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INSTITUTO TECNOLOGICO DE ZACATEPEC Nombre del laboratorio: Laboratorio de Bioquímica Numero de práctica: 7 Nombre de la práctica: Identificación de azúcares reductores Fecha de entrega del reporte: 16 de Abril del 2018 Integrantes: Rangel Ramos Rocío Esther 100% Rodríguez Guevara Alan 100% Rodríguez Noguerón Ricardo 100% Batalla López Alan Joseph 100% Medrano Nava María Teresa 100% INTRODUCCION: Los azucares reductores son aquellos que presentan un carbono libre en su estructura y pueden reducir, en determinadas condiciones, a las sales cúpricas. El ensayo de fehling se funda en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehído. Este se oxida a ácido y se reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a oxido de cobre (I), que dorma de un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reacción es que la forma aldehído puede detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad. Si un azúcar reduce el licor de Fehling a óxido de cobre (I) rojo, se dic que es un azúcar reductor. Al reaccionar con monosacáridos, se torna verdoso; si lo hace con disacáridos, toma el color ladrillo. OBJETIVO GENERAL: Familiarizarse con las propiedades químicas de los azucares determinando los azucares reductores por la reacción de Fehling. MARCO TEORICO: Se denomina técnicamente azúcares a los glúcidos que generalmente tienen sabor dulce, como son los diferentes monosacáridos, disacáridos y oligosacáridos, aunque a veces se usa incorrectamente para referirse a todos los carbohidratos. En cambio, se denomina coloquialmente azúcar a la sacarosa, también llamado azúcar común o azúcar de mesa. La sacarosa es un disacárido formado por una molécula de glucosa y una de fructosa, que se obtiene principalmente de la caña de azúcar o de la remolacha azucarera. Los azúcares son elementos primordiales, y están compuestos solamente por carbono, oxígeno e hidrógeno. Los azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas. Todos los monosacáridos son azúcares reductores, ya que al menos tienen un -OH hemiacetálico libre, por lo que dan positivo a la reacción con reactivo de Fehling, a la reacción con reactivo de Tollens, a la Reacción de Maillard y la Reacción de Benedict. Otras formas de decir que son reductores es decir que presentan equilibrio con la forma abierta, presentan mutarrotación (cambio espontáneo entre las dos formas cicladas α (alfa) y β (beta)), o decir que forma osazonas. El reactivo de Fehling, es una solución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling. Esta prueba se utiliza para el reconocimiento de azúcares reductores. El poder reductor que pueden presentar los azúcares proviene de su grupo carbonilo, que puede ser oxidado a grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. Si el grupo carbonilo se encuentra combinado no puede presentar este poder reductor. ECUACION GENERAL. GLUCOSA FRUCTOSA Es el azúcar reductor más abundante en el organismo. Su concentración en la sangre está sometida a un cuidadoso mecanismo de regulación en individuos sanos y en personas que padecen diabetes, aumenta sustancialmente. Esto lleva a que esta sea el azúcar reductor generalmente considerado en las reacciones de la glucozilacion no enzimática de interés biológico. Esta azúcar es encontrada en los vegetales, las frutas y la miel. Es un monosacárido que tiene la misma fórmula empírica que la glucosa, peor con diferente estructura. Al ser sometida a la prueba del fehling, esta reacciona lo cual se evidencia al observar un precipitado color ladrillo. SACAROSA ALMIDON MATERIALES 1 Agitar de vidrio 1 Probeta de 10 mL 1 Probeta de 50 mL 10 Tubos de ensayo 15x150 mL 1 Gradilla 1 Piceta 1 Perilla de 3 Vías 2 Pipetas de Pasteur desechables 1 Espátula 1 Vortex 4 Vidrio de reloj 1 Pipeta de 10 mL 1 Termómetro 2 Vasos de precipitados de 250 mL La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que carece de poder reductor y la reacción con el licor de Fehling es negativa. Sin embargo, en presencia de HCl y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, que sí son reductores. Es una macromolécula compuesta por dos polisacáridos, la amilosa y la amilopectina. Es el glúcido de reserva de la mayoría de los vegetales. En este caso al mezclarse con el Fehling no ocurrió ninguna reacción entre las soluciones, debido a que el almidón es un azúcar no reductor. 