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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA FACULTAD DE ZOOTECNIA DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE NUTRICIÓN CURSO: NUTRICIÓN ANIMAL - LABORATORIO INFORME DE PRÁCTICA N°4 Determinación de Fibra cruda y Extracto libre de Nitrógeno GRUPO 1 Integrantes: ● Chumpitaz Flores, Antonela Johanna 20181238 ● Orozco Galarreta, Xiomara Giselly 20171313 ● Peralta Pérez, Steffany Gianella 20170484 ● Ricapa Corrales, Rosha Nicol 20181265 Profesora: ● Dra. Nataly Bernuy Osorio Horario de práctica: ● Jueves 11:00 a.m. - 1:00 p.m. 2020 - II LA MOLINA - PERÚ I. INTRODUCCIÓN: En esta práctica se determinó la fibra cruda y el extracto libre de nitrógeno. La fibra cruda se representa como la porción no digerible de los alimentos, mientras más alta sea su concentración en la muestra, menor será su valor alimenticio. En esta práctica se determinará la fibra cruda con tratamientos ácidos y alcalinos que harán una separación de los constituyentes solubles de los insolubles. La fibra cruda está constituida por celulosa, hemicelulosa y lignina. El extracto libre de nitrógeno se determina restando el 100% menos los porcentajes de humedad, proteína cruda, lípidos crudos, fibra cruda y ceniza. Así este porcentaje representa los nutrientes no evaluados como los carbohidratos digeridos, vitaminas y demás compuestos orgánicos solubles no nitrogenados. Objetivos: ● Determinar el porcentaje de fibra cruda de la muestra. ● Determinar el extracto libre de nitrógeno de la muestra. II. REVISIÓN DE LITERATURA 2.1 Fibra Cruda Es una de las seis fracciones que reporta el análisis proximal del alimento y representa la parte insoluble después de ebulliciones sucesivas con ácido débil (H2SO4, 1.25%) y álcali débil (NaOH, 1.25%); el protocolo de determinación de fibra cruda representa lo que le sucede al alimento en el estómago (ambiente ácido) y a nivel del intestino (ambiente alcalino). (Arrubla & Ramírez, s.f.) Si queremos analizar su composición, pues está formada por todos los componentes de la pared celular más la fracción de almidón resistente. Por otro lado, su importancia radica en saber la cantidad de esta en la dieta, la cual dependerá de la fisiología digestiva propia de cada especie; por ejemplo, en el caso de monogástricos se debe considerar un nivel máximo de fibra cruda; lo contrario sucede con poligástricos donde se debe considerar un nivel mínimo de fibra cruda (Arrubla & Ramírez, s.f.) Fuente: Möller, J. (2014) Fórmula la determinación de la Fibra cruda: X100% 𝐹𝑖𝑏𝑟𝑎 𝐶𝑟𝑢𝑑𝑎 = 𝑊1 − 𝑊2𝑊 Donde: W: Peso de la muestra. W1: Peso del crisol conteniendo el residuo de digestión seco. W2: Peso del crisol conteniendo las cenizas. 2.2 Fibra dietética La fibra dietética está constituida por la parte comestible de las plantas o carbohidratos análogos que son resistentes a la digestión y absorción en el intestino delgado, con fermentación parcial o completa en el intestino grueso. La fibra dietética incluye polisacáridos, oligosacáridos, lignina y sustancias asociadas a las plantas. (Robles, s.f) Dado sus propiedades de solubilidad, podemos agruparlas en solubles y no solubles. a) Fibra dietética soluble (FDS). Son el conjunto de sustancias que son solubles en el agua. Estas pueden ser las pectinas, gomas, mucílagos, ciertas hemicelulosas y celulosa modificada. b) Fibra dietética insoluble (FDI). Es la fracción no soluble en el agua,está constituída por las celulosas, la mayoría de las hemicelulosas y la lignina. 