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Biología Celular I Ciclo Trujillo – Perú 2022 Integrantes: • Ayala Azabache, JazmÍn • Casanova Coral, Amy sashenka • Calderon Rojas, Maria de los Angeles • Tello Paredes Mel Marley • Vargas Saavedra, Jhon Franklin Semestre: 2022-2 Ciclo: I Grupo: 5 Turno: Mañana Docente: Alvaro David Rodriguez Salvatierra PRÁCTICA 4: CITOESQUELETO Y PRACTICA 5: DIFUSIÓN –DIÁLISIS – ÓSMOSIS INTRODUCCIÓN Durante el desarrollo de la práctica realizaremos el reconocimiento tanto de cilios como los flagelos, las cuales son estructuras derivadas de los centriolos. Son expansiones citoplasmáticas, filiformes y móviles, localizadas en la superficie de algunas células. En esta sesión reconoceremos algunas características morfológicas en células animales y vegetales, observándolas a través del microscopio para establecer las diferencias entre célula procariota y células eucarióticas. Por otro lado, realizaremos distintos experimentos para entender el proceso de difusión, diálisis y ósmosis; sabiendo que la difusión se caracteriza por ser un mecanismo pasivo a favor delgradiente de concentración, por otro lado, la diálisis, es la separación de sustancias que se encuentran juntas, finalmente la osmosis es la difusión de agua, durante la practica reconoceremos el medio hipotónico, hipertónico e isotónico. I. OBJETIVOS ✓ Explicar las funciones de los componentes del citoesqueleto ✓ Describir el movimiento de cilios y flagelos ✓ Diferenciar las bases moleculares de la difusión, la ósmosis y diálisis. ✓ Explicar la importancia fisiológica de la difusión, la ósmosis y diálisis. II. MATERIALES DE LA PRÁCTICA 4 ✓ Muestra de semen ✓ Agua estancada (recolectada con 4 días de anticipación y añadirle pocas hojuelas de ✓ avena). ✓ Suero fisiológico. ✓ Tubos de ensayo. ✓ Gradillas. ✓ Cristal violeta. ✓ Laminillas cubre objetos. ✓ -Lamina porta objetos. ✓ Microscopio. III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA 4 Reconocimiento de cilios 1. Coloca una gota de agua estancada sobre un portaobjeto cubrir con una laminilla. 2. Observa con el objetivo de menor aumento. 3. Observa los cilios en el Paramecium. Observación: Bacterias Muestra: Agua estancada Aumento: 40X Coloración: Sin coloración Interpretación: En el experimento se pudo observar la presencia de un paramecio se comporta como un protozoario, mientras que la euglena se comporta como Vegetal, tienen flagelos y cilios, lo cual hace que se coman entre ellos. MATERIALES DE LA PRÁCTICA 5 ✓ 1 huevo. ✓ 3 buches secos de pollo- ✓ 3 ml de sangre. ✓ Fenolftaleína. ✓ NaOH 10%. ✓ Nitrato de plata 2%. ✓ Reactivo de Biuret. ✓ Lugol. ✓ 5 Laminas porta objetos. ✓ 5 Laminillas cubreobjetos. ✓ 2 Jeringas hipodérmica de 5ml. ✓ Alcohol etílico de 96°. ✓ Torundas de Algodón. ✓ 3 vasos de precipitación de 250 ml. ✓ 4 tubos de ensayo de 13x100mm. ✓ 2 Pipetas de 10 ml y microscopio óptico Observación: Flagelos Muestra: Semen Humano Aumento: 40 X Coloración: cristal violeta Interpretación: En la muestra después de diluirla con suero fisiológico para activarlos, pudimos observar muchos espermatozoides que tiene una estructura particular, como si fuera una cabeza con cola y de color blanco, cabe resaltar que algunos de ellos estaban vivos porque la muestra era fresca. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA 5 Difusión ✓ Prepara dos buches de pollo deshidratados, dejando un extremo cerrado y el otro extremo abierto. ✓ Coloca dentro de los buches de pollo y de los vasos de precipitación, lo siguiente: 1. Lava con agua de caño el buche 1 y sumergirlo dentro del vaso 1. 2. Dejar actuar por 15 minutos. Observar, esquematizar e interpretar. 3. Lava con agua de caño el buche 2 y sumergirlo dentro del vaso 2. 4. Dejar actuar por 15 minutos. Observar, esquematizar e interpretar. BUCHE Y VASO 1 Como se observa en el primer buche tenemos Agua destilada + Fenolftaleína “dentro del buche”, en el Vaso 1 se añadió agua de caño + NaOH y lo dejamos interactuar por unos minutos. Cabe recalcar que la fenolftaleína es un indicador de la presencia de bases, esto quiere decir que cuando reconocer alguna esta misma se torna de un color rosado, grosella o violeta como se pudo observar. El NaOH es ionizado, por ende, realiza un transporte pasivo y asciende por difusión simple al interior del buche, por ello es reconocido por lo anterior mencionado que es la “Fenolftaleína”. BUCHE Y VASO 2 En cuanto a lo observado, en el segundo buche se colocó solución de almidón “dentro del buche”, en el vaso 2 se agregó agua de caño + Lugol y lo dejamos interactuar por un par de minutos. Luego de pasado esos minutos vemos una reacción del almidón con el Lugol nos mostrara una coloración “azul oscuro” esto se debe, ya que el Lugol se utiliza para ver si hay presencia de almidón porque esta sustancia adsorbe yodo produciendo la coloración antes mencionada. Pero según lo observamos no hubo ninguna reacción, esto quiere decir que las dos moléculas son grandes y, por lo tanto, no se pudo difuminar. Diálisis ✓ Dentro de un buche de pollo deshidratado, coloca solución de albúmina disuelta en cloruro de sodio. ✓ Sumergirlo en un vaso con 150 ml de agua destilada. Deja actuar por 30 minutos. ✓ Pasado este tiempo, coloca dentro de 2 tubos de ensayo de 15x150mm, lo siguiente: ✓ Observa, esquematiza e interprete. Interpretación