Microscopía Electrónica de Transmisión y Microscopía Electrónica de Barrido

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Microscopía Electrónica de Transmisión y 
Microscopía Electrónica de Barrido 
 
1 Microscopía Electrónica de Transmisión 
Pablo A. González 
 
La microscopía electrónica de transmisión es una técnica donde un rayo de 
electrones atraviesa una muestra ultrafina interactuando con ella. Esta interacción 
es recogida por una pantalla fluorescente, una capa de material fotosensible o un 
sensor que convierte la imagen en tiempo real a una forma que puede ser 
observada a través de un monitor. 
Los microscopios electrónicos son capaces de resolver dos puntos cercanos de 
una manera significativamente mayor a los microscopios de luz visible debido a 
que la longitud de onda de los electrones es órdenes de magnitud menor a la de 
los fotones visibles. 
 
Figura 1.Microscopio Electrónico de Transmisión 
Un microscopio electrónico de transmisión supone acceder a observar objetos 
miles de veces más pequeños que los observables por microscopía óptica, 
accediendo de lleno a la escala nanométrica. 
El primer microscopio electrónico de transmisión fue construído por Max Knoll y 
Ernst Ruska en 1931 y se basó en trabajos previos sobre la manipulación de los 
entonces llamados rayos catódicos (corrientes de electrones de electrones) 
usando campos magnéticos en tubos de vacío. 
Al mismo tiempo que se desarrollaban técnicas de manipulación de corrientes de 
electrones, De Broglie publicaba su hipótesis de que toda partícula podía ser 
entendida también como onda. Empezar a percibir los electrones como onda 
permitía pensar en utilizar las longitudes de onda significativamente más pequeñas 
como herramienta para superar las resoluciones alcanzadas por los microscopios 
ópticos. 
Las muestras para microscopía de barrido suelen estarcompletamente 
deshidratadas, ya que las mismas van a observarse en cámaras de alto vacío, 
para esto suelen ser fijadas de manera previa en soluciones de glutaraldehído o 
formaldehído y tratadas luego con tetróxido de osmio. 
Los MEB pueden alcanzar amplificaciones de hasta 500.000 veces y las imágenes 
obtenidas suelen colorearse, a veces utilizando la información obtenida de la 
interacción de los datos provenientes de más de un detector para cada punto de 
la muestra, lo que logra agregar todavía más información en una sola imagen. 
Un microscopio óptico de transmisión funciona gracias a una fuente de emisión, 
que puede ser un filamento de tungsteno o hexaborato de lantano que son 
estimulados usando fuentes de alto voltaje (100 - 300 kV) para que liberen 
electrones dentro de un espacio cerrado con alto vacío. Una vez lograda esta 
emisión de electrones, se utilizan lentes magnéticas para modificar el haz de 
electrones y enfocarlo sobre la muestra. 
Para lograr que los electrones se desplacen en el espacio sin desviarse al chocar 
contra moléculas de gas, la microscopía electrónica de transmisión necesita de un 
sistema de vacío que llega a vacíos de entre 10^-4 y 10^-7 Pa. Esto es es necesario 
no solo para lograr que los electrones viajen sin desviarse por colisionar con 
moléculas de gas sino también para permitir que se genere una diferencia de 
voltaje entre el cátodo y la tierra sin generar arco. 
Los electrones, ahora enfocados y desplazándose sin problemas por el vacío, 
llegan hasta la muestra que se encuentra dispuesta en grillas de oro, molibdeno, 
cobre o platino, de unos 3 mm de diámetro y 100 um de ancho sobre las que se 
disponen cortes de material realizados en ultramicrotomía, alcanzando cerca de 
100 nm de espesor, aunque el grosor va a depender del tipo de microscopía de 
transmisión y del voltaje al que se trabaje. 
Las resoluciones alcanzables por microscopía electrónica de transmisión han ido 
progresando con el tiempo hasta alcanzar hoy resoluciones que pueden llegar 
cerca de los 50 pm.