2.3 Extracto libre de nitrógeno Esta fracción agrupan polisacáridos (celulosa y almidón), ligninas, materias pécticas, ac. orgánicos y otras sustancias libres de nitrógeno, constituyendo así la parte más valiosa del alimento (Ramírez, 1998). Fórmula para la determinación del Extracto libre de nitrógeno % 𝐸𝐿𝑁 = 100% − ( %ℎ𝑢𝑚𝑒𝑑𝑎𝑑 + %𝑐𝑒𝑛𝑖𝑧𝑎 + %𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 + %𝐺𝑟𝑎𝑠𝑎 + %𝑓𝑖𝑏𝑟𝑎 *Todo en la misma base seca, fresca o parcialmente seca. 2.4 Carbohidratos Este grupo comprende, desde los compuestos más simples como monosacáridos hasta los más complejos como almidón y celulosa. A través de de un procedimiento analítico sencillo, no es posible determinar todo el contenido de carbohidratos, ya que se encuentran integrados por numerosas entidades químicas que carecen de una característica analítica común (Ramírez, 1998). 2.5 Clasificación de insumos 2.5.1 De acuerdo a su comp. química. Tenemos insumos orgánicos como las proteínas, los fibrosos y energéticos, estos últimos, abarcan a los lípidos y ELN. 2.5.2 De acuerdo al consejo nacional de investigaciones NRC. Los agruparon como: ● Forrajes secos ● Pastos y forrajes ● Silajes, ensilados y henolajes. ● Alimentos energéticos. ● Alimentos proteicos. ● Suplementos minerales y vitamínicos. ● Aditivos no nutricionales. III. MATERIALES Y MÉTODOS ➢ Determinación de Fibra cruda La práctica se realizó en el Laboratorio de Nutrición Animal (LABN) Equipos y Materiales Fig. 1: Vasos Beaker de 500 ml Fig. 2: Crisol Fig. 3: Papel filtro Fig. 4: Estufa Fig. 5: Mufla Fig. 6: Balanza analítica Fig. 7: Desecador Fig. 8: Pinza Reactivos ● Ácido Sulfúrico 1.25% ● Hidróxido de sodio 1.25% ● Agua destilada Procedimiento 1. Pesar la muestra (exenta de grasa, se puede tomar el residuo de la determinación de grasa). 2. Digestión ácida: Colocar la muestra en un vaso y agregarle 200 ml de H2SO4 al 1.25%. Hervir durante 30 minutos en un destilador de reflujo, filtrar y lavar con agua destilada caliente hasta neutralizar la acidez. En esta digestión se elimina el total de carbohidratos solubles, parte de la proteína y como error del análisis existe una pérdida de una parte de lignina y hemicelulosa y una ligera cantidad de celulosa. 3. Digestión Básica: Colocar el filtrado nuevamente en el vaso de 600 ml. Y someterlo a la digestión alcalina. Para ello añadir 200 ml de NaOH 1.25% y hervirlo durante 30 minutos en destilador de reflujo (cuidar durante todo este tiempo). Filtrar al vacío en una cápsula de cerámica porosa lavando con agua destilada caliente. En esta digestión se termina de eliminar el remanente de la proteína e igualmente que en el caso anterior existe una pérdida de una parte de la fibra insoluble. 4. Colocar el residuo en la estufa (2 horas), enfriar en desecador y pesar. 5. Luego se lleva a la mufla (para eliminar la materia orgánica y obtener las cenizas), finalmente cuando la cápsula esté fría junto con la ceniza, se pesa nuevamente. IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES 4.1 RESULTADOS Muestra Muestra 1 Muestra 2 P. muestra, g 3.4512 3.5291 W crisol residuo seco, g 18.8377 19.0723 W crisol cenizas, g 18.7523 18.0574 ❖ Determinación de los valores de fibra cruda % Fibra cruda = x 100𝑊1 − 𝑊2𝑊 MUESTRA 1 % Fibra cruda 1= x10018.8377−18.75233.4512 =2.4745 MUESTRA 2 % Fibra cruda 2= x10019.0723−18.05743.5291 =28.7580 Muestra Agua Proteína Ceniza Grasa Fibra ELN Muestra 1 5.89 28.30 2.66 3.20 2.4745 