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“Estimación de la biomasa forrajera de alfalfa utilizando un método no destructivo” Capellino, Lorena L. y Trevisi, Daniela E. Asignaturas participantes Introducción a los Sistemas de Producción Estadística y Diseño Forrajes Área Pedagógica Grupo de Nutrición (Área de Producción Animal) Responsables Ing. Agr. Patricia Menchón (FCA-UNMdP) Ing. Agr. Jesús Petrantonio (FCA-UNMdP) Ing. Agr. María A. Marino (FCA-UNMdP) Prof. Viviana Pérez (FCA-UNMdP) Ing. Agr. Héctor Fernández (INTA-EEA Balcarce) 1 Resumen La biomasa de la pastura es una medida instantánea del peso total del forraje por unidad de superficie de suelo (Hodgson, 1979). Debido a la importancia de este atributo para tomar decisiones a campo, usualmente es necesario utilizar este parámetro y confiar en la bondad de las técnicas de muestreo para estimar la cantidad de forraje presente y definir el manejo del sistema (Wilm, 1944 y Mannetje, 2000). La información sobre la precisión de los métodos disponibles para cuantificar la disponibilidad de forraje en las pasturas de la región es escasa. Por lo tanto el objetivo del trabajo fue estimar la disponibilidad estacional de forraje por el método no destructivo de doble muestreo, mediante el uso de pasturómetro. Las mediciones se realizaron en tres fechas durante el ciclo de crecimiento: 04 de junio (M1), 10 de septiembre (M2) y 27 de diciembre de 2013 (M3), en una pastura pura de alfalfa establecida en el paraje El Volcán (Balcarce). Se ajustaron ecuaciones de calibración para cada fecha de muestreo, usando regresiones lineales simples. A partir de la ecuación de regresión obtenida se calculó la media aritmética de la masa de forraje por estimación puntual y por intervalo con un 95% de confianza. El análisis de la varianza con la fecha de muestreo como único factor mostró diferencias significativas en la disponibilidad de pasto entre momentos de muestreo (p<0,05). M3 mostró la mayor disponibilidad de forraje, seguido por M2 y M1, con acumulaciones de 2935, 2010 y 1065 kg MS/ha, respectivamente. El análisis de la varianza para los coeficientes de regresión, fue no significativo para las pendientes (p>0,05) y significativo para las ordenadas (p<0,05). La técnica de doble muestreo con la utilización del pasturómetro, permitió cuantificar convenientemente la variación estacional en la oferta de forraje en la pastura de alfalfa y demostró ser una herramienta confiable, rápida y económica. Si bien las pendientes de las ecuaciones de regresión por fecha de muestreo no mostraron diferencias significativas, se recomienda realizar calibraciones periódicas de acuerdo al estado fenológico en el que se encuentra la pastura. Capellino, Lorena L. y Trevisi, Daniela E. 2 Índice 1) Introducción……………………………………………………...3 1.1) Método destructivo. Corte……………………....3 1.2) Método no destructivo……………………….......4 2) Desarrollo …………………………………………………………5 2.1) Materiales y Métodos………………………….. 5 2.2) Modelo estadístico………………………………6 2.3) Resultados y Discusión……………………..….7 3) Conclusión………………………………………………………..10 4) Bibliografía………………………………………………………...11 5) Anexos……………………………………………………………..12 3 1) Introducción Los sistemas de producción ganaderos del sudeste bonaerense son principalmente pastoriles. Por esto, la producción estacional de forraje de una pastura y su utilización determinan en gran medida la productividad del sistema. En los establecimientos comerciales de la región suele cuantificarse el peso y estado corporal de los animales, sin embargo no es común realizar mediciones del crecimiento de las pasturas o de la oferta de forraje de las mismas. El conocimiento del perfil de distribución estacional de forraje es prioritario en la elaboración de presupuestos forrajeros para los distintos sistemas de producción ganaderos (Sevilla, et al. 2001). La estimación de la disponibilidad