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BACTERIOLOGÍA CLÍNICA 2015 TEORÍA 14 1 MICOBACTERIAS ENFERMEDAD POR Mycobacterium tuberculosis La Tuberculosis (TB) es una enfermedad infecciosa, transmisible y curable. El mecanismo de transmisión más importante y que causa casi la totalidad de los contagios es la vía aerógena (inhalación del bacilo). La mayoría de los enfermos presenta localización pulmonar, pero puede afectar a cualquier órgano del cuerpo humano. Desde el punto de vista de la Salud Pública se deben implementar medidas para controlar su transmisión y diseminación en la comunidad. Epidemiología Se estima que un tercio de la población mundial está infectada, formando el mayor reservorio humano conocido para una enfermedad infecciosa. Cada año aparecen 8 millones de casos nuevos y se producen 2 millones de muertes por esta causa. El nº de casos ha ido en aumento en coincidencia con el incremento de casos de SIDA. Taxonomía Familia: Mycobacteriaceae Orden: Actinomycetales Género: Mycobacterium (>150 especies) El género incluye especies patógenas, saprófitas y ocasionalmente patógenas. Se aíslan de muestras clínicas, aguas, suelos y del medio ambiente. Agente causal Micobacterias incluídas en el Complejo M. tuberculosis, que comprende: M. tuberculosis, M. africanum, M. bovis, M. microti, M. canneti, M. pinnipedi Todas pueden causar TB en el hombre. M. tuberculosis causa la mayoría de los casos de TB en humanos (99% casos de TB en el mundo). M. bovis es hallado en el ganado bovino, animales salvajes y domésticos desde donde puede ser transmitido al hombre. En áreas ganaderas 1-2% del total de casos de TB. M. africanum causante de algunos casos de TB en África. BACTERIOLOGÍA CLÍNICA 2015 TEORÍA 14 2 M. microti causa TB en roedores y en algunos mamíferos. M. canneti M. pinnipedi causante de TB en lobos, elefantes y leones marinos BCG (cepa vacunal) puede ser aislado de lesiones originadas por alguna complicación de la vacuna (niños) y de pacientes con tratamiento de cáncer de vejiga realizado con BCG. La gran mayoría de las micobacterias que no están integradas en el Complejo M. tuberculosis se encuentran en el medio ambiente y tienen escasa capacidad patógena. Sin embargo algunas pueden producir enfermedades llamadas micobacteriosis, especialmente en situaciones de inmunodeficiencias. Microbiología Bacilos delgados, rectos o ligeramente curvos. Aerobios. No flagelados, inmóviles No esporulados, no capsulados. No produce toxinas. Ácido alcohol resistente (BAAR). Diferentes estructuras químicas presentes en su pared celular ejercen efectos patógenos y evitan la actuación de mecanismos de defensa del huésped (por evasión del sistema inmune). PC gruesa y compleja, muy rica en lípidos, entre los que se destacan los ác. micólicos (h/ 60% del peso seco). 1 lípidos externos 2 ácidos micólicos 3 polisacáridos (arabinogalactano) 4 peptidoglicano 5 membrana plasmática 6 lipoarabinomanano (LAM) 7 fosfatidilinositol manósido El contenido lipídico explica sus propiedades: Las características de su tinción Impermeabilidad (colorantes, detergentes, dificultad para incorporar nutrientes, etc.) Resistencia a: agentes físicos y químicos, desecación, antisépticos y antimicrobianos, actividad bactericida del complemento, destrucción intracelular por macrófagos. BACTERIOLOGÍA CLÍNICA 2015 TEORÍA 14 3 Sensible a la pasteurización (60ºC, 30´), calor, luz solar y radiación UV. El componente proteico de la PC, peptidoglicanos es el que desencadena la respuesta inmune celular y las reacciones de hipersensibilidad retardada. Los componentes polisacáridos, como los arabinogalactanos poseen propiedades inmunosupresoras. Los glucolípidos localizados en la periferia de la PC, funcionan como evasinas, facilitan