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“AÑO DEL BICENTENARIO DEL PERÚ: 200 AÑOS DE INDEPENDENCIA” ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA TEMA: PRACTICA No. 6: DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS: SISTEMA ABO, VARIANTE DU DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS: SISTEMA ABO Y FACTOR Rh. INTEGRANTES: ➢ Guevara Perez, Ruth ➢ Leyva Luna, Jennifer ➢ Paucar Cueva, Percy ➢ Ticona Quispe, Johana DOCENTE: Q.F. Dr. Juan Manuel Parreño Tipian SECCIÓN: FB8M2 CURSO: Interpretación de análisis clínico CICLO: 8°vo LIMA-PERÚ 2021-II DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS: SISTEMA ABO, VARIANTE DU I. Introducción Al realizar una transfusión de sangre es importante saber el grupo sanguíneo para evitar reacciones de rechazo cuando se hagan transfusiones de sangre. Los glóbulos rojos tienen unos marcadores en la superficie que los caracterizan. Estos marcadores (antígenos) son proteínas y azúcares que utiliza nuestro cuerpo para saber que nuestros glóbulos rojos nos pertenecen. El sistema sanguíneo AB0 tiene cuatro grupos sanguíneos: • Grupo A. Este grupo sanguíneo tiene un marcador conocido como “A”. • Grupo B. Este grupo sanguíneo tiene un marcador conocido como “B”. • Grupo AB. Este grupo sanguíneo tiene tanto marcadores A como marcadores B. • Grupo 0. Este grupo sanguíneo no tiene marcadores A ni B. Saber el tipo de grupo sanguíneo es poder reconocer cuales células sanguíneas del donante son compatibles con las suyas propias. Si las células sanguíneas no se reconocen como compatibles, se producirá un rechazo. Si a un paciente le administran un grupo sanguíneo inadecuado, sus anticuerpos se encargarán de inmediato de destruir las células invasoras. Esta respuesta agresiva de todo el cuerpo puede causar fiebre, escalofríos e hipotensión (tensión arterial baja). Para identifica tipo de grupo sanguíneo se realiza una prueba de sangre para determinar el grupo sanguíneo se denomina tipificación ABO, segundo paso se llama prueba inversa. La determinación del grupo sanguíneo es especialmente importante durante el embarazo. Pruebas cuidadosas pueden prevenir una anemia grave en el recién nacido e ictericia. II. Cuestionario 1. ¿Qué importancia clínica tiene la determinación de los grupos sanguíneos? La importancia clínica de los grupos sanguíneos consiste en su participación tanto en las reacciones hemolíticas postransfusionales como en la enfermedad hemolítica del recién nacido. Los antígenos de grupo sanguíneo que se localizan en la membrana celular también proporcionan marcadores de genes que se utilizan en antropología para estudios genéticos de poblaciones humanas y tienen importancia médica y legal en asuntos de paternidad, biológicos y criminalísticos. El ABO es de suma importante no sólo en la transfusión de sangre, sino también en el transplante de células, tejidos y órganos. Igualmente, la medicina forense tiene en cuenta el grupo sanguíneo ABO, al realizar el análisis de evidencias en la escena del crimen, tales como sangre, saliva, líquido seminal y cabello. 2. ¿Qué aplicación Ud. Le daría la determinación de los sistemas MN y P? La determinación de los sistemas MN y P, se puede aplicar mayormente en maternidad. La reacción correspondiente a los antígenos M y N es menos intensa y más difícil de observar, por lo que puede ser necesario usar el microscopio óptico para su identificación. 3. ¿Porque es importante la determinación de la variante Du? El antígeno Du es una variante débil del antígeno D que tiene interés desde el punto de vista transfusional. Este antígeno aglutina débilmente o no aglutina con los anticuerpos Anti-D habituales y, por lo tanto, es posible clasificar erróneamente al portador de este antígeno como Rh negativo por ende ayudara a determinar si la persona es D negativa o D positiva. 