Practica 6 Imprimela Thomas - A Saul (1)

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Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios No. 4
Especialidad: Laboratorio clínico Semestre: 3 Grupo: “A”
Módulo ll: Identifica microorganismos con base en técnicas microbiológicas para diagnóstico clínico.
Submódulo I: Identifica microorganismos con base en técnicas bacteriológicas. 
Práctica # 6: Urocultivo ó cultivo de orina. 
Equipo 7 Integrantes:
Ramírez Montañez Alberto Saúl
Ramírez Vargas Lidia Concepción 
Rangel Puentes Sadie Aneli
Reyes Garduño Luis Tomas 
Reyes Mata Verónica
Rodríguez Alemán Areisy Mariana
Nombre del docente: Mc. Ricardo Ramírez Macías
Maestro adjunto: Q.F.B. Iván Rocha
Objetivo
Detectar microorganismos patógenos mediante el examen de urocultivo haciendo un recuento de colonias por el método de KASS en Agar tripticasa y realizando un antibiograma a la orina sembrada.
Fundamento
El urocultivo es la prueba de orina que identifica la presencia de bacterias. Como los riñones y la vejiga son estériles, es decir, no hay microbios presentes, la identificación de bacterias en la orina suele ser un fuerte indicador de una infección del tracto urinario.
El urocultivo se hace colocando la orina en un medio propicio a la reproducción de bacterias, llamado medio de cultivo. Si la orina contiene gérmenes, en 48 horas se podrá identificar la formación de colonias de bacterias y así se puede identificar qué tipo de bacteria está presente y que antibióticos son eficaces para luchar contra ellas (antibiograma).
Un cultivo de orina se considera positivo cuando, después de este tiempo, es posible identificar más de 100.000 colonias de bacterias, llamadas colonias de unidades formadoras de colonias (UFC). Cuando el urocultivo es positivo, el resultado muestra todavía el nombre de la bacteria que ha sido identificada, junto con los antibióticos que han demostrado ser eficaces en la prevención de su crecimiento, el llamado antibiograma.
El gran problema del urocultivo  está  cuando hay crecimiento de colonias de bacterias, pero estas son mucho más pequeñas que los 100.000 UFC. Estos valores pueden ser la contaminación de la muestra de resultados. Actualmente solamente si valoran urocultivos  entre 10.000 y 100.000 UFC cuando también hay piuria en el examen general de orina (leucocitos en orina) y síntomas clínicos sugestivos de infección del tracto urinario.
Valores por debajo de 10000 UFC se consideran contaminantes por bacterias de la región perineal.
Material, Equipo y Reactivos:
· Orina
· Caja Petri
· Aza bacteriológica
· Portaobjetos
· Cubreobjetos
· Pipeta Serológica
· Tubo de ensaye	
· Microscopio
· Portaobjetos
· Incubadora
· Sensidisco para Antibiograma
· Mechero	
· Medios de cultivo triple:
i) S110
ii) EMB
iii) Agar Sangre
· Biggy
· Muller Hinton
Metodología
1. Recolectar la orina en un frasco estéril desechando la primera micción (10-15 ml), con previo aseo genital.
2. Homogenizar la muestra mediante agitación.
3. Recuento de colonias por método de KASS. Diluir la muestra 1:100 (0.1 ml de orina + 9.9 ml de solución salina) y mezclar.
4. Tomar 1 ml de esta dilución y depositar en una caja Petri esterilizada sobre la cual se vacían aproximadamente 10 ml de Agar nutritivo o Agar-tripticasa a una temperatura aproximada a 45°C.
5. Rotar suavemente para tener una mezcla homogénea. Dejar solidificar e incubar a 37°C por 24 horas.
6. Realizar el conteo de colonias y multiplicar por el factor de dilución que es de 100.
Cuando el conteo es mayor de 100 mil colonias por mililitros la probabilidad de una infección es de 80-95 %.
7. Con la aza bacteriológica, sembrar por estría en los medios de cultivo: Agar-sangre, S110, EMB y Biggy e incubar por 37°C por 24 horas.
8. Observar el crecimiento de colonias e identificarlas realizando las pruebas bioquímicas correspondientes.
9. Realizar la sensibilidad a los microorganismos (antibiograma).
Resultados
Conteo de Colonias: 225,600
Se Observaron: Cocos, diplococos, estreptococos y estafilococos Gram Positivos.
Microorganismo sensible a:
1. Netilmiacina
2. Amikacina
3. Cloranfenicol
4. Sulfametoxasol
Conclusiones
El urocultivo debe ser interpretado por profesionales cualificados y debe ser realizado con el mayor cuidado posible pues los instrumentos deben estar estériles si se quiere obtener el resultado real. Siempre es bueno recordar que quién debe ser tratado es el paciente y no el resultado del examen.
Referencias Bibliográficas
http://www.mdsaude.com/es/2016/04/examen-de-urocultivo.html
Hooton TM, Bradley SF, Cardenas DD, et al. Diagnosis, prevention, and treatment of catheter-associated urinary tract infection in adults: 2009 International Clinical Practice Guidelines from the Infectious Diseases Society of America.
Dean AJ, Lee DC. Bedside laboratory and microbiologic procedures. In: Roberts JR, Hedges JR, eds. Clinical Procedures in Emergency Medicine. 5th ed.