que la bacteria escape de la acción de los macrófagos. El “cord factor” es un potente quimiotáxico e induce la formación de granulomas. Patogenia La TB se contagia cuando una persona sana tiene contacto cercano diario con un enfermo que no está en tratamiento. Cuando el enfermo tose o estornuda elimina las bacterias, éstas quedan suspendidas en el aire y pueden ser inhaladas por otra persona sana. No se contagia por compartir utensilios u otros elementos con un enfermo. Transmisión de TB: aerosoles contagiantes: gotitas < 5 micras. Infección y bacteriemia La infecciones en zonas más periféricas del parénquima despierta la respuesta inflamatoria aguda donde los macrófagos fagocitan los bacilos. Cuando la carga bacteriana es baja, el bacilo es destruido por las defensas innatas y no se produce respuesta inmune. En cambio, cuando la carga bacteriana es alta, el bacilo es transportado por linfa a ganglios y se disemina y despierta la inmunidad. En las siembras orgánicas de TB de ganglios regionales, los bacilos se vacían en sangre venosa. La posibilidad que se asiente en uno u otro órgano depende de la tensión de O2 del órgano: en etapa de crecimiento lo hace en huesos, en la pubertad en los genitales y el órgano de elección es el pulmón. El órgano que tiene la tensión parcial de O2 más alta del organismo es el pulmón, es por ello que las regiones apicales y dorsales son las más afectadas en la TB pulmonar. Allí se desarrollan cavidades que alojan grandes poblaciones de bacilos y éstos pueden detectarse en las muestras de esputo. Además de la vía de transmisión aerógena existen otras formas de contagio mucho menos frecuentes: Orodigestiva (M. bovis; por consumo de leche no pasteurizada), Urogenital, Cutáneo mucosa, Transplacentaria (TB congénita). BACTERIOLOGÍA CLÍNICA 2015 TEORÍA 14 4 Síntomas de TB pulmonar: Tos con expectoración persistente (más de 15 días). Expectoración con sangre (hemoptisis), con o sin dolor torácico y dificultad para respirar. Pérdida de peso o de apetito. Fiebre vespertina y sudores nocturnos. Cansancio, decaimiento. Identificación del Síntoma Respiratorio Los síntomas más frecuentes y de mayor importancia para identificar a los enfermos de TB son la tos y la expectoración, que definen al Sintomático Respiratorio. SINTOMÁTICO RESPIRATORIO (SR): Es toda persona que presenta tos y expectoración por más de 15 días. La TB extrapulmonar afecta a otros órganos: ganglios, huesos, articulaciones, tracto génito urinario, intestino, menínges y otras partes del organismo. Diagnosticar estas localizaciones puede ser dificultoso y aunque no propagan la enfermedad deben ser tratados para curarse. Huésped susceptible: El riesgo de desarrollar TB una vez producida la infección, es de naturaleza principalmente endógena, determinado por la integridad del sistema inmunitario celular. Factores de riesgo: Edad (extremos de la vida). Estado inmunitario (VIH/Sida). Antecedentes de TB no tratada. Tiempo transcurrido desde la infección (I. reciente). Otras: Diabetes Miellitus, silicosis, neoplasias, desnutrición, etc. Métodos diagnósticos Bacteriología: Baciloscopía, Cultivo. Serología Clínica Radiología Histopatología Prueba Tuberculínica Baciloscopía Permite hacer el diagnóstico. Permite observar al bacilo a través del microscopio. Consiste en el examen directo de las muestras mediante coloración. La técnica se basa se la capacidad que poseen las micobacterias de incorporar anilinas (fucsina, auramina) y retenerla frente a la acción de decolorantes como la mezcla alcohol- ácido. Esta propiedad se debe al alto contenido de ácidos micólicos que poseen en su PC. Zielh- Neelsen. Tinción fluorescente. Fundamental para el Diagnóstico y Control de Tratamiento de TB pulmonar en el