DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES DIARREICAS AGUDAS

Vista previa del material en texto

KAREN ANDREA MORALES C. 
 
 
DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES 
GASTROINTESTINALES Y ENFERMEDADES DIARREICAS AGUDAS (E Das) 
 
 
DEFINICION DE EDAs 
▪ Cambio súbito en el patrón de evacuación intestinal normal del individuo. Caracterizado por aumento 
en la frecuencia o la disminución en la consistencia de las deposiciones. 
 
▪ Aparición debe tener menos de TRES SEMANAS. 
▪ Se puede acompañar de signos y síntomas como náuseas, vómitos, fiebre o dolor abdominal. 
▪ La causa más frecuente es la INFECCIÓN GASTROINTESTINAL. 
▪ Produce una gastroenteritis o inflamación de la mucosa gástrica e intestinal. --→ GASTROENTERITIS AGUDA. 
▪ La diarrea refleja un aumento en la pérdida de componentes: agua y electrolitos. 
▪ El término agudo viene dado de ser habitualmente un PROCESO DE CARÁCTER AUTOLIMITADO, con una duración 
menor de 3 semanas. 
▪ Existencia de diarrea cuando hay más de 2 deposiciones de menor consistencia, o 1 deposición de menor 
consistencia con presencia de sangre macroscópica, en un periodo de 24 horas. 
▪ Frecuencia de las deposiciones es más alta en niños menores de 3 meses. 
▪ Los pacientes con EDA no requieren una evaluación inmediata por el laboratorio, puesto que sus episodios clínicos 
son por lo general autolimitados y por tanto los resultados de sus estudios diagnósticos estarán disponibles 
después que los síntomas hayan desaparecido. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
KAREN ANDREA MORALES C. 
 
 
 
EPIDEMIOLOGIA 
• La diarrea aguda es una de las enfermedades más comunes en niños (Menores de 5 años) 
• 2° causa de morbilidad y mortalidad a escala mundial. 
• Virus Norwalk, 1° virus identificado como agente etiológico de gastroenteritis en humanos. 
• 4 grandes categorías de estos virus: rotavirus, astrovirus, adenovirus entéricos y calicivirus humanos. 
• Los rotavirus constituyen el principal agente etiológico productor de diarrea en la infancia, se asocian a una forma de 
enfermedad más grave e infectan prácticamente a todos los niños en los 4 primeros años de vida, dándose la 
enfermedad especialmente entre los 6 y 24 meses de edad. Son los más frecuentemente detectados en los casos que 
precisan ingreso hospitalario. 
• Etiología bacteriana, los agentes predominantes son Salmonella spp y Campylobacter spp, seguidos de Shigella spp, 
Aeromona spp y Yersinia spp. Agentes detectados en pacientes con gastroenteritis tratados de forma ambulatoria. 
• La dificultad de estudio en heces de las distintas variedades de E. coli hace que se disponga de escasos datos sobre su 
incidencia en nuestro medio. 
• Algunos factores del huésped que influyen en el desarrollo EDA son las edades extremas, inmunocomprometidos por 
enfermedades o terapias, uso de bloqueadores de la bomba de protones. 
• Clínicamente la diarrea infecciosa aguda se clasifica en dos síndromes fisiopatológicos, comúnmente denominados no 
inflamatorios (principalmente virales, enfermedades más leves) e inflamatorios (principalmente invasivos o con 
bacterias productoras de toxinas, enfermedades más graves). 
• Las infecciones virales son la causa más común de diarrea aguda. Las infecciones bacterianas se asocian con mayor 
frecuencia con viajes, comorbilidades y enfermedades transmitidas por los alimentos. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FISIOPATOLOGIA 
• Diarrea se produce cuando el volumen de agua y electrolitos presentado al colon excede su capacidad de absorción, 
eliminándose de forma aumentada por las heces. 
• Puede deberse a un aumento en la secreción y/o a una disminución de la absorción a nivel de intestino delgado, o, 
más infrecuentemente, a una alteración similar a nivel de colon. Secundarias a la afectación intestinal que resulta de 
la interacción entre el agente infeccioso y la mucosa intestinal. 
KAREN ANDREA MORALES C. 
 
• En determinados casos se da la penetración de la barrera mucosa por antígenos extraños, tales como microorganismos 
o toxinas. 
• Las toxinas microbianas pueden ligarse a los receptores del enterocito y estimular la secreción epitelial de agua y 
iones. 
• Microorganismos pueden dañar el enterocito produciendo una disminución en la absorción de electrolitos, una 
pérdida de las hidrolasas del borde en cepillo y un escape de fluido a través del epitelio. 
• La lesión por daño directo de la célula epitelial tiene lugar en las infecciones por agentes virales como Rotavirus, 
aunque en este caso además una proteína viral actuaría como enterotoxina. 
• También se produce lesión vellositaria en infecciones agudas por protozoos tales como Giardia lamblia, 
Cryptosporidium parvum y Microsporidium. 
 
