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187 Cuando el pH del medio es 3.1, el Glutamato no tiene carga por lo tanto no va a poder migrar en un campo eléctrico. Por lo tanto se debe modificar el pH del Buffer, por ejemplo, si este pH=2, el Glutamato estaría cargado positivamente porque está debajo del punto isoeléctrico, por lo tanto se tendría que sembrar en el ánodo (+) para que viaje, hacia el cátodo (-). Se concluye: pH del medio < Punto isoeléctrico → + pH del medio > Punto isoeléctrico → - 3- SI EL AMINOÁCIDO ES BÁSICO. (Lisina) Si es básico es porque predominan los grupos amino, sobre los grupos carboxilos. 1. Una especie iónica donde los grupos amino α (NH3+), carboxilo α (COO-), y amino ε (NH3+), estén protonado será cuando el pH del medio sea ácido. Comportándose como un ácido, a pesar de que sea un aminoácido básico porque es capaz de donar hidrogeniones tanto en el carboxilo α, como en el amino α y ε. Se titula entonces, con una base. 2. Cuando se empiece a agregar hidróxidos (bases OH+), el pH del medio, empieza aumentar, hasta llegar al momento en que el carboxilo α, done un protón, quedando COO-. El pH ahora será el correspondiente al pKa1. En este caso, la Lisina le corresponde: 2.2, eso quiere decir que cuando el pH del medio donde esté disuelto la Lisina, sea 2.2, el 50% de la Lisina está expresada en la forma COO-, y el otro 50%, en la forma anterior. 3. Si se le sigue agregando base, llega el momento en el que el amino α, ioniza (NH2), apareciendo el pKa2=9.2, queriendo decir, que a ese pH, el 50% de las moléculas de Lisina muestran la forma NH2 y COO-, y el otro 50% muestran la forma anterior. 4. Si se le sigue titulando, llega el momento en el que el amino ε, ioniza (NH2), apareciendo el pK3=10.8, queriendo decir, que a ese pH, el 50% de las moléculas de Lisina muestran la forma NH2, NH2, COO- y el otro 50% muestran la forma anterior. En este punto la Lisina es básica. é = = . . = 10 0+1+2 -1 1 2 3 4 188 Si se tiene mezcla, Alanina, Lisina y Glutamato. Si se quiere (Por ejemplo) que la Alanina no migre, que el Glutamato migre de cátodo a ánodo, y la Lisina, de ánodo a cátodo, el pH del medio seria el punto isoeléctrico de la Alanina. 5.2 REGULACIÓN COLOIDO-OSMÓTICA En las arteriolas, la presión hidrostática es de aproximadamente 37mmHg; se opone a ella una presión intersticial (hística) de1mmHg. La presión osmótica (presión oncótica) ejercida por las proteínas plasmáticas es de alrededor de 25mmHg. De este modo, una fuerza neta hacia afuera de unos 11mmHg. Impulsa el líquido hacia los espacios intersticiales. En las vénulas, la presión hidrostática es de alrededor de 17mmHg, con las presiones oncótica e intersticial como se describieron; así, una fuerza neta de alrededor de 9mHg atrae agua de regreso hacia la circulación. Las presiones anteriores a menudo se denominan las fuerzas de Starling. Si la concentración de proteínas plasmáticas está notoriamente disminuida (p. ej. Debido a desnutrición proteínica grave), el líquido no es atraído de regreso hacia el compartimiento intravasculasr, y se acumula en los espacios hísticos extravasculares, un estado conocido como edema. El edema tiene muchas causas; la deficiencia de proteínas, es una de ellas. 189 1. CICLO DE KREBS. También llamado, Ciclo del ácido cítrico o Ciclo de los ácidos tricarboxilicos. Vía metabólica cíclica que comienza con Oxaloacetato y termina con Oxaloacetato. Ocurre al interior de la mitocondria, a nivel de la matriz mitocondrial, gracias a que los sistemas enzimáticos se encuentran en ese lugar, con excepción de la Aconitasa y la Succinato deshidrogenasa, las cuales están ligadas a la membrana mitocondrial interna. El Ciclo de Krebs tiene como objetivo, oxidar los grupos Acetilos que resultan de los glúcidos, lípidos y proteínas a CO2, con la producción de equivalentes de reducción de tipo coenzimas reducidas como NADH+H+ y FADH2; hay que tener en cuenta que el ciclo NO PRODUCE ATP significativamente. El ATP se produce en un proceso acoplado a la Cadena respiratoria llamado