Apuntes de Bioquimica Clinica Enzimatica

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Bioquímica Clínica Enzimática
Introducción a las enzimas
Viernes, 10 de febrero de 2023
Antecedentes
· 1700 primeros estudios de enzimas en digestión por enzimas estomacales.
· 1800 almidón se convierte en azúcar por la saliva.
· 1850 Louis Pasteur fermentación de azúcar en alcohol por levaduras o sea fermentos.
· 1897 Eduard Buchner, descubre las enzimas.
· Frederick W. Kühne introduce el término enzima.
· John Northrop y Moses Kunit cristalizaron: pepsina, tripsina y otras enzimas digestivas.
· Todas las enzimas excepto un pequeño grupo de enzimas catalíticas RNA son proteínas.
Conceptos Básicos
Cofactor: Productos iones inorgánicos que funcionan como cofactores de algunas enzimas para que puedan funcionar adecuadamente, como hierro, cobre, manganeso, magnesio, níquel, zinc. La familia citocromo P450 utiliza estos iones en sus enzimas como citocromo oxidasa, etc.
Coenzimas: Un complejo orgánico o metalorgánico que se une a la enzima para que pueda cumplir su función catalítica. Algunos de ellos son vitaminas como B6 y B12, son precursores también de vías metabólicas importantes.
Grupo prostético: Grupo funcional unido covalentemente a la enzima y puede ser de naturaleza orgánica e inorgánica, pero generalmente orgánica, les permite a las enzimas llevar a cabo su función catalítica.
Holoenzima: Van a activar a al enzima, coenzima o ión metálico y activa a las enzimas.
Apoenzima o apoproteínas: Parte proteica de la enzima.
Sitio activo: Punto de unión entre sustrato y enzima.
Cinética Enzimática
Cuando el sustrato es mayor que la enzima se utiliza la ecuación. 
Martes, 14 de febrero de 2023
Métodos directos y acoplados
· Glucosa:
· Sustrato: Glucosa sanguínea a 37°C.
· Enzima: Glucosa oxidasa > NADH “colorimétrico”
 P1 P2 Reduce
· Fluorimetría: Producto fluorescente (quimioluminiscencia).
· Ensayos discontinuos: Creatinina/Bilirrubina. Gráfico tiempo contra absorbancia.
· Ensayos radiométricos: Determinaciones enzimáticas por compuestos radiactivos (yodo 125).
· HPLC: Método de cromatografía de gases de alta resolución. Solventes volátiles (cetona y alcohol).
Factor del que depende
· Temperatura alta: Desnaturalización de enzimas.
· pH: Medicamento, alcohol, tabaco, dieta.
· Concentración del sustrato.
· Fuerza osmótica > unión sustrato – Enzima (Enlace iónico)
Condiciones de función pancreática en personas con enfermedad metabólica
· Inflamación = Es inmunomediada por citocinas “interleucina 8, 1, 6 y factor de necrosis tumoral”
· Hinchazón = Retención de líquidos.
Alteración enzimática nivel plasmático > efecto metabólico > elevadas de enzimas
PCA Elevado = Hay inflamación nivel próstata.
Clasificación enzimática 
1.- Bücher: 
· Plasmoespecífica: Enzima, cofactor, protrombina.
· Exocitoenzimas: Enzimas que son secretadas: Lipasa, amilasa, insulina, glucagón.
· Endocitoenzimas: Sustrato dentro de la célula, dentro del RNA.
2.- Bioquímica: 
· Oxidorreductasas: Pérdida protones, glucosa 6 – fosfatasa.
· Liasas.
· Transferasas: Transferir grupo funcional.
· Ligasas: Forma enlace nuevo.
· Isomerasas.
· Hidrolasas: Hidrólisis.
Viernes, 17 de febrero de 2023
LDHA en DNA interviene para formar miRNA que se regulan por metilación y acetilación aumenta la actividad enzimática < Célula oncogénica. Tiene función la LDHA en la formación de nuevos vasos sanguíneos, regula la secreción de ácido hialurónico, IL8 y VEGF. Esta interviene en la metástasis.
Martes, 21 de febrero de 2023
PÁNCREAS
Posterior al hígado, función exocrina y endocrina.
· Tripsinógeno > (enterocinasa) Tripsina > aa. 
· Amilasa > Carbohidratos.
· Lipasa > Ácidos grasos.
Bilis, vertida a la mucosa duodenal desde el inicio de la digestión. Emulsión de grasas por bilis, forma de gotas y facilita la acción de lipasa.
Anatomía y fisiología
· 80 – 85% función exocrina.
· 10 – 15 % matriz extracelular y los vasos.
· 2% función endocrina.
	Tipo celular
	Hormona
	α 15-80%
	Glucagón
	β 60-80%
	Insulina
	δ 5-10%
	Somatostatina
	PP < 2%
	Polipéptido pancreático
Secreción de insulina comienza desde las papilas gustativas, el contacto con estos > Los carbohidratos.
Insulina favorece lipogénesis e inhibe lipolisis.
JUGO PANCREÁTICO
· Densidad: 1.007 y 1.035.
· pH alcalino.
· Incoloro.
· Secreción enzimática e hidroeléctrica (Cl- / HCO3 – ácido carbónico-).
· 0.2 – 0.3 ml/min.
· 5 ml/min bajo estímulos metabólicos (oler y probar), 1 Lt. al día. 
REGULACIÓN DE LAS SECRECIONES:
· Sistema nervioso parasimpático. Adrenalina favorece la glucogénesis > cantidades de azúcar > favorece producción de insulina > continuo = sobrecargar al páncreas.
· Regulación hormonal (glucagón, saciedad y apetito).
· Período digestivo.: 3 fases.
1.- Cefálica: Estímulos motores.
2.- Gástrica: Bolo alimenticio.
3.- Digestiva: Vaciamiento intestinal.
Viernes, 24 de febrero de 2023
Pruebas de funcionamiento pancreático
	