 
DIAGNÓSTICO 
 
Indicaciones para paciente antes de toma de muestra fecal 
 
o No haber tomado antibióticos 
 
o Evitar que la muestra se contamine de orina. 
o La cantidad de muestra tiene que ser como del tamaño de una nuez 
o No ingerir laxantes, carnes rojas, grasas en exceso o legumbres de hojas. 
 
 
Medidas para obtener una muestra adecuada para el dx 
 
1. Las muestras de excremento deben ser recién emitidas y obtenidas en recipiente estéril de boca ancha y con tapa 
hermética (5 ml) que permitan su fácil transporte (máximo 2 hrs). 
2. Cuando la muestra no pueda analizarse inmediatamente después de haberse obtenido, es importante el empleo 
de medios de transporte tales como el Cary Blair que preserva la viabilidad de los microorganismos patógenos. 
3. Para pacientes pediátricos las muestras se deberán obtener por irrigación con sonda, una jeringa sin aguja y SSI a 
37°C. La solución salina se inyecta a través de la sonda directamente al recto y posteriormente con la misma 
jeringa y sonda se recolecta la muestra, también se puede introducir un hisopo estéril hasta rebasar el esfínter 
anal y rotarlo suavemente. Cuando sea posible se recurre a una sigmoidoscopia. 
4. Las heces obtenidas del suelo, excusado, así como del pañal no son útiles, porque pueden contaminarse con 
material extraño. 
 
CITOLOGÍA DE MOCO FECAL (CMF) ----- CONOCER SI ES VIRAL/ BACTERIANA 
❖ Nos permite diferenciar la etiología de una infección es viral o bacteriana (+10 LEUCOCITOS POR CAMPO) 
❖ La presencia de moco indica irritación o inflamación intestinal. En condiciones normales las heces no suelen 
contener células epiteliales, ni leucocitos, ni eritrocitos 
❖ Tiene por objetivo EVALUAR LA CELULARIDAD DE LA MUESTRA. 
KAREN ANDREA MORALES C. 
 
❖ Más de 10 leucocitos por campo en moco fecal orienta a una patología infecciosa. 
❖ Si el predominio es de mononucleares, es más probable que la etiología sea viral. 
❖ Si él es de polimorfonucleares, se puede pensar en patología bacteriana. 
❖ Si encontramos eritrocitos, habrá que pensar en complementar datos para síndrome disentérico. 
 
 
1. Evaluación MACROSCOPICA DE MOCO FECAL 
 
o Sugiere que se origina del colon. 
o Si está mezclado con las heces y tiene aspecto brillante, sugiere que procede del intestino delgado. 
o Si es transparente como catarro alérgico, sugiere colon irritable (estrés). 
o Si es opaco con células epiteliales, sugiere un proceso inflamatorio agudo. 
o Si es sanguinolento, sugiere neoplasma, amibiasis, gastroenteritis enteroinvasiva. 
o Si es sanguinolento y tiene pus, sugiere colitis ulcerosa, carcinoma, disentería bacilar, diverticulitis aguda o tubérculos 
intestinales. 
 
. 
2. Evaluación de la CELULARIDAD: 
Búsqueda e identificación de células polimorfonucleares (PMN) o mononucleares (MN) que permiten determinar la 
posible causa del padecimiento (viral o bacteriano 
 
PROCEDIMIENTO 
3. Pequeña cantidad de heces (moco y sangre), extendido sobre un portaobjetos. 
4. Agregar 2 gotas de AZUL DE METILENO. 
5. Se cubre con un cubreobjetos. 
6. Reposar de 2 a 3 min 
7. Observa al microscopio con aumento de 40x. 
 
REPORTE 
 Se realiza contando 100 células y se informa el porcentaje de las células encontradas 
La presencia de células epiteliales, eritrocitos y bacterias se reporta como:o Abundantes: (+++) 
o Moderadas (++) 
o Escasas (+) 
 
RESULTADOS 
 
o Si se encuentran pocos PMN sugiere amibiasis aguda 
o Si encuentra abundantes eosinófilos sugiere alergia intestinal 
KAREN ANDREA MORALES C. 
 
o Si observa células epiteliales sugiere irritación gastrointestinal 
o Si encuentra abundantes eritrocitos indicaría una sospecha de síndrome disentérico. 
 
 
pH DE LAS HECES 
Heces normales son neutras o ligeramente alcalinas (pH 6.9 a 7.2). ---→ Factores dietéticos y endógenos. 
Procedimiento 
1. Tira reactiva / papel tornasol---→ Contiene indicadores de pH 
2. Se sumerge en una mezcla de heces y solución salina (o agua destilada) 
3. Debe adoptar un color que va a depender de los protones existentes en la muestra. 
4. Comparar con la tira control. 
 