4. ¿Qué diferencias encuentra entre las pruebas de Coombs directa y la prueba de Coombs indirecta? PRUEBA DE COOMBS DIRECTA PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA - Se utiliza para detectar anticuerpos fijados en la superficie de hematíes. - Se usa para detectar anemias, por ejemplo, anemia hemolítica por anticuerpos, anemia hemolítica debido a los fármacos, enfermedad hemolítica del recién nacido y también se utiliza esta prueba en investigación de reacciones transfusionales. - La prueba de Coombs indirecta busca una serie de glóbulos rojos estandarizados. - Se usa para, investigación de anticuerpos, (ejemplo: IgM (no aglutinantes), IgA e IgG), pruebas cruzadas (se realiza en pacientes poli transfundidos, para escoger sangre compatible). También se utiliza esta prueba en fenotipos eritrocitarios. 5. ¿Qué son las pruebas cruzadas directa e indirecta? Las pruebas cruzadas son exámenes de rutina que se realizan en los bancos de sangre para verificar la compatibilidad de la sangre de un donador y su receptor. La prueba cruzada directa se hace sobre una muestra de sangre. Esta detecta los anticuerpos que ya están unidos a los glóbulos rojos. Detecta anticuerpos ya unidos a la superficie de los glóbulos rojos. La prueba de cruzada indirecta se hace sobre una muestra de la parte líquida de la sangre (suero). Esta detecta los anticuerpos que están presentes en el torrente sanguíneo y que podrían adherirse a ciertos glóbulos rojos, glóbulos rojos que tienen antígenos específicos. III. Referencias bibliográficas 1. Fajardo Gonzales M. Los Grupos Sanguíneos entes de vital importancia en el equilibrio del proceso salud- enfermedad. [Internet]. 2019 [citado 4 octubre 2021]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/332231008_Grupos_Sanguin eos_y_FACTO-R-h 2. MANUAL_DE_PRACTICAS_GENETICA_2011[1].pdf - Universidad Jorge Tadeo Lozano Manual Pr\u00e1cticas Gen\u00e9tica FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES DEPARTAMENTO DE | Course Hero [Internet]. Coursehero.com. 2011 [citado 4 octubre 2021]. Disponible en: https://www.coursehero.com/file/54807735/MANUAL-DE-PRACTICAS- GENETICA-20111pdf/ 3. Escobar Tadeo P. Hemoclasificación y transfusiones sanguíneas [Internet]. 2021 [citado 4 octubre 2021]. Disponible en: https://www.studocu.com/co/document/universidad-autonoma-de- bucaramanga/sistemas-funcionales-efectores/hemoclasificacion-y- transfusiones-sanguineas-inmunologia/ 4. Alcover Palomino M. Determinación del antígeno D Débil – Du [Internet]. 2017 [citado 4 octubre 2021]. Disponible en: https://www.fundacionsigno.com/bazar/1/IT-75- HEM1C_Determinacion_del_antigeno_D_debil_-_Du.pdf https://www.researchgate.net/publication/332231008_Grupos_Sanguineos_y_FACTO-R-h https://www.researchgate.net/publication/332231008_Grupos_Sanguineos_y_FACTO-R-h https://www.studocu.com/co/document/universidad-autonoma-de-bucaramanga/sistemas-funcionales-efectores/hemoclasificacion-y-transfusiones-sanguineas-inmunologia/ https://www.studocu.com/co/document/universidad-autonoma-de-bucaramanga/sistemas-funcionales-efectores/hemoclasificacion-y-transfusiones-sanguineas-inmunologia/ https://www.studocu.com/co/document/universidad-autonoma-de-bucaramanga/sistemas-funcionales-efectores/hemoclasificacion-y-transfusiones-sanguineas-inmunologia/ https://www.fundacionsigno.com/bazar/1/IT-75-HEM1C_Determinacion_del_antigeno_D_debil_-_Du.pdf https://www.fundacionsigno.com/bazar/1/IT-75-HEM1C_Determinacion_del_antigeno_D_debil_-_Du.pdf PRACTICA No 7: PRUEBAS SEROLÓGICAS: DETERMINACIÓN DE FIEBRE TIFOIDEA, PARATIFOIDEA, MALTA, SIFILIS I. Introducción La antiestreptolisina (ASL) son anticuerpos específicos contra productos extracelulares de Streptococcus pyogenes (estreptococos del grupo A: GAS), entre los cuales la antiestreptolisina O (ASO) es la más empleada en los análisis de laboratorio. La determinación de la antiestreptolisina O proporciona información útil para el diagnóstico y la monitorización de las infecciones humanaspor estreptococos, como amigdalitis, otitis, erisipela, escarlatina y enfermedades asociadas como la fiebre reumática o la glomerulonefritis. Los anticuerpos contra la estreptolisina O pueden detectarse entre 1 y 3 semanas después de la infección, y los valores máximos se alcanzan entre 3 y 6 semanas después. Los valores patológicos de ASO indican siempre una infección por estreptococos, mientras que los resultados negativos no excluyen la posibilidad de una infección por GAS actual o pasada. Método Test inmunoturbidimétrico con partículas de refuerzo Los niveles de ASLO pueden ser enmascarados por los antibióticos y por los corticoides. También un aumento de la beta lipoproteína puede inhibir la estreptolisina O y producir títulos falsos de elevación de ASLO. Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clínica, hospital) pero en ocasiones se realiza en el propio domicilio del paciente. Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en la flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra utilizará guantes sanitarios, una aguja (con una jeringa o tubo de extracción). Le pondrá un tortor (cinta de goma-látex) en el brazo para que las venas retengan más sangre y aparezcan más visibles y accesibles. Limpiará la zona del pinchazo con un antiséptico y mediante una palpación localizará la vena apropiada y accederá a ella con la aguja. Le soltarán el tortor. Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizará una aspiración (mediante la jeringa o mediante la aplicación de un tubo con vacío). Al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodón o similar para favorecer la coagulación y se le indicará que flexione el brazo y mantenga la zona presionada con un esparadrapo durante unas horas. La sangre extraída se traslada al laboratorio de análisis en un tubo especial para bioquímica, que contiene un producto anticoagulante. En general no suelen ser necesarios más de 10 mililitros de sangre para una batería estándar de parámetros bioquímicos. Principio Determinación de la concentración de ASO mediante la medición fotométrica de la reacción antígeno-anticuerpo entre partículas de látex recubiertas con estreptolisina O y los anticuerpos contra estreptolisina O contenidos en la muestra II. Cuestionario AGLUTINACIONES 1. ¿Cuál es la importancia clínica de la determinación de las pruebas de aglutinación? Las pruebas de aglutinación en la mayoría son rápidas, pero menos sensibles que muchos otros métodos. Tiene importancia clínica al determinar algunos serotipos de algunas bacterias1 (tabla 1) y diagnostico algunas enfermedades (tabla 2). Tabla 1: prueba aglutinación para detección microorganismos1 Detección microorganismo Streptococcus pneumoniae Muestra respiratoria y liquido pleural: Entre las técnicas utilizadas para la detección de antígeno de S. pyogenes se encuentra la aglutinación facilitada, es técnica rápidas, sensibles y específicas; la sensibilidad depende del reactivo empleado y de la carga bacteriana. Líquido cefalorraquídeo (LCR): la prueba de aglutinación mediante látex presenta una sensibilidad varia entre 67% al 100%. De un total de 95 LCR de pacientes con sospecha de meningitis, la prueba LA resulta el más sensible (86,6%) seguido de la CoA (73,0%) y de la CIE (66,6%). Haemophilus influenzae Muestra respiratoria y liquido pleural: Las técnicas empleadas son de aglutinación de látex y de coaglutinación. Son técnicas que permiten obtener resultados rápidos pero cuya sensibilidad no es muy elevada. Líquido