo del diagrama. Desde el centro de la base se traza una línea vertical hasta el siguiente paso operatorio 3,0 mL de H2O 1- La adición de un reactivo a los materiales de partida, se indica con una flecha horizontal dirigida hacia la línea vertical. 1 mL de etanol 2- La separación de una porción de la mezcla reaccionante se indica mediante una flecha que arranca de la línea vertical. La porción separada se encierra entredos líneas horizontales paralelas: 1 mL Las operaciones que se realicen sobre la mezcla de reacción, que no impliquen separación de los componentes de la mezcla como agitar, calentar, enfriar, medir etc. se escriben interrumpiendo la línea vertical por dos líneas horizontales paralelas. La operación se escribe en el espacio comprendido entre las dos líneas: Agitar fuertemente medir temperatura Una operación que implique separación de la mezcla reaccionante, como centrifugar, filtrar, evaporar o decantar, se muestra mediante una línea horizontal al final de la línea vertical. El nombre de la operación se escribe entre paréntesis debajo de la línea horizontal (Filtración) 3- Los productos de cualquier operación que implique separación se encierran en un rectángulo unido por líneas verticales a los dos extremos de la línea horizontal. Los productos de la separación reciben los siguientes nombres: OPERACIÓN PRODUCTOS Centrifugar Residuo – sobrenadante Filtrar Residuo – filtrado Evaporar Vapor – residuo Destilar Residuo – destilado Ejemplo: (centrifugación) Sobrenadante Residuo 4- Todas las observaciones se escriben dentro de líneas onduladas, situadas debajo o al lado de la parte del diagrama a que se refieren y unidas por una flecha al lugar apropiado del diagrama Sólido de color negro aspecto cristalino Residuo b) Precauciones y cuidados: coloque dentro de globos las precauciones y cuidados que debe tener en algunos pasos con los reactivos, las muestras o los procedimientos. Conéctelos al rectángulo correspondiente. Usar guantes c) Observaciones: durante la práctica anote sus observaciones dentro de globos ondulados conectados al rectángulo correspondiente. Observaciones
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