57.475 Muestra 2 8.73 5.25 3.79 9.43 28.7580 44.042 ❖ Determinación del Extracto Libre de Nitrógeno %ELN = 100% - ( % Humedad - % Ceniza - % Proteína - % Grasa - % Fibra cruda) MUESTRA 1 %ELN 1 = 100 - (5.89 - 2.66 - 28.30 - 3.20 - 2.4745) = 57.475 % La muestra 1 estaría clasificada como alimento proteico ya que generalmente contienen más del 20% de proteína total. MUESTRA 2 %ELN 2 = 100 - (8.73 - 3.79 - 5.25 - 9.43 - 28.7580) = 44.042 % La muestra 2 estaría clasificada como forrajes secos por su alto contenido de MS y FC, más de 18% en base seca. 4.2. DISCUSIONES - Según los resultados obtenidos al determinar el porcentaje de la fibra cruda según los datos obtenidos para la muestra 1 es 2.4745 y el porcentaje de la muestra 2 es 28.7580; por otro lado para hallar la determinación de extracto libre de nitrógeno de un alimento es necesario tener los datos de la humedad, ceniza, fibra cruda, extracto etéreo y proteína cruda ya que el ELN se determinará por diferencia. - El ELN 1 de la muestra 1 nos da como resultado 57.475 % y estaría clasificado como alimento proteico porque contienemás del 20 % de proteína total y el ELN 2 de la muestra 2 nos da como resultado 44.042 %, por lo tanto esta muestra estaría clasificada como forraje seco por su contenido alto de MS y fibra cruda puesto que se utilizó 28.7580 % de fibra cruda para realizar la determinación del extracto libre de nitrógeno. V. CONCLUSIONES ● Se determinó la cantidad de fibra cruda de la muestra 1 y 2 que fueron 2.4745 y 28.7580 respectivamente. ● Se determinó la cantidad de extracto libre de nitrógeno de la muestra 1 y 2 que fueron 57.475 % y 44.042 % respectivamente. VI. BIBLIOGRAFÍA ● Arrubla, J; Ramírez, D. s.f. Implementación de un método de determinación de fibra cruda en materias primas y producto terminado en alimentos para animales en CIPA S.A. Universidad Tecnológica de Pereira. Pereira. Recuperado de: http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/handle/11059/7352/66407R17 3.pdf?sequence=1&isAllowed=y ● Möller, J. 2014. Comparación de los métodos para la determinación de fibra en pienso y en los alimentos. Recuperado de: www.fossanalytics.com ● Miguel Angel Olvera Novoa, Carlos A. Martínez Palacios, Elizabeth Real de León. Manual de técnicas para laboratorio de nutrición de peces y crustáceos. Análisis proximal. Recuperado de: http://www.fao.org/3/AB489S/AB489S03.htm#ch3.6 ● Ramírez, I. 1998. Análisis de alimentos. 3 ed. Santa Fe de Bogotá. Recuperado de: accefyn-dspace.metabiblioteca.org ● Robles, S. s.f. Centro Nacional de Alimentos y Nutrición. Instituto Nacional de Salud. Recuperado de: https://repositorio.ins.gob.pe/xmlui/bitstream/handle/INS/834/BOLETIN-200 1-ene-oct-13-14.pdf?sequence=1&isAllowed=y http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/handle/11059/7352/66407R173.pdf?sequence=1&isAllowed=y http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/handle/11059/7352/66407R173.pdf?sequence=1&isAllowed=y https://www.fossanalytics.com/-/media/files/documents/papers/feed-and-forage-segment/fibre-methods-compared_es.pdf http://www.fao.org/3/AB489S/AB489S03.htm#ch3.6 https://accefyn-dspace.metabiblioteca.org/bitstream/001/54/1/ACCEFVN-AC-spa-1998-Analisis%20de%20alimentos..pdf https://repositorio.ins.gob.pe/xmlui/bitstream/handle/INS/834/BOLETIN-2001-ene-oct-13-14.pdf?sequence=1&isAllowed=y https://repositorio.ins.gob.pe/xmlui/bitstream/handle/INS/834/BOLETIN-2001-ene-oct-13-14.pdf?sequence=1&isAllowed=y