Fosforilación oxidativa. El ciclo se justifica con la antigua incapacidad de oxidar grupos acetilos, para convertirlo en CO2. UNIVERSIDAD LIBRE SECCIONAL BARRANQUILLA FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE MEDICINA INTEGRACIÓN METABÓLICA IDENTIFICACIÓN RESPONSABLE: ANDRES JULIAN SALCEDO CREACIÓN: NOVIEMBRE DE 2016 EDITOR: ANDRES JULIAN SALCEDO ÚLTIMA EDICIÓN: DICIEMBRE DE 2018 DOCENTE: Dr. ISMAEL LIZARAZU SEMESTRE: II ASIGNATURA: BIOQUÍMICA 190 0. Si se parte del Piruvato, el cual deriva de la Glucosa en Glicólisis. El Piruvato debe ingresar a la matriz para hacer parte del complejo multienzimático de la Piruvato Deshidrogenasa, con la debida utilización de las coenzimas NAD, FAD, CoA, TPP y Lipoamida. Esta es una reacción altamente exergónica, porque la variación de energía libre es de ΔG´°= -33.4kJ/mol, lo cual la hace, altamente irreversible. 1. El AcetilCoA, que proviene de la βOxidación de los ácidos grasos, del Piruvato que viene de la glucosa o el AcetilCoA que llega desde el esqueleto hidrocarbonado de los aminoácidos reacciona con el Oxaloacetato que preferencialmente se produce por carboxilación del Piruvato por la Piruvato carboxilasa (Biotinodependiente), y viene de la glucosa, para entonces producir el Citrato, el cual es un ácido tricarboxilico, la condensación ocurre gracias a la Citrato sintasa. Reacción exergónica ΔG´°= - 32.2kJ/mol (7.7kCal/mol), más de 7.3kCal/mol necesarias para producir una mol de ATP, a partir de ADP + Pi. La reacción es exergónica, gracias a la hidrólisis del enlace tioester. Cuando se quiere transformar, kJ, a kCal, se tiene que dividir entre 4.18. Si se quiere transformar kCal a kJ, se multiplica 4.18. 2. El Citrato debe descarboxilarse, pero para esto debe sufrir una isomeración para producir un compuesto que sea suceptible de descarboxilación oxidativa. Por eso el Citrato se deshidrata gracias a la Aconitasa, con la pérdida de H2O, produciendo el Cis-Isocitrato, y es la misma Aconitasa que le incorpora H2O, para producir el Isocitrato, todo esto con el fin de invertir la posición del hidrógeno y el grupo OH. Tiene una variación de energía baja, por lo tanto es reversible. La Aconitasa, en su centro activo tiene un centro Hierro-azufre (Fe+ S), que actúa como centro de fijación de sustratos y centro catalítico. 3. Gracias a que el Isocitrato es un sustrato que está parcialmente oxidado, la Isocitrato deshidrogenasa, necesita de NAD, el cual entra oxidado y sale de la forma NADH+H+, y Mg+ convirtiéndose entonces en Oxalosuccinato el cual es un compuesto intermediario de la reacción. Después se elimina el carboxilo en forma de CO2, y se convierte en αCetoglutarato, mediante una descarboxilación oxidativa. Como tal el Isocitrato se transforma en αCetoglutarato. Existen dos formas de Isocitrato deshidrogenasa, una es dependiente al NAD y se encuentra en la matriz mitocondrial, la otra depende del NADP, y se encuentra tanto en la matriz mitocondrial como el citosol. De estas dos, la que mayor tiene participación en el ciclo es la que está ligada al NAD. 4. El αCetoglutarato, sigue descarboxilando oxidativamente , gracias al complejo multienzimático de la αCetoglutarato deshidrgenasa (Similar al CM de Piruvato deshidrogenasa), convirtiéndose en SuccinilCoA (Tioester), produciendo CO2, el cual no proviene del grupo acetilo sino que deriva del Oxaloacetato. Reacción altamente exergónica ΔG´°= -33.5kJ/mol, por lo tanto es irreversible. 5. El SuccinilCoA es un tioester, el cual al hidrolizarse se convierte en Succinato, gracias a la SuccinilCoA sintetasa liberando gran cantidad de energía, la cual puede ser utilizada parar producir energía de tipo GTP a partir de GDP, lo que equivale a producir una mol de ATP, porque la reacción hay que perpetuarla, el GTP resultante reacciona con el ADP, transfiriéndole el grupo fosfato convirtiéndose en ATP, el GTP en ADP, gracias a la Nucleósido bifosfoquinasa. Esta es la única fosforilación a nivel de sustrato que ocurre en el ciclo.
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