MICROSCOPÍA - Anatomía veterinaria microscopica

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La histología es el "estudio de los tejidos"
Análisis de la composición y función del material biológico.
Todas las células (sean iguales o diferentes) que cumplan la misma 
se les conoce como tejido en conjunto.
Para el estudio de la histología, es necesario usar la ciencia 
de la microscopía: estudio detallado que requiere 
instrumento de microscopio.
Simple o lupa
Usa 1 o más lentes en 
un solo sistema 
óptico
Fotónico o 
compuesto
Utilizado para estudios biológicos. 
Utiliza lentes convexos (curvos).
Óptico o liviano
Debe de haber una fuente de 
luz para mejorar la imagen. 
Proviene del compuesto
Digital
Utiliza una cámara que 
muestra la imagen
Fluorescente Electrónico
Estereoscópico o de 
disección:
Aumenta la imagen y 
permite manipularlo.
Sistema óptico: observar
Los lentes que lo conforman son:
Ocular: cerca del ojo1.
Objetivo: cerca de la muestra2.
Condensador: concentra la luz 
en la muestra
3.
Diafragma: regula la cantidad 
de luz
4.
Foco5.
Parte mecánica: manipular
Se conforma por
Soporte: contiene una base y un brazo 
que unen los elementos
1.
Platina: charola que coloca a la muestra2.
Cabezal: sostiene los oculares3.
Revólver: contiene los lentes objetivos4.
Tornillos de enfoque: enfocan la muestra 
(macro y micrométricos)
5.
Partes del microscopio óptico
PROCESAMIENTOS DE MUESTRAS
Toma de muestra:1.
En caso de requerir análisis patológico o reporte a las autoridades•
Deben recolectarse rápido•
Fijación de la muestra: para que la muestra se mantenga en su estado común (no se expande ni se retrae), no se descompongan (produce muerte bacteriana 
o inactiva enzimas) y detengan la autólisis (muerte celular). Existen 2 tipos de fijadores:
Físicos: Métodos ambientales 
Congelacióni.
Liofilización: deshidratación. Más efectivo que los solventes polares.ii.
a.
Químicos: Uso de sustancias. Se necesita que se cubra completamente la muestra del químico (al menos 1cm cúbico).
Aldehídos: Formaldehído al 10%. Son muy eficientes pero debe tratarse con precaución (carcinogénicos).i.
Solventes polares: Alcohol, acetona y cloroformo. Pueden evaporar el agua y grasa. ii.
Ácidos: Acético (Vinagre diluido al 50%), pírico y fórmico. Pueden quemar las proteínas.iii.
Sales: Dicromato de potasio, Cloruro de Mercurio. Es un método de liofilización química.iv.
b.
2.
Procesamiento de la muestra (preparación): No todas las muestras se pueden observar en fresco. Se necesitan hacer cortes micrométricos. 
Técnica de inclusión en parafina: Sirve para dar dureza y consistencia para poderlas cortar y teñir y la parafina se infiltra al interior de la célula 
(sustituyen el relleno de agua) como soporte al tejido. (La parafina es moldeable y económica a comparación de la cera). Sus pasos son:
Deshidratación: Extrae el agua de los tejidos y crea el espacio donde va a entrar la parafina. Se usa alcohol en diferentes grados de concentración 
dependiendo del tamaño de la muestra (del 10% al 100% de etanol de forma lenta para no cambiar la morfología de las células).
i.
Impregnación en solventes (Fase de aclarado o diafanización): ayuda a que la célula recupere su integridad de la célula. Se utilizan alcoholes 
neutros (xilol) para desplazar y sustituir a los alcoholes anteriores.
ii.
Inclusión en parafina: Se utiliza parafina diluida y completamente líquida, después se realizan baños en la parafina de la muestra hasta formar un
bloque (se puede usar un recipiente molde). Una vez que se tiene el molde, se ingresa al microtomo (aparato de corte milimétrico). 
iii.
a.
3.
Tinción de la muestra (tinción histológica): Los tejidos del cuerpo son incoloros (a excepción del cabello y la sangre). Colorear la muestra permite hacer una 
correcta diferenciación entre células y tejidos. El colorante depende de la muestra. Existen varios tipos de tintes (se debe buscar la neutralidad del ph con los 
tejidos para crear el tinte):
Básicos: para tejidos basófilos: ácidos (como el gástrico)a.
Ácidos: para tejidos acidófilos: básicos (como la glándula mamaria)b.
Mordientes: Contienen metales y se usa normalmente en sustancias radioactivas.c.
Neutros: penetran en cualquier tipo de tejidos, excepto en la sangre (por ser neutro en ph).d.
Hidrofóbicos: Repelen el líquido, por lo que se usa en tejidos adiposos (grasa).e.
4.
Por lo general se deben de utilizar por lo menos 2 colorantes, para teñir varios tipos de células y tejidos (no todos son iguales). En veterinaria se suele utilizar 
H. Y E (Hematoxilina como básico azul y Eosina como ácido rojo).
¿Cuál es el proceso de Tinción?
1. Desparafinar: se sustituye la parafina en por el xilol
2. Hidratar en alcohol (de 100% de concentración a agua destilada).
3. Aplicar las tinciones (primero la hematoxilina).
4. Lavado con agua destilada para eliminar exceso
5. Diferenciar aplicando alcohol ácido y luego lavar con agua destilada
6. Aplicar sustancia alcalina y lavar
7. Aplicar el segundo colorante
8. Deshidratar en alcohol (de 10 a 100)
9. Aclarar con xilol para eliminar todos los alcoholes y fijar los colorantes.
Montaje de la muestra: colocar la muestra en las laminillas listas para su observación al microscopio. Se protege la muestra con el cubreobjetos.5.
Identificación de la muestra: Son los datos que deben incluirse al entregar la muestra en laboratorio. Estos datos son los siguientes
Fecha y nombre de la persona que recolectó la muestraa.
Especie Animalb.
Sexoc.
Órgano o tejidod.
Fijador que se utilizóe.
Información anexa:
Nombre y teléfono del clínicoi.
Nombre y teléfono del propietarioii.
Tipo de análisis que se pideiii.
Signos clínicosiv.
Vacunación y tratamientov.
f.
Antes de tomar una muestra:
Encontrar la mejor zona para una muestra 
representativa: tomarÊtejidoÊsanoÊyÊpatológico.
•
Tener el material adecuado: mesas, instrumental 
y superficies que protejan la muestra.
•
Protección al médico que evite la zoonosis
(enfermedades transmisibles a los humanos).
•
Microscopia
martes, 18 de agosto de 2020 03:44 p. m.