1 Jeringa con manguera 2 Barra de agitación magnética 4 Vasos de precipitados de 50 mL 2 Pinzas para tubo de ensayo 2 Matraz volumétrico de 100 mL 1 Agitador magnético EQUIPO Balanza analítica Baño María eléctrico REACTIVOS Almidón soluble 1g Sacarosa 0.5g Lactasa 0.5g Fructosa 0.5g Dextrosa 0.5g Hidróxido de sodio 0.5g Sulfato de cobre 0.5g Tartrato de Sodio y Potasio 10g Reactivo de Fehling A Reactivo de Fehling B PROCEDIMIENTO Se lavó el material de manera meticulosa, finalizando el lavado con un enjuague con agua destilada; se dejó secar el material mientras se continuó con la limpieza de la mesa de trabajo. Se prepararon las disoluciones de los diferentes reactivos, mezclando un gramo del reactivo con 10mL de agua destilada. Al tener todas la disoluciones se agregaron 0.5 mL de disolucion en cada uno de los tubos de ensayo. Posteriormente, se agregó a los tubos de ensayo con las disoluciones 2 mL del reactivo Fehling I y 2 mL del reactivo Fehling II. Se mezclaron hasta que se observaba homogénea la mezcla. Los tubos de ensayo se calentaron en un baño maría a 100°C por 3 minutos y se observaron los cambios de las disoluciones. MEMORIA FOTOGRÁFICA Se preparó la disolución de almidón procurando agitarlo de manera constante para evitar el asentamiento del reactivo. Se prepararon las diferentes disoluciones y se colocaron en vasos de precipitados. Fig. 1. Preparación de la disolución de almidón. Fig. 1.1 Preparación de las disoluciones. Se pipetearon las cantidades necesarias de reactivos para continuar con el procedimiento. Al tubo de ensayo con los reactivos Fehling I y Fehling II se le agrego cada una de las disoluciones, en este caso se está agregando la disolución de almidón. Fig. 2. Pipeteado de los reactivos. ráctica. Fig. 3. Agregado de los reactivos a los tubos de ensayo. Tubo de ensayo con reactivos antes de ser mezclados. Se realizó el baño maría de los tubos de ensayo simultáneamente y tomando el tiempo de 3 minutos. Fig. 3.1. Agregado de los reactivos a los tubos de ensayo. Fig. 4. Baño María. Tubos de ensayo finalizado el procedimiento, para observar los cambios. RESULTADOS: Tubo 1 Fructosa Rojo Azúcar reductor Tubo 2 Sacarosa Azul Azúcar no reductor Tubo 3 Agua destilada Azul Muestra blanco Tubo 4 Almidon Azul Azúcar no reductor Tubo 5 Lactosa Rojo Azúcar reductor Tubo 6 Glucosa Rojo Azúcar reductor Fig. 5. Resultados. CONCLUSIONES: Con esta práctica llegamos a observar cada cambio que obtuvo los tubos de ensayocon la mezcla de la disolución del Fehling A y B con respecto a cada Azúcar. Se llegó a la observación experimental de cuales eran azúcares reductores por medio del ensayo Fehling de manera obteniéndose resultados satisfactorios. BIBLIOGRAFIA: Juan Carlos Argoti B. (2012). carbohidratos. s/f, de slideshare Sitio web: https://es.slideshare.net/juanarg16082010/presentacion-carbohidratos-11352933 Mejia Rocha Johann Luigi. (2012). reconocimiento y propiedades quimicas de los carbohidratos. s/f, de slideshare Sitio web: https://es.slideshare.net/vegabner/laboratorio-08-15744240 Angie Castañeda Camila Bravo. (2015). azucares reductores. s/f, de prezi Sitio web: https://prezi.com/ki6shjmpxdcw/los-azucares-reductores-son-aquellos-azucares-que- poseen-su/
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