cefalorraquídeo: método detección antígeno utiliza aglutinación por látex para este microorganismo de tipo B detectándose sensibilidad de prueba del 78% al 100%. N. meningitidis Líquido cefalorraquídeo: La prueba de aglutinación por látex que detecta el antígeno polisacárido de los serogrupos A, C, Y y W135, presenta una sensibilidad que varía según diversos autores del 50% al 93%. S. agalactiae y E. coli Liquido cefalorraquídeo y orina: la aglutinación de látex presenta una sensibilidad que varía según diversos autores, del 69% al 100%. LA: Aglutinación por partículas de látex; CoA: Coaglutinación; CIE: Contrainmunoelectroforesis. Tabla 2: prueba de aglutinación para detección enfermedades Enfermedades Resultados Síndrome de Guillain-Barré2 (SGB) Para realizar el método diagnóstico rápido se modificó para cuantificar albuminuria por aglutinación con partículas de látex sensibilizados, para la detección de este analito en el líquido cefalorraquídeo de aquellos pacientes con sospecha de esta enfermedad. Se detectó con este método a través pérdida de la selectividad y la regulación de la difusión de la albúmina y otras proteínas, de la sangre al LCR. Se comprobó que este método puede ser utilizado como método de diagnóstico rápido del síndrome de Guillain-Barré. Además indica es una técnica realiza por sus ventajas de ahorro costo financiero, fácil eliminación de residuos y entrega rápida de resultados. Equinococosis quística3 Se utilizó para diagnostico esta enfermedad la prueba de aglutinación de látex estandarizada. Se usaron en total 80 sueros diferentes grupos de pacientes. Los resultados fueron 40 sueros de pacientes con hidatidosis 1 dio resultado negativo y los 40 sueros de pacientes o personas sin hidatidosis cuatro dieron resultados positivos obteniéndose una sensibilidad de 97,5%, una especificidad de 90,0%. Se concluyó que se recomienda el uso de esta prueba para el descarte de hidatidosis en regiones endémicas del país, así como prueba de tamizaje. Hidatidosis humana4 Se realizó el diagnostico mediante partículas de látex, se empleó total 80 sueros: 40 pacientes con enfermedad hidatídica confirmados quirúrgicamente, 20 pacientes enfermedades parasitarias y 20 a personas sanas. Los resultados fueron una sensibilidad y especificidad encontrada fue de 97.5% y 90% respectivamente. Se concluyó que la prueba de aglutinación de látex presenta alta sensibilidad y buena especificidad, recomienda utilizar en pruebas de tamizaje y diagnóstico en regiones endémicas del Perú. El costo de cada prueba fue calculado entre 1 a 1.5 dólares. 2. ¿Cómo se relacionan las pruebas positivas de aglutinación en el hemograma de Schilling? No hay relación en prueba de aglutinación y hemograma de Schilling. El hemograma Schilling es utilizado para: recuento leucocitario, recuento glóbulos rojos, determinación volumen globular (hematocrito). En cambio, prueba de aglutinación identifica microorganismo patógeno La capacidad inmunogénica de distintas partículas, es en orden decreciente la siguiente: proteínas, glicoproteínas, polisacáridos, lípidos y azúcares5. 3. ¿A que se denomina los portadores sanos? El portador es una persona que lleva y es capaz de transmitir una mutación genética asociada a una enfermedad, y puede o no puede mostrar síntomas de la enfermedad6. Los portadores sanos es la persona que a pesar puede trasmitir mutación no presenta síntomas clínicos significativos del agente infeccioso por ello no se dan cuenta y esta sinmatologia se evidencia cuando junta con otra persona portadora que luego se trasmite a sus hijos que pueden tener mayor probabilidad sufrir enfermedad grave. 