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CLONACIÓN MOLECULAR Y EXPRESIÓN GENÉTICA BIO. MSC. CARMEN BARBA G. DOCENTE UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO O B JE T IV O S Explicar ¿qué es la Clonación Molecular y la Expresión Genética? Definir los pasos de la Clonación Molecular, las ventajas y desventajas en la práctica médica Determinar la importancia de la clonación Molecular y la expresión genética en la práctica clínica CLONACIÓN MOLECULAR La clonación molecular se caracteriza por aislar un fragmento de ADN de interés e insertarlo en un plásmido (vector) y obtener múltiples copias de ello en un organismo generalmente procariota por acción de la ADN polimerasa. Plásmido: Son moléculas de ADN en forma de anillo (ADN circular), presentes principalmente en bacterias, que se replican de manera autónoma. No son infecciosos. Vector molecular: son moléculas transportadoras que transfieren y replican fragmentos de ADN que llevan insertados mediante técnicas de ADN recombinante. Para que sirva de vector, una molécula debe ser capaz de replicarse junto con el fragmento de ADN que transporta. Enzima de Restricción: Una enzima de restricción es aquella que puede reconocer una secuencia característica de nucleótidos dentro de una molécula de ADN y cortar el ADN en ese punto en concreto, llamado sitio o diana de restricción, o en un sitio no muy lejano a este. La clonación de cualquier fragmento de ADN consiste en los siguientes pasos: •Elección del organismo huésped y el vector de clonación •Preparación del ADN del vector •Preparación del ADN a clonar •Creación del ADN recombinante •Introducción del ADN recombinante en el organismo huésped •Selección de los organismos que contienen ADN recombinante •Detección de clones con insertos de ADN deseado y propiedades biológicas. APLICACIONES DE LA CLONACIÓN MOLECULAR La Clonación Molecular se utiliza en una amplia variedad de experimentos biológicos y las aplicaciones prácticas van desde la toma de las huellas dactilares hasta la producción de proteínas a gran escala. En investigación: Se utiliza esta técnica para conocer la función de determinados genes a través de la deleción, inserción y transposición de ciertos genes en distintos organismos y también se puede usar promotores para estimular la actividad de determinados genes. Mediante la manipulación genética se puede obtener animales que padezcan enfermedades análogas a las humanas para simular dichas enfermedades y pruebas preclínicas de medicamentos y terapias para combatirlas. Fabricación de Productos Terapéuticos: Los organismos transgénicos son utilizados para fabricar productos destinados al uso terapéutico en humanos. La vacuna contra la hepatitis B se produce a partir de levaduras a la que se ha insertado un gen para producir el antígeno HBsAg presente en la envoltura del virus de la hepatitis. El anticoagulante Atryn usado para disminuir el riego de coagulo durante operaciones quirúrgicas, se extrae de la leche de cabra modificada genéticamente. Terapia Génica: Usa virus genéticamente modificados para introducir genes humanos con el fin de curar algunas enfermedades. Actualmente la terapia se centra solo en células somáticas por lo que los cambios que se pueden producir no se transmitirán a los descendientes. Es una técnica relativamente nueva que ya esta dando resultados asombrosos en el área clínica y terapéutica. Además, la clonación tiene importantes aportaciones en la industria, a la resistencia de alimentos, a las plagas sin pesticidas, animales mejorados y más eficientes, animales de compañía mejorados genéticamente que son hipoalergénicos. EXPRESIÓN GENÉTICA Proceso por el cual todos los organismos procariotas y eucariotas transforman la información codificada en el ADN en proteínas que son necesarias para el desarrollo y funcionamiento de un organismo vivo. Se puede decir también que es el proceso mediante el cual la información almacenada en el ADN es usada para dirigir la síntesis de un producto específico como el ARN y proteínas. Experimento de Griffith Experimento de Avery, McLeod y Mc Carty Experimento de Hershey y Chase GRACIAS POR SU ATENCIÓN
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