forrajera a través de una evaluación cuantitativa de las características de la pastura (Cangiano y Pece. 2011), resulta una herramienta de toma de decisiones y planificación tanto en el corto, como en el mediano y largo plazo. La biomasa de la pastura es una medida instantánea del peso total del forraje por unidad de superficie de suelo (Hodgson, 1979). Por esta razón, la determinación de la cantidad de materia seca (MS) presente en un sitio y en un momento dado requeriría el corte, secado y pesado del total del forraje disponible en la pastura. Este procedimiento lleva tiempo y trabajo y puede resultar impráctico en estudios de pastoreo. Sin embargo, debido a la importancia de este atributo para tomar decisiones a campo y para poder explicar resultados de experimentos, usualmente es necesario utilizar este parámetro y se confía en la bondad de las técnicas de muestreo para estimar la cantidad de forraje presente y definir el manejo del sistema (Wilm, 1944; Mannetje, 2000). Por lo dicho, el método para estimar la disponibilidad forrajera debería ser rápido y confiable. Existen diversas maneras de realizar un muestreo para estimar la disponibilidad de forraje de un recurso forrajero: 1.1) El método destructivo, es un método preciso para estimar el rendimiento de forrajes, que consiste en cortar y pesar en fresco y en seco las muestras de pasto. Para tener estimaciones confiables hay que tener un gran número de muestras. La presencia de los animales, la orina y las heces en las pasturas y el hecho que las mismas pueden consistir de más de una especie, las convierten en un sistema biológico altamente variable, y de allí la necesidad de obtener un elevado número de muestras para poder estimar su cantidad de manera confiable. Esta técnica además Capellino, Lorena L. y Trevisi, Daniela E. 4 de ser destructiva, es costosa en términos de tiempo y trabajo (Fernández, 1999). 1.2) El método no destructivo, permite estimar la disponibilidad forrajera sin destruir la muestra de pasto. Entre los métodos que se pueden citar se encuentran: estimación visual y determinación de altura. Las estimaciones visuales de la disponibilidad implican algo más que una simple mirada al potrero. Al potrero hay que caminarlo y mirarlo en varios lugares de manera similar a como se haría con los otros tipos de muestreo. Requiere de un entrenamiento previo del observador, y su determinación se basa en la integración por parte del observador de varios atributos de las pasturas tales como: altura, cobertura, densidad, composición botánica, relación tallo-hoja, estrés, ataque de plagas, adversidades, etc. La desventaja de la estimación visual es que sin un correcto entrenamiento del observador se puede incurrir en errores de estimación sobrestimando los efectos de la altura y subestimando los efectos de la densidad. La ventaja de ésta técnica radica en que las mediciones son hechas rápidamente sin ningún equipamiento especial (Fernández, 1999). Otra metodología no destructiva para estimar la cantidad de forraje es midiendo la altura del mismo. Este es un método objetivo, fácil, rápido y confiable. La altura de la pastura puede ser medida de maneras distintas, por ejemplo: colocando una regla verticalmente sobre el nivel del suelo, a través de la pastura y luego evaluando su altura promedio; midiendo la altura del macollo más largo de un manojo de macollos del área a muestrear; usando un pasturómetro, que registra valores de altura de la pastura tomando en cuenta su densidad (Spada y Cangiano, 1991). La relación entre la biomasa aérea y altura medida por este tipo de instrumento es generalmente lineal. Para obtener esa relación, existe un método denominado doble muestreo que consiste en obtener muestras concomitantes (Lantinga et al., 2004); por un lado, unas pocas muestrasprecisas de la biomasa aérea por corte y por el otro, un número