Aprendizaje autodirigido práctica 7 y 8 inmuno

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Aprendizaje autodirigido práctica No. 7-8: Inmunodifusión e 
Inmunoprecipitación. 
 
Becerril García Diana María, Contreras Reynoso Maricielo, Juárez Espinosa 
Fernanda Elizabeth, López Vilchis Ximena, Polo Contreras Sabrina, Ramírez 
Romero Karime. 
Asignatura: Técnicas de inmunología. 
Licenciatura: Químico Farmacéutico Biotecnólogo. 
Periodo: 2021-01 
Fecha de entrega: 28 de mayo de 2021 
Docente: M en C. Araceli Álvarez Cruz. 
 
 
1. ¿Qué es la inmunodifusión radial? 
La inmunodifusión radial es una técnica inmunológica cuantitativa que se fundamenta 
en la reacción de precipitación entre antígeno y anticuerpos; la cual genera la 
formación de precipitados en medios líquidos o semifluidos. Cuando existe un exceso 
de anticuerpos, la cantidad de precipitado se relaciona directamente con la cantidad 
de antígeno en el medio líquido o semifluido. 
(Bioted, S.f) 
 
 
2. ¿Cuáles son los orígenes de esta técnica? 
Existen dos variantes principales del método de inmunodifusión radial. La variante 
descrita por: 
● Mancini et al. (1965), se basa en una difusión completa de la muestra (48-72 
h) y establece una relación lineal entre la concentración de antígeno y el 
cuadrado del diámetro del precipitado. 
● Fahey y McKelvey (1965), se basa en una difusión parcial de la muestra (4-16 
h), y establece una relación lineal entre el logaritmo de la concentración de 
antígeno y el diámetro del precipitado. El método de difusión completa es más 
lento, pero proporciona mayor exactitud y precisión, por lo que ha sido el más 
utilizado. 
(Lomonte, 2020) 
 
 
 
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3. ¿Por qué se utiliza agarosa al 3% en la inmunodifusión radial? 
 
La agarosa al 3% sirve como base o soporte de la agarosa al 12%, ya que, al 
no estar tan concentrada, estará más diluida y opondrá menos resistencia. Por 
otra parte, el gel de agarosa separa las moléculas en función de su tamaño, su 
carga y su forma, por lo que la concentración del gel tiene un impacto sobre la 
movilidad de las moléculas en el gel. 
(EDVOTEK, 2016). 
 
 
4. ¿Cuál es la diferencia entre inmunodifusión simple y doble? 
En la inmunodifusión simple se mantiene fijo el antígeno en una solución 
difundida dentro de un gel que contiene el anticuerpo, mientras que en la 
inmunodifusión doble tanto el antígeno como el anticuerpo están libres para 
difundir (de forma radial o lineal) hacia el otro para formar un precipitado, 
colocándolos en dos pocillos hechos sobre un soporte, como una placa de 
agar. 
(Rabadán, 2014) 
 
 
5. Mencione tres ventajas y tres desventajas de la técnica de 
inmunodifusión 
Ventajas 
➢ Costo accesible. 
➢ Es un procedimiento sencillo de realizar. 
➢ Tiene un límite inferior de sensibilidad de 10-50 mg/L. 
 
Desventajas 
➢ Bajo límite de detección (no detecta presencia de anticuerpos incompletos). 
➢ Es un proceso que requiere periodos prolongados. 
➢ La interpretación está sujeta al analista. 
(Grenon, 2006) 
 
 
6. ¿Qué es la inmunoprecipitación? 
La inmunoprecipitación es una técnica cuyo objetivo es la purificación y el aislamiento 
de una proteína específica utilizando un anticuerpo contra esa proteína. 
(Shissler & Webb, 2021) 
 
 
 
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7. ¿En qué consiste la prueba VDRL? 
El VDRL es una técnica de floculación que utiliza el antígeno de cardiolipina para 
detectar anticuerpos antitreponémicos inespecíficos producidos por el individuo ante 
una infección sifilítica. Se practica normalmente en lámina, en la que se mezcla el 
suero del paciente (previamente calentado para inactivar el complemento), con una 
suspensión fresca de antígeno de cardiolipina; esta mezcla se agita de forma rotatoria 
y al cabo de pocos minutos puede observarse la floculación utilizando un microscopio 
de bajo aumento; sus resultados pueden expresarse tanto cualitativa como 
cuantitativamente. 
(Larrondo, et. al., 1999) 
 
Su fundamento está en que las "reaginas" presentes en individuos infectados por T. 
pallidum se detectan en suero por la reacción con un antígeno cardiolipínico purificado 
y estabilizado. Si la muestra contiene reagina, ésta se unirá al antígeno produciendo 
una floculación visible en microscopio. Las reacciones inespecíficas se evitan con el 
empleo de antígeno altamente purificado y el agregado de cloruro de colina 
característica de la técnica USR (Unheated Serum Reagin) en la que no es necesario 
inactivar la muestra. 
(Wiener Lab, 2000) 
 
 
8. ¿En qué consiste la prueba RPR? 
La prueba rápida de reaginas plasmáticas (RPR), es un análisis de sangre para 
determinar si se tienen anticuerpos contra la sífilis. 
(The StayWell Company, 2021). 
En la prueba, las reaginas presentes en el suero de individuos infectados con 
Treponema pallidum, se detectan por acción de estas con antígeno de cardiolipina, 
lecitina y colesterol adsorbido sobre partículas de carbón. La reacción produce una 
aglutinación visible macroscópicamente, favorecida por las partículas de carbón. 
(Wiener lab, 2000). 
 
 
9. ¿Qué diferencia existe entre la VDRL y la RPR? 
La diferencia entre ambas radica en que para la prueba VDRL se produce una 
reacción Ag-Ac de tipo floculación y el tipo de análisis puede ser tanto cualitativo 
como cuantitativo de las muestras de suero y LCR; mientras que para la prueba RPR, 
se produce una reacción Ag-Ac unido a partículas de carbón, así como permite el 
análisis de las muestras de plasma y suero. 
(Santiago, 2015) 
 
 
 
 
 
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10. Mencione tres ventajas y tres desventajas de la inmunoprecipitación 
Ventajas 
1. No desnaturaliza las proteínas antes de que se produzca la unión del 
antígeno con el anticuerpo. 
2. Se puede utilizar “in vivo” 
3. Se observan fácilmente y son muy útiles. 
(Vicalegr. s.f) 
 
Desventajas 
1. Poseen baja sensibilidad. 
2. Puede detectarse cambios de los que se desconoce la patogenicidad. 
3. No detecta copias completas del genoma. 
(Oriola, J. 2013) 
 
 
REFERENCIAS 
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de https://www.bioted.es/protocolos/INMUNODIFUSION-RADIAL.pdf. 
 
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Consultado el 25 de mayo de 2021. Recuperado de: 
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Grenon, S. (2006). Guía de prácticas de inmunología. Consultado el 21 de mayo de 
2021. Recuperado de 
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armamentario para la investigación básica en Uro-Oncología? Archivos Españoles de 
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https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/rpr_slide_test_sp.pdf
https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/rpr_slide_test_sp.pdf
https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/vdrl_test_c_controles_sp.pdf
https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/vdrl_test_c_controles_sp.pdf
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