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Práctica 4. Técnica micro cristalográfica para la identificación de colina en fluido seminal y diferenciación microscópica entre sangre venosa y sangre menstrual. Fecha: 24 de septiembre de 2021. OBJETIVO Determinar la presencia de colina en fluido seminal mediante un método cristalográfico. Diferenciar la sangre menstrual de la sangre venosa mediante observación al microscopio. INVESTIGACIÓN PREVIA Fundamento de Cristales de Florence La reacción de Florence consiste en la formación de cristales bajo la acción del yoduro de potasio, yodo y agua destilada. Se coloca en un portaobjetos una gota del macerado sospechoso y se le agregan dos gotas de reactivo, cubriendo la preparación. Los cristales de Florence aparecen con frecuencia al instante. (UAL, s.f). Se basa en la formación de cristales de yoduro de colina, la cual se encuentra presente en el espermatozoide en forma de fosforil-colina y lecitina. Los cristales de yoduro de colina son láminas romboidales de color pardo. Es importante conocer que la colina no es exclusiva del semen, pero resulta de gran importancia en el análisis de muestras aspérmicas, principalmente porque no se conocen otros fluidos que registren simultáneamente una alta presencia de colina junto con fosfatasa ácida como en el espermatozoide. (Mota, et., al., s.f). Colina La colina es un nutriente que se encuentra en muchos alimentos. El cerebro y el SN la necesitan para regular la memoria y el estado de ánimo, para el control muscular y otras funciones. También es necesaria para formar las membranas que rodean las células del organismo. El hígado es capaz de producir una pequeña cantidad de colina, pero la mayor parte proviene de los alimentos. (NIH, 2019). La colina, presente en todas las células, es una base orgánica constitutiva de la lecitina. Interviene en el transporte de los lípidos y en su metabolismo formando los fosfolípidos. (Mota, et., al., s.f). En la eyaculación hay otras aminas con carga positiva en concentración elevada, entre ellas colina y fosforilcolina, que suelen hallarse como componentes de lípidos o como factores lipotróficos. El semen de los mamíferos es rico en colina. En los seres humanos predomina la fosforilcolina. (Wein, et., al., 2007). Gracias a la Lecitina que produce hidrólisis la colina, se puede determinar el tiempo de la muestra debido a la cantidad de colina, en donde, a menor tiempo transcurrido menor cantidad de colina, mientras que a mayor cantidad de colina mayor tiempo transcurrido. (Castro, s.f) Las cantidades de colina presentes en semen normal se encuentran entre 11.2 y 14.4 mg de colina por cada 100 mL se semen. (García, 1994). La colina puede ayudar con la función eréctil, ya que mantiene las arterias limpias para el flujo sanguíneo, por lo que una deficiencia de colina puede causar el endurecimiento de las arterias, afectando el funcionamiento normal del flujo sanguíneo alrededor del cuerpo, lo que puede provocar disfunción eréctil y otros problemas más graves. (Fertility Help Hub, 2021). La colina se puede encontrar también en los siguientes fluidos: • Plasma → 7.0-13.0 µM • Suero → 9.0-13.3 µM • Orina → 15.5 ± 8.8 µM • Fluido cerebroespinal → 0.7-2.5 µM • Fluido amniótico 22.8-24.5 µM • Calostro → 132 ± 21 µM • Leche materna → 110-300 µM • Dializado peritoneal → 14-28 µM (Wurtman & Cansev, 2010). Composición de la sangre menstrual La sangre menstrual se encuentra compuesta de: - Agua - Células muertas del endometrio - Lípidos - Proteínas - Hormonas como progesterona (Ilovecyclo, 2021). CUESTIONARIO 1. Además de las células epiteliales ¿hay algún otro componente que pueda diferenciar a la sangre venosa de la menstrual? Si, debido a que la sangre venosa presenta un color rojo uniforme que brilla al contacto con el aire, mientras que la sangre menstrual no brilla, además, contiene pequeñas cantidades de fibrina intacta, fibrinógeno y productos de degradación de la fibrina. Así mismo, el olor ácido, reacciones ácidas y la presencia de ácido fosfórico y láctico son características presentes en la sangre menstrual comparada con la sangre venosa. (Quinn & Elkins, 2016). 