PRÁCTICA4_TÉCNICAS DE TINCIÓN

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Universidad Veracruzana
Facultad de Bioanálisis / Región Xalapa
Experiencia Educativa: “Microbiología General”
Práctica No. 4: Técnicas de tinción.
Académico: Q.F.B. Pozos Mestizo Edith
Alumna: Hernández Bautista Dayra Elizabeth
Matrícula: S20020971
Práctica #4: Técnicas de tinción.
Objetivo.
· Hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes.
· Revelar su forma y tamaño.
Fundamento.
La tinción es un método sencillo para incrementar el contraste entre la célula y su entorno y por lo tanto contribuye a mejorar la imagen observada. Las técnicas de tinción con diversos colorantes facilitan la observación al aumentar notablemente el contraste. En Microbiología todas las tinciones se realizan a partir de suspensiones de microorganismos extendidas en un portaobjetos (frotis), secadas y fijadas. La fijación, procedimiento que permite preservar estructuras celulares, se puede llevar a cabo con diferentes tratamientos: fijación por calor o fijación química. La fijación por calor es la más utilizada para la observación de bacterias. 
Todos los colorantes utilizados en microbiología tienen en común la presencia de grupos cromóforos, grupos con dobles enlaces conjugados que son los responsables del color mediante la unión a estructuras celulares por enlaces iónicos, covalentes o hidrófobos, los que establecen enlaces iónicos son los más frecuentes. Entre los colorantes que se unen por enlaces covalentes destaca el reactivo de Schiff, utilizado para la tinción de DNA, donde el colorante se une a la desoxi-ribosa. Por otra parte, en la tinción negativa se utilizan compuestos que no penetran en las células, sino que impregnan el medio circundante. Los microorganismos aparecen refringentes sobre un fondo negro.
Material.
· Microscopio
· Cultivo puro
· Portaobjetos
· Colorantes
· Puente para tinción
· Asa bacteriológica
· Aceite de inmersión
Técnica.
Tinción de Gram.
Tinción Simple.
Resultados.
	Tinción de Gram
	Tinción Simple
	
	
Conclusión.
Un método muy sencillo de tinción de Gram basado en el uso de colorantes (colorantes) es muy útil en medicina y permite una mejor observación de las bacterias al microscopio. Una importante contribución práctica a la tinción de Gram es su capacidad para determinar el tipo de antibiótico, así como su eficacia. Por otro lado, el método de tinción simple solo muestra la morfología celular.
Referencias.
· Equipo. (Dakota del Norte). Métodos y Técnicas de Tinción. Blogspot.Com. Recuperado el 8 de junio ​​de 2022, de http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/2014/10/metodos-y-tecnicas-de-tincion.html
· (2001). Microbiological Applications: Laboratory Manual in General Microbiology (8 th ed.). The McGraw-Hill Companies.
· Harisha, S. (2006). An Introduction to Practical Biotechnology (1st). Firewall Media.
Preparar un frotis de E. Coli y fijarlo en calor.
Cubrir el frotis con azul de metileno y dejar reposando 1 minuto.
Lavar con agua corrientee suavemente y dejar secar.
Observar al microscopio con el objetido de inmesión.
Preparar frotis con E.Coli (+), S. Aureus (-) y uno con ambos.
Dejar secar y fijar al calor.
Teñir con cristal violeta por un minuto.
Enjuagar suavemente con agua corriente y escurrir.
Cubrir el frotis con yodo de gramm y dejar reposar por un minuto.
Enjuagar suavemente con agua corriente y escurrir.
Decolorar con etanol al 95% (inclinado y por gota). Dejar de 10-20 segundos.
Enjuagar suavemente con agua corriente y escurrir.
Contrastar safranina por 20-30 segundos. Enjuagar y dejar secar el frotis.
Examinar con el objetivo de inmersión.