Electroforesis

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Electroforesis
La electroforesis es una técnica que emplean los cientificos en el laboratorio utilizada para separar el ADN, el ARN, o moléculas o proteínas en base a su tamaño y carga eléctrica. Se utiliza una corriente eléctrica para mover las moléculas y que se separen a través de un gel. Los poros del gel actúan como un colador, permitiendo que las moléculas más pequeñas se muevan más rápido que las grandes. Las condiciones utilizadas durante la electroforesis se pueden ajustar para separar moléculas en el rango de tamaño que se desee.
A diferencia de las proteínas, que pueden tener una carga positiva o negativa, los ácidos nucleicos solo poseen carga negativa (esto debido a su esqueleto de fosfatos). En una electroforesis, los ácidos nucleicos migrarán hacia el polo positivo; es decir, el ánodo. En el caso de las proteínas se realiza un pretratamiento con detergentes, como el dodecilsulfato de sodio (SDS), que les confiere una carga negativa; con ello se homogenizan las proteínas de la muestra y todas migrarán hacia el polo positivo, y sólo se separarán por tamaño.
El principio de la electroforesis consiste en la migración proporcional de las moléculas a través de un gel u otro tipo de matriz porosa, según su peso molecular o tamaño; movimiento generado por el campo eléctrico.
Elementos necesarios para una electroforesis
· Cámara de electroforesis 
· Geles de agarosa: Polisacárido extraído de algas marinas, es un gel altamente poroso tras someterlo a calor y enfriarlo nuevamente. La ventaja de este gel es que no es un compuesto tóxico y permite realizar el análisis de ácidos nucleicos con pesos moleculares variados, pero su poder de resolución es menor.
· Geles de acrilamida: polímero sintético, termoestable, incoloro y químicamente inerte, que puede generar geles con un amplio intervalo de tamaños de poro. Su desventaja es que es un veneno neurotóxico.
· Buffer de corrimiento: es de la misma composición y pH que el buffer con el que se prepara el gel de resolución, ya sea agarosa o acrilamida. Proporciona el medio para la transmisión de la corriente eléctrica y mantiene el pH sin variaciones mientras se realiza el corrimiento.
· Marcador de peso molecular: Son moléculas de ADN o de proteínas que permiten determinar por comparación el tamaño de los fragmentos de ácidos nucleicos o proteínas contenidos en las muestras sometidas a electroforesis. En el caso de los ácidos nucleicos pueden ser fagos o plásmidos sometidos a corte con enzimas de restricción que generan fragmentos de tamaño.
· Buffer de carga: amortiguador que tiene como fin brindar peso, densidad y color a la muestra, lo que facilita su depósito en el pocillo y evita su salida del gel; permite, además, monitorear el corrimiento de la muestra en el gel. Contiene Tris, azul de bromofenol, azul de xileno y glicerol (9 para ácidos nucleicos) o Tris-HCl, pH 6.8, ditiotritol (DTT), SDS, glicerol y azul de bromofenol (para proteínas).
· Trans iluminador ultravioleta: transmite luz del espectro ultravioleta a través de la muestra, excitando la molécula cromogénica que emite luz fluorescente que permite visualizarla.