4. ¿Qué patologías dan falsos positivos para las aglutinaciones (pruebas cruzadas)? En la fiebre tifoidea se utiliza prueba aglutinación se observa que en los primeros seis a ocho días del inicio de la enfermedad aparecen los anticuerpos contra el antígeno O y desaparecen entre tres a seis meses después. Por esta característica da un falso positivo que se observan con frecuencia relacionados con procesos infecciosos causados por otras bacterias, hongos,virus o parásitos, también pueden ser producidos por procesos no infecciosos como las enfermedades autoinmunes o las hepatopatías crónicas7. III. Referencias bibliográficas: 1. A. Jose; B. Rosa; D. Jose, M. Lurdes, R. Nuria. Procedimiento en microbiología clínica: recomendaciones de la sociedad española de enfermedades infecciosas y microbiología clínica [Internet]. 2005: 1 – 62 [citado 05 octubre de 2021]. Disponible en: https://seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiol ogia/seimc-procedimientomicrobiologia19.pdf 2. González-Losada Cristóbal, Victoria-García Maylin, Dorta-Contreras Alberto Juan. Método de aglutinación en látex para el diagnóstico rápido del síndrome de Guillain-Barré. Vaccimonitor [Internet]. 2018 Ago [citado 05 de octubre de 2021] ; 27( 2 ): 67-75. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025- 028X2018000200005 3. Miranda Eduardo, Sánchez Elizabeth, Náquira César, Somocursio José, Ayala Eduardo, Miranda Gilberto. Evaluación de una prueba de aglutinación de látex para el diagnóstico serológico de la equinococosis quística. Rev. perú. med. exp. salud publica [Internet]. 2009 Abr [citado 05 de octubre de 2021] ; 26( 2 ): 198-202. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726- 46342009000200011 4. Miranda, Eduardo. Desarrollo de la Prueba de Aglutinación de Látex para el Diagnóstico de la Hidatidosis Humana. Centro Nacional de Salud Pública [Internet]. 2007 [citado 05 octubre de 2021]. Disponible en: https://bvs.ins.gob.pe/insprint/CINDOC/INFORMES_TECNICOS/27.pdf 5. Aguilar, García. Reacciones de aglutinación. Gac Med Mex [Internet]. 2004; [citado 05 octubre de 2021]. 140(3):50-52. Disponible en: https://www.medigraphic.com/cgi- bin/new/resumen.cgi?IDARTICULO=11402 6. National Human genome research institure [Internet] Portador. Disponible en: https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Portador 7. Labañino Mulet Niurka, Rodríguez Meléndez Susana Victoria. Test de Widal ¿es útil para el diagnóstico de la fiebre tifoidea?. CCM [Internet]. 2013 Jun [citado 2021 Oct 06] ; 17( 2 ): 199-201. Disponible en: https://seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia19.pdf https://seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia19.pdf http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2018000200005 http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2018000200005 http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-46342009000200011 http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-46342009000200011 https://bvs.ins.gob.pe/insprint/CINDOC/INFORMES_TECNICOS/27.pdf https://www.medigraphic.com/cgi-bin/new/resumen.cgi?IDARTICULO=11402 https://www.medigraphic.com/cgi-bin/new/resumen.cgi?IDARTICULO=11402 https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Portador DIAGNÓSTICO DE SIFILIS 1. ¿En qué se diferencian las pruebas de VDRL y RPR? VDRL RPR Únicamente puede emplearse con suero. Si existen anticuerpos se combinan formando una floculación que es leída microscópicamente. Se usa en plasma y en suero. Antígeno no articulado. Antígeno no articulado. Una prueba VDLR requiere un microscopio para conocer el resultado de la prueba. Las pruebas de RPR se pueden hacer sin el uso de un microscopio, el resultado puede ser visto a simple vista. 