 
Resultados 
▪ pH fecal ácido menor a 6.0 es evidencia de malabsorción de azúcares reductores en el intestino 
delgado, Llegar al intestino grueso, son fermentados por acción bacteriana. 
+ Dispepsia de fermentación---→ Reacción acida (CH reductores que no se absorben se fermentan) 
+ Generan ácido láctico, ácido acético, ácidos grasos de cadena corta. 
+ Se forman gases, provocando distensión abdominal y cólico. 
▪ pH es ligeramente alcalino se sospechará de intolerancia a los disacáridos 
▪ pH fecal es alto puede ser un factor de riesgo de cáncer colo rectal. 
 
 
Azucares reductores 
▪ Son aquellos que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional aldehído o cetona) intacto y que a través de este 
pueden reaccionar como agentes reductores de otras moléculas. 
 
▪ Los disacáridos no se hidrolizan en monosacáridos y al pasar a intestino grueso son fermentados, generando 
malestar intestinal, gases y por ende el pH fecal se acidifica. 
 
Azucares reductores 
Usar el reactivo de Benedit (contiene sulfato cúprico, citrato sódico y carbonato anhídrido de sodio). 
En una solución que contiene azúcares reductores y el reactivo de Benedit, el ion cúprico es reducido por efecto del 
grupo aldehído o cetona del azúcar hasta formar un precipitado de color rojo-naranja correspondiente al 
óxido cuproso (Cu2O). 
1. En un tubo de ensayo colocar una cantidad pequeña de heces y agregar un mililitro de SSI. 
2. Mezclar, adicionar una pastilla de clinitest (que contiene al reactivo de Benedit). 
KAREN ANDREA MORALES C. 
 
3. Sin agitar la mezcla esperar 15 segundos y se observa la coloración. 
 
¿Cómo se interpretan los resultados? 
El color resultante, varía con la cantidad de sustancia presente reducida, si existen azúcares reductores la reacción se 
tornará rojo-naranja, y se sospechosa etiología viral o; si la reacción adquiere la tonalidad azul, será negativa. 
 
PRUEBAS RÁPIDAS PARA DETECCIÓN DE VIRUS O ENTEROBACTERIAS 
PATÓGENAS EN HECES 
 
• Basado en 3 tecnicas inmunológicas: AGLUTINACION CON LATEX, ELISA e INMUNOCROMATOGRAFIA. 
• Son pruebas cualitativas que detectan antígenos virales o de enterobacterias patógenas. 
• Es mejor usa la INMUNOCROMATOGRAFIA: Es mas rápida(minutos), necesita menor cantidad de muestra y 
demuestra una sensibilidad de 87%-100%, además de especificidad de 91.7-100%. 
• Existen pruebas rápidas para Rotavirus, Helicobacter pylori, Yersinia enterocolítica, E. coli, 
• Existen pruebas de aglutinación mediante anticuerpos monoclonales para V. cholerae O1 y O139, coaglutinación 
SMART. 
 
PROCEDIMIENTO 
Se puede utilizar una prueba rápida de detección de antígenos basada en el principio de “SANDWICH”: 
1. En fase sólida por inmunocromatográfica (por ejemplo, para rotavirus o H. pylori), se tomará una alícuota 
diluida de heces 
2. Se deberá agregar al pozo para muestra. 
3. La muestra fluye a través de la tira que contiene los anticuerpos (por ejemplo, anti-H. pylori) asociados 
con el colorante rojizo de oro coloidal. 
 
 
RESULTADOS 
 
• Si la muestra contiene los ANTÍGENOS PROBLEMA, estos se unirán al anticuerpo asociado al ORO 
COLOIDAL. 
• Se formar el complejo Antígeno-anticuerpo-oro coloidal. 
• El movimiento de este complejo a través de la membrana de nitrocelulosa por acción de capilaridad 
hacia la región de la línea de prueba en la cual se encuentran los anticuerpos inmovilizados. 
• Como estos complejos reaccionan en la zona de prueba se verán unidos los anticuerpos en la membrana 
formando una línea. 
• La segunda línea rojiza en la zona de control siempre debe aparecer, pues es el control de calidad de la 
prueba. 
 
KAREN ANDREA MORALES C. 
 