adulto. Sensibilidad: 5000-10000 bacilos/ml esputo. Confirma el 65-80% de casos de TB pulmonar, un resultado negativo BACTERIOLOGÍA CLÍNICA 2015 TEORÍA 14 5no descarta la enfermedad. Utilidad limitada en pacientes con VIH/Sida y en niños (formas paucibacilares: pocos bacilos). No específica, pero una baciloscopía pos de una muestra respiratoria de un paciente inmunocompetente tiene muy alto valor predictivo para el diagnóstico de TB. Muestra: La Muestra debe provenir del sitio de la lesión, obtenida en cantidad suficiente, en envase adecuado, bien identificada, conservada y transportada. N° de muestras: 2 (spot (muestra de la consulta) + matinal que por lo general la llevan al día siguiente). El Envase debe ser: Descartable, Boca ancha, Material plástico transparente, Cierre hermético. Tipo de muestras: Localización pulmonar: - Esputo (es el más frecuente) - Lavado bronquial, Lavado broncoalveolar y Lavado gástrico, cuando el paciente no puede expectorar. Otras localizaciones: orina, LCR, L. pleural, L. ascítico, sangre, biopsias, etc. INFORME Neg (-): No se encuentran BAAR en 100 campos observados (CO). Pos (+): se observa en promedio menos de un bacilo por campo en 100/ CO. Pos (++): de 1 a 10 BAAR por campo en 50/ CO. Pos (+++): más de 10 BAAR por campo en 20/ CO. La bacilocospía sigue siendo aún la técnica de elección para el objetivo principal de cortar la cadena de transmisión mediante el diagnóstico de los casos bacilíferos. Cultivo a) Nutrientes básicos: Fuente de C: glicerol o glucosa. Fuente de N: asparagina e iones amonio. b) Medios a base de huevo: Löwenstein – Jensen, Stonebrink, Kudoh-Ogawa. c) Medios semisintéticos: ej. Middlebrook 7H11. d) Sist. fluorométrico BACTEC MGIT. BACTERIOLOGÍA CLÍNICA 2015 TEORÍA 14 6 Medio de Löwenstein – Jensen: no se hace en placa, se hace en tubos largos, se incuba hasta 60 días. Medio verdoso por el verde de malaquita y posee un inhibidor. Método más sensible y específico, permite demostrar bacilos viables en cualquier muestra. Sensibilidad: 10-100 bacilos vivos/ ml muestra. Permite diagnosticar TB pulmonar paucibacilar (20- 30%). TBC extrapulmonar: prácticamente es el único método de diagnóstico bacteriológico. Obtener los bacilos en cultivo permite realizar ID y PS a drogas. Requiere 30-60 días obtener el resultado. Método de referencia. Uso selectivo del Cultivo: SR, con baciloscopías reiteradamente neg. que persisten con síntomas y/o con imágenes radiológicas sospechosas. Diagnóstico de TB extrapulmonar y de la niñez. Inmunosuprimidos: prevalencia de micobacterias y multirresistencia. Pacientes con tratamiento previo. Exposición a infección por bacilos R a fármacos (contacto de TB-MDR, internado, trabajador de salud o de prisiones). Vigilancia de farmacorresistencia. Tipificación Zielh – Nielssen los bacilos son todos rosados. Aspecto microscópico: Formas ácido alcohol resistente, Morfología y tamaño, Cord factor. Características del cultivo Tiempo de crecimiento, T óptima 37ºC, Características de las colonias: rugosas, s/ pigmentación y secas Crecimiento lento, no tiene pigmento. Produce niacina y reduce el nitrato. Catalasa termosensible y sensible a Isoniacida. Prueba turberculínica (PPD) Pone de manifiesto un estado de hipersensibilidad del organismo frente a las proteínas del bacilo tuberculoso. Técnica de Mantoux: aplicación intradérmica de una dosis uniforme de tuberculina y observación de la respuesta mediante palpación de la zona de inoculación. Lectura: diámetro de induración a las 72 hs (mm.) Interpretación: Pacientes infectados por HIV: ≥ 5 mm BACTERIOLOGÍA CLÍNICA 2015 TEORÍA 14 7 Resto de la población: ≥ 10 mm Factores como desnutrición, edad, inmunodeprimidos, infecciones virales y TB grave pueden deprimir la reacción. No se