	Exocrino
	Endocrino
	
	Liberar el jugo pancreático, secreta lipasa, amilasa y tripsina.
	Liberación de insulina y glucagón al torrente sanguíneo.
	Primera línea (evaluación directa)
	Jugo pancreático (matriz): pH, color, densidad, enzimas.
Suero: (Amilasa, lipasa).
	CA 19-9.
Carcinoembrionario (CEA).
Insulina y glucagón.
	Segunda línea (evaluación indirecta) (Consecuencia de funcionamiento inadecuado del páncreas).
	Saliva (amilasa salival).
Heces (tripsina, esteatorrea – por mala absorción posiblemente por un parásito-, azúcares reductores, almidones).
	Biopsia.
Glucosa (HbA1c y CTOG).
Hígado puede alterar la función del páncreas, una esteatosis.
Procesos patológicos que afectan:
· Pancreatitis (confusión con vesícula biliar), también puede alterar la función hepática. Niveles elevados de amilasa y lipasa, la inflamación hace que estas enzimas se produzcan en exceso. Se desarrolla por consumo elevado de alcohol, drogas, un cáncer o un virus (agentes etiológicos, desarrollan la crónica). Generalmente se acompaña de hepatitis en personas alcohólicas. Glucagón estaría de normal a elevado e insulina baja. Procesos cancerosos pueden causar pancreatitis. Pancreatitis aguda (causada por obstrucción en vías biliares) amilasa elevada y en la crónica las dos enzimas van a estar elevadas.
· Cáncer de páncreas > DT2, disminución de los niveles de insulina por las células cancerosas. Una persona diabética tiene predisposición para desarrollar cáncer.
Para medir las pruebas de funcionamiento pancreático, el paciente debe llegar en las siguiente condiciones:
· Ayuno. 
· Si toma algún medicamento, una hepatitis puede generar una pancreatitis, el medicamento estaría dañando indirectamente al páncreas. Una inflamación de la vesícula biliar estaría afectando al páncreas por su cercanía.
Si la glucosa no se guarda se vuelve lípido, por lo tanto, hígado graso. Sino están funcionando correctamente los mecanismos.