 
COPROCULTIVO 
Tracto gastrointestinal colonizado por un microbiota normal constituida por bacterias pertenecientes a las familias: 
1. Enterobacteriácea (p. ejemplo Escherichia coli), 
2. Bacteroidetes (p. ejemplo Bacteroides sp.) 
3. Enterococcaceae (p. ejemplo Enterococcus faecalis) 
4. Streptococcaceae (p. ejemplo Streptococcus del grupo viridans). 
 
• Algunos miembros de estas familias pueden causar gastroenteritis y disentería bacilar. 
• El diagnóstico etiológico se realiza mediante el cultivo de los microorganismos presentes en la materia 
fecal. 
• Se logra, inicialmente el aislamiento y posteriormente se realiza la identificación bioquímica y serológica de 
las bacterias patógenas presentes. 
• Para el aislamiento bacteriano se requiere el uso de medios selectivos diferenciales y de medios de cultivos 
enriquecidos 
 
 
Procedimiento 
1. Realizar un primoaislamiento en caldo de enriquecimiento. 
2. Incubar a 37° C/24 hrs. 
3. Inocular con el asa los medios de cultivo Mc Conkey, Salmonella- Shigella (SS), Eosina-azul de metileno (EMB). 
4. Con el asa bacteriológica sembrar en estría cruzada y luego esterilizar por calor seco el asa. 
5. Incubar a 37°c por 24hrs. 
6. Observar el crecimiento y morfología colonial. 
7. Realizar resiembras para detallar el metabolismo bacteriano (pruebas bioquímicas). 
 
 
Actualmente se utilizan medios cromogénicos CHROMagarTM------ > Medios de cultivo de elevada especificidad, 
rápida y de confianza; Los medios identifican a: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, 
Candida albicans, Listeria monocytogenes, Enterococcus sp, Salmonella sp, Candidas sp. 
 
 
PRUEBAS BIOQUIMICAS 
TSI (agar triple azúcar-hierro): 
Permite observar la fermentación de glucosa, lactosa y sacarosa. Producción de gas. Producción de ácido sulfhídrico. 
• Fermentación acidifica el medio: Indicador (rojo de fenol) vire de rojo a amarillo. 
• El tiosulfato de sodio reduce a sulfuro de hidrógeno (H2S) que reacciona con sales de hierro, proporcionando 
sulfuro de hierro de color negro. 
KAREN ANDREA MORALES C. 
 
 
Agar citrato de Simmons: 
Para diferenciar aquellas bacterias que emplean el citrato como única fuente de carbono y energía. 
• Indicador: Colorante azul de bromotimol, se alcaliniza con sales de amonio y el medio vire de verde a un color 
azul cuando es positivo. 
 
LIA (agar hierro lisina): 
Prueba basada en descarboxilación y desaminación de lisina, también en producción de ácido sulfhídrico, el medio sin 
inocular es violeta. 
• Descarboxilación de la lisina positiva; pico violeta/fondo violeta. Prueba negativa: Pico violeta/ fondo amarillo. 
• Desaminación de la lisina; pico rojizo/fondo amarillo, se presenta en Proteus, Providencia y Morganella sp. 
• Producción de ácido sulfhídrico: ennegrecimiento del medio (especialmente en el límite entre el pico y el fondo. 
 
MIO (agar Movilidad-Indol-Ornitina): 
Detecta la movilidad del microorganismo, producción de indol y descarboxilación de ornitina. 
• La fermentación de la dextrosa hace que el medio vire a un color amarillo. 
• La descarboxilación de la ornitina alcaliniza el medio dando un vire a color púrpura. 
• La producción de indol a partir del triptófano se manifiesta al agregar el reactivo de Kovac o de Erlich. 
 
UREA (Agar Christensen) 
• Detecta la capacidad de hidrolizar la urea del microorganismo debido a la producción de ureasa. 
• Un cambio de amarillo a rosado indica que la urea fue hidrolizadapor la ureasa del microorganismo. 
• Ausencia de cambio de color indica reacción negativa. 
 
Rojo de Metilo y Vogues Proskauer: 
Determina capacidad de fermentar la glucosa con producción de ácido por la vía ácido-mixta o con producción de un 
producto final neutro (acetoína) por la vía butanodiólica. 
 
• Prueba de Rojo de Metilo: Una coloración roja, indicadora de la presencia de ácidos provenientes de la 
fermentación de la glucosa, constituye un resultado positivo, una coloración amarilla constituye una reacción 
negativa. 
• Vogues Proskauer: La aparición de un color rosado constituye una reacción positiva indicadora de la presencia 
de acetoína, producto de la fermentación de la glucosa.