Bacilos Gram Positivos

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA 
Facultad de Medicina 
Departamento de Microbiología 
 
PRÁCTICA VIRTUAL DE LABORATORIO 
 
BACILOS GRAM POSITIVOS 
 
 
INTRODUCCIÓN 
La mayoría de los bacilos Gram positivos se encuentran ampliamente distribuidos en la 
naturaleza y pueden formar parte de la microbiota tanto en el hombre como en animales. 
Frecuentemente, no son patógenos primarios para el hombre, aunque hay algunas especies 
virulentas e importantes en patología humana. 
 
G É N E R O L I S T E R I A 
Cocobacilos Gram positivos que se presentan aislados o 
agrupados en cadenas cortas; móviles a 22ºC mostrando un 
aspecto de “sombrilla”, pero inmóviles a 37ºC. Crecen bien 
sobre placas de agar sangre, produciendo colonias pequeñas, 
translúcidas, beta-hemolíticas, similares a Streptococcus sp, 
pero el halo de hemólisis es pequeño en comparación con el 
tamaño de su colonia y a veces es necesario remover la 
colonia para visualizar la hemólisis. Se desarrollan a 30-37ºC, 
pero crecen a bajas temperaturas (4ºC), característica que le 
permite desarrollarse en alimentos refrigerados y producir 
infección por su consumo, convirtiéndose en el agente más 
importante por contaminación alimentaria. Son catalasa positiva y utilizan hidratos de 
carbono, como la glucosa, manosa y ramnosa, pero no el manitol. Hidrolizan la esculina. Son 
aerobios facultativos y crecen mejor con una atmósfera de CO2. 
Adaptado de Wahab A. Clin Case Rep. 2017 
Dec 15;6(1):209-213. 
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 Diagnóstico de Laboratorio 
Una vez se tiene la muestra se procede a sembrar en los 
distintos medios de cultivo, el más utilizado es agar 
sangre donde se observan colonias medianas, 
cremosas, traslúcidas, ligeramente convexas, de bordes 
regulares, rodeadas de un halo pequeño de beta 
hemólisis. Para iniciar la identificación además de las 
características macro y microscópicas de la colonia, se 
utiliza la prueba de la catalasa que permite 
diferenciarlos del género estreptococo. FACULTAD DE MEDICINA - UN 
Pero también existen otras pruebas bioquímicas dentro de cuales se encuentran: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
• Prueba de Motilidad 
Principio: Determinar si la bacteria es móvil o inmóvil. Permite diferenciar entre 
cepas de Listeria monocytogenes y cepas de Corynebacterium 
Procedimiento: Inocular en el medio de motilidad, haciendo una picadura central, 
hasta la mitad del medio e incubar a 22°C por 48 h. 
Resultados 
- Positiva: motilidad en “sombrilla” 
- Negativa: Inmóvil, el medio permanece límpido (crecimiento únicamente en la 
línea de inóculo. 
 
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G É N E R O E R Y S I P E L O T H R I X 
Erysipelothrix rusiopathiae 
Bacilos Gram positivos, microarefílicos y exigentes, catalasa negativos y producen H2S. Son 
inmóviles y no sintetizan cápsula ni esporos. Esta especie se encuentra ampliamente 
distribuida en la naturaleza. En humanos produce una celulitis “erisipeloide” caracterizada 
• Utilización de hidratos de carbono 
 
Principio: Determinar la capacidad del microorganismo de utilizar (fermentar o 
degradar) un carbohidrato específico incorporado en un medio de cultivo básico, 
con la producción de ácido, el cual provoca la disminución del pH en el medio y este 
se detecta mediante el viraje del indicador rojo de fenol a amarillo. 
 
Procedimiento: Se debe sembrar la colonia en el caldo con hidrato de carbono 
incorporado (Glucosa, Manosa, Sacarosa, Ramnosa, Manitol, etc.) e incubar a 35°C 
por 24 horas. 
 