distingue una reacción inducida por BCG, M.tuberculosis u otra micobacteria ambiental. La PPD solamente diagnostica “infección” y no enfermedad. Una reacción positiva a la tuberculina indica haber estado en contacto en algún momento con una micobacteria y estar sensibilizado a sus antígenos. Tratamiento de la TB Los objetivos del tratamiento son: Curar al paciente y recuperar/ mejorar la calidad de vida y productividad. Prevenir la muerte por TB activa, o sus secuelas. Prevenir la recaída. Reducir la transmisión de TB en la población. Prevenir el desarrollo y transmisión de TB resistente a fármacos. Los fármacos antituberculosos guardan entre sí poca relación en lo que respecta a estructura química, mecanismo de acción, quizás a ello se deba la eficacia de la ad combinada. Los medicamentos actualmente empleados cumplen en su conjunto con los siguientes requisitos: Potencia bactericida contra los bacilos metabólicamente activos. Actividad esterilizante contra los bacilos de metabolismo semi-activos y persistentes. Prevención de la selección de bacilos resistentes durante el tiempo de tratamiento. No se conoce agente terapéutico que posea en sí mismo estas propiedades. Se deben utilizar: - 4 medicamentos en forma combinada en los primeros dos meses (fase intensiva). - Al menos 2 fármacos en los meses siguientes (fase de continuación), para reducir el número de bacilos persistentes a fin de evitar recaídas después de finalizado el esquema (duración mínima de 6 meses). Fármacos de 1ra línea: Isoniacida, Rifampicina, Pirazinamida, Estreptomicina, Etambutol. Control del tratamiento La respuesta al tratamiento debe ser vigilada por baciloscopía del esputo. Es importante el control en forma mensual, pero es fundamental la baciloscopía al final de la fase inicial (dos meses) y al final del tratamiento. Si es posible deben cultivarse estas muestras. BACTERIOLOGÍA CLÍNICA 2015 TEORÍA 14 8 Tuberculosis y SIDA: La aparición del SIDA cambió la epidemiología de la TB y hace más difícil su control. La infección por VIH es actualmente el factor que genera mayor riesgo de padecer la enfermedad tuberculosa. La TB es un fuerte predictor de la infección por VIH, generalmente precede a otras infecciones oportunistas y en algunos casos al mismo diagnóstico. El VIH y M. tuberculosis son dos patógenos intracelulares que interactúan en la misma población celular (LT CD4). Ambos patógenos son intracelulares, con período de latencia potencialmente largo. Siempre es mayor el Nº de infectados que el de enfermos. Pacientes con SIDA y TB pueden ser infecciosos en ausencia de cavidades pulmonares e incluso con Rx tórax normales. La TB impacta negativamente a la infección por VIH, provocando elevación de la carga viral y más rápida progresión. La expresión clínica de la TB varía de acuerdo al deterioro inmunitario del paciente. Se debe sospechar TB en VIH e investigar infección VIH en los enfermos de TBC. Vacuna BCG (bacilo de Calmette y Guérin): El valor de la vacuna BCG radica en prevenir la diseminación hematógena de la infección primaria con el M. tuberculosis. El uso del BCG es una estrategia importante por su impacto en la disminución de la mortalidad infantil, al prevenir la TB diseminada y formas graves de TB (miliar y meníngea). La vacuna BCG no evita la infección por el M. tuberculosis. Composición: El BCG es una suspensión de bacilos atenuados de M. bovis (50 000 a 3 millones de partículas/dosis) Normas Nacionales de Vacunación: *RN a término y niño pretérmino con 2000 g o más antes del egreso de la maternidad. *Niño de 6 años o menos que no presente cicatríz de BCG y/o registro de vacunación. *No se requiere otra aplicación del BCG luego de los 6 años de edad.
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