Observación: Diálisis Muestra: Buche reposado en ovoalbúmina Coloración: Biuret en el vaso de precipitado 2 Interpretación: En este caso, se dividió el buche en dos tubos de ensayo, en el primer vaso precipitado se agregaron 5ml del líquido del vaso junto a tres gotas de Nitrato de plata del cual, se pudo observar que en la parte superior se formó una mezcla blanca, dando a entender, que el Cloruro de Sodio tuvo una reacción en la misma solución, mezclándose con esta. Por otro lado, en el vaso precipitado dos se utilizó el mismo liquido del vaso (5ml) además, de Biuret y 5 gotas de Sulfato de Cobre teniendo como resultado que se torne de un color lila dándonos a entender que el biuret reacciono a la muestra de proteínas. Ósmosis (hemólisis y crenación) Coloque 3 tubos de ensayo de 13x100 mm, en una gradilla, y agregue lo siguiente: Observación: Hipotónica Muestra: Muestra de sangre Aumento: 40X Coloración: sin coloración Interpretación: Se observo, un medio hipotónico, gracias a la solución de 0,5% NaCl y solución de agua destilada, cabe resaltar que había una concentración menor en el medio externo en relación al medio interno del eritrocito; destacando que puede llegar a ocurrir un proceso llamado hemólisis. Observación: Hipertónica Muestra: Muestra de sangre Aumento: 40X Coloración: sin coloración Interpretación: En este caso pudimos observa un ambiente con concentración osmolar distinto, en el que se observó mayor osmolaridad en el medio externo; debido a esto el eritrocito se deshidrató. Cabe resaltar que esta muestra se le agrego 2,5% NaCl la misma genero un medio Hipertónico. Observación: Isotónica Muestra: Muestra de sangre Aumento: 40X Coloración: sin coloración Interpretación: Los eritrocitos presentan una superficie lisa, que si bien es cierto es indicativo de una soluciónisotónica, cabe resaltar que esta muestra se le agrego 0,9% NaCl la misma genero un medio isotónico, sabiendo que en este caso la solución tiene la misma presión osmótica que la sangre, lo permite que los glóbulos no se deformen. IV. DISCUSIÓN ✓ En la revisión final de resultados, se pudo reconocer que la naturaleza de las imágenes depende del tipo de luz y de la forma en que se preparó la muestra, la fijación puede ser física o química, siendo el procedimiento de preservación de la estructura celular, facilitando posteriormente el uso de colorantes ya sean éstos de naturaleza ácida o básica; tengamos presente también que cada técnica está diseñada para destacar características estructurales particulares de la célula. ✓ Tengamos presente que, “teñir supone una reacción de intercambio de iones del colorante a lugares activos de la superficie o interior de las estructuras de la célula, esto permitirá contrastar mucho más el microorganismo con respecto al medio que le rodea” (Gonzáles R., 2020). Teniendo como base lo anterior, podemos destacar que la coloración o tinción mejora el contraste en la imagen vista al microscopio. ✓ Por otro lado, al hacer un enfoque de las células podemos decir que; “las células eucariotas poseen un grado de organización superior a las células procariotas, debido a que poseen un mayor tamaño, a la existencia de una gran variedad de organelas ubicadas en el citoplasma, que llevan a cabo una serie de funciones específicas y a la presencia de un núcleo más definido gracias a la membrana que lo rodea” (Herrera A., y Zapata D.2016). De esto, se desprende que la morfología de las células eucariotas es muy variada y se encuentra en función de su actividad y relación con el ambiente; y el vínculo que establecen las células permite llevar a cabo los procesos celulares de un organismo. V. CONCLUSIONES ✓ En la muestra de Semen Humano observamos características notables que tienen algunos flagelos, como el espermatozoide. ✓ La fenolftaleína, es una molécula grande y el NaOH es una molécula pequeña, ya que las pequeñas son las únicas que se pueden difuminar. ✓ Logramos observar el proceso de diálisis por medio de la ovoalbúmina y el buche, donde se notó que el Cloruro de Sodio tuvo una reacción con la solución, además, en el Segundo tubo observamos que el biuret reacciono a la muestra de proteínas. ✓ Finalmente, realizamos el experimento de osmosis donde visualizamos el medio hipotónico, hipertónico e isotónico. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ✓ González R., Elizalde B., Cortés M. y Orduña M. Las tinciones básicas en el Laboratorio de Microbiología: Un enfoque gráfico [en línea]. México: UNAM, FES Zaragoza; 2020. [Citado: 2022 julio 08]. Disponible en https://www.zaragoza.unam.mx/wp- content/Portal2015/publicaciones/libros/cbiologicas/libros/Tinciones.pdf ✓ Herrera A., Zapata D. y Villa L. La enseñanza de las células eucariotas y procariotas mediante una secuencia de situaciones experimentales orientada en la teoría de los campos conceptuales [Tesis para optar al título de: Licenciados en educación Básica con Énfasis en Ciencias Naturales y Educación Ambiental]. Medellín: Universidad de Antioquía; 2016. Disponible en: http://ayura.udea.edu.co:8080/jspui/bitstream/123456789/2407/1/JE0105 7_adria na_dayson_leny.pdf ✓ Pacheco M., García P. y Pombal D. Diversidad celular. [Internet]. España. 2020. [Citado: 2022 Julio 08]. Disponible en https://mmegias.webs.uvigo.es/5-celulas/1-diversidad.php
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