sustancial de muestras indirectas de una variable altamente correlacionada con la biomasa aérea como es la altura (Cangiano y Brizuela, 2011). La información sobre la precisión de los métodos disponibles para cuantificar la disponibilidad de forraje en las pasturas de la región es escasa. Por lo tanto el objetivo 5 del trabajo fue estimar la disponibilidad estacional de forraje por el método no destructivo de doble muestreo, mediante el uso de pasturómetro. Las hipótesis a probar son: que el método de doble muestreo utilizando el pasturómetro permite cuantificar la variación estacional en la oferta de forraje de una pastura de alfalfa. Los coeficientes de las regresiones lineales ajustadas entre la biomasa aérea y la altura de la pastura no son diferentes entre fechas de muestreo. 2) Desarrollo 2.1) Materiales y Métodos Se utilizó una pastura pura de Alfalfa var. MECHA de la empresa KWS (grupo 9) establecida en un potrero perteneciente al establecimiento “La Segunda Esperanza” ubicado en el paraje El Volcán (Balcarce), sembrada el 20 de marzo de 2012, a una densidad de 15 kg/ha. La siembra se realizó en directa sobre un rastrojo de trigo. Se agregaron 100 kg/ha de fertilizante (7-40-0-5) a la siembra. Se aplicó herbicida Preside (flumetsulam 12 g/100 cm3) como pre emergente a razón 600 cc/ha y en post- emergencia se realizó una aplicación de graminicida Galant (haloxifop metil) para controlar Avena negra y otras gramíneas anuales. Como características de manejo la pastura presentaba una carga alta instantánea durante los meses de octubre a noviembre, con 300 novillos Angus/ha de 350-400 kg/cabeza en fase de terminación, los cuales recibían un cambio de parcela diaria con una rotación de 25-30 días, pastoreando solo desde media mañana hasta la tarde; el resto del día pasaban a corral donde por la mañana se suplementaban, con un complemento dietario (20% de su ingesta) de base silo de maíz, grano de maíz y sal anti empaste. Para llevar a cabo el método de doble muestreo se utilizó un pasturómetro desarrollado en el INTA (Fernández, comunicación personal) que se compone de un eje por el que se desliza un plato metálico, de una superficie cuadrada de 0,16 m2 y peso determinado (ver anexo 1). El deslizamiento del plato es desde abajo hacia arriba empujado por la masa de pastura, proporcionando una lectura de la altura de las plantas. Para la calibración del mismo se tomaron dos muestras al azar de pasto de tres sectores bien diferenciados del lote (bajo, media loma y loma), para lo cual se arrojó un marco de muestreo metálico de igual superficie que el plato que compone al Capellino, Lorena L. y Trevisi, Daniela E. 6 pasturómetro, en donde se midió la altura y se cortó el forraje presente. Para estandarizar las estimaciones los cortes se realizaron al ras del suelo para mantener una altura de corte constante. La cantidad total de forraje cosechado se colocó inmediatamente en una bolsa de nylon correctamente rotulado para su identificación, para luego pesarlas antes y después de secarse en estufa a 65 °C por 48 h en laboratorio. El contenido de MS de las muestras se calculó por diferencia entre el peso inicial y el final. El peso seco se expresó en kg MS/ha. Posteriormente se tomó un número sustancial de muestras indirectas de altura en distintas áreas del potrero, siguiendo un patrón de zigzag, tomando una lectura cada siete pasos, hasta obtener aproximadamente entre 40-70 observaciones. El análisis posterior se realizó mediante un software Pasturom (Fernández, 1999) que permite el uso de esta metodología de manera muy sencilla a través de una regresión lineal entre ambos datos. La ecuación que lo representa es ŷi = a + b xi, donde “ŷi” es la biomasa aérea estimada en kg MS/ha correspondiente para cada observación de altura “xi”, “a” es la ordenada al origen (kg MS/ha) y “b” es el coeficiente de regresión (pendiente de la recta) medido en kg MS*ha-1 / cm. A partir de la ecuación mencionada anteriormente y con los valores de las muestras indirectas se estimó la biomasa aérea promedio para cada momento muestreado. Las mediciones se realizaron en tres fechas durante el ciclo de crecimiento de alfalfa: 04 de junio (M1), 10 de septiembre (M2) y 27 de diciembre de 2013 (M3). 