Extracción de ADN en muestras vegetales (Practica)

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Asignatura:
	Biología 
	Fecha:
	 25/10/2022
PRÁCTICA
1. TITULO 
Extracción de ADN en muestras vegetales
2. INTRODUCCIÓN 
Las características fisiológicas y bioquímicas de todo ser vivo están contenida s en sus respectivos genomas. Los genomas de bacterias, hongos, plantas, animales y algunos virus están compuestos por moléculas de ácido desoxirribonucleico.
El ADN es una estructura química cuyos elementos fundamentales se organizan de manera a lineal generando enormes secuencias de información
Las plantas poseen tres tipos de ADN: el nuclear, el mitocondrial y el cloroplástico. Reciben estos nombres dependiendo del tipo de organelo celular en el que el ADN se encuentre. Los distintos tipos de ADN tienen características bioquímicas semejantes.
Fuente Original revisada:
Pedro, J. (Palmas) (2002). Teoría y práctica para la extracción y purificación del ADN de palma de aceite. Bogotá. 
En la siguiente práctica se buscará conocer más acerca del ADN sobre los tejidos vegetales.
3. OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL 
Extraer ADN en muestras de tejidos vegetales mediante procesos sencillos y rápidos
OBJETIVO ESPECIFICO 
· Visualizar la forma del ADN de un tejido vegetal mediante la extracción de una muestra con la utilización de frutas.
· Reconocer y aprender los procesos y métodos empleados en un proceso de extracción de muestras de ADN.
4. RECURSOS. 
Tabla 1
Materiales de laboratorio
	Materiales
	Reactivos
	· Un maduro
· 3 fresas grandes
· Colador o cenidor
· Una cuchara sopera
· Dos fundas ziploc
· Franela o mantel pequeño de cocina
Materiales de laboratorio
· 2 vasos de precipitación
· 2 tubos de ensayo
· Una gradilla
	· Alcohol (bien frío de preferencia)
· Jabón líquido
· 50 ml de agua fría
· Sal
5. PROCEDIMIENTO.
El primer paso a realizar para una mejor proyección de esta práctica fue organizar todos los materiales que usaríamos en la mesa de trabajo y clasificarlo de acuerdo al uso que tendrían.
Figura 1
Materiales para el experimento
Nota: Los materiales se pueden leer en la Tabla 1
Lo siguiente que hicimos fue picar el maduro y las fresas en trozos pequeños y delgados e introducir las frutas picadas en diferentes fundas ziploc para no mezclar su contenido y obtener una buena extracción del ADN de cada uno, tras este paso sacamos el aire de la funda y la sellamos, comenzando a aplastar el contenido de ambas hasta que se vuelvan una masa más suave y espesa, una vez realizado esto procedemos a abrir con cuidado de no regar el contenido y agregarle 50 ml de agua fría a cada una de las fundas y agregamos 250 g de sal y volvemos a sellar, una vez más aplastamos con precisión para que el contenido de ambas fundas se vuelva aún más suave y líquida que antes, 
Figura 2
“Papilla” de frutas
	 Figura 2A
	FFigura 2B
Ya realizado esto procedemos a cernir con cuidado ambas masas en dos recipientes de vidrio de forma que no caiga nada fuera del envase y después agregarles una cucharada de jabón líquido a cada uno, ya con las muestras en los recipientes, con una varilla de vidrio mezclamos lentamente en círculos para no generar burbujas en las muestras.
Figura 3
Mezcla de la papilla con Jabón
 Figura 3A Figura 3B
	
	
Esperamos unos pocos minutos y vaciamos el contenido de los envases en dos tubos de ensayo, llenamos hasta la mitad del recipiente y por las paredes de del tubo agregamos los 50 ml de alcohol frío en cada uno, al realizar esto la muestra debería quedar en la parte inferior el tubo y el alcohol en el superior.
Figura 4
Muestras de ADN
Nota: Es el resultado final del experimento
No esperamos mucho hasta que pudimos visualizar como en la parte superior donde se encontraba el alcohol de la muestra comenzaba a surgir pequeñas burbujas que formaban una cadena, en el caso de la muestra de fresas no se visualizaba mucho la forma de ADN, pero en el caso de la muestra del maduro se veía de mejor manera la cadena que representaba el ADN obtenido de la muestra.
Figura 5
Figura 5A Figura5B
	
	
6. RESULTADOS 
Tras el proceso de preparación y extracción se logro visualizar la forma de una cadena de ADN de tejidos vegetales y como esta se formaba en el alcohol a través de las partículas que expulsaban las muestras. 
7. CONCLUSIONES 
Podemos finalizar concluyendo que hemos identificando y aprendido la forma, genes y procesos de extracción de las muestras de ADN en tejidos vegetales mediante la práctica realizada en clases.
8. RECOMENDACIONES 
Cuando se realicen prácticas en el laboratorio, las personas que no intervengan en ellas deben estar perfectamente informadas de las mismas.
· Mantener en todo momento las batas abrochadas.
· No abandonar objetos personales en mesas de trabajo.
· No ingerir alimentos en el laboratorio.
· Lavarse las manos antes de abandonar el laboratorio.
· Estas siempre bajo la supervisión de un docente tutor.
9. PREGUNTAS DE CONTROL 
Una vez que se ha realizado la extracción de ADN, contesten las siguientes preguntas.
a. ¿Qué papel juegan el detergente líquido y la licuadora en la extracción?
Las moléculas de detergente ayudan a romper las membranas celulares y liberar el ADN del núcleo.
b. ¿Qué habría pasado si antes de agregar el alcohol o isopropanol a la solución de ADN hubieses agitado fuertemente?
No se habría logrado visualizar la muestra de ADN ya que se hubiera arruinado
c. ¿Cuál es la función de la sal en la extracción de ADN?
“Los iones sodio con carga positiva son atraídos por las cargas negativas del ADN, neutralizando la carga del ADN esto permite a las moléculas de ADN unirse en vez de repelerse entre sí” (Biotechnology Explorer, s.f)
d. ¿De qué manera crees que está organizado el contenido blanco que pudiste observar en la solución de alcohol?
BIBLIOGRAFÍA
Pedro, J. (Palmas) (2002). Teoría y práctica para la extracción y purificación del ADN de palma de aceite. Bogotá. https://blogs.ead.unlp.edu.ar/geneticamuseo/files/2018/04/Art% C3%ADculo-extraccion-ADN-en-plantas.pdf
Biotechnology Explorer (Bio Rad) (s.f). Kit de genes en una botella Módulo de extracción de ADN. Madrid. https://www.bio-rad.com/webroot/web/pdf/lse/literature/4110034ES.pdf