Reporte Práctica No 4

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Universidad Veracruzana
Facultad de Bioanálisis – Xalapa
Bioquímica Básica
Ricardo Vázquez Ballona
Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez
PRACTICA 4. 
Reacción de Fehling
22 de septiembre de 2021
Práctica 4.
 Reacción de Fehling.
Objetivo.
· Identificar carbohidratos reductores y no reductores.
Generalidades.
Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos. Si el glúcido que se investiga es reductor, se oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre (II), de color azul, a óxido de cobre (I), de color rojo-anaranjado.
El reactivo de Fehling, es un reactivo químico utilizado para diferenciar entre los grupos funcionales carbohidrato y cetona solubles en agua, y como prueba para azúcares reductores y azúcares no reductores, complementaria a la prueba del reactivo de Tollens. La prueba fue desarrollada por el químico alemán Hermann von Fehling en 1849.
El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:2
· Sulfato cúprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1000 ml.
· Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 173 g; solución de hidróxido de sodio al 40 %, 3 g; agua, hasta 500 ml.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitación del hidróxido de cobre (II).
Procedimiento.
Para la preparación de la disolución de sacarosa:
1. Prepara una disolución al 10 % de sacarosa a un volumen final de 20 mL con agua destilada en un vaso de precipitados de 50 mL. Esta disolución la prepara sólo un equipo y servirá para todos los demás equipos.
Para la preparación de la disolución de almidón:
1. Pela y ralla la papa dentro del vaso de precipitado de 100 mL, añade 50 mL de agua destilada y mezcla con un agitador de vidrio.
2. Filtra el extracto de papa en un matraz Erlenmeyer de 150 mL usando el embudo y la gasa. Los residuos de papa pueden ser desechados en áreas verdes, así como el extracto sobrante. Esta disolución la prepara sólo un equipo y servirá para todos los demás equipos.
Para el experimento:
Identifica cuidadosamente cada tubo antes de iniciar.
1. Rotula los tubos como: 1 glucosa, 2 fructosa, 3 sacarosa, 4 almidón, 5 control negativo.
2. En cada tubo vierte un 1 ml de Fehling A y 1 mL de Fehling B, cubre con papel Parafilm y mezcla suavemente por inversión, retira el papel Parafilm del tubo y caliéntalo a ebullición en baño maría por un minuto.
3. Saca el tubo del baño maría con las pinzas para tubo de ensaye y añade a cada uno 1 mL de la disolución correspondiente de carbohidrato, al control negativo añade 1 mL de agua destilada.
4. Mezcla suavemente por inversión con papel Parafilm, retira el papel y vuelve a poner el tubo en baño maría en el mechero hasta ebullición.
Si se reduce el cobre en forma de un precipitado de CuO2 de color rojizo la reacción es positiva para azúcar reductor.
Materiales y equipo:
	Material por equipo:
5 tubos de ensaye de 13 x 100 mm Gradilla para tubos
Vaso de precipitados de 250 mL Pinzas para tubo de ensaye Mechero y tripie con tela de asbesto 2 pipetas graduadas de 5 mL
5 pipetas graduadas de 2 mL Agitador de vidrio
Perilla
Papel parafil
	Material por grupo:
Balanza granataria con platillo de aluminio para tarar
Espátula
Vaso de precipitados de 100 mL
2 vasos de precipitados de 50 mL
Agitador de vidrio Embudo
Matraz Erlenmeyer de 150 mL
	Reactivos por equipo:
5 mL Fehling A (CuSO4)
5 mL Fehling B (Tartrato/NaOH) 1 mL de glucosa al 1%
1 mL de fructosa 1 %
10 mL de agua destilada
Sustancias	traídas	por	los alumnos por grupo:
1 papa pequeña
1 rallador de cocina
2-5 g de azúcar morena 
1 gasa
Precauciones.
· Colocarse la respectiva bata de laboratorio, abotonada.
· Colocarse los accesorios de protección individual (cubrebocas, lentes de protección, guantes).
· Tener bien tapados los tubos de ensayo. 
· Mantener los tubos de ensayo en la gradilla.
· Rotular los tubos de ensayo.
· Cambiar las puntillas de las pipetas automáticas al momento que se deban cambiar.
· Usar pinzas para agarrar los tubos cuando se saquen del baño maría.
· Mantener extremo cuidado con la placa calefactora para el baño maría.
Resultados
	
	Tubo 1 Fructosa 1%
	Tubo 2 Azúcar de casa 1%
	Tubo 3 Orina
Paciente 1
	Tubo 4 Orina Paciente 2
	Coloración observada
	Verde claro
	Café claro
	Verde claro
	Verde claro
	Fehling (+), (-)
	Positivo
	Positivo
	Positivo
	Positivo
	
 Tubo 1 	 Tubo 2 	 Tubo 3 Tubo 4
 Fructosa Azúcar Orina p1 Orina p2 
	 Baño maría
	Tubo 1
Fructosa
Positivo
	
	Tubo 3
Orina
Paciente 1
Positivo
500 mg/dl
	
	Tubo 2
Azúcar de casa
Positivo
1000 mg/dl
	
	Tubo 4
Orina
Paciente 2
Positivo
500 mg/dl
	
Conclusiones
El principio químico de esta prueba se fundamenta en la reacción de oxidación del cobre y el poder reductor de los azúcares (monosacáridos, polisacáridos, aldehídos y ciertas cetonas). 
Esta prueba nos permitió identificar cual es un azúcar reductor. Un azúcar es reductor por la formación de un precipitado de color rojo ladrillo (óxido cuproso) y la decoloración de la solución.
Referencias
Wikipedia contributors. Reactivo de Fehling [Internet]. Wikipedia, The Free Encyclopedia. [citado el 22 de septiembre de 2021]. Disponible en: https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Reactivo_de_Fehling&oldid=135398299
REACCIONES QUÍMICAS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO [Internet]. Ehu.eus. [citado el 22 de septiembre de 2021]. Disponible en: http://www.ehu.eus/biomoleculas/hc/sugar4.htm
Prueba de Fehling [Internet]. Dequimica.info. 2020 [citado el 22 de septiembre de 2021]. Disponible en: https://www.dequimica.info/prueba-de-fehling
Glúcidos PN 2. DEPARTAMENTO DE ELECTRÓNICA Y AUTOMÁTICA [Internet]. Edu.ar. [citado el 22 de septiembre de 2021]. Disponible en: http://dea.unsj.edu.ar/quimica2/LABORATORIO%202%20GLUCIDOS.pdf
REACCIÓN DE FEHLING - LABORATORIOS DE BIOQUÍMICA [Internet]. Google.com. [citado el 22 de septiembre de 2021]. Disponible en: https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/carbohidratos/reaccion-de-fehling