2. ¿Por qué la sangre menstrual no coagula? La sangre menstrual no coagula a causa de la acción de una sustancia llamada plasmina y de las prostaciclinas, que actúan principalmente previniendo la formación y agregación plaquetaria propias del proceso de coagulación de la sangre. (Saludemia, s.f). 3. ¿Cuál es la importancia legal de realizar la diferenciación motivo de esta práctica? Realizar la correcta diferenciación e identificación de las máculas de líquido hemático es de suma importancia debido a que de esta forma se pueden tener las pruebas necesarias para hacer la determinación en donde se demuestre la veracidad de los hechos de pretensión cuando se habal en un proceso judicial por el que se esté cursando, es por esto que es importante conocer y comprender la información que se obtiene a partir de las pruebas de laboratorio durante el análisis de una muestra hemática. METODOLOGÍA Técnica micro cristalográfica para la identificación de colina en fluido seminal. Diferenciación microscópica entre sangre venosa y sangre menstrual. REFERENCIAS Castro, D. (s.f). Investigación de delitos sexuales. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: http://www.bvs.hn/Honduras/SexologiaForense/pdf/SexologiaForense-6.pdf Fertility Help Hub. (2021). The critical nutrient missing in your fertility supplements. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://www.fertilityhelphub.com/blog/wellbeing/choline-fertility-supplement/ García, F. (1994). Estudio experimental de la determinación del cinc en manchas de semen y su aplicación médico legal. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: http://webs.ucm.es/BUCM/tesis//19911996/D/0/D0046701.pdf Ilovecyclo. (2021). Contenido de la sangre menstrual. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://ilovecyclo.com/blog/contenido-de-la- sangre-menstrual/ Mota, et. al. (s.f). investigación de espermios. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://criminalistica.mx/areas-forenses/genetica- forense/1427-investigacion-de-espermios NIH. (2019). Datos sobre la Colina. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://ods.od.nih.gov/pdf/factsheets/Choline-DatosEnEspanol.pdf Quinn, A., Elkins K. (2016). The Differentiation of Menstrual from Venous Blood and Other Body Fluids on Various Substrates Using ATR FT-IR Spectroscopy. Journal of Forensic Sciences, 62(1), 197-204. doi:10.1111/1556-4029.13250 Saludemia. (s.f). ¿Qué es la menstruación? Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://www.saludemia.com/menstruacion UAL. (s.f). Unidad 27. Investigación de manchas. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: http://ual.dyndns.org/biblioteca/Medicina_Legal/Pdf/Unidad_27.pdf Wein, A., et., al. (2007). Urología. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://books.google.com.mx/books?id=Rc4NFKLJL4sC&printsec=frontcover&hl=e s#v=onepage&q&f=false Wurtman, J., Cansev, M. (2010). Choline and its products acetylcholine and phosphatidylcholine. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://www.researchgate.net/publication/226035757_Choline_and_Its_Products_A cetylcholine_and_Phosphatidylcholine http://www.bvs.hn/Honduras/SexologiaForense/pdf/SexologiaForense-6.pdf https://www.fertilityhelphub.com/blog/wellbeing/choline-fertility-supplement/ http://webs.ucm.es/BUCM/tesis/19911996/D/0/D0046701.pdf https://ilovecyclo.com/blog/contenido-de-la-sangre-menstrual/ https://ilovecyclo.com/blog/contenido-de-la-sangre-menstrual/ https://criminalistica.mx/areas-forenses/genetica-forense/1427-investigacion-de-espermioshttps://criminalistica.mx/areas-forenses/genetica-forense/1427-investigacion-de-espermios https://ods.od.nih.gov/pdf/factsheets/Choline-DatosEnEspanol.pdf https://www.saludemia.com/menstruacion http://ual.dyndns.org/biblioteca/Medicina_Legal/Pdf/Unidad_27.pdf https://books.google.com.mx/books?id=Rc4NFKLJL4sC&printsec=frontcover&hl=es#v=onepage&q&f=false https://books.google.com.mx/books?id=Rc4NFKLJL4sC&printsec=frontcover&hl=es#v=onepage&q&f=false https://www.researchgate.net/publication/226035757_Choline_and_Its_Products_Acetylcholine_and_Phosphatidylcholine https://www.researchgate.net/publication/226035757_Choline_and_Its_Products_Acetylcholine_and_Phosphatidylcholine
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