PRÁCTICA 9 DETERMINACIÓN DE BRUCELLA CON ROSA DE BENGALA Y HUDDLESON

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UNIVERSIDAD VERACRUZANA 
FACULTAD DE BIOANÁLISIS 
LABORATORIO CLÍNICO VETERINARIO 
LETICIA ROMERO ORTIZ 
PRÁCTICA 9: DETERMINACIÓN DE BRUCELLA CON ROSA 
DE BENGALA Y HUDDLESON 
DAYRA ELIZABETH HERNÁNDEZ BAUTISTA 
02/05/2023 
PRÁCTICA 9: DETERMINACIÓN DE BRUCELLA CON ROSA DE BENGALA Y 
HUDDLESON 
Introducción 
La brucelosis es una enfermedad bacteriana causada por varias especies 
de Brucella, que infectan principalmente al ganado vacuno, porcino, caprino y ovino 
y a los perros. Los humanos generalmente contraen la enfermedad por contacto 
directo con animales infectados, por comer o beber productos animales 
contaminados o por inhalar agentes transmitidos por el aire. La mayoría de los casos 
se producen por la ingestión de leche o queso no pasteurizados de cabras u ovejas 
infectadas. 
La brucelosis es una de las zoonosis más extendidas transmitidas por los animales 
y, en las zonas donde es endémica, la brucelosis humana tiene graves 
consecuencias para la salud pública. La expansión de las industrias animales y la 
urbanización, así como la falta de medidas higiénicas en la cría de animales y en la 
manipulación de alimentos, explican en parte que la brucelosis siga siendo un 
peligro para la salud pública. 
La causan diversas bacterias de la familia Brucella, cada una de las cuales tiende a 
infectar a una especie animal específica, aunque la mayoría de ellas también son 
capaces de infectar a otras especies animales. 
La brucelosis afecta a los bovinos, porcinos, ovinos, caprinos, equinos, camélidos y 
perros. También puede infectar a otros rumiantes, algunos mamíferos marinos y al 
ser humano. 
La enfermedad en los animales se caracteriza por la existencia de abortos o falta 
de reproducción. Aunque los animales suelen recuperarse, y después del primer 
aborto son capaces de procrear, ellos pueden continuar excretando bacterias. 
Las brucelosis del ganado bovino (B. abortus), ovino y caprino (B. melitensis) y de 
los porcinos (B. suis) son enfermedades que figuran en el Código Sanitario para los 
Animales Terrestres de la Organización Mundial de Sanidad Animal (OMSA) y 
deben ser notificadas de manera obligatoria a la OMSA (Código Sanitario para los 
Animales Terrestres). 
Fundamento 
La primera prueba utilizada para el diagnóstico de la brucelosis fue la aglutinación 
sencilla, esta prueba detecta un antígeno de naturaleza lipopolisacarídica en la 
superficie de los microorganismos de Brucella abortus. La prueba de rosa de 
bengala es una adaptación de la aglutinación sencilla en la que las brúcelas se tiñen 
con rosa de bengala, y se utilizan como antígeno en la aglutinación rápida. 
Outteridge., (1989). 
Se basa en una reacción de aglutinación directa en tarjeta, en la cual el antígeno 
elaborado con la cepa de Brucella abortus, al establecer contacto con anticuerpos 
IgM o IgG presentes en el suero problema aglutinará. Morilla (1986). 
La prueba es cualitativa, se utilizan determinada cantidad de suero sanguíneo y la 
misma cantidad del Abatest-tarjeta, coloreado con rosa de bengala y un pH de 3.65. 
Se colocan los reactivos sobre una tarjeta y se mezclan, pasado un tiempo se 
observará si se presentó o no la aglutinación. Debido al pH bajo, las IgM muchas 
veces no establecen perfectamente la aglutinación, mientras que, en presencia de 
IgG, esta sí se realiza mejor. 
La prueba de Hddleson es una prueba sencilla y cuantitativa descripta en 1928 por 
Huddieson, que aún se emplea como tamiz en algunos países. En esta técnica se 
utilizan proporciones adecuadas que produce entrecruzamiento entre los 
determinantes antigénicos de partículas adyacentes que origina la aglutinación, 21 
la cual se observa microscópicamente con facilidad en forma de agregados gruesos 
o grumos. HalliweII (1992). 
Objetivo 
Realizar de manera correcta las técnicas para las pruebas de Rosa de Bengala y 
método de Huddleson para el diagnóstico de brucelosis. 
Material 
- Muestra: Suero de bovino 
- Pipetas Pasteur 
- Placa de prueba 
Kit de: 
- Rosa de Bengada 
- Huddleson 
 
Método 
- Rosa de Bengala. 
1. Tener a temperatura ambiente la muestra y reactivos a utilizar. 
2. Colocar una gota de muestra de suero en un circulo de la placa. 
Colocar el control positivo en otro circulo y el control negativo en 
otro circulo. 
3. Colocar a todos los círculos el antígeno Rosa de Bengala. 
4. Mezclar agitando la placa suavemente por 4 minutos. 
5. Leer resultados. 
 
- Huddleson. 
1. Tener a temperatura ambiente la muestra y reactivos a utilizar. 
2. Colocar una gota de muestra de suero en un circulo de la placa. 
Colocar el control positivo en otro circulo y el control negativo en 
otro circulo. 
3. Colocar a todos los círculos el reactivo de Huddleson. 
4. Mezclar agitando la placa suavemente por 7 minutos. 
5. Leer resultados. 
Resultados. 
Rosa de Bengala Huddleson 
 
 
 
Referencias. 
➢ Brucelosis. (2021, marzo 23). Recuperado el 3 de mayo de 2023, de OMSA 
- Organización Mundial de Sanidad Animal website: 
https://www.woah.org/es/enfermedad/brucelosis/ 
➢ Brucelosis bovina (BB). (s/f). Recuperado el 3 de mayo de 2023, de Gob.cl 
website: https://www.sag.gob.cl/ambitos-de-accion/brucelosis-bovina-bb 
➢ Rodrguez Zapata, M., Snchez Martnez, L., Sols, J., & Solera Santos, J. 
(2006). Brucelosis. Medicine, 9(53), 3465–3474. doi:10.1016/s0211-
3449(06)74200-x 
➢ Universidad veracruzana unidad DE ciencias DE la Salud facultad DE 
bioanálisis patologia clinica Veterinaria para obtener El título DE: Presenta: 
(s/f). Recuperado el 29 de abril de 2023, de Docplayer.es website: 
https://docplayer.es/30947812-Universidad-veracruzana-unidad-de-
ciencias-de-la-salud-facultad-de-bioanalisis-patologia-clinica-veterinaria-
para-obtener-el-titulo-de-presenta.html 
 
 
 
 
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