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Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
Actividad 4. Cuestionario 
1. Explica cuál es la razón por la que se deposita una gota de aceite de inmersión, 
cuando se utiliza el objetivo de 100x. 
Al colocar una gota de aceite de inmersión, el cual tiene el mismo índice de refracción 
que el vidrio, entre el objetivo de 100X y el portaobjetos (placa) se reduce 
significativamente la dispersión de la luz que ocurriría si no se utiliza el aceite de 
inmersión. Por ello, se incrementa la resolución de la imagen. 
2. ¿Qué ventaja tiene realizar la técnica de Köhler? 
La iluminación Köhler facilita la iluminación uniforme, la alta resolución y el buen 
contraste de la muestra. 
3. Explique brevemente si en todos los microscopios se puede realizar la técnica 
de Köhler y porqué. 
La iluminación Köhler puede brindar una iluminación uniforme de las muestras en 
campo claro, campo oscuro y en todas las variaciones de microscopía óptica de 
contraste de fase mediante el uso de los recorridos de luz transmitida y reflejada. 
Es la técnica predominante para la iluminación de muestras en la microscopía de luz 
científica moderna. Requiere elementos ópticos adicionales que son más caros y 
pueden no estar presentes en microscopios ópticos más básicos. 
4. ¿Por qué se recomienda descender lentamente el condensador al realizar la 
técnica de Köhler? 
El condensador se utiliza para enfocar la luz sobre la preparación. Elevando o bajando 
el condensador puede alterarse el plano del foco de luz y elegirse una posición que 
consiga el foco preciso. 
5. Explique el fenómeno de difracción. 
Es cuando una onda atraviesa un obstáculo pequeño, se distorsiona y se propaga en 
diferentes direcciones detrás del orificio. Si el orificio es mayor que la longitud de onda 
no hay difracción. 
 
Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
6. ¿Por qué es necesario utilizar muestras en fresco con el microscopio de 
campo oscuro? 
Porque sirven para analizar microrganismos vivos. 
7. Establezca la diferencia que existe, desde el punto de vista óptico, entre un 
microscopio compuesto y un microscopio de campo oscuro. 
El principio de funcionamiento de los microscopios compuestos se basa en la 
combinación de dos lentes. Esta combinación de dos lentes hace posible alcanzar 
aumentos cercanos a 1000x o incluso ligeramente superiores 
En microscopía de campo oscuro, el contraste se crea por un espécimen brillante sobre 
fondo oscuro. Esta es ideal para revelar contornos, bordes, fronteras y gradientes de 
índice de refracción, pero no brinda mucha información sobre la estructura interna. 
8. Explique cómo está constituido el condensador y los objetivos de un 
microscopio de contraste de fases. 
El condensador presenta un disco que proyecta un haz de luz con forma anular, y en la 
lente de salida de los objetivos, se agregan unos “anillos de fase”, que son discos 
transparentes con un diseño en relieve, cabe destacar que existen dos tipos diferentes 
de anillos de fase, denominados positivo y negativo, los cuales tienen distintos efectos 
sobre la luz y, por lo tanto, las imágenes se ven diferentes en cada uno. 
9. ¿Cuál es la finalidad de utilizar una lente auxiliar en el microscopio de 
contraste de fases? 
Incrementar el tamaño de la observación 
10. ¿Cómo interviene el IR en las muestras observadas en la técnica de contraste 
de fases? 
Permite considerar la determinación simultanea de mas de un analito o propiedad de 
interés a partir del espectro registrado de la muestra. 
 
 
Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
Referencias. 
Riley, M. (2003). Microscopía Básica. 
https://www.apsnet.org/edcenter/disimpactmngmnt/labexercises/Microscopi
o/Pages/default.aspx#:~:text=Al%20colocar%20una%20gota%20de,la%20r
esoluci%C3%B3n%20de%20la%20imagen. 
Bellinger, R. (2016). Aprovechar al máximo la iluminación Köhler. Blog Post | 
Olympus IMS. https://www.olympus-ims.com/es/insight/making-the-most-of-
kohler-
illumination/#:%7E:text=La%20iluminaci%C3%B3n%20K%C3%B6hler%20f
acilita%20la,inferior%20con%20la%20iluminaci%C3%B3n%20K%C3%B6hl
er. 
Köhler illumination - Wikipedia. (2020). 
https://es.qaz.wiki/wiki/K%C3%B6hler_illumination#Advantages 
Ramos Marquez., E. C. (2006). Manual de laboratorio de instrumentación básica. 
UNIVERSIDAD VERACRUZANA. 
https://www.uv.mx/personal/jzamudio/files/2011/06/MANUAL-DE-
INSTRUMENTACION-BASICA.pdf 
METODO DE ESTUDIO DE LOS MICROORGANISMOS. (s. f.). 
http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/
uni_02/56/cap304.htm 
Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
El microscopio simple (Definición, partes y aplicaciones). (2021, 1 enero). Mundo 
Microscopio. https://www.mundomicroscopio.com/microscopio-simple/ 
Microscopio de Contraste de Fases (Características y Funcionamiento). (2021, 1 
enero). Mundo Microscopio. 
https://www.mundomicroscopio.com/microscopio-de-contraste-de-
fases/#:%7E:text=El%20microscopio%20de%20contraste%20de%20fases
%20es%20un%20tipo%20de,de%20usar%20t%C3%A9cnicas%20de%20tin
ci%C3%B3n.&text=Este%20microscopio%20manipula%20la%20luz,contras
te%20de%20la%20muestra%20observada.

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