2.2) Modelo estadístico Para analizar la hipótesis de que existen diferencias en la disponibilidad de pastos registradas por el pasturómetro según fecha de muestreo (ver anexo 2), se utilizó un análisis de varianza con el momento de muestreo como único factor con datos desbalanceados. A partir de la ecuación de regresión obtenida con el software Pasturom, se obtuvo la disponibilidad de pasto en kg MS/ha para cada medición de altura por fecha de muestreo, las cuales representan las repeticiones para el análisis de la varianza (Cuadro1). Se calculó la media aritmética de la masa de forraje por estimación puntual y por intervalo con un 95% de confianza (ver anexo 3). Mediante el test de Tukey se realizaron las comparaciones múltiples de medias por tratamiento. 7 Para probar la hipótesis de que no existen diferencias significativas entre los coeficientes de la regresión (pendiente y ordenada al origen) según el momento de muestreo, se utilizó un análisis de la varianza con el estadístico F. Todos los datos se evaluaron con el paquete estadístico Rcmdr de R 3.0.2 (2013). Cuadro 1. Fecha de muestreo, ecuación de regresión y tamaño de muestras para los tres niveles de tratamiento. Factor Ecuaciones de Regresión Tamaño de muestra M1 ŷ=151,35x- 354,53 R2=0,98 72 M2 ŷ=219,37x- 272,20 R2=0,98 44 M3 ŷ=193,75x- 3635,54 R2=0,97 60 Referencias: M1, 4 de junio 2013; M2, 10 de septiembre 2013 y M3, 27 de diciembre 2013. 2.3) Resultados y Discusión El análisis de la varianza con la fecha de muestreo como único factor mostró diferencias significativas en la disponibilidad de pasto para los tres momentos de muestreo (p<0,05). Los resultados para las correspondientes comparaciones múltiples de medias según el test de Tukey se muestran en el Cuadro 2. Cuadro 2. Media aritmética por estimación puntual y por intervalo de confianza para cada uno de los momentos. Factor Media aritmética (kg MS/ha) Estimación puntual Intervalo de confianza M1 1065,4 a (± 320,7) (922,2 ; 1093,2) M2 2010,7 b (± 734,4) (1862,9 ; 2196,1) M3 2935,8 c (± 1721,4) (2649,1 ; 3223,8) Letras iguales en columnas indican diferencias no significativas (p>0,05). Entre paréntesis se indica la desviación típica estándar. Referencias: M1, 4 de junio 2013; M2, 10 de septiembre 2013 y M3, 27 de diciembre 2013. Se puede observar claramente que M3 (27/12/2013) mostró la mayor disponibilidad de forraje, seguido por M2 (10/09/2013) y M1 (04/06/2013), con acumulaciones de 2935, 2010 y 1065 kg MS/ha, respectivamente. Estos resultados eran esperados, ya Capellino, Lorena L. y Trevisi, Daniela E. 8 que a medida que avanza el ciclo de crecimiento del cultivo durante el período primaveral aumenta la tasa de crecimiento del forraje (Romero et al., 2002). Esto se explica debido a que la biomasa aérea acumulada resulta del conjunto de distintas partes de una planta y tejidos que difieren en madurez según el momento de rebrote, la estación del año y las condiciones ambientales bajo las que esté sujeta la pastura. Con el avance de la madurez del canopeo, aumenta la biomasa aérea con un incremento en la lignificación de tallos y una disminución en la relación hoja-tallo (Cangiano y Pece, 2005), dando como consecuencia mayor cantidad de forraje con menor digestibilidad e inferior calidad. En particular en pasturas de alfalfas establecidas, el primer crecimiento de primavera se origina en las yemas ubicadas en la corona. Éstas se forman durantela temporada de crecimiento anterior, alcanzando su máximo número hacia fines