VII. CUESTIONARIO PRÁCTICA 04 1. Discuta el concepto de fibra: fibra dietética y fibra cruda. Según la Asociación Americana de Químicos de Cereales (AACC) en mayo del 2000, la Fibra dietética es la parte comestible de las plantas o carbohidratos análogos que son resistentes a la digestión y absorción en el intestino delgado, con fermentación parcial o completa en el intestino grueso. La Fibra dietética incluye polisacáridos, oligosacáridos, lignina y sustancias asociadas de las plantas. También promueven efectos fisiológicos benéficos que incluyen su propiedad laxante, la disminución del colesterol sanguíneo y/o la disminución de la glucosa sanguínea. El término de Fibra cruda, es un viejo término basado en un método de análisis que ha sido criticado por muchos investigadores; se basa en la extracción ácida y luego alcalina del material de las plantas. El método data del inicio de la centuria de 1900 y hay un consenso que es defectuoso y debe descontinuarse. Sin embargo, se menciona el término, porque muchas publicaciones y tablas de Alimentos emplean aún esta expresión, aunque debe entenderse claramente la diferenciación entre ambos términos: los valores de Fibra Dietética Total (FDT) son 3 a 5 veces mayores que los valores de Fibra cruda. 2. Calcule el porcentaje de fibra cruda en una muestra de afrecho que contiene 18 % de humedad. Considere que el análisis se trabajó con: Peso de muestra desgrasada y seca = 2.6 g Peso después de la estufa = 19.7651 g Peso después de la mufla = 19.3422 g % EE = 2.3 Peso de la muestra: p p - 18%p - 2.3%p = 2.6 p = 3.2622 g Entonces: %Fibra cruda = x100 19.7651 − 19.3422 3.2622 = 12.9636% 3. Reporte una lista de productos comerciales que contienen fibra soluble y son utilizados como antidiarreicos. Indicar el principio activo y casa comercial. PRODUCTO PRINCIPIO ACTIVO CASA COMERCIAL COLEFLUX CÁPSULA Racecadotrilo FARMINDUSTRIA S.A. IMPACT ATC: Fórmulas completas especiales Merck Peruana S.A. ISOSOURCE EPA y DHA Nestlé Health Science NOVASOURSE DIABET ATC: Fórmulas completas especiales Nestlé Health Science PEPTAMEN JUNIOR LHPEPTAMEN JUNIOR LH Harina de pescado Nestlé Health Science RESOURCE CF ATC: Fórmulas completas poliméricas normoproteicas hipercalóricas Nestlé Health Science 4. Explique la relación entre fibra y tasa de pasaje. La tasa de pasaje tiene un importante significado en el paso del alimento por el tracto gastrointestinal. Para la determinación de la tasa de pasaje está influenciada por diferentes factores como; la especie animal, el tipo de alimento, así mismo el tipo de forraje y su calidad. La velocidad de pasaje puede aumentar a causa de un incremento en el consumo o por disminución del tamaño de partícula del alimento. Sin embargo, no siempre un menor tamaño de partícula causa una disminución de la digestibilidad de la fibra. Por otro lado, si el tamaño de partícula es excesivamente pequeño aumenta la tasa de pasaje. 5. Calcule el porcentaje de fibra cruda en una muestra de afrecho que contiene 11% de humedad. Considere que al análisis se trabajó con: Peso de muestra desgrasada y seca = 2.6 g Peso después de la estufa = 19.7651 g Peso después de la mufla = 19.3422 g % EE en base seca = 3.0 a) Pasar el % EE en base seca a base fresca: 3 -------> 100 x -------> 89 % EE = x = 2,67% b) Peso de la muestra: p p - 11%p - 2.67%p = 2,6g p = 3,0117 g c) Entonces: % Fibra cruda = x 10019, 7651 − 19, 34223,0117 %FC = 14,0419%
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