Resultados: 
- Positivo: El indicador del medio vira a amarillo 
- Negativo: El medio conserva su color rojo. 
 
 
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por una lesión eritematosa púrpura, dolorosa, no supurada y 
bastante pruriginosa. En general el proceso es auto limitado y rara 
vez causa enfermedad sistémica. La enfermedad humana es poco 
frecuente y se limita a trabajadores de la pesca, de mataderos, 
carniceros, etc., configurando una enfermedad laboral. Presenta 
hialuronidasa y neuraminidasa como mecanismos de 
patogenicidad. Modificado de https://www.flickr.com/photos/nathanreading/6843370774 
 
G É N E R O C O R Y N E B A C T E R I U M 
Bacilos Gram positivos pleomórficos, la mayoría de 
las veces en forma de mazo y agrupados en 
empalizada o formando letras en V, Y, L o caracteres 
chinos; por su morfología típica se conocen como 
difteroides. Son facultativos, pero hay algunas 
especies aerobias estrictas. Se encuentran 
ampliamente distribuidos en la naturaleza (suelo, 
agua, superficie de plantas) y forman parte de la 
microbiota de humanos y algunos animales. 
 
Diagnóstico de Laboratorio 
Cuando hay sospecha de infección por C. diphtheriae debe recogerse muestra de 
nasofaringe y garganta, y la siembra debe hacerse en agar sangre enriquecido no selectivo y 
medios especiales como agar sangre con cisteína telurita (CTBA), medio de cultivo Tindsdale, 
agar colistina-nalidíxico (CNA) o medio de Loeffler. Los medios que contienen telurita inhiben 
el crecimiento de la mayoría de las bacterias respiratorias y de bacilos gram negativos. Este 
compuesto se reduce por C. diphteriae volviendo el medio de color gris o negro. A su vez, la 
degradación de la cisteína por la actividad cisteinasa de este microorganismo genera un halo 
pardo alrededor de las colonias. C. diptheriae también fermenta hidratos de carbono 
(sacarosa, matosa, etc.). 
Modificado de Wen F. Microbiol Resour Announc. 2019;8 
(37):e00556-19. Published 2019 Sep 12. 
 
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Obtenido de https://www.flickr.com/photos/nathanreading/6381658417/in/photostream/ 
 
Otra prueba bioquímica que se emplean para su identificación es: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
• Pirazinamidasa 
 
Principio: Esta enzima deamina la pirazinamida para formar ácido pirazinoico, 
compuesto que produce una banda o anillo en el medio. Esta prueba se utiliza para 
diferenciar otras especies de corynebacterium de C. diphteriae, que no la produce. 
 
Procedimiento: Se siembra la colonia en el caldo especial y se incuba por 4 dias. 
Posteriormente, se agrega sulfato de amonio ferroso al medio. 
Resultados: 
- Positivo: Sobresale un anillo rojo-rosado cuando la prueba es positiva. 
- Negativo: El medio conserva su color original. 
 
 
 
Obtenido de http://www.fcq.uach.mx/phocadownload/DOCENCIA/MATERIAL-DE-ESTUDIO/micobacterias/diagnostico/diagnostico.html 
 
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Cuando se hace aislamiento de C. diphteriae también se realiza la prueba de Elek, la cual se 
usa para probar la toxigenicidad de las cepas mediante un ensayo de inmunodifusión. 
 
G É N E R O B A C I L L U S 
Bacilos Gram positivos esporulados, largos, gruesos y delgados con bordes recortados y 
pueden agruparse en cadena; aerobios estrictos, con excepción de algunas especies 
facultativas. Se encuentran distribuidos en suelo, aguas y vegetales y que por sus esporas 
logran mantenerse muchos años, aún en condiciones adversas. 
 
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 CUESTIONARIO 
1. ¿Cuáles son las especies de cada uno de estos géneros más importantes en patología 
humana? 
2. Escriba qué pruebas se debe realizar para diferenciar especies de los géneros a estudiar.