del otoño. Los crecimientos posteriores se originan en yemas de corona, dando origen a tallos de corona, y en las yemas axilares de los tallos remanentes, que dan origen a tallos axilares. (Romero et al., 1995). Si bien el número de tallos axilares después de un corte (pastoreo) es mayor que los de la corona, a medida que avanza la madurez muchos mueren. Los tallos de corona aumentan con la madurez, siendo su aporte productivo mayor que el de los tallos axilares (Juan, 1989). El análisis de la varianza para los coeficientes de regresión según el momento de muestreo, fue no significativo para las pendientes (p>0,05) y significativo para las ordenadas (p<0,05). Aunque para fines prácticos la ordenada al origen es útil para calibrar el método de muestreo, biológicamente no tiene una interpretación lógica debido a un error de extrapolación, por lo tanto no será tenida en cuenta en este análisis. En el Gráfico 1 se muestran las rectas de regresión para cada uno de los momentos obtenidos por el método de doble muestreo. 9 10 20 30 40 1 0 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 4 0 0 0 5 0 0 0 Altura (cm) B io m a s a ( K g M S /h a ) momento M1 M2 M3 Grafico 1: Disponibilidad de forraje (kg MS/ha) función de la altura (cm) para cada uno de los tres momentos de evaluación (M1, M2 y M3). Según los resultados obtenidos del test de hipótesis la respuesta de la biomasa ante cambios de una unidad en la altura del forraje, es independiente del momento muestreado, esto se debe a que en el otoño, la planta de alfalfa experimenta cambios bioquímicos, fisiológicos y morfológicos que parecen incrementar su resistencia a las bajas temperaturas mientras que el crecimiento del forraje por encima del nivel del suelo se suprime en forma reversible. (Quintero y Rosenbrorck, 2001). El rasgo más notable de este cambio en la fisiología de la planta es una menor actividad de las zonas de crecimiento de los entrenudos que lleva a tallos de menor altura. La magnitud de este cambio muestra una gran variabilidad genética, con cultivares “de marcada” latencia invernal y cultivares “sin” latencia invernal. Las modificaciones en la altura de los tallos están estrechamente asociadas con esta variabilidad genética (Cangiano y Brizuela, 2011). 10 20 30 40 1 0 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 4 0 0 0 5 0 0 0 Altura (cm) B io m a s a ( K g M S /h a ) momento M1 M2 M3 ŷ=219,37x- 272,20 R2=0,98 ŷ=151,35x- 354,53 R2=0,98 ŷ=193,75x- 3635,54 R2=0,97 Capellino, Lorena L. y Trevisi, Daniela E. 10 3) Conclusión La técnica de doble muestreo con la utilización del pasturómetro para estimar indirectamente la biomasa aérea de una pastura, permitió cuantificar convenientemente la variación estacional en la oferta de forraje en la pastura de alfalfa y demostró ser un método confiable, rápido y económico. Sin embargo, presenta algunas desventajas como la necesidad de calibrar el mismo cada vez que se utilice, debido a los cambios que existen entre y dentro de las pasturas, entre estaciones y años. La exactitud de la ecuación de calibración, la intensidad de muestreo y el tamaño de muestra son elementos claves que se deben tener en cuenta cuando se desea utilizar este tipo de técnica para obtener una mayor precisión en los resultados. Si bien las pendientes de las ecuaciones de regresión por fecha de muestreo no mostraron diferencias significativas, se recomienda realizar calibraciones periódicas de acuerdo al estado fenológico en el que se encuentra la pastura; debido a que la ecuación está representada además de la pendiente, por la ordena al origen, que si mostró diferencias significativas para las fechas muestreadas lo que dio como resultado la variación en la producción de materia seca estimada por el modelo. 11 4) Bibliografía 1. CANGIANO, CARLOS A.; BRIZUELA, MIGUEL A. 2011. Producción animal en pastoreo 2ª edición. Ediciones INTA. Balcarce, Buenos Aires, Argentina. 