2. ¿Cuáles son las pruebas confirmatorias de análisis clínicos de un VDRL positivo? El resultado se considera positivo cuando el título de dilución comienza a partir de 1/16. Este título significa que si la sangre se diluye 16 veces, aún es posible identificar anticuerpos. Los títulos de dilución más bajos como 1/1, 1/2, 1/4 y 1/8, indican que es posible tener sífilis, porque después de una, dos, cuatro u ocho diluciones aún es posible detectar los anticuerpos. Como es una posibilidad, es importante volver al médico para que se solicite un examen de confirmación, ya que este título puede ser el resultado de una reacción cruzada, es decir, un falso positivo. Los títulos bajos también se encuentran en la sífilis primaria, donde los anticuerpos circulan en la sangre a bajas concentraciones. Los títulos superiores a 1/16 indican que tiene sífilis y, por lo tanto, debe ir al médico para comenzar el tratamiento rápidamente. 3. ¿Cómo se relaciona el hemograma se Schilling con un VDRL positivo? No tiene ninguna relación ya que el hemograma se Schilling sirve para varlorar la absorción de la vitamina B12 en íleon terminal, por lo que tiene su indicación en el estudio del déficit de la vitamina B12 y en la valoración de la integridad de la mucosa del ileon terminal. Mientras que un VDRL positivo es un examen para detectar sífilis. Mide sustancias (proteínas), llamadas anticuerpos, que su cuerpo puede producir si usted entra en contacto con la bacteria que causa la sífilis. 4. ¿Qué es el fenómeno de prozona? El fenómeno de prozona es un efecto que provoca falsos negativos en los ensayos inmunológicos. Los ejemplos incluyen altas cantidades de sífilis es decir, una enfermedad contagiosa crónica que producen chancros y erupciones, anticuerpos en pacientes con VIH. 5. ¿Qué patologías dan falsos positivos para VDRL? Los falsos positivos estuvieron dados fundamentalmente por los pacientes con leptospirosis, mononucleosis infecciosa, hepatitis, tuberculosis, diabetes mellitus y fiebre reumática, así como por embarazadas y ancianos. Referencias bibliográficas: 1. Álvarez R. Interpretación de las pruebas diagnósticas de sífilis en gestantes. Rev. peru. ginecol. obstet. vol.64 no.3 Lima jul./set. 2018 2. Pruebas de sífilis. [Internet]. [Acceso 4 de octubre 2021]. Disponible en: https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/pruebas-de- sifilis/#:~:text=La%20prueba%20de%20s%C3%ADfilis%20generalmente,tubo% 20de%20ensayo%20o%20frasco. 3. Rodriguez I., Fernández C.Falsos biológicos positivos por VDRL en el diagnóstico serológico de la sífilis. Rev Cubana Med Trop v.58 n.1 Ciudad de la Habana ene.- abr. 2006. 4. Mosquera G., Cuellar I., Tamayo M. Secundarismo sifilítico en infección por VIH, con fenómeno de Prozona. Acta Med Colomb vol.39 no.1 Bogotá Jan./Mar. 2014 5. Monto M. Et al. INDICACIONES E INTERPRETACIÓN DE LA PRUEBA DE SCHILLING. [Internet]. [Acceso 4 de octubre 2021]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/sdfe/pdf/download/eid/1-s2.0- S1576988701702294/first-page-pdf https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/pruebas-de-sifilis/#:~:text=La%20prueba%20de%20s%C3%ADfilis%20generalmente,tubo%20de%20ensayo%20o%20frasco https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/pruebas-de-sifilis/#:~:text=La%20prueba%20de%20s%C3%ADfilis%20generalmente,tubo%20de%20ensayo%20o%20frasco https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/pruebas-de-sifilis/#:~:text=La%20prueba%20de%20s%C3%ADfilis%20generalmente,tubo%20de%20ensayo%20o%20frasco https://www.sciencedirect.com/sdfe/pdf/download/eid/1-s2.0-S1576988701702294/first-page-pdf https://www.sciencedirect.com/sdfe/pdf/download/eid/1-s2.0-S1576988701702294/first-page-pdf ANTIESTREPTOLISINAS O (ASTO o AS0) La antiestreptolisina (ASL) son anticuerpos específicos contra productos extracelulares de Streptococcus pyogenes (estreptococos del grupo A: GAS), entre los cuales la antiestreptolisina O (ASO) es la más empleada en los análisis de laboratorio. La determinación de la antiestreptolisina O proporciona información útil para el diagnóstico y la monitorización de las infecciones humanas por estreptococos, como amigdalitis, otitis, erisipela, escarlatina y enfermedades asociadas como la fiebre reumática o la glomerulonefritis. Los anticuerpos contra la estreptolisina O pueden detectarseentre 1 y 3 semanas después de la infección, y los valores máximos se alcanzan entre 3 y 6 semanas después. Los valores patológicos de ASO indican siempre una infección por estreptococos, mientras que los resultados negativos no excluyen la posibilidad de una infección por GAS actual o pasada. Método Test inmunoturbidimétrico con partículas de refuerzo Los niveles de ASLO pueden ser enmascarados por los antibióticos y por los corticoides. También un aumento de la beta lipoproteína puede inhibir la estreptolisina O y producir títulos falsos de elevación de ASLO.Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clínica, hospital) pero en ocasiones se realiza en el propio domicilio del paciente. Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en la flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra utilizará guantes sanitarios, una aguja (con una jeringa o tubo de extracción). Le pondrá un tortor (cinta de goma-látex) en el brazo para que las venas retengan más sangre y aparezcan más visibles y accesibles. Limpiará la zona del pinchazo con un antiséptico y mediante una palpación localizará la vena apropiada y accederá a ella con la aguja. Le soltarán el tortor. Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizará una aspiración (mediante la jeringa o mediante la aplicación de un tubo con vacío). Al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodón o similar para favorecer la coagulación y se le indicará que flexione el brazo y mantenga la zona presionada con un esparadrapo durante unas horas. La sangre extraída se traslada al laboratorio de análisis en un tubo especial para bioquímica, que contiene un producto anticoagulante. En general no suelen ser necesarios más de 10 mililitros de sangre para una batería estándar de parámetros bioquímicos. Principio Determinación de la concentración de ASO mediante la medición fotométrica de la reacción antígeno-anticuerpo entre partículas de látex recubiertas con estreptolisina O y los anticuerpos contra estreptolisina O contenidos en la muestra Cuestionario 1. ¿Cuál es el fundamento de la prueba de ASTO? Los anticuerpos antiestreptolisina O se detectan en suero por su reacción con la estreptolisina O adsorbida sobre soporte inerte de látex. Los anticuerpos antiestreptolisina reaccionan con la estreptolisina produciendo una aglutinación visible macroscópicamente. 2. Mencionar los estados fisiológicos y medicamentos que interfieran con la prueba de antiestreptolinasa. Principio Determinación de la concentración de ASO mediante la medición fotométrica de la reacción antígeno-anticuerpo entre partículas de látex recubiertas con estreptolisina O y los anticuerpos contra estreptolisina O contenidos en la muestra. Reactivos Componentes y concentraciones R1: Amortiguadora de fosfato pH 7,0 100 mmol/L NaCl --------------------------------------150 mmol/L R2: Partículas de látex recubiertas con estreptolisina O Amortiguadora de glicina pH 8,0 100 mmol/L NaCl ----------------------------------- 150 mmol/L Conservación y estabilidad de los reactivos Los reactivos se pueden conservar a una temperatura de 2 a 8 °C hasta el final del mes de caducidad indicado en el envase, siempre que se evite la contaminación una vez abiertos los frascos. ¡No congelar los reactivos! Advertencias y medidas de precaución ✓ Los reactivos contienen azida de sodio (0,95 g/L) como conservante. No ingerir. Evitar el contacto con la piel y las mucosas. ✓ Excepcionalmente pueden obtenerse valores erróneos en muestras de pacientes con gammapatías. ✓ Consultar las fichas de seguridad de los reactivos y observar todas las medidas de precaución necesarias para la manipulación de reactivos de laboratorio. Para un correcto diagnóstico, se recomienda evaluar los resultados según la historia médica del paciente, los exámenes clínicos, así como los resultados obtenidos con otros parámetros. 3. ¿Cuáles son los fundamentos para las pruebas de PCR y LATEX? El PCR-Latex Test es una prueba rápida de aglutinación en porta basada en la técnica de Singer1 , para la detección directa y la semicuantificación de la proteína C-reactiva (PCR) en suero. La determinación se efectúa ensayando una suspensión de látex recubierto con anticuerpos anti-PCR, frente a los sueros problema. La presencia de glutinación es indicativa de un aumento del nivel de PCR por encima del límite superior del intervalo de referencia de las muestras ensayadas. La prueba de aglutinación de látex se basa en reacciones inmunológicas antígeno-anticuerpo en las cuales las partículas de látex sensibilizadas con anticuerpos específicos provocan, al contactar con los antígenos correspondientes, una reacción de aglutinación que se evidencia por la formación de malla o grumos visibles macroscópicamente (10-11). Por tanto, el objetivo de esta investigación es evaluar un método basado en la aglutinación por látex para la determinación de albúmina en líquido cefalorraquídeo como herramienta complementaria para el diagnóstico rápido presuntivo del SGB. 4. ¿Qué importancia clínica tienen las determinaciones de ASO, PCR Y LATEX? El PCR-Latex Test es una prueba rápida de aglutinación en porta basada en la técnica de Singer1 , para la detección directa y la semicuantificación de la proteína C-reactiva (PCR) en suero; reacciona con el mucopolisacárido C de muchos neumococos. El examen ASLO, también llamado ASO, AEO o antiestreptolisina O, tiene como objetivo identificar la presencia de una toxina liberada por la bacteria Streptococcus pyogenes, la estreptolisina O; es útil para el diagnóstico y tratamiento de la fiebre reumática , la glomérulo nefritis aguda y otras infecciones por estreptococo beta hemolítico del grupo A El análisis de sangre de anticuerpos reumatoideos (AR) mide la cantidad de anticuerpos reumatoideos en la sangre. Normalmente, los anticuerpos son producidos por el sistema inmunitario para ayudar a destruir y eliminar la invasión de bacterias y virus que pueden causar enfermedades. Pero los anticuerpos reumatoideos pueden adherirse a los tejidos normales del cuerpo, causando daños. Referencias bibliográficas: 1. Anticuerpos reumatoideos (AR) [Internet]. Cigna.com. [citado el 7 de octubre de 2021]. Disponible en: https://www.cigna.com/es-us/individuals- families/health-wellness/hw/pruebas-mdicas/anticuerpos-reumatoideos- hw42783 2. Tests 150. Determinación de la proteína C-reactiva [Internet]. Linear.es. [citado el 7 de octubre de 2021]. Disponible en: http://www.linear.es/ficheros/archivos/2410025_cas.pdf 3. Cuenca Flores RD. Determinación de proteína C reactiva (PCR), factor reumatoide (FR) y antiestreptolisna o (asto) en secreciones faríngeas positivas para estreptococo pyogenes en los adultos mayores del Barrio Obrapía. 2015. https://www.cigna.com/es-us/individuals-families/health-wellness/hw/pruebas-mdicas/anticuerpos-reumatoideos-hw42783 https://www.cigna.com/es-us/individuals-families/health-wellness/hw/pruebas-mdicas/anticuerpos-reumatoideos-hw42783 https://www.cigna.com/es-us/individuals-families/health-wellness/hw/pruebas-mdicas/anticuerpos-reumatoideos-hw42783 http://www.linear.es/ficheros/archivos/2410025_cas.pdf
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