Post Practica6-Grup B Eq 3 - Ximena Monserrat Zapata Rodriguez

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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ 
 
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS 
 
QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO 
 
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA I 
 
 
NOMBRE DE LA PRÁCTICA ___6: “Determinación de la actividad enzimática Succinato 
deshidrogenasa, Citocromo oxidasa y ATPasa”__________________________________ 
 
GRUPO ____” B” _______HORA _8:00 – 11:00_______. EQUIPO: __3___ 
 
INTEGRANTES: 
1____OLVERA FLORES GILBERTO_____________________________________ 
2____ZAPATA RODRIGUEZ XIMENA MONSERRAT________________________ 
3__________________________________________________________________ 
4__________________________________________________________________ 
 
CRITERIO EVALUADO 
VALOR DEL 
CRITERIO (%) 
CALIFICACIÓN OBTENIDA (%) 
 1 2 3 4 
Cálculos previos a la 
practica 
10 
Participación 10 
Reporte 30 
Discusión y conclusiones 
de la práctica 
50 
TOTAL 100 
 
 
 
 
 
 
 
 
PRACTICA 6. Determinación de la actividad enzimática Succinato deshidrogenasa, 
Citocromo oxidasa y ATPasa 
 
1. Succinato deshidrogenasa 
a) ¿Para qué se añade el aceite a las muestras? 
El aceite sirve para crear una barrera para evitar la entrada de oxígeno y que este no interfiera 
con la reacción 
b) Represente en imagen o dibujo el resultado obtenido y describa los cambios observados. 
 
 
 
En el tubo 2 no hay cambio porque no tiene enzima y aceite impide la entrada de oxígeno, en 
el 1 se lleva a cabo la reacción y el oxígeno no interfiera y tiene enzima, en el tubo 3 si hay 
enzima, pero también oxígeno y se oxida el azul de metileno. 
 
2. Citrocomo oxidasa. 
a) Represente en imagen o dibujo el resultado obtenido y describa los cambios observados. 
 
La reaccion se lleva en el tubo 1 porque no hay nada que impida la reacción de color vino el 
cianuro de potasio inhibe la citocromo oxidasa, en su forma reducida la p-fenilendiamina es 
claro e incoloro en su forma reducida es color café más fuerte o color vino, en el tubo dos el 
cianuro inhibe la enzima por esta razón no llega a ser color vino. 
 
 
3. Fosforilación oxidativa 
a) Calcule la concentración de los tubos la curva patrón de fosfato de potasio monobásico en cada 
tubo en mM y complete el siguiente cuadro: 
 
Tubos Fosfato de potasio 
monobásico 1mM (ml) 
Absorbancia Concentración de 
fosforo inorgánico (mM) 
1 0.5 0.062 0.1 
2 1.0 0.107 0.2 
3 1.5 0.114 0.3 
4 2.0 0.129 0.4 
 
Cálculos: 𝐶1𝑉1 = 𝐶2𝑉2 
 
𝐶1𝑉1
𝑉2
= 𝐶2 
 
• 
(1𝑚𝑀)(0.5 𝑚𝑙)
5 𝑚𝑙
= 0.1 𝑚𝑀 
 
• 
(1 𝑚𝑀)(1.0 𝑚𝑙)
5 𝑚𝑙
= 0.2 𝑚𝑀 
 
• 
(1 𝑚𝑀)(1.5 𝑚𝑙)
5 𝑚𝑙
= 0.3 𝑚𝑀 
 
• 
(1 𝑚𝑀)(2.0 𝑚𝑙)
5 𝑚𝑙
= 0.4 𝑚𝑀 
 
 
 
 
 
 
 
 
b) Elabore la curva patrón de fósforo inorgánico, graficando absorbancias vs concentración (mM). 
4 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
c) Obtenga la concentración de fósforo inorgánico libre por acción de la ATPasa en cada tubo 
problema (interpolando o por regresión línea). Utilizando la curva patrón de fosfato de potasio 
monobásico y complete el siguiente cuadro: 
 
Tubos Absorbancia Concentración de fosforo 
inorgánico (mM) 
1 0.081 0.1442 
2 0.088 0.1778 
3 0.069 0.0865 
 
Cálculos: 𝑦 = 0.208𝑥 + 0.051 
 
 
𝑦−0.051
0.208
= 𝑥 
 
y = 0.208x + 0.051
R² = 0.8674
0
0.02
0.04
0.06
0.08
0.1
0.12
0.14
0.16
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45
A
b
s
o
rb
a
n
c
ia
[fosforo inorganico] (mM)
Universidad Autonoma de San Luis Potosi
Facultad de Ciencias Quimicas
Laboratorio de Bioquimica Metabolica I
Practica 6: " “Determinación de la actividad enzimática...”
Curva Patron de fosforo inorganico
Absorbancia Vs. [fosforo inorganico] (mM)
(Fosforo 
inorganico) 
Absorbancia 
0.1 0.062 
0.2 0.107 
0.3 0.114 
0.4 0.129 
 
• 
0.081−0.051
0.208
= 0.1442 𝑚𝑀 
 
• 
0.088−0.051
0.208
= 0.1778 𝑚𝑀 
 
• 
0.069−0.051
0.208
= 0.0865 𝑚𝑀 
 
 
4. Discuta los resultados obtenidos en el experimento de succinato deshidrogenasa, Citrocomo 
oxidasa y fosforilación oxidativa. 
Hechas y enviadas de manera individual. 
 
 
5. Escriba sus conclusiones. 
Hechas y enviadas de manera individual.