73-241-242- 243-244 p. 2. CANGIANO, CARLOS A. 1997. Producción Animal en Pastoreo. Editorial La Barrosa. 1ª edición. INTA, Balcarce, Buenos Aires, Argentina. 11-12 p. pp. 15-26. 3. CANGIANO, C. A.; PECE, M.A. octubre 2005. Acumulación de biomasa aérea en rebrotes de alfalfa en Balcarce. Revista Argentina de Producción Animal. Balcarce, Buenos Aires, Argentina. 25: 39-52. 4. CARRILLO, JORGE. 2003. Manejo de pasturas. Ediciones INTA. Balcarce, Buenos Aires, Argentina. 55-56 p. 5. FERNÁNDEZ, HÉCTOR H. 1999. Estimación de la disponibilidad de pasto. Área de Producción Animal EEA. Balcarce, Buenos Aires, Argentina. 6. HIJANO, EDGARDO H.; NAVARRO, ARIADNA. Marzo 1995. La alfalfa en la Argentina. Subprograma Alfalfa. Enciclopedia Agro de Cuyo- manual 11. INTA C. R. Cuyo, San Juan, Argentina. 151-152-153-154 p. 7. HODGSON, J. 1979. Nomenclature and definitions in grazing studies. Grass Forage Sci. (34):11-18. 8. JUAN, N. A. 1989. Growth of alfalfa germplasms differing in dormancy cut at two maturity siages. M.S. Thesis. University of Minnesota. USA. 9. LEACH, G. L. 1969. Shoot number, shoot size and yield of regrowth in three iucerne cultivars. Aust. J. Agr. Res. 20:425-434. 10. LÓPEZ-GUERREROA, ISAÍAS; et al. 2011. Comparaciones entre cuatro métodos de estimación de biomasa en praderas de festuca alta. Centro de Investigación y extensión Agrícola del Valle de Shenandoah (SVAREC), en Steeles Tavern, Virginia, EUA. Rev Mex Cienc Pecu. 2(2):209-220. 11. MANNETJE, L. T. 2000. Measuring biomass of grassland vegetation. In: Field and Laboratory Methods for Grassland and Animal Production Research. Jones RM editors. Cambridge, UK: CABI Publishing Univ. Press.151-177. 12. QUINTERO, C.E; ROSENBROCK, M.J. Marzo 2001. Alfalfa, productividad y ambiente. Cuadernillo de forrajeras Agromercado, el negocio del campo al día. INTA Manfredi. Nº55. 8-9-10 p. 13. ROMERO N. A.; COMERÓN E. A. y USTARROZ E. 1995. Manejo y utilización de la alfalfa. Boletín de Divulgación Técnica E.E.A. Anguil, Argentina. 1-2-5 p. 14. ROMERO, L. A.; ARONNA, M.S.; CUATRIN, A.L. 2002. Producción estacional de forraje y relación hoja-tallo de alfalfas multifoliadas.25º Congreso Argentino de Producción Animal, INTA Rafaela, Buenos Aires, Argentina. 15. SEVILLA, G.; PASINATO A.; GARCÍA, J. M. 2001. Curvas de crecimiento de forrajeras templadas irrigadas .Arch. Latinoam. Prod. Anim. Estación Experimental Agropecuaria Hilario Ascasubi del INTA, Buenos Aires, Argentina .9 (2): 91-98. 16. WILM, H.G.; COSTELLO, D.F.; KLIPPLE, G.E. 1944. Estimating forage yield by the double-sampling method. J Am Soc Agr. (36):194-203. Capellino, Lorena L. y Trevisi, Daniela E. 12 5) Anexos Anexo 1 Pasturómetro INTA (Fernández, H.) Anexo 2 Hipótesis: H0: 1 = 2 = 3 = 0 (no hay efecto diferencial en el promedio poblacional de la disponibilidad de pasto en Kg MS/ha debido a las diferentes fechas de muestreo) H1: algún i ≠ 0 (hay efecto diferencial en el promedio poblacional de la disponibilidad de pasto en Kg MS/ha debido a las diferentes fechas de muestreo) H0: β1 = β2 = β3 (la variación en la disponibilidad de pasto en kg MS/ha debido a cambios en la altura es igual para los tres momentos de muestreo) H1: β1 ≠ β2 ≠ β3 (la variación en la disponibilidad de pasto en kg MS/ha debido a cambios en la altura es distinta para los tres momentos 13 Anexo 3 * Donde: n: numero de muestra para la estimación por doble muestreo (n=6) : Promedio en Kg MS/ha obtenidos a través de la regresión con los seis datos. : Promedio en Kg MS/ha para los datos solamente medidos. : Media en Kg MS/ha estimada a travésde la regresión con los datos obtenidos por doble muestreo. : Sumatoria de la diferencia de cada valor observado por doble muestreo y su promedio